氧梯度切除术是一种功能分析,用于评估个体患病倾向。迄今为止,没有其他功能性检测可用或使用。氧气梯度切除术能够确定患有刀状细胞疾病的患者的血细胞开始变紧的氧张力。
这种氧气张力是患者特有的,它可以作为疾病严重程度的生物标志物。在刀状细胞疾病中,这种技术可用于监测治疗效果,并可用于开发新的治疗方法。这种技术的视觉演示很重要,因为它非常敏感。
有许多因素会影响测量,当你开始使用这种技术时,你不知道。首次尝试此技术的人可能会体验到该技术对样品制备和样品处理非常敏感。我的建议是尽可能标准化地工作,并制定一个常规。
要开始此过程,请打开计算机和 ektacytometer,然后打开计算机上的软件。打开氮气缸,确保氮气可用于脱氧样品。降低杯子中的鲍勃,确保杯子可以自由转动。
当软件运行时,检查消息,确保气体阀打开,然后单击"确定"。确保 ektacytometer 启动自检查过程并选择启动。如果自检查失败,则通过单击硬件检查、pO2、自检查重新运行它。从左侧列出的不同测试中选择 pO2 扫描。
选择屏幕右侧的设置,并确保根据表之一列出的参数设置这些设置,以确保每次测量都使用相同的设置。通过单击"确定",然后再次单击"确定"来保存这些设置。首先,在含有EDTA的管子中通过贴面采集血液样本,并在4摄氏度下储存血液,至少30分钟,但不超过24小时。
在此之后,通过反转轻轻混合样品以均质化。在测量之前,让样品预热到滚筒台上的室温。使用血液学分析仪测量完整的血液计数,将吸气需要放入管中,然后按下血液学分析仪针头后面的按钮开始测量,分析仪将使用 20 到 200 微升全血。
然后,通过计算要添加的样本量,将整个血液样本标准化为在五毫升 PVP 中 2 亿红血球的 RBC 计数。首先,切一个移液器尖端,然后通过重新暂停血液三次来预湿它。然后将计算的样品体积移液到 PVP 小瓶中。
通过反转手动混合样品,直到样品均匀。慢慢地将两毫升的血液和PVP混合物抽入三毫升注射器,无需针头。按下柱塞以去除任何可见的气泡和多余的样品溶液,直到注射器中留有 1.5 至 1.8 毫升。
通过连接器缓慢而均匀地将总样品体积注入鲍勃中。确保样品水平高于氧气传感器和小吸孔。在软件中,单击新并填写示例标识符、备注、捐赠日期和 PVP 的粘度。
单击"确定"并吸气。吸气60秒后,杯会转动并再次吸气15秒。当旋转停止时,单击"确定"。合上机器盖。
单击"继续",现在开始氧气梯度 ektacytomytry 以固定增益完成。测量后,打印显示由软件自动计算的曲线和参数的报表。确保原始数据自动存储在设置中的指定文件夹中。
首先,取出样品注射器,用装满蒸馏水或去化水的注射器进行更换。冲洗过程中按干净并缓慢冲洗接头,确保两个方向齐平。接下来,取出注射器并提起鲍勃。
使用软布彻底干燥鲍勃和接头。然后使用大注射器冲洗接头,以去除管和鲍勃中剩余的任何水。将注射器留在入口,并堵住鲍勃的出口,使管子中的压力重新升高,从而去除剩余的水。
然后擦干杯子,同时避免接触氧气点。放下用于下一次测量的机器的鲍勃和杯子。确保机器正确冲洗后,检查以确保正确的管子与清洁液相关。
关闭软件,按下关闭,然后按开始开始一天结束清洁程序。然后清空废瓶,用软布擦干鲍勃和杯子。合上机器的盖子。
关闭氮气缸并关闭计算机和机器。氧梯度 ektacytomy 可用于研究红血球在氧气浓度范围内的病变行为。在氧梯度 ektacytomy 中,氮气对样品进行连续脱氧,然后由环境空气快速再氧。
在这些条件下,在脱氧下可以观察到红细胞病。这会导致衍射模式失真,因为带病的红色细胞在应用的剪切应力下无法正确对齐。脱氧过程中,病红血球显示形状变化,模仿氧梯度切除术期间的情况,但氧合时形状没有变化。
这个过程导致在氧梯度切层切除术期间衍射模式失真,从而导致伸长指数降低。ektacytometer 获得的代表性曲线显示了反映病病行为不同特征的六个参数:最大伸长指数、最小伸长指数、增量 EI、病点、曲线下区域和恢复。此处显示了来自健康对子的红血球、HbS 状患者的代表性曲线和同源刀状细胞病患者的曲线。
用羟基尿素和输血治疗的同源刀状细胞患者的代表性曲线存在明显差异,这突出了这种测定的用处。影响氧梯度 ektacytom测量的因素有很多,如 PVP 的温度、pH 值和渗透度,但水的残余物和血液样本溶液的混合程度也会影响测量结果。因此,标准化的样品处理至关重要。
氧梯度 ektacytometry 的结果可直接在临床实践中实施,从而有助于个性化医学。这项技术使得研究病患行为成为可能,以研究治疗刀状细胞病的新疗法的潜力,并可以作为临床相关的疾病严重性生物标志物。