口面部疼痛评估设备（OPAD）是临床前疼痛研究的宝贵工具，因为它使用操作性奖励冲突范式。这包括伤害感受、学习和动机，这对人类疼痛体验和提高翻译效度很重要。与传统的基于反射的测定相比，OPAD的一个显着优势是它是全自动的，这消除了限制动物防止相关应激效应的需要，并且还减少了实验者的偏见。
演示眶下神经的CCI手术将是我实验室的实验室技术员Darrice Montgomery。首先设置口面部疼痛评估设备（OPAD），方法是放置牛奶滴注盘，有机玻璃笼和金属地板格栅。将电线连接到笼子上，然后将瓶架滑到设备背面的金属杆上。
然后，将奖励牛奶瓶放在瓶架上，使动物可以到达壶嘴。拧紧支架的左侧旋钮，将瓶子固定到位。然后，打开前面板并打开笼子。
要设置协议，请打开软件，输入密码，然后单击“登录我”或按 Enter 键。 单击“新建空实验”和“实验方案”菜单。在“设备”下，单击“未命名协议”，然后选择此协议将使用的模式。
在设备特定模式下，选择 OPAD 机械保持架模式并命名协议。确保所有笼子都打开后，通过单击协议窗格顶部的“设备和添加项目”来添加 OPAD 笼子，然后选择“新建 OPAD 笼子”和“添加所有连接的 OPAD 笼子”。若要添加试验测试阶段，请转到“测试”选项卡以选择阶段，转到“第一阶段”选项卡，然后命名阶段。
添加 10 分钟作为测试持续时间。通过单击添加项目选项卡添加更多阶段，然后单击新阶段。接下来，通过单击“其他信息和治疗组”来分配组。
检查使用的治疗组，然后选择选项 用户将手动将动物分配到他们的组。通过单击“协议”菜单来分配动物标识。在“其他信息”下，单击“动物 ID”，然后选中“使用我的 ID 指代动物”选项。
通过在单击“查看治疗”并键入治疗名称之前键入实验标题来设置实验。添加动物并通过单击查看动物和添加动物来分配治疗和动物 ID。输入要测试的动物数量，然后输入确定。
动物列表出现后，为每只大鼠添加动物ID和治疗方法。通过单击协议菜单，然后单击保存协议来保存协议。输入文件名和软件密码，然后单击保存。
然后，通过单击文件保存实验文件，然后单击保存，键入软件密码并单击保存选项卡。打开保持架后，寻找笼子上的绿灯，表示保持架已准备好进行测试。双击打开保存的实验文件。
输入密码，单击“登录”，或按 Enter 键。在屏幕左侧，记下动物的数量和相应的笼子、当天运行的阶段和测试状态。在笼子的屏幕上观察测试动物的 ID。
将老鼠放入笼子中，然后按下相应笼子上的按钮。请注意，一旦测试开始，绿灯就会变成橙色灯。确保动物可以接触到奖励瓶，同时与机械尖刺充分接触。
在屏幕右侧，观察每只动物的图表，显示舔舐和接触的数量。测试会话结束时会听到警告声音。将麻醉的大鼠放在手术工作台上并约束它。
使用加热垫将体温保持在 37 摄氏度。在眼睛上涂抹眼药膏，以防止它们变干。使用手术刀刀片15在牙龈背侧和嘴唇之间做一个小切口。
使用手术刀刀片去除软组织，露出眶下神经或离子的分支。在钝弯曲的注射器针的帮助下，在离子周围放置两个5-O铬肠结扎，然后使用组织粘合剂闭合伤口。本文介绍了单个CCI ION和Sham操作的大鼠在基线标准10分钟测试期间以及手术后两周，四周和六周的接触尝试和舔舐数据。
该模型显示，在非有害时期，大鼠长时间饮酒。受伤后，动物无法长时间与带刺的棒保持面部接触，导致舔舐次数减少。在Sham组中，饮酒期未观察到显着变化。
基线CCI ION和Sham操作大鼠之间的平均舔次数没有显着差异。然而，CCI ION在手术后四周之前显着减少了舔舐次数，并在术后一周和神经损伤后一周增加了第一次舔舐的潜伏期，表明机械性痛觉过敏。假手术大鼠无明显变化。
使用 OPAD 时，优化奶瓶的距离和钉子的宽度。请务必保持一致，以减少数据收集过程中的错误。
