首先，将 BC002 型生物芯片放入玻璃培养皿中，用无菌 70% 乙醇冲洗所有腔体 45 分钟。然后用无菌双蒸水冲洗蛀牙两次。使用带有蓝色尖端的 1， 000 微升移液器，用无菌胶原蛋白 IV 溶液涂覆上腔的生物芯片膜。
将芯片在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下孵育 30 分钟。孵育后，用含有镁和钙的无菌 PBS 冲洗下腔室和上腔室两次。用 250 微升含有青霉素链霉素的内皮细胞或 EC 培养基填充每个腔的上腔，用 150 微升填充下腔。
在 T25 培养瓶中用 5 毫升不含镁和钙 PBS 的 DPBS 洗涤汇合的人脐静脉内皮细胞培养物。在 PBS 中加入 1 毫升 0.25 胰蛋白酶和 1 毫摩尔 EDTA。并在 37 摄氏度下孵育 3 分钟。
孵育后，加入 5 毫升 PBS 和 5% FCS 以终止胰蛋白酶活性。在 50 mL 锥形管中，将悬浮液以 350G 离心 5 分钟。并将沉淀重悬于 1 毫升 EC 培养基中。
将 10 μL 1 至 10 稀释的细胞悬液添加到含有 10 μL 台盼蓝染色剂的微量离心管中。用 Neubauer 腔室手动计数细胞。计数后，用 200 微升含有 0.4 倍 10 倍于六人脐静脉内皮细胞培养物的 EC 培养基替换生物芯片上腔中的内皮细胞培养基。
将装有生物芯片的玻璃培养皿置于 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下。每天更换培养基，上腔室使用 300 μL EC 培养基，下腔室使用 200 μL RPMI + 培养基。用 1 毫升 PBS 洗涤单核细胞后，将它们在含有利多卡因和 EDTA 的预热 PBS 中于 37 摄氏度和 5% 二氧化碳中孵育 7 分钟。
收集细胞并以 350G 离心 7 分钟。如前所述，重新悬浮在 1 mL RPMI + 计数细胞中后。以 0.1 乘以 10 的功率接种 6 个单核细胞，该单核细胞悬浮在下腔室的 200 微升 RPMI+中。
将生物芯片端口朝下放置，使细胞附着在膜上。
