首先,将用无菌 0.9% 盐水稀释的小瓶丁丙诺啡和用 PBS 稀释的 notexin 放在冰上。在鼻锥设置下,用修剪器剃掉麻醉小鼠的后肢,然后将鼠标放回感应盒中。准备胰岛素注射器,其中含有 15 微升用于 GA 的 notexin 溶液,以及用于 TA 注射的 10 微升 notexin 溶液。
将鼠标移动到鼻锥设置后,用乙醇湿巾对注射部位进行消毒。将针头斜面朝下以 30 度角插入 TA 肌肉腹部。平行于胫骨推进针头以到达 TA 的中腹,然后缓慢注入 notexin 溶液 10 秒。
要将 notexin 溶液注射到 GA 中,请将针头以 45 度角插入 GA 肌肉外侧头的中腹部并注射溶液。转动鼠标,使用胰岛素注射器皮下注射丁丙诺啡。使用此方程计算每只小鼠所需的碘脱氧尿嘧啶溶液的体积。
使用胰岛素注射器,在安乐死前 8 至 12 小时在消毒的注射部位进行碘脱氧尿苷溶液的腹膜内注射。