我们感谢W。刘某的意见，我们最初的成像设置，Z Gitai建议使用ImageJ 13来算蠕虫，使用Google SketchUp的帮助和J.阿什拉夫。 CTM是皮尤研究中心在生物医学科学的学者，麦克奈特学者和凯克学者。

<ol>
	<li>Bargmann, C. I., Hartwieg, E., Horvitz, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odorant-selective+genes+and+neurons+mediate+olfaction+in+C.+elegans.">Odorant-selective genes and neurons mediate olfaction in C. elegans.</a> Cell. 74, 515-515 (1993).</li><li>Ward, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemotaxis+by+the+nematode+Caenorhabditis+elegans:+identification+of+attractants+and+analysis+of+the+response+by+use+of+mutants.">Chemotaxis by the nematode Caenorhabditis elegans: identification of attractants and analysis of the response by use of mutants.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 70, 817-817 (1973).</li><li>Bono, M. d. e., Maricq, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+substrates+of+complex+behaviors+in+C.+elegans.">Neuronal substrates of complex behaviors in C. elegans.</a> Annu Rev Neurosci. 28, 451-451 (2005).</li><li>Mori, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+chemotaxis+and+thermotaxis+in+the+nematode+Caenorhabditis+elegans.">Genetics of chemotaxis and thermotaxis in the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Annu Rev Genet. 33, 399-399 (1999).</li><li>Zhang, Y., Lu, H., Bargmann, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenic+bacteria+induce+aversive+olfactory+learning+in+Caenorhabditis+elegans.">Pathogenic bacteria induce aversive olfactory learning in Caenorhabditis elegans.</a> Nature. 438, 179-179 (2005).</li><li>Kauffman, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+signaling+and+dietary+restriction+differentially+influence+the+decline+of+learning+and+memory+with+age.">Insulin signaling and dietary restriction differentially influence the decline of learning and memory with age.</a> PLoS Biol. 8, e1000372-e1000372 (2010).</li><li>Torayama, I., Ishihara, T., Katsura, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caenorhabditis+elegans+integrates+the+signals+of+butanone+and+food+to+enhance+chemotaxis+to+butanone.">Caenorhabditis elegans integrates the signals of butanone and food to enhance chemotaxis to butanone.</a> J Neurosci. 27, 741-741 (2007).</li><li>Silva, A. J., Kogan, J. H., Frankland, P. W., Kida, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CREB+and+memory.">CREB and memory.</a> Annu Rev Neurosci. 21, 127-127 (1998).</li><li>Meyer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iterative+image+transformations+for+an+automatic+screening+of+cervical+smears.">Iterative image transformations for an automatic screening of cervical smears.</a> J Histochem Cytochem. 27, 128-128 (1979).</li><li>Otsu, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Threshold+Selection+Method+from+Gray-Level+Histograms.">A Threshold Selection Method from Gray-Level Histograms.</a> IEEE Transactions on Systems, Man, and Cybernetics. 9, 62-62 (1979).</li><li>Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+genetics+of+Caenorhabditis+elegans.">The genetics of Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 77, 71-71 (1974).</li><li>Stephens, G. J., Johnson-Kerner, B., Bialek, W., Ryu, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dimensionality+and+dynamics+in+the+behavior+of+C.+elegans.">Dimensionality and dynamics in the behavior of C. elegans.</a> PLoS Comput Biol. 4, e1000028-e1000028 (2008).</li><li>Abramoff, M. a. g. e. l. h. a. e. s., Ram, P. J., J, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image+Processing+with+ImageJ.">Image Processing with ImageJ.</a> Biophotonics International. 11, 36-36 (2004).</li></ol>

c. 在线虫嗅觉的联想学习和记忆的分析，提出了区分集结学习，行距学习，短期记忆和长期记忆的过程。依靠这些检测蠕虫的能力，意识在他们的环境1,2的食品和化学气味，并形成两者之间的正相关。6因此，实验是非常敏感的动物开始人口的饥饿，必须十分小心采取措施，确保美联储前和培训后，蠕虫病毒。单集结训练产生短期的联想记忆。空调期和间隔训练范式数上升是在 C中实现长期的联想记忆的关键线虫 ，因为它在其他生物体中。6,8也许可以修改这个实验产生长期记忆的不同条件和无条件刺激之间的关联。 可以用我们的联想学习和记忆的分析，比较野生型的学习和记忆能力的老化或遗传突变的动物。例如，而联想学习和长期的联想记忆能力下降老化野生型蠕虫，学习是保持与动物的年龄与降低胰岛素信号，与学习和记忆不再是维持较长calorically限制动物随着年龄的增长6。这些分析也适合的RNAi治疗或C.药理操纵线虫 。例如，蠕虫与DAF - 2 RNA干扰治疗可改善短期和长期的联想记忆，相反，基因转录和蛋白质的合成与药物（放线菌素D和放线菌酮），分别间隔训练期间堵塞，扰乱了长期记忆的形成。 6 长期记忆是一个过程，是所有动物的生存至关重要，它出现，内存中的一个巴甫洛夫协会所涉及的分子机器大部分是从哺乳动物的蠕虫保守 6分辨能力和测试联想学习，短短期和长期记忆使用这些嗅觉检测使得C 。 线虫一个优秀的系统内存的进一步研究，并可能为神经退化过程，导致在人类学习和记忆的丧失洞察力。

