一种检测产生硫化氢细菌的灵敏目视方法

产生硫化氢的细菌可以利用含硫氨基酸和蛋白质来生产硫化氢。在这里，我们建立了一种灵敏而简单的方法来检测细菌中的硫化氢。该方法是硫化铋沉淀的改进版本，使用96孔透明微量滴定板。

将细菌培养物与含有L-半胱氨酸的铋溶液合并培养20分钟，最后观察到黑色沉淀。演示这些程序的将是来自我们实验室的研究助理Wei Zhu。首先将细菌菌落从Luria-Bertani或LB琼脂平板转移到100毫升LB培养基中，并在37摄氏度下培养12至16小时，直到细菌浓度约为每毫升10亿个细胞。

将一个梭杆菌核和普通变形杆菌的细菌菌落从胰蛋白酶大豆肉汤或TSB琼脂平板转移到100毫升TSB培养基中，并在37摄氏度下厌氧培养24小时，直到细菌浓度约为每毫升10亿个细胞。在96孔微量滴定板中将100微升细菌培养物与100微升新制备的铋溶液混合，并在37摄氏度下培养20分钟。对于每种细菌菌株，一式三份进行分析。

20 分钟后，检查颜色是否变化。如果溶液的颜色从浅黄色变为黑色，则表明细菌能够产生硫化氢或H2S。重复此测量三次。

使用不同浓度的硫化氢钠与硫化铋溶液混合确定方法的灵敏度。最后，通过观察黑色硫化铋沉淀物的形成来确定硫化氢铋和硫化物离子的存在。使用从无颜色生产到最深黑色生产的视觉量表对孔的颜色进行评分。

使用选定细菌菌株的纯培养物研究了硫化氢测试的性能。结果表明，副伤寒沙门氏菌B、核梭杆菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌和普通变形杆菌均能产生硫化氢和黑色硫化铋沉淀。而副伤寒沙门氏菌 A、金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌和肺炎克雷伯菌未显示任何黑色沉淀。

这种方法的主要优点是易于复制并且不需要专门的设备。