我们认为该协议具有重要意义,因为它展示了一种非侵入性简单易行的方法,可以随着时间的推移评估肝病诊断的关键指标。这种成像方法允许分析肝脏状态,评估相对血容量,门静脉直径,血管网络强度,肝脏病理学的所有重要参数。了解NAFLD进展期间肝血管网络的适应性并将其与特定标志物(如脂肪变性,炎症和纤维化)相关联,可以帮助建立新的有效治疗方案。
该技术有助于识别此类标志物,并提升小鼠在临床前研究中的价值,重点是开发针对疾病进展的新疗法。首先,将麻醉动物置于CT扫描仪摇篮中。涂抹眼药膏,固定鼻锥,并在CT扫描仪上设置扫描参数。
准备尾静脉导管并将鼠标放在床上,用温水加热尾部。将导管插入尾静脉并通过注射给药第一种造影剂,缓慢手动进行,持续时间为一到三分钟。然后,在不同的时间点进行全身和肝脏扫描。
在用第一种造影剂进行最终读数后10天,遵循相同的程序施用第二种造影剂。加载造影前扫描的DICOM文件后,调整对比度以清晰地看到肝脏,脾脏和白色脂肪组织。在 3D ROI 工具下,选择添加 ROI 以生成多个 ROI,以在肝脏、脾脏和脂肪组织看起来清晰且没有明显血管和脂肪的区域执行采样。
在绘画模式下,选择“球体”。勾选仅 2D 框,然后从下拉菜单中选择 8 个像素的直径以在数据上绘制 ROI。从侵蚀扩张特征中,选择减去一个侵蚀。
通过在横向平面上使用球体工具分割感兴趣区域的 2D ROI 来执行采样。转到导航并选择显示表以显示量化表,其中包含每个 ROI 的计算猎犬字段单位值。然后,将值代入此等式中。
计算肝脏脂肪的百分比。加载eXIA扫描DICOM文件,并调整对比度以清楚地看到肝脏,脾脏和左心室。在 3D ROI 工具下,选择添加 ROI 以细分肝脏的多个 ROI。
在绘画模式下,选择“仅 2D”,然后选择“球体添加 8 个像素的直径以在数据上绘制 ROI”。从侵蚀扩张特征中,选择减去一个侵蚀。为每个ROI指定名称和颜色,然后选择显示表以显示包含每个ROI计算的HU值的量化表。
重复这些步骤以获得PV器官t0后,将值插入屏幕上显示的方程式中,以提取对应于功能性组织摄取脂质转移的百分比对比度。加载ExiTron扫描DICOM文件,并调整对比度以清楚地看到肝脏血管网络。选择“添加 ROI”以生成肝脏的 3D ROI。
通过标记所需区域来定义肝脏投资回报率。然后从 ROI 选择器中选择背景投资回报率。点击 执行切割 图标,在不改变肝脏投资回报率的情况下删除背景。
激活最大强度投影查看器。然后,在魔杖图标表示的分割算法下,选择连接的阈值以重新分割肝脏投资回报率。通过输入最小值和最大值来设置阈值并获得血管网络。
再次,去除背景肝组织以获得血管网络的清晰表示。加载ExiTron扫描DICOM文件后,调整对比度以清晰地看到肝脏,脾脏和左心室。选择添加肝脏和大血管的 ROI 和分段 ROI。
定义分割层以为每个组织生成 2D ROI。对造影前DICOM文件重复这些步骤,以获得注射造影剂之前肝脏的平均亮度。对于门静脉直径,定位肠系膜上静脉和脾静脉交界处上方三到四层的横平面,然后进行导航,然后进行距离卫生,选择线以测量两点之间的确切距离。
平均对比度值由此分组数据表示。功能性组织摄取测定表明,与健康对照组相比,非酒精性脂肪性肝病小鼠中eXIA造影剂的积累更高,清除速度更慢。这些代表性结果表明,非酒精性脂肪性肝病小鼠与健康对照组在肝脂肪百分比、肝血管网络容积、门静脉直径和肝相对血容量方面存在差异。
与对照组相比,没有任何造影剂的显微CT成像表明,与对照组相比,患有非酒精性脂肪性肝病的小鼠的肝脏脂肪百分比更高。同样,与健康对照组相比,在患有非酒精性脂肪性肝病的小鼠中发现了更高的肝血管网络体积、肝脏相对血容量和更大的门静脉直径。尝试这种技术时要记住的最重要的事情是始终准确选择的解剖区域。
选择错误的解剖部位会导致不准确的结果。通过遵循这种方法和协议,可以对肝病分期进行准确评估。因此,它可以作为评估新药效率的指定平台。
该技术为评估肝脏病理和启动相关药物开发测定的新的、更简单、更准确的方法铺平了道路。