我们的大豆毛根转化方法足以同时研究多个基因或网络的功能,并且可以在致力于长期稳定的转化方法之前确定最佳的工程策略。大豆毛根转化是分析大豆植株基因功能的有用工具。目前使用的技术包括CRISPR-Cas9基因组编辑,RNA干扰,转录组学和蛋白质组学以及成像技术。
功能基因组学模型时代的主要挑战是充分分析众多基因的功能。大多数基因是多基因的,是通过许多基因的相互作用来实现的。我们的毛根方案将以足够的通量促进基因功能分析,从而开始理解多基因网络。
我们已经确定了Ti质粒在根茎农杆菌菌株中的重要性。我们发现,如果不筛选Ti质粒,它会增加转化大豆子叶无法产生任何颜色的风险。因此,质粒的筛选成为转化前的重要步骤。
与其他基因表达技术相比,我们的发根表达系统易于操作,耗时更少,并且具有成本效益。此外,我们的新方案通过在子叶转化前检查Ti质粒和农杆菌,将毛根转化率提高了50%。通过表征十几种转录因子基因的功能,我们最近的结果为多基因工程研究铺平了道路,旨在解锁植物中有价值的植物抗毒素代谢物的生物合成。
未来,我们将使用这种毛根转化方法来剖析调节植物抗毒素生物合成的转录因子基因网络。该方法可用于提高制药和农业工业中这些特殊代谢物的生产。