使用大鼠的中位神经,可以充分复制人类周围神经病变。临床上,这些病变大部分发生在上肢,这支持了使用这个实验模型。本文将展示,如何产生不同类型的中位神经病变在大鼠。
此外,我们将说明,如何评估功能恢复这种神经使用几个测试。中位神经起源于脊髓段C6到T1。中位数神经以绿色突出显示。在此视频中,手术窗帘不用于演示目的。
手术时请包括窗帘。右臂和胸腔区域的中层部分的皮肤被倾斜,直到深筋膜平面。出血容器被小心地连接。
接下来,在手臂的中周方面,小心切开胸膜,注意不要损伤血管和神经结构。一把剪刀是直白地打开下面,胸腔主肌肉的终端插入,为了逗弄这种肌肉,远离潜在的轴动脉和静脉,以及从胸腔丛的终端分支。插入胸腔的主要肌肉,然后与电烧。
然后,小肌肉被暴露和切割。然后,从胸血管和乌尔纳神经钝解解中神经,直到肘部区域。现在可以观察,布拉奇尔丛的不同终端分支,即中位数、乌尔纳尔、径向、轴和肌肉神经。
与中位神经暴露和隔离不同的机械损伤可以诱发。只需解剖中位数神经,就可以创建沙姆组。在粉碎组中,中位神经被压缩,使用显微外科钳15秒。
切除组的结果是切除中位神经的10毫米长段。中位数神经的近位树桩与 8 - 0 连接尼龙缝合,以防止斧弓生长。或者,可以旋转切除的段180度,并使用它作为自体神经移植。
在这种情况下,媒体神经部分的近位和近侧树桩被缝合到神经移植使用10-0尼龙缝合。物理治疗是治疗从周围神经损伤中恢复的患者的标准的一部分。有多种策略,提供术后物理治疗的老鼠,已提交中位神经损伤。
重要的是选择年轻的大鼠,并允许他们在手术前接触物理治疗仪器。这些可确保更轻松、更快地适应锻炼设置。此外,物理治疗仪器应允许大鼠有一定程度的自由度,理想情况下,使他们能够执行精细的运动与前爪。
有几种进行物理治疗的方法。例如,可以使用单个球体。把老鼠放在球体里,然后放在一个几乎没有障碍物的房间里。
让它探索半个小时的房间。每天做一次。老鼠也可以被关在单独的笼子里。
与合并的运行轮。这样,老鼠就可以锻炼,只要他们想要,只要他们想要。另一种可能性是容纳,老鼠在更大的笼子里。
使用皮革、绳索、运行轮和其他环保元素个性化笼子。这些使它们有足够的行动自由,符合它们的自然探索行为,并允许大鼠熟悉功能测试中存在的一些元素。在进行功能测试之前,请让大鼠熟悉您选择用作正强化的食物。
晚上进行试验,当大鼠自然更活跃时。从抓握测试开始。将老鼠放在网格上,用尾巴抬起它,让它抓住网格。
当大鼠能够抓住网格时, 具有类似的强度, 两个前爪。这意味着中位数神经正在发挥作用,抓握测试被认为是阳性的。如果无法用受伤的爪子抓住网格,则抓取测试被视为阴性。
对于 Pin Prick 测试,将大鼠放在平台上,等待几分钟,直到探索和主要的梳妆活动消退。当老鼠静止不动,站在前爪上时开始。在镜子的帮助下,将冯·弗雷的头发插入网状物,以戳前爪的手掌方面。
在每个前爪上重复五次,或者每次评估后等待几秒钟。得分的退出反应如下,零为无撤回响应,如果大鼠慢慢地从灯丝中删除爪子;如果大鼠快速响应刺激,并删除爪子或舔爪子,则为二。将老鼠放在梯子底部,轻轻触摸老鼠的尾巴。
一旦老鼠开始行走,启动计时器,一旦它鼻子穿过盒子入口,就停止计时器。记录时间并重复测试三次。把老鼠放在绳子底部,轻轻摸摸它的尾巴,劝它爬上去。
如果动物没有,在任务期间犹豫或停止攀爬,则认为测试有效。一旦动物开始攀爬,一旦老鼠的口声穿过平台的入口,就启动计时器。执行后给老鼠一点零食,正确完成任务,并允许它,休息几分钟,然后再重复它。
