O que este protocolo não só mimetiza a ocorrência e o desenvolvimento de FTCD clínica, mas também fornece um modelo animal confiável para avaliar tratamentos terapêuticos contra FTCD. Mas essa técnica é de fácil execução e permite a observação do crescimento imediatamente após a lesão. Esta técnica pode mimetizar com sucesso defeitos clínicos da cartilagem, fornecendo uma plataforma para estudar o processo patológico dos defeitos da cartilagem e desenvolver drogas terapêuticas correspondentes.
Este método poderia ser aplicado no estudo de defeitos traumáticos da cartilagem, nomeadamente osteoartrite pós-traumática. Ao tentar esta técnica pela primeira vez, é importante flexionar a tíbia e a fíbula em um ângulo de 90 graus para expor completamente a cóclea do côndilo femoral e manter a broca perpendicular à superfície da cartilagem. Comece colocando um rato anestesiado na mesa cirúrgica em decúbito dorsal.
Coloque um pano estéril sobre o rato, expondo a articulação do joelho raspada e desinfetada. Usando uma lâmina de bisturi número 11, faça uma incisão vertical de um centímetro no meio da articulação do joelho. E cortar a cápsula articular e o tendão do quadríceps femoral ao longo da borda medial da patela.
Em seguida, vire a patela para fora e flexione a tíbia e a fíbula em um ângulo de 90 graus, Para expor o côndilo femoral coclear. Usando uma broca circular de 1,6 milímetro fazer um defeito de cartilagem de espessura total 0,1 milímetro de profundidade na cóclea do côndilo femoral. Limpar o sítio cirúrgico com algodão embebido em soro fisiológico 0,9% e substituir a patela.
Em seguida, mantendo o joelho em posição estendida, sutura da incisão camada por camada com pontos inabsorvíveis 4-0. Para medir o limiar de retirada mecânica ou TCM dos ratos, colocar o animal em uma única câmara plástica sobre uma plataforma de malha metálica. Coloque a base da malha de arame 50 centímetros acima de uma mesa.
Iniciar a mensuração do TCM após 30 minutos de adaptação. Em seguida, pressione o filamento de Von Frey perpendicularmente na superfície da plantadora da pata traseira do rato. Em seguida, dobre a escova por dois segundos evitando a parte mais grossa da porção central da pata.
Aumente o peso do estímulo gradualmente a partir de 4 gramas, até que ocorra uma resposta positiva como retirada da pata ou lambedura. 3 dias após a modelagem, os ratos do grupo modelo apresentaram TCM reduzido em relação ao grupo sham. Sugerindo hiperalgesia no grupo modelo.
O TCM do grupo modelo permaneceu baixo mesmo após 17 dias. Indicativo da duração da sensibilidade à dor. A coloração histopatológica do grupo sham mostrou clara superfície articular e cartilagem intacta, distribuição uniforme dos condrócitos e alta expressão de colágeno tipo II.
Em contraste, o grupo modelo demonstrou superfícies de cartilagem deprimidas, perda de condrócitos, aumento da expressão de metaloproteinases de matriz MMP13 e diminuição da expressão de colágeno tipo II. O mais importante a lembrar é que a patela deve ser reduzida antes da sutura.
