CRPS 背后的机制我仍然不清楚。建立一个临床前动物模型模仿CRPS I将是探索CRPS I的基础机制的关键。大鼠CPIP模型表现出许多CRPS我喜欢的simit,其中包括后肢水肿和高血症在早期阶段。模型建立后,然后是持续的热和机械超敏。
首先用苯巴比他钠麻醉所有大鼠。用钳子捏住它们的后爪或尾巴,确保大鼠正确麻醉。把兽医软膏放在眼睛上
在手术过程中,将大鼠放在37摄氏度的加热垫上。用甘油润滑右后爪和脚踝。然后将一个硝酸盐 70 测高仪 O 环滑入一点五毫升管的较大一侧,并切断卡扣盖。
小心地将后爪插入空心管,直到其到达底部。逐渐将 O 环从管子滑到脚踝关节附近的右后肢。在那里离开三个小时
对假老鼠群体应用同样的治疗方法,但不应诱发缺血的破O环除外。三个小时后,切断O环,监测大鼠,直到它恢复足够的意识,以保持胸骨的恢复。在老鼠完全从麻醉中恢复之前,不要将老鼠放在其他大鼠的陪伴下。
将大鼠放在网状地板上的透明有机玻璃室中,并在任何行为测试前将大鼠与环境进行30分钟的习惯。使用冯弗雷灯丝测试大鼠的机械性肌酸。从中间灯丝开始测试,垂直地将其应用到后爪的中间植物表面。
施加适当的力使灯丝弯曲长达五秒钟。爪子的突然缩回被认为是一种不费时的行为。第三天、第二天、第一天和每隔一天进行一次机械性阿洛迪尼亚试验,直到第13天。
应用向上向下测试方法测试阈值,并采用迪克森方法计算 50% 的爪子提取阈值。要测试热超高血症,请使用哈格里夫斯方法,将50瓦灯泡发出的光束直接对瞄准后爪。测量爪子退出延迟,将 20 秒设置为截止阈值,以避免过度伤害。
每只后爪在五分钟的间隔内重复每次测试三次,并以平均值作为爪子的退出延迟。在天三、第二天、第一天和每隔一天进行热超大病测试,直到第 13 天。为了测试辣椒素诱发急性中毒行为,用DMSO准备200毫摩尔辣椒素储存溶液,并在PBS中进一步稀释1至1000,用于注射。
辣椒素是一种试剂,可引起皮肤、眼睛和呼吸的关节刺激。在准备辣椒素溶液时,戴上口罩和护目镜很重要。然后用连接到一毫升注射器的30针将50微升辣椒素或车辆注射到后爪中。
在注射后 10 分钟内,使用摄像机记录注射爪子的舔、咬或退缩等无行为。通过测量模型建立后 15 分钟、24 小时、48 小时和 72 小时的爪子直径增加,评估后爪水肿。将 O 环放在脚踝上后,前爪皮肤出现青紫,这是组织缺氧的迹象。
切割O环后,爪子开始充满血液,并表现出强烈的肿胀,表明强烈的高血症。肿胀逐渐减少,并在手术后48小时恢复正常。模型建立一天后,CPIP组的单体后爪表现出明显的机械性,持续了13天的观察时间框架。
CPIP组的反向后爪也显示机械超高血症13天。在测量热高血痛时,CPIP大鼠的双边后爪与假组大鼠相比,对有毒热刺激的反应明显降低了戒断延迟。前爪的热超高热量一直持续到观察时间框架结束,而反面后爪的热超高热量持续七天。
假和CPIP组被测试与辣椒素注射的无性行为。当车辆被注射时,假组表现出轻微的明显反应,CPIP组表现出明显较高的反应。更重要的是,CPIP大鼠对辣椒素注射的反应明显高于假组,这表明CPIP大鼠表现出与患有CRPS的人类患者相似的现象I.By这种程序,在模型建立之前和期间对大鼠进行麻醉。
由缺血和人类CRPS建立的本协议中描述的CPIP大鼠模型我喜欢模拟。这些模型的家庭,更多的机制关于CRPS我可以探讨。