首先，在磁激活细胞分选组织储存溶液中植入 CIED 期间，在胸大肌上方获得 250 毫克 STAT。在 10 毫升冷的 Hanks'Balanced 盐溶液中制备每毫升 1 毫克胶原酶/分散酶。在层流柜下，在 500 微升胶原酶/分散酶溶液中将组织切碎成一立方毫米的小块。
向混合物中加入 4.5 毫升胶原酶/分散酶溶液，并将研磨的组织转移到干净的 50 毫升离心管中。用 5 毫升胶原酶/分散酶溶液清洗培养皿盖，然后加入试管中。将试管在 37 摄氏度下在设置为每分钟 20 转的试管旋转器中孵育 30 分钟。
为了停止消化，将 10 毫升完全内皮细胞生长培养基倒入试管中。用 14 号 Venflon 套管研磨消化的混合物后，通过 70 微米的细胞筛过滤，然后用 10 毫升 0.5% PBS-BSA 缓冲液冲洗。在室温下将滤液以 300G 离心 10 分钟，弃去上清液。
要去除死细胞，将 200 μL 死细胞去除珠添加到微量离心管中的细胞沉淀中，然后孵育。然后将带有 30 微米过滤器的液体分离柱连接到分离磁体上，并在下方放置一个 15 毫升的离心管。用死细胞去除结合缓冲液洗涤色谱柱后，加入样品珠悬浮液。
让它在重力下通过并收集洗脱液。接下来，旋转收集的活细胞洗脱液，并将所得沉淀重悬于 400 微升 0.5% PBS-BSA 中。将悬浮细胞与 20 μL 抗 CD31 包被的磁珠在 4 摄氏度下孵育 20 分钟。
离心后，将细胞沉淀重悬于 500 μL 的 0.5%PBS-BSA 中。将带有 30 微米过滤器的色谱柱连接到分离器磁铁上，并在下方放置一个 15 毫升离心管。将细胞微珠悬浮液添加到色谱柱中，使其在重力作用下通过。
洗涤色谱柱后，将其放入新鲜的 15 mL离心管中，并向色谱柱中加入 1 mL 0.5% PBS-BSA。推动柱塞以收集 CD31 阳性组分。如前所述离心样品，并将细胞沉淀重悬于一毫升完全微血管内皮细胞生长培养基中。
将悬浮液分配到 2% 明胶包被的 24 孔板的两个孔中。在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下培养细胞 2 到 4 周，直到细胞接近 80% 汇合。
