首先,将 10 克 DMEM 粉末和 5.95 克 HEPES 溶解在一升蒸馏水中,并将培养基的 pH 值调节至 6.91。将溶液分装到较小的容器中,并储存在 4 摄氏度下。然后将 88% DMEM 培养基与 HEPES、10% 胎牛血清和 2% 青霉素链霉素混合。
要准备斑马鱼,请为四到五条成年斑马鱼设置一个装有大约两升水的容器或水箱。使用鱼网,将 4 到 5 条成年斑马鱼转移到准备好的鱼缸中。准备单独的盛水容器,用于麻醉和回收斑马鱼。
麻醉成年斑马鱼后,用塑料勺将鱼转移到衬有湿纸巾的培养皿中,然后将培养皿置于解剖立体显微镜下。接下来,使用细镊子轻轻拉动前后方向以去除鳞片。将每个单独的秤放入一个单独的 0.2 ml 管中,该管中含有水垢培养基工作溶液,并将试管放入设置为 28 摄氏度的培养箱中。
去除鳞片后,小心地将斑马鱼放回回收箱并对其进行监测。斑马鱼恢复运动后,将其放回常规饲养箱。