首先,取一个电子游标卡尺,将其外颌置于耳朵外缘的中点,然后将其伸入耳道。测量并记录沿线的三分之二点和二分之一点的厚度。然后,将大鼠的头部向一侧倾斜,使耳朵向上。
将 50 微升油酸均匀涂抹在耳朵的腹侧和背侧,每天一次,持续 25 天。使用配备 34 或 36 号针头的 1 毫升注射器,将 50 微升痤疮角杆菌混悬液皮内注射到耳朵腹侧表面。第 25 天,测量并记录耳朵的厚度。
从安乐死的大鼠身上切下耳朵后,使用 8 毫米环形钻在耳朵上钻固定大小的孔。准备并染色耳切片后,在光学显微镜下观察它们。记录病理变化以供病理学家进行后续评估,并根据此处显示的表格为这些变化分配分数。
油酸组和油酸痤疮角杆菌组的耳朵表现为增厚、硬结、红斑、鳞屑和粉刺,偶尔因抓挠而出血。组织病理学分析显示油酸和油酸与痤疮锥杆菌组存在角化不全、角化过度和肥大。病理评分表明,与对照组相比,这些组的严重程度更高。
免疫组化显示 TNF α 在痤疮锥杆菌组的真皮中表达较高,油酸在痤疮锥杆菌组中的表达较高。