在走廊地板上放置一张图形纸。然后,抓住老鼠的尾巴,让它拿着画刷,浸在甲基蓝。放在走廊的入口处,让他走进箱子。
从走廊地板上取出图形纸,重复测试,直到获得对两个前爪的一个很好的、有代表性的印象。从获得的打印件中选择一个连续前爪打印良好的打印件,并测量以下参数。打印长度、手指张差、中间手指张开和姿态因子。
最后测量两个连续打印的第二个手指之间的距离,即步长。要执行热成像评估,请将一块双侧胶水放在海绵上。将老鼠放在它上,然后粘上前爪,如图所示。
等待一分钟,以消散处理老鼠的爪子的热交换。以 90 度和约 30 厘米距离大鼠的角度抓取相机。进行两次收购。
首先,一个全身热图,然后,近似相机到大鼠的上半身,使第二个。从获得的热图中,我们发现一个与前爪的棕榈区对应的兴趣区域。测量两爪上该区域的平均值、最小值和最高温度值,并计算温差。
要执行以下评估,请如前所述,暴露两侧的中位神经。首先将大鼠放在其背上,然后将电极放在皮肤上。大鼠大腿上的接地电极和左上肢的刺激和记录电极。
将记录电极,在Flexor数字神经下层肌肉腹部,和刺激电极,大约在中位数神经。以 10 毫伏的刺激振幅开始采集,并在 10 毫伏步长的步骤中逐渐增加采集,直到达到 2 伏。在采集过程中,注册第一个可见手指弯曲的刺激振幅。
这就是电机刺激阈值。获得复合肌肉作用潜力所需的最小刺激振幅,C.M.A.P.is神经刺激阈值。最后,选择一个.M.A.P,以响应上轴刺激,并测量以下参数,延迟,振幅和持续时间。
要执行柔性强度评估,首先通过五或六个丝缝合线环穿过每个前爪的手掌区域,并留下五厘米长。把老鼠放在它的背上。从左前爪开始,在测功机钩中钩住缝合线,然后将前爪与测功机对齐,而不会给挂钩带来太大的压力。
握住刺激电极,大约在中位神经中。将刺激振幅调整为 1.5 伏,并记录 30 秒的即时力。从获取的绘图中,分析最大值、最小值和平均值力值以及曲线下的区域。
Flexor 卡皮径向,由中位神经内侧,被双边去除,并按精度度量。关于一些代表性的结果,在抓举测试中,反应积极的大鼠比例在Sham组中最高,并且随着时间的推移,在神经移植组的大鼠中逐渐增加。针刺测试结果更高,在沙姆组相比,那些格拉夫特或切除组。
大鼠的速度在梯子运行测试中,是沙姆组最高的,比大鼠提交到中实验室病变。在较轻者中,运行梯子的时间往往会随着时间的推移而减少,以减小神经恢复的中位数。与在梯子跑步测试中观察到的情况类似,与中位神经受伤的群体相比,大鼠攀爬绳索所花的时间在Sham组中是逊比的。
在这个测试中,大鼠的速度在大鼠中增加,其中允许神经中位数恢复。如这些条形图所示,对行走大鼠的分析往往显示爪印形态的变化。这些变化往往更明显,在粉碎伤害比在段神经病变。
此图显示,热成像似乎是一个有用的工具,搜索温差,在手术后的前30天前30天。这些温差更明显,在神经伤害更重的老鼠中,如切除组的老鼠。大鼠的弯曲强度与神经恢复程度直接相关。
最接近正常时,恢复是最大的,如这些条形图比较强度,在切除和神经移植组两个爪子。关于电子造影术,可以观察到各种模式。正常的C.M.A.P.潜力,是典型的来自Sham组的老鼠。
虽然多相C.M.A.P.is与神经的可变程度病变有关,如在粉碎和神经移植组发生。在切除组,没有C.M.A.P.的波和形态的Flexor卡皮径向取决于中位神经恢复。这两个图像显示这些肌肉,在沙姆和切除组。
如本文所示,大鼠中位神经是周围神经病变和修复的方便模型。多种标准化策略可用于评估电机和感官恢复。其中许多是非侵入性的,允许日常评估。
最后,实验物理治疗设置,可以模拟临床背景下的恢复,促进对人类物种结果的考虑。