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sodium Azide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>S227</td>
<td>Prepare 1 M concentration in distilled water</td>
</tr>
<tr>
<td>Ethyl Alcohol 190 Proof</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pharmco-Aaper</td>
<td>DSP-CT-18</td>
<td>&gt;95% Ethanol may have impurities that interfere with chemotaxis assays</td>
</tr>
<tr>
<td>2-Butanone 99+%</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Acros</td>
<td>14967-0010</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Basler IEEE-1394/FireWire Area Scan CMOS Camera</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Edmund Optics</td>
<td>NT56-683</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>InfiniMite Video Lens &#x2013; Alpha Industrial</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Edmund Optics</td>
<td>NT56-202</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dolan-Jenner MI-150 Fiber Optic Illuminator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Edmund Optics</td>
<td>NT55-718</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>8&#x201D; x 8&#x201D; Backlight</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Schott Fostec</td>
<td>A08927</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Standard Boom Stand</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Edmund Optics</td>
<td>NT54-120</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>3/4&#x201D; Post Adaptor for Boom Stands</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Edmund Optics</td>
<td>NT54-124</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Standard Fixed 1/4-20 Mounting Plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Edmund Optics</td>
<td>NT54-122</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

c. elegans positive butanone learning, short-term, and long-term associative memory assays

经验和教训的信息的记忆是对生物体做出选择，帮助他们生存的关键。 C。 线虫导航环境，通过神经元特异性检测食品和化学品气味1，2和化学气味3，温度 4， 和 5食物来源的致病关联的营养状态。 在这里，我们描述了线虫联想学习和短期和长期的联想记忆的实验。我们修改了一个厌恶的嗅觉学习范式，而不是产生了积极的回应;检测涉及挨饿〜400蠕虫病毒，然后喂养存在AWC神经遥感挥发趋化丁酮的浓度，引发低的趋化指数（类似的蠕虫Toroyama 等7）。一个标准的人口趋assay1测试蠕虫的吸引力的气味立即分钟后调理小时。 经过调理，野生型动物的趋化丁酮增加〜0.6趋化指数的单位，其“学习指数”。联想学习是依赖于在培训期间的食品和丁酮的存在。配对为一个单一的调整期（“集结培训”）的食品和丁酮产生短期的联想记忆，持续1〜2小时。 （“间隔训练”）之间的休息时间多空调期间产生长期的联想记忆（&lt;40小时），并依赖于cAMP反应元件结合蛋白（CREB），6个长期内存跨越所需的转录因子种8。 我们的协议还包括为快速，准确地测定趋化指数的图像分析方法。动物趋化实验板的高对比度的图像捕获和分析蠕虫计数MATLAB软件。软件修正不均匀使用一个形态tophat转型背景的 9大津的方法是再使用，以确定一个阈值从后台单独的蠕虫 10非常小的颗粒被删除自动和较大的非WORM地区（板边缘或琼脂拳）是手动选择删除。然后，该软件估计由单一的蠕虫病毒的大小，忽略上面指定的最大大小的区域，其余地区的平均大小。蠕虫的数量，然后除以确定蠕虫占用由一个单一的蠕虫的规模估计总面积估计。 我们发现，学习和短期和长期记忆可以区分，以及这些过程与高等生物上有着类似的关键分子 。6,8我们的分析，可以快速测试的新的候选基因或分子，影响了学习和短期或长期在 C中的长期记忆线虫是跨物种有关。

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C. elegans Positive Butanone Learning, Short-term, and Long-term Associative Memory Assays

在这里，我们描述的方法来测试线虫联想学习和短期和长期的联想记忆。这些人口分析蠕虫的能力，以chemotax聘请走向挥发的气味，并形成积极的联想后，搭配食物的趋化丁酮。空调期间的人数增加导致长期记忆。

线虫的积极丁酮学习，短期，长期联想记忆检测

The memory of experiences and learned information is critical for organisms to make choices that aid their survival. C. elegans navigates its environment ...

c-elegans-positive-butanone-learning-short-term-long-term-associative

Research

JoVE Journal

Neuroscience

C. elegans Positive Butanone Learning, Short-term, and Long-term Associative Memory Assays

28.9K 次观看.  Princeton University. 在这里，我们描述的方法来测试线虫联想学习和短期和长期的联想记忆。这些人口分析蠕虫的能力，以chemotax聘请走向挥发的气味，并形成积极的联想后，搭配食物的趋化丁酮。空调期间的人数增加导致长期记忆。