制备胶质母细胞瘤原位小鼠模型的外科手术

首先，准备用于手术的鼠标并将其放置在立体定位框架上。然后，抬起颅骨上的皮肤，将剪刀放在右眼和耳朵之间，形成一个切口。沿着切口标记向颅骨左侧切开，并去除由此产生的圆形皮瓣。

用手术刀刀片或微型刮匙轻轻刮擦颅骨表面以去除骨膜。使用生理盐水和真空吸尘器保持手术区域清洁，没有碎屑。划伤骨膜，以确保更好地粘附在氰基丙烯酸酯胶水和牙科粘接剂上。

然后，使用高压灭菌的铅笔标记颅窗的位置。用惯用手握住钻头，用非惯用手握住注射器或镊子。将冷盐水涂抹在颅骨上，以防止过热并保持手术视野清洁。

钻孔时，将玻璃盖滑块放在颅骨顶部，以确认它正好适合颅窗内。一旦可以压下颅骨皮瓣，使用镊子小心地从手术区域取出碎片。如果发生轻微出血，请使用止血海绵局部涂抹冰冷盐水，并轻压以帮助减少失血。

取培养的 C6 神经胶质瘤细胞进行植入。在气密微升注射器中吸出一微升细胞悬浮液。然后，将注射器放置在立体定向框架内。

要植入细胞进行双光子成像，请在大脑浅表区域注射 0.5 微升细胞悬浮液，深度为 0.8 毫米。注射后，缩回针头并退出脑组织。现在，将头杆和玻璃盖从酒精滑到盐水溶液中，并使用真空吸头或镊子将这些组件导航到手术部位。

将玻璃盖玻片放在颅窗内，并涂抹少量氰基丙烯酸酯胶。用棉尖涂抹器或用手术刀轻轻刮掉玻璃盖玻片上的任何胶水溢出物。将玻璃盖滑块固定在颅窗中并应用头杆。

混合牙科水泥，定位头杆，然后将水泥涂抹在周围区域。用注射器尖端、手术刀或钻头清洁任何多余的水泥。密封颅窗后，检查是否有暴露的颅骨区域。