自由运动大鼠脑电图记录过程中兴奋氨基酸的微透析

这种方法可以帮助回答神经科学中的关键问题，如神经疾病自然病的自然历史中神经化学的变化。建议的微透析脑电图技术的主要优点是，这种组合方法允许在疾病发展和进展的特定阶段对神经递质释放的变化进行配对。首先打开位于法拉第笼外的放大器。

打开 EEG 软件，开始 EEG 采集并观察未连接电缆产生的 EEG 信号。接下来，将动物连接到系绳脑电图记录系统，将动物的头部握在一只手的两个拉伸手指之间，用另一只自由手将连接器拧到电极基座上。根据单个动物的电极信号在放大器的每个通道上设置放大系数，以便 EEG 信号具有比例。

然后让动物在研究人员的直接观察下探索新笼子至少一个小时。根据动物的商品调整电缆，并确保电缆不会干扰动物的运动和躺姿。最后，检查摄像机上的正确图像帧，然后开始视频 EEG 录制。

首先，根据制造商用户指南准备首次使用的显微透析探头，然后用 Ringer 解决方案填充它们。然后，切割 10 厘米长的 FEP 管片，然后使用不同颜色的管适配器将它们连接到探头的入口和出口。确保管道接触适配器，所有连接中没有死空间。

用钳子用钳子把假刀从导轨上取下，用力握住动物的头。将微透析探针插入导导管，并使用建模粘土进一步牢固。接下来，将动物连接到系绳脑电图记录系统。

然后把动物放进有机玻璃缸里，让它探索新的环境。跟随清醒和自由移动的老鼠运动。然后，使用管式适配器，使用含有 Ringer 溶液的钝化 22 量针将探针的入口连接到 2.5 毫升注射器。

通过连续推动 2.5 毫升注射器的活塞，在 10 秒内将一毫升的振铃解决方案推入探头。检查出口上是否出现液体掉落，以表示探头何时可供使用。最后，用环法器溶液将连接到 FEP 管的 2.5 毫升注射器加满，然后将它们安装到输液泵上。

以每分钟两微升启动泵，让它通宵运行。通过视频 EEG 录像验证样本采集前三小时内没有癫痫发作后，停止泵携带装满 Ringer 溶液的 FEP 管状注射器。安装另一套 2.5 毫升注射器连接到 FEP 管，用管适配器填充含有 100 毫摩尔钾溶液的改良环法溶液。

以每分钟两微升启动泵，让它运行。检查系统中是否没有气泡，并确保油管接触适配器，所有连接中没有死空间。然后，检查出口上是否出现液体掉落，以表示探头何时可供使用。

接下来，将装满林格溶液的注射器的 FEP 管连接到每个动物的探针入口管，等待出口尖端液体掉落的外观。将探头的插座连接到 FEP 管，从而在试管中收集。将 FEP 管插入带穿孔盖的封闭 0.2 毫升试管中，并用一块建模粘土固定管，确保管保持在原位。

在每分钟两微升运行泵 60 分钟而不收集样品以平衡系统后，在基线条件下连续收集 5 个 30 分钟的透析样品，并在冰上存储样品。10 分钟后，将含有 100 毫摩尔钾环器溶液的注射器中的管材切换到正常的振铃器溶液，让泵运行。收集第五个平衡后透析器后，每 10 分钟收集 20 微升透析器分数一小时。

然后收集另外三个 30 分钟的透析样品并停止泵。最后，在实验后将样品储存在零下80摄氏度，直到HPLC分析。实验完成后，用蒸馏水冲洗用过的微透析探针，并将其存放在装满清洁蒸馏水的小瓶中，直到下次使用。

最后，用蒸馏水冲洗整个微透析装置，然后冲洗70%的乙醇。用空气代替乙醇，并将其存放在无菌环境中。这些是从控制大鼠和癫痫大鼠的海马体在疾病的慢性阶段记录的代表性脑电图痕迹。

对照大鼠未观察到脑电图改变，而癫痫大鼠行为发作前和癫痫发作期间，则观察到同步的表氧表皮活动。慢性癫痫大鼠的谷氨酸浓度明显高于对照动物。高钾使对照大鼠的谷氨酸额外释放约30分钟，慢性癫痫大鼠体内谷氨酸释放约60分钟。

在尝试此过程时，重要的是要记住，植入该装置的动物在长时间的实验中容易丢失它，因此请使用光头组和足够长的电缆，以避免干扰动物的移动性。根据是否有适当的分析论文，该方法可以进一步用于测试大脑中不同的可溶性分子，同时使用EEG记录。开发后，该技术使表皮学领域的研究人员能够深入了解时间叶癫痫中兴奋性神经传递的变化。

看完这段视频后，我们相信您将更好地了解如何在自由移动的癫痫大鼠体内进行显微透析以及深度电极 EEG 记录。