刺激和孵育全血样品，用于宿主对真菌和病毒病原体免疫的抗原特异性分析

首先，在无菌条件下准备 2.7 毫升不含抗凝剂、抗原和共刺激抗体的采血管。将抗 CD28 和抗 CD49d 添加到每个试管中，包括阴性对照。如果冷冻，请在全血刺激前约 30 至 60 分钟在室温下解冻即用型刺激管。

使用含有肝素锂抗凝剂的采血管从供体或患者那里采集静脉血。将所需量的肝素化全血移液到无菌工作台下的刺激管中。小心地将试管倒置约 5 到 10 次。

然后，将试管放入 37 摄氏度的培养箱中。孵育 4 小时后，在 RPMI 培养基中制备 1 毫克/毫升布雷菲德菌素 A 溶液。在无菌工作台中，打开用于流式细胞术分析的试管的盖子。

然后将 1% 的布雷菲德菌素 A 溶液样品体积转移到刺激管中。将加盖管在 37 摄氏度下再孵育 16 至 18 小时。