分离小鼠晶状体上皮细胞以研究晶状体相关疾病

首先，将安乐死的小鼠放在手术平台上。用手术剪刀轻轻取下眼睑。然后在弯曲的镊子的帮助下，轻轻按压眼窝的两侧，使眼睛向外突出。

用白内障刀在角膜上小心切开，用弯曲的镊子小心地取出晶状体。接下来，使用带有钝头的弯曲镊子，将镜片转移到含有 5 毫升无菌 DPBS 和庆大霉素的 60 毫米塑料培养皿中。用含有庆大霉素的DPBS溶液轻轻冲洗镜片。

完成漂洗过程后，将镜头放在一张滤纸上并使其干燥。镜片充分干燥后，小心地将其转移到培养皿的盖子上，以准备取出镜片胶囊。然后向上旋转晶状体，确保前节朝上。

用镊子握住前囊的同时，用惯用手的囊镊子产生小撕裂。向相反方向轻轻拉动两个工具以取出胶囊。将胶囊放入DPBS中，直到所有晶状体解剖完成。

之后，小心地将镜头囊转移到六孔板上。向每个孔中加入一毫升0.05%胰蛋白酶溶液以启动酶解过程。轻轻搅拌胰蛋白酶溶液以确保均匀渗透。

将板放入细胞培养箱中，让胶囊在 37 摄氏度下消化 8 至 10 分钟。然后用解剖剪刀小心地将消化后的晶状体胶囊切碎，以促进细胞分离。加入0.5毫升含有10%FBS的培养基以淬灭胰蛋白酶。

将组织样品转移到离心管中，并以1000G离心五分钟。小心地除去上清液，不要干扰细胞沉淀。使用一毫升培养基重悬细胞并将细胞接种在 24 孔板中。

培养的晶状体上皮细胞的相位对比图像显示，在第三天和第五天之间，细胞开始增殖阶段。在第 7 天和第 10 天之间可以观察到快速生长和对数增殖阶段。