首先准备病毒接种物。通过每微升 Worthington 胰蛋白酶添加 10 微克并在 37 摄氏度下孵育一小时来激活轮状病毒储备液。然后用 50 μL CMGF-Next 稀释 50 μL 活化病毒原液,用 100 μL 病毒接种物替换 HIO 单层培养基以感染单层。
对于轮状病毒感染,使用 25 号针头在单层的长度上做一个刻度。将板在 37 摄氏度下孵育两个小时。孵育后,取出接种物并用1X PBS洗涤单层一次。
然后加入 100 微升无酚红分化培养基。将载玻片放入 37 摄氏度培养箱中,直到准备好成像。