首先,将凝固的含血管以 626 比 1、409 G 的离心力在 2 至 8 摄氏度下离心 20 分钟。然后小心地将上清液收集在新管中。将上清液储存在零下 80 摄氏度。
接下来,设置空白标准品孔和样品孔。将 50 μL 稀释的标准品移液到 ELISA 板中。然后将 40 微升稀释的样品转移到样品孔中。
向样品孔中加入 10 μL 血清。现在,用密封膜密封板。将密封板放入 37 摄氏度的培养箱中 30 分钟。
用蒸馏水稀释 30 倍浓洗液,得单一强度的洗液。接下来,从板上取下密封膜并丢弃液体。现在,在每个孔中填充 200 微升洗涤液 5 次。
最后一次弃去上清液后,将板拍干。将 50 微升酶试剂移液到除空白孔以外的所有孔中。然后用密封膜密封板,然后将其放入 37 摄氏度的培养箱中 30 分钟。
再洗板五次后,加入 50 微升显色剂 A 和 B,轻轻摇动板以充分混合。然后将板在 37 摄氏度下弱光下孵育 10 分钟。现在,将 50 μL 终止液移液到每个孔中以终止反应。
在 450 纳米处依次测量每个孔的吸光度。蛋氨酸组的血浆同型半胱氨酸浓度是对照组的两倍。治疗组血浆同型半胱氨酸浓度相对较低。