使用大鼠对象定位任务的主体内实验设计

对象定位任务允许我们利用啮齿动物的自发探索行为来研究空间记忆形成或保留的各种机制。此协议允许重复对象定位任务多达四次，有助于提高统计能力以及涉及外科手术的研究的效率和产出。开始获得一个方形竞技场，由不透明、有孔的硬塑料制成，最小宽度为60厘米，高度为50厘米。

要通过自动化软件成功记录大鼠的动作，请确保地板颜色与大鼠的颜色形成对比。将竞技场放在一个盒子里，或者放在一个被窗帘包围的平台上。要创建上下文，在竞技场中插入第二层不同颜色或图案的可插入墙壁。

悬挂具有不同几何形状和颜色的 3D 空间提示，使大鼠无法到达它们。将不同对有孔、不可咀嚼且易于清洁的物体与不同的几何形状和纹理连接到竞技场的地板上。用床上用品填充非方形桶。

随机将 5 到 10 个形状和大小不同的对象放置，这些对象与实验中将要使用的对象不同。对于第一节，把所有的家笼带到实验室，让老鼠习惯到房间，并定居至少30分钟。将两到四只老鼠从同一个笼子里放在桶里大约20分钟。

通过去除每组大鼠之间的任何粪便来清洁水桶。把所有的老鼠放在家里的笼子里，然后把它们送回房间。对于第二节，将所有笼子带到实验室，并离开至少30分钟。

将每只老鼠单独放入桶中10分钟。将鼠放回家庭笼子中，并在每只老鼠之后清洁水桶。完工后，将所有笼子归还给住房室。

对于第四节，将所有笼子带到实验室，并离开至少30分钟。将两到四只老鼠从同一个笼子里放在空荡荡的竞技场上，20分钟没有背景或空间线索。将所有大鼠放回家庭笼中，每组大鼠后用70%乙醇擦拭竞技场。

修改空竞技场以创建第一个上下文，而无需将对象放入竞技场。对于上下文习惯的第一节，将所有笼子带到实验室，并离开至少30分钟。启动录音机，然后将第一只老鼠放在竞技场中央，让老鼠探索竞技场10分钟。

然后停止录音机，把老鼠放回家里的笼子里。完工后，将所有笼子归还给住房室。对于每只大鼠，连续两天重复第二和第三节，这样每只大鼠总共有三次上下文习惯。

将所有笼子带到实验室，至少离开30分钟。使用事先准备好的时间表，使用粘垫或双面胶带将第一对相同的对象放置在指定位置。启动录音机，将第一只老鼠放在竞技场上，与面对墙壁或任何物体未占据的角落的每个物体保持同等距离。

对于弱编码允许大鼠探索竞技场和物体20分钟的一次试验。对于强编码，大鼠可以探索五分钟，对同一只大鼠进行三次试验。停止录音机。

将鼠子放回家庭笼中，取出物体，每次录音后用乙醇擦拭竞技场。将所有笼子带到实验室，在第一次测试前留出足够的时间，以便大鼠至少可以离开30分钟。将对象放置在指定位置。

启动录音机，将第一只老鼠放在竞技场上，面对一堵墙或一个没有物体占据的角落。让老鼠探索竞技场和物体五分钟。把老鼠放回家里的笼子里。

取出物体，用70%乙醇彻底擦拭物体和竞技场。重复记录每只老鼠，然后将笼子送回屋内。对于每只大鼠，在编码和测试试验中为每个物体的探索时间打分。

在整个持续时间内进行评分编码试验，并针对两分钟的测试试验进行评分编码试验，以获得最佳歧视表现。计算每个物体的勘探百分比或每只老鼠的歧视指数，并计算组的平均值。使用一个示例 T 测试检测高于机会水平的重大偏好。

强大的编码协议导致在新的位置偏爱对象，平均百分比探索明显高于50%的机会水平，在测试中，有1小时和24小时延迟。较弱的编码协议显著增加了对新位置对象的偏好，相比之下，延迟一小时但延迟 24 小时的测试中的机会级别显著增加。此协议的一个显著优点是，它可以使用与同一组大鼠的四个不同的上下文执行四次。

这里演示了使用与两组一小时记忆和 24 小时内存的实验组进行反平衡的一种可能方法的结果。这两组在上下文一和二中进行了平衡，在另外两个上下文中重复了三和四。这四个上下文的结果通过比较每个上下文中的偏好和机会级别来单独呈现，以评估每个实验组的内存。

在四个上下文中未检测到显著差异。为了更好地表示数据和在数据的主题比较中，在主体比较（即配对 T 测试）中，将两个制衡上下文的结果进行组合和比较。由于这项任务依赖于好奇心，所以处理和习惯是至关重要的，这样动物就不会在测试期间不知所措或害怕。

本协议中可以实施进一步的操作，如药理学和光遗传学干预，以及用于研究短期和长期记忆以及增强或损害这些记忆的活体成像。