我叫托马斯·普雷沃特医生我是成瘾和心理健康中心的科学家，或CAMH，也是多伦多大学精神病学系的助理教授。我的小组特别有兴趣减少小鼠的基线焦虑和反应，以减少数据变异性并改善动物福利。
事实证明，老鼠是基础科学和临床前研究的宝贵资产，然而，世界上很少有实验室能够控制基线焦虑和实验室动物的反应，因此，使实验室之间数据的可复制性复杂化。导致基线焦虑的一个主要因素是不受控制的环境变量，如住房条件、环境丰富和压力暴露。虽然住房条件的标准化和致富有助于改善这一问题，但在与实验者互动时，暴露于压力在小鼠中仍基本上得不到解决。
尾部处理，用尾巴抬起鼠标的过程，仍然是鼠标广泛使用的鼠标处理技术，尽管它特别紧张。虽然尾部处理的替代方案已经出现，包括隧道处理和杯子处理。采用这些技术的速度很慢。
在这里，我们描述了一种新的技术，类似于杯式处理，可以实现只有三天的习惯，或3D处理。通过逐步提高响应鼠标对某些处理里程碑的反应的交互程度和复杂性，我们可以减轻压力，促进日常处理。我们评估小鼠在行为测试中3D处理的功效，评估焦虑行为，与实验者和周围应激激素、皮质激素、水平的相互作用，并提供隧道处理和尾部处理技术的比较。
轻轻打开笼子，将盖子放在一边。在尝试拿起鼠标之前，将戴手套的手引入家庭笼子。让鼠标习惯到手的存在约30秒。
然后尝试用杯子抓鼠标。如果鼠标不容易被拾起，双手合十，用它们引导鼠标到笼子的一角。然后用双手拿起鼠标。
一旦鼠标从笼子中取出，请保持双手尽可能平整和打开。让鼠标自由探索。这为鼠标提供了一个平面平台，可以踩到并限制咬人的风险。
手张开，平放，手掌向上。将另一只手放在鼠标旁边，让鼠标在没有任何约束的情况下从手到手自由移动。用平手处理一分钟后，放松手掌，轻轻将鼠标杯在头上，然后轻轻地将鼠标在双手之间滚动。
继续四分钟，在手之间轻轻滚动和自由探索你的张开的手之间交替。在最后两分钟，执行庇护测试。让鼠标移动到手的边缘，将两只手放在一起。
非常缓慢，杯你的手，使鼠标适合在由手形成的庇护所。请务必留下一个开口，以便鼠标在需要时可以逃逸。尽量让鼠标在避难所里保持5到10秒，没有任何限制。
在最后两分钟内重复庇护测试三到四次。不要急于处理过程。如果鼠标因被限制在手内而出现压力，请继续在手之间滚动并自由探索 30 秒，然后重新尝试庇护测试。
允许在手自由探索30秒，然后轻轻地更换鼠标在其笼子里。用 70% 乙醇或适当的清洁溶液清洁任何粪便和尿液的板凳顶部。必要时清洁粪便和尿液的手套，换上新笼子时，用 70% 乙醇冲洗手套或更换手套。
到第二天，用杯子把老鼠从笼子里取出来应该已经可行了。如果鼠标看起来反应迟钝，则执行平手和自由探索开放头 30 秒到一分钟。否则，在手和庇护所测试之间滚动。
从第一天起，在手和庇护步骤之间执行角色，时间为两到三分钟。执行每个步骤数次。如果鼠标在庇护测试中似乎很自在，尝试抚摸鼠标的背部和头部。
如果鼠标不试图逃离接触，继续鼻子戳。轻轻触摸鼻子尖上的鼠标。如果它不咬人或试图转过头来，这是一个很好的习惯的迹象。
对于抚摸和鼻子戳测试，不要急于的过程。如果鼠标因被限制在手内而出现压力，或者不想被触摸，请继续在手之间滚动几分钟，然后重试。停止这个会话后，约三分钟的处理，如果动物对庇护所反应良好，头部抚摸和鼻子戳。
如果动物似乎愿意探索你的手没有任何压力的迹象，如试图逃跑，从手中跳下或避免与手接触。如果鼠标继续表现出压力迹象或对庇护测试或鼻子戳测试反应不好，请继续会话，直到达到五分钟，如第一天。更换笼子里的老鼠，清洁长凳上衣和手套。
第三天，在第二天进行相同的步骤。拿起手掌上的鼠标。将鼠标在手之间转移。
轻轻地将鼠标限制在杯形手中。如果鼠标对这些步骤反应良好，请尝试抚摸鼠标并尝试鼻子戳测试。在第三天，鼠标应该足够放松，坐在手掌上而不移动，你应该能够通过这些步骤在大约两到三分钟。
更换笼子里的老鼠，清洁长凳上衣和手套。第三天如果动物将被限制用于实验目的，如口腔咽伤或腹膜注射，小鼠可以接受颈部捏测试。
抓住鼠标的脖子，拇指和食指之间，抬起鼠标五厘米以上的手两到三秒钟。对于成年小鼠来说，这通常是一个不舒服的位置，如果小鼠保持接近不动状态，它们就习惯于处理，并且很容易被限制注射。将鼠标放回平手，让鼠标自由探索一分钟。
动物被测试为愿意自愿与实验者互动，以及在实验环境中处理的便利性。在研究中，当实验者试图捡起老鼠时，通过管子处理或3D处理处理的小鼠逃跑的可能性较小。此外，研究一只使用3D技术处理的小鼠在与实验者手相同的象限中花费的时间更多，这表明与实验者互动的意愿增强。
在研究二中，与尾部处理的小鼠相比，通过管子处理或3D处理处理的小鼠在实验者试图拾取小鼠时逃跑的可能性较小。然而，在研究二中，处理技术并没有显著影响与实验者手在同一象限中花费的时间。在焦虑行为、新奇抑制喂养测试和高架加迷宫两项测试中，3D 和隧道处理效果与尾部处理进行了比较。
在研究一中，在新奇的抑制喂养试验中，隧道处理和3D处理小鼠的焦虑有减少的趋势。在高架加迷宫中，没有整体处理效果。如果总结为 Z 分数，与尾部处理小鼠相比，隧道处理和 3D 处理小鼠的整体焦虑显著减少。
在研究二中，在新奇的抑制喂养测试或高架加迷宫中，处理焦虑措施没有整体效果。当总结为 Z 分数时，处理技术对焦虑没有整体影响。作为压力的生理测量，我们从尾部处理，3D处理和隧道处理小鼠15分钟后，一个简短的处理会议和测试皮质酮水平的血清。
在研究中，处理没有整体效果。在研究二中，3D处理显著降低皮质激素水平相比，尾部处理。基于科学界对小鼠处理技术不广泛认可的观察，我们描述了一种新型处理技术的应用。
在这两项研究中，隧道和3D处理减少了老鼠被拾起时逃跑的企图，从而可能促进日常处理。此外，在年龄较大的雄性小鼠中，这种技术减少了焦虑行为，并增加了与实验者的互动。在年轻的女性。
该技术降低了皮质激素水平观察到的反应处理。实施这项技术有可能减少数据变异性，改善动物福利，并促进日常处理。
