该方法的总体目标是利用超声心动图计算冠状动脉储备,对大鼠左前降冠动脉功能进行可视化。该方法为诊断患病心脏的微血管功能障碍和评估整个研究中的潜在治疗方法提供了重要的评估工具。虽然再灌注疗法已被证明可以挽救危及的心肌,并改善左心室功能,但小冠状动脉重新硬化后,可能会发生功能异常。
该方法可深入了解大鼠冠状动脉微循环,以及其他模型,包括心肌梗塞和左心室压力体积过载。在贫血前再灌注手术超声成像之前,确认麻醉费舍尔344大鼠对手趾捏缺乏反应。剃掉胸口的头发。
将软膏涂抹在动物的眼睛上,将动物放在37至38摄氏度的内置加热平台上。将 13 至 24 兆赫线性探头连接到超声波机。将应用预设设置为心脏成像设置,并使用导轨系统定位探头,以获得准星短轴视图。
使用 XY 轴微操纵器将探头在旋转方向上移动,以定位肺动脉。移动探头,使左心室更容易可见。捕获并存储 B 模式图像后,单击彩色多普勒并在短轴中可视化冠状动脉。
实时观察到的红色表示流动的方向。在彩色多普勒模式下可视化下前下降冠状动脉后,将模式更改为脉冲波,并查找冠状动脉上是否存在黄色指示线。将黄色脉冲波线放在冠状动脉中间,注意角度与流动方向平行,并使用 Cine Store 捕捉休息左前下降冠状动脉流动的速度和波形的峰值隔膜。
获得休息左前下降流速度后,在尾部底部周围放置一小条纱布,并使用海斯特抓住和扭转游布施加压力,导致静脉扩大。小心地将一个 25 量的输液蝴蝶针连接到一个装有多巴胺的 10 毫升注射器中,放入扩张的尾静脉中,用胶水和一块手术胶带稳定针头。当输液管线被固定后,取出血吸管和图尼克以恢复流量,将注射器放入输液泵中,以每分钟注射20微克/ 公斤。
在输液过程中,仔细监测左前降动脉峰和心率,在多巴胺引起的应激条件下,定期记录多普勒模式下的左前下降动脉脉冲波峰。在挑战期间,前降冠状动脉峰和心率趋于稳定后,停止输液,取出尾静脉输液,将动物从平台上取出。然后,使用峰值速度工具从图像中获取峰值舒张速度,并计算冠状动脉流量储备指数,作为左前下降动脉应力峰舒张流速与休息左前下降动脉峰舒张流速度的比率。
使用光纤光源,用 18 量 18 量 IV 导管插答大鼠,并连接到导管到呼吸机。接下来,使用 8-0单丝缝合线,通过第五节间空间的15毫米开口,用一个普通结将左前下降动脉的线状,30分钟。在缺血期结束时,通过心脏表面变色直观地确认缺血,并释放连体。
再灌注可以通过心肌先前变色区域的发红来验证。手术后72小时,测量冠状动脉流动和冠状动脉流动储备,并将测量结果与受伤前获得的测量结果进行比较。在这个具有代表性的实验中,在缺血再灌注手术之前,在多巴胺输注后,休息的左前冠状动脉速度被测量为大约423毫米/秒,比多巴胺输注后的速度增加一倍以上。
缺血再灌注72小时后,休息左前冠状动脉速度明显高于手术前休息左前冠状动脉速度下降。与手术前的反应相比,损伤后对多巴胺测试的应激反应显著降低。冠状动脉流量储备计算为应力期间峰值流速与休息流速度的比率,手术前幼鼠约为2.1,但受伤后72小时明显降低。
此外,受伤72小时后左心室的收缩功能没有显著变化。开发后,该技术将允许研究人员在能够准确模拟人类疾病状况的小动物模型中探索和使用冠状动脉的超声波成像。看完这段视频后,你应该对如何测量冠状动脉血流量和评估小动物心脏病模型中的冠状动脉微循环有一个很好的理解。