首先,将用于微波辅助萃取的稀释的 60% 溶剂放在工作平台上。称取 0.67 克咖啡银皮,并在反应容器中以 1:30 的比例与 20 毫升提取溶剂混合。在容器中添加磁力搅拌棒,以确保样品内热量和溶剂的均匀分布。
用特殊工具牢牢关闭容器,然后将其放入微波辅助萃取室中。要设置方法,请单击显示器顶部栏上的工具箱图标,然后在附件部分选择 SK eT 转子。然后单击搅拌并键入 20% 以设置搅拌速率。
单击门锁扇区并将其设置为在超过 80 摄氏度的温度下激活。然后单击顶部栏上的表格图标,并将温度梯度 T1 设置为 10 分钟的萃取持续时间。微波功率为 1800 瓦,温度为 120 摄氏度。
要激活搅拌,请单击搅拌按钮并等待绿灯出现。将鼓风机风扇速度设置为三级。要保持提取时间,请将提取持续时间设置为 2 分钟,将微波功率设置为 1800 瓦,将温度设置为 120 摄氏度,从而选择所需的提取温度 T120。
现在,单击屏幕左下角的冷却按钮,然后选择 10 分钟的冷却时间。单击屏幕右上角的 Save 图标。通过选择使用的容器数量开始提取过程。
萃取后,在 4 摄氏度下以 9072 g 离心萃取物 15 分钟。用 10 毫升玻璃移液管收集上清液,并在零下 20 摄氏度下储存。在 96 孔板中用蒸馏水将咖啡银皮提取物稀释十倍。
将 10 μL 稀释样品与 20 μL 未稀释的 folin-ciocalteu 试剂混合,并让它们反应 3 分钟。接下来,向 96 孔板的每个孔中的混合物中加入 100 微升 7.5% 碳酸钠溶液。通过用蒸馏水稀释,为没食子酸标准浓度范围制备不同的浓度。
将它们与 20 μL folin-ciocalteu 试剂混合,让它们反应 3 分钟。接下来,向 96 孔板的每个孔中的混合物中加入 100 微升 7.5% 碳酸钠溶液。在室温下避光孵育反应 30 分钟。
在酶标仪上,测量 765 纳米反应混合物的吸光度。使用标准品浓度和 765 纳米处的吸光度绘制标准校准曲线。将结果表示为每克样品的没食子酸当量毫克数。
1, 2 己二醇水溶液萃取产生的总酚含量最高,水提取得到的最低。1, 2 己二醇水溶液提取产生的总黄酮含量最高,异戊二醇水溶液提取产生的总黄酮含量最低。己二醇水溶液萃取的 DPPH 测定值最高,乙醇水溶液萃取的 DPPH 测定值最低。
戊二醇水萃取法的 ABTS 测定值最高,水萃取法的测定值最低。己二醇水萃取法的 FRAP 值最高,水萃取法最低。