使用口面部操作性疼痛测定法评估大鼠神经损伤诱导的机械超敏反应

口面部疼痛评估设备（OPAD）是临床前疼痛研究的宝贵工具，因为它使用操作性奖励冲突范式。这包括伤害感受、学习和动机，这对人类疼痛体验和提高翻译效度很重要。与传统的基于反射的测定相比，OPAD的一个显着优势是它是全自动的，这消除了限制动物防止相关应激效应的需要，并且还减少了实验者的偏见。

演示眶下神经的CCI手术将是我实验室的实验室技术员Darrice Montgomery。首先设置口面部疼痛评估设备（OPAD），方法是放置牛奶滴注盘，有机玻璃笼和金属地板格栅。将电线连接到笼子上，然后将瓶架滑到设备背面的金属杆上。

然后，将奖励牛奶瓶放在瓶架上，使动物可以到达壶嘴。拧紧支架的左侧旋钮，将瓶子固定到位。然后，打开前面板并打开笼子。

要设置协议，请打开软件，输入密码，然后单击“登录我”或按 Enter 键。 单击“新建空实验”和“实验方案”菜单。在“设备”下，单击“未命名协议”，然后选择此协议将使用的模式。

在设备特定模式下，选择 OPAD 机械保持架模式并命名协议。确保所有笼子都打开后，通过单击协议窗格顶部的“设备和添加项目”来添加 OPAD 笼子，然后选择“新建 OPAD 笼子”和“添加所有连接的 OPAD 笼子”。若要添加试验测试阶段，请转到“测试”选项卡以选择阶段，转到“第一阶段”选项卡，然后命名阶段。

添加 10 分钟作为测试持续时间。通过单击添加项目选项卡添加更多阶段，然后单击新阶段。接下来，通过单击“其他信息和治疗组”来分配组。

检查使用的治疗组，然后选择选项 用户将手动将动物分配到他们的组。通过单击“协议”菜单来分配动物标识。在“其他信息”下，单击“动物 ID”，然后选中“使用我的 ID 指代动物”选项。

通过在单击“查看治疗”并键入治疗名称之前键入实验标题来设置实验。添加动物并通过单击查看动物和添加动物来分配治疗和动物 ID。输入要测试的动物数量，然后输入确定。

动物列表出现后，为每只大鼠添加动物ID和治疗方法。通过单击协议菜单，然后单击保存协议来保存协议。输入文件名和软件密码，然后单击保存。

然后，通过单击文件保存实验文件，然后单击保存，键入软件密码并单击保存选项卡。打开保持架后，寻找笼子上的绿灯，表示保持架已准备好进行测试。双击打开保存的实验文件。

输入密码，单击“登录”，或按 Enter 键。在屏幕左侧，记下动物的数量和相应的笼子、当天运行的阶段和测试状态。在笼子的屏幕上观察测试动物的 ID。

将老鼠放入笼子中，然后按下相应笼子上的按钮。请注意，一旦测试开始，绿灯就会变成橙色灯。确保动物可以接触到奖励瓶，同时与机械尖刺充分接触。

在屏幕右侧，观察每只动物的图表，显示舔舐和接触的数量。测试会话结束时会听到警告声音。将麻醉的大鼠放在手术工作台上并约束它。

使用加热垫将体温保持在 37 摄氏度。在眼睛上涂抹眼药膏，以防止它们变干。使用手术刀刀片15在牙龈背侧和嘴唇之间做一个小切口。

使用手术刀刀片去除软组织，露出眶下神经或离子的分支。在钝弯曲的注射器针的帮助下，在离子周围放置两个5-O铬肠结扎，然后使用组织粘合剂闭合伤口。本文介绍了单个CCI ION和Sham操作的大鼠在基线标准10分钟测试期间以及手术后两周，四周和六周的接触尝试和舔舐数据。

该模型显示，在非有害时期，大鼠长时间饮酒。受伤后，动物无法长时间与带刺的棒保持面部接触，导致舔舐次数减少。在Sham组中，饮酒期未观察到显着变化。

基线CCI ION和Sham操作大鼠之间的平均舔次数没有显着差异。然而，CCI ION在手术后四周之前显着减少了舔舐次数，并在术后一周和神经损伤后一周增加了第一次舔舐的潜伏期，表明机械性痛觉过敏。假手术大鼠无明显变化。

使用 OPAD 时，优化奶瓶的距离和钉子的宽度。请务必保持一致，以减少数据收集过程中的错误。