从均质化人肌间脂肪组织样品中分离单细胞细胞核，用于 RNA 测序

将均质化的人肌间脂肪组织收集到冰上的1.7毫升低结合管中后，向匀浆中加入14微升10%Triton X-100。将试管在黑暗的冰上孵育 10 到 15 分钟，同时每三分钟涡旋一次。在单独的 15 毫升锥形管中，用 100 微升 DPBS 预润湿一个 100 微米和一个 40 微米细胞过滤器。

通过 100 微米细胞过滤器过滤匀浆。用 400 微升均质缓冲液冲洗 1.7 毫升低结合管，并将悬浮液过滤至 100 微米细胞过滤器。接下来，在 40 微米细胞过滤器上过滤通过 100 微米滤液获得的悬浮液。

将溶液均匀分布到两个预冷的 1.7 毫升低结合管中。将试管以 2700G 在 4 摄氏度下离心 10 分钟。弃去顶部脂质层和上清液，在第一个管中留下约 50 微升。

轻轻地上下移液 20 次而不产生气泡，将颗粒重悬于第一个管中，然后将悬浮液转移到新的 1.7 毫升低结合管中。接下来，将 500 微升细胞核分离培养基加入 1.7 毫升低结合管中，并与移液混合。将试管以 1000G 在 4 摄氏度下离心 10 分钟。

取出上清液，在试管中留下约 50 微升，轻轻移液器以重悬沉淀。然后，加入 200 微升细胞核分离培养基，混合悬浮液。加入一滴活细胞染色溶液，在黑暗的冰上孵育。

15 分钟后，通过 30 微米细胞过滤器过滤溶液。混合细胞核溶液，将 10 微升加入细胞计数室载玻片中。使用自动细胞计数仪对细胞核进行计数。