hSATMVEC-脂肪细胞共培养研究 CIED 植入患者的细胞串扰

首先，解冻传代，一个人白色皮下前脂肪细胞，并将细胞加入含有 12 至 15 毫升温热前脂肪细胞生长培养基-2 的 T75 培养瓶中。细胞达到 90% 汇合度后，用 PBS 洗涤，并与 1 毫升 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液孵育 2 分钟。使用光学显微镜确认细胞脱离，并向细胞中加入 23 毫升前脂肪细胞生长培养基-2。

将 1 mL 细胞悬液分配到 24 孔共培养伴侣板的每个孔中，并孵育板以实现细胞汇合。然后用 1 毫升前脂肪细胞分化培养基替换培养基，并在 37 摄氏度下与 5% 二氧化碳孵育 10 天。在分化的第 6 天，在 transwell 插入物上的 500 微升完全 MVEC 生长培养基中，以 4 人 SAT MVEC 的 5 倍 10 的功效接种。

将插入物放入含有 500 微升完全 MVEC 生长培养基的孔中，并在 37 摄氏度下与 5% 二氧化碳一起孵育。第 10 天，当脂肪细胞完全分化时，从每个孔中取出一半的培养基，并将含有汇合 SAT MVEV 的 transwell 插入物转移到每个孔中。将板孵育 24 小时以获得共培养物。

随着人类皮下白色前脂肪细胞更加分化，可以注意到脂质液泡的形成。