与使用市售跑轮设备的模型相比,该协议允许研究人员以更低的成本抵抗训练大量小鼠。这种阻力训练模型的主要优点是它完全是自愿的,这减少了动物的压力和研究人员的时间投入。该模型可以帮助更好地了解调节肌肉质量以响应运动训练的细胞和分子机制。
根据设计,这种加载的轮子运行模型执行起来相对简单。然而,仍然建议研究人员在独特的实验室环境中进行试点测试,以估计实验前小鼠的运行性能。演示这一程序的是PJ Koopmans,我实验室的研究生研究助理。
要设置跑轮装置,请将单个一克传感器磁铁粘在跑轮的外中圆周上,并且仅在车轮适应的第一周使用该轮。负载车轮运行需要两克负载,因此将两个一克的磁铁并排粘在车轮的外圆周上。可以使用胶带将磁铁固定到位,直到胶水牢固干燥。
随着几周的过去,在第 3、4、5 和 7 周施加额外的负载,方法是在已经存在的任一磁铁上放置另一个 1 克磁铁。由于这些磁铁牢固地相互粘附,因此不需要胶水。高负载车轮运行设置需要三组车轮。
第二周需要的第一组轮子只有一个 2.5 克的磁铁粘在轮子的外圆周上。第二组轮子,仅在第三周需要,有两个 2.5 克的磁铁并排粘在轮子的外圆周上。四周及以上所需的第三组车轮有三个 2.5 克的磁铁并排粘在车轮的外圆周上。
通过在已经存在的任一磁铁上放置另一个 2.5 克磁铁,在第六周和第八周施加额外的负载。确保在组装之前将新电池插入自行车码表。然后使用配备数字自行车码表的笼子组装跑轮,以监测锻炼期间行驶的时间和距离。
以公里/小时为单位的平均速度是通过算术得出的。在初始自行车计算机编程期间设置车轮尺寸,并通过测量运行车轮的外周来计算每转距离。为确保所有计算机和传感器组件都包含在笼子外的坚固屏障内,以防止小鼠咀嚼组件,请使用带有小矩形切口的空移液器吸头盒的盖子,用于磁性自行车传感器和盒子的主要部分来固定自行车码表, 和电线。
在移液器吸头盒盖的角落钻两个孔,将磁性自行车传感器和行车支架固定在保持架外侧,并将运行轴距倒置插入笼盖的间隙,但位于固体表面的顶部。用硬件将轴距和计算机传感器固定在笼子的顶部。确保自行车码表传感器和移液器吸头盒盖位于车轮传感器磁铁所在位置的正上方,并且传感器磁铁和计算机传感器之间的间隔不超过一厘米,以便正确记录车轮运动。
在将盖子放在保持架上之前,将适当的行走轮连接到轴距上,然后将盖子牢固地放在保持架上。将轮子悬挂在笼盖上,确保与笼底至少有 2.5 厘米的间隙。然后在笼子中放置最少量的垫料,以确保轮子自由旋转,但不会因垫料堆积而受到阻碍。
由于小鼠是一种夜行动物,它们的大部分自然笼活动,包括车轮奔跑,将在光照周期的黑暗时间进行。在实验过程中,以预定的一致间隔记录来自自行车码表的这些数据,以确保准确的活动监测。将久坐不动的小鼠单独安置在装有锁定跑轮的笼子中九周,以防止任何跑步。
如有必要,减少负载轮运行和高负载轮运行组的负荷,以确保小鼠按照负荷计划继续锻炼整个九周方案。在研究期间,小鼠被随机分配到三个治疗组之一,即久坐,负荷轮跑或高负荷轮跑,然后完成各自的九周方案。适应一周后,在跑步距离或训练量方面没有分组或按时间差异分组。
尽管纤维横截面积没有差异,但高负荷轮运行组的归一化比目鱼质量比久坐组大21.4%。尽管足底肌质量和平均纤维横截面积没有取代统计学上的显着差异,但与久坐和负重车轮运行相比,高负荷轮跑在足底中横截面积较大的纤维比例似乎发生了变化。通过NC2肌肉功能测试测量,两组之间GPS复合体的抽搐或峰值力没有显着差异。
重要的是要确保车轮在保持架内自由旋转,并且车轮传感器磁铁靠近自行车码表传感器,以便车轮旋转畅通无阻,自行车码表准确记录运行数据。在此过程之后,研究人员可以进行后续分析,例如收缩功能或免疫组织化学技术,以进一步检查运动训练的各种生理反应。