该方案不仅模拟了临床FTCD的发生和发展,而且还为评估FTCD的治疗提供了可靠的动物模型。但是这种技术很容易执行,并且可以在受伤后立即观察生长。该技术可以成功模拟临床软骨缺损,为研究软骨缺损的病理过程和开发相应的治疗药物提供平台。
该方法可用于研究创伤性软骨缺陷,即创伤后骨关节炎。首次尝试这种技术时,重要的是将胫骨和腓骨弯曲成90度角,以充分暴露股骨髁的耳蜗,并使钻头垂直于软骨表面。首先将麻醉的大鼠以仰卧姿势放在手术台上。
将无菌窗帘放在大鼠身上,露出剃须和消毒的膝关节。使用11号手术刀刀片在膝关节中间做一个一厘米的垂直切口。并沿髌骨内侧边缘切割关节囊和股股股四头肌肌腱。
接下来,将髌骨向外转动,将胫骨和腓骨弯曲成 90 度角,以暴露股骨髁耳蜗。使用1.6毫米圆形钻头在股骨髁耳蜗中形成全厚度0.1毫米深的软骨缺损。用浸泡在0.9%盐水溶液中的棉球擦拭手术部位,并更换髌骨。
然后保持膝盖处于伸展位置,使用不可吸收的4-0缝合线逐层缝合切口。为了测量大鼠的机械撤退阈值或MWT“,将动物放置在金属丝网平台上的单个塑料室中。将金属丝网底座放在桌子上方 50 厘米处。
适应 30 分钟后开始 MWT 测量。接下来,将冯弗雷细丝垂直地压在大鼠后爪的花盆表面上。然后弯曲刷子两秒钟,避开爪子中央部分最厚的部分。
从 4 克逐渐增加刺激重量,直到出现爪子撤回或舔舐等积极反应。建模后3天,与假组相比,模型组的大鼠显示出降低的MWT。提示模型组痛觉过敏。
即使在17天后,模型组的MWT仍然很低。指示疼痛敏感性的长度。假手术组组织病理学染色显示关节清晰,软骨表面完整,软骨细胞分布均匀,II.型胶原表达高。
相比之下,模型组表现出软骨表面凹陷,软骨细胞丢失,基质金属蛋白酶MMP13表达增加以及II型胶原蛋白表达降低。要记住的最重要的事情是缝合前必须缩小髌骨。