Chick <em>ex ovo</em> Culture and <em>ex ovo</em> CAM Assay: How it Really Works

Chicken eggs in the early phase of breeding are between in vitro and in vivo systems and provide a vascular test environment not only to study ...

University of Duisburg-Essen

&#x76F4;&#x63A5; biocoating &#x7684;&#x53EF;&#x690D;&#x5165;&#x91D1;&#x5C5E;&#x949B;&#x548C;&#x4E0D;&#x9508;&#x94A2;&#x5E26;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D; 2 (&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2) &#x4E3A;&#x672A;&#x6765;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x975E;&#x9AA8;&#x6C34;&#x6CE5;&#x9AA8;&#x6216;&#x7259;&#x9F7F;&#x4FEE;&#x590D;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6982;&#x5FF5;&#x548C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x8868;&#x9762;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F71;&#x54CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x4EE5;&#x53CA; juxtacrine &#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x63D0;&#x5230;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x7F8A;&#x548C;&#x5154;&#x5B50;&#x7684;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2 &#x6D82;&#x6599;&#x8D6B;&#x7136;&#x589E;&#x52A0;&#x9AA8;&#x6F5C;&#x5728;&#x949B;&#x690D;&#x5165;&#x7269;&#x3002;

&#x52A0;&#x901F;&#x548C;&#x6539;&#x8FDB;&#x9AA8;&#x8D28;&#x7684;&#x690D;&#x5165;&#x7269;&#x4E0E;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D; (BMP-2) 2 biocoated&#x3002;

A concept and methodology are presented for the direct biocoating of implantable metals like titanium and stainless steel with bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) for future applications as cementless bone or dental prostheses. Such bioactive surfaces can influence cells and tissues by chemotactic as well as juxtacrine mechanisms. Reference is made to first experiments in sheep and rabbits in which BMP-2 coatings impressively increased the osteoinductive potential of titanium implants.

Accelerated and improved osteointegration of implants biocoated with bone morphogenetic protein 2 (BMP-2).

Un concept et une m&eacute;thodologie sont pr&eacute;sent&eacute;s pour la biocoating directe de m&eacute;taux implantables tels que le titane et acier inoxydable avec la prot&eacute;ine morphog&eacute;n&eacute;tique osseuse 2 (BMP-2) pour de futures applications sans ciment osseux ou proth&egrave;ses dentaires. Ces surfaces bioactives peuvent influencer les cellules et les tissus par chimiotactique ainsi que des m&eacute;canismes juxtacrine. On se reportera aux premi&egrave;res exp&eacute;riences chez les moutons et lapins dont BMP-2 rev&ecirc;tements remarquablement augment&eacute; l&#39;ost&eacute;o-inducteurs potentiel des implants en titane.

Ost&eacute;oint&eacute;gration am&eacute;lior&eacute;e et plus rapide des implants biocoated avec la prot&eacute;ine morphog&eacute;n&eacute;tique osseuse 2 (BMP-2).

Beschleunigt und verbessert die Osteointegration von Implantaten mit knochenmorphogenetisches Protein 2 (BMP-2) biocoated.

Un concetto e la metodologia sono presentati per la diretta biocoating di impiantabili metalli come il titanio e acciaio inox con bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) per le future applicazioni come osso Cirurgica o protesi dentarie. Tali superfici bioattive possono influenzare le cellule e tessuti da chemiotattica nonch&eacute; meccanismi di juxtacrine. Si fa riferimento ai primi esperimenti in pecore e conigli in cui BMP-2 rivestimenti straordinariamente aumentato l&#39;osteoinduttivit&agrave; potenziale delle protesi di titanio.

Accelerato e migliorato osteointegrazione di protesi biocoated con bone morphogenetic protein 2 (BMP-2).

&#x6982;&#x5FF5;&#x3068;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5; biocoating &#x306E;&#x690D;&#x8FBC;&#x307F;&#x578B;&#x91D1;&#x5C5E;&#x30C1;&#x30BF;&#x30F3;&#x3068;&#x30B9;&#x30C6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30B9;&#x92FC;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6210;&#x56E0;&#x5B50; 2 &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; (BMP 2) &#x30BB;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x9AA8;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6280;&#x5DE5;&#x7269;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63B2;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x6D3B;&#x6027;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; juxtacrine &#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3002;&#x53C2;&#x7167;&#x6700;&#x521D;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7F8A;&#x3084;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;&#x5897;&#x52A0;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3069;&#x306E; BMP 2 &#x3067;&#x5370;&#x8C61;&#x7684;&#x306A;&#x9AA8;&#x306B;&#x30C1;&#x30BF;&#x30F3;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306B;&#x3002;

&#x52A0;&#x901F;&#x3068;&#x6539;&#x826F; osteointegration &#x306E; biocoated &#x3068;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 2 (BMP 2) &#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xAC1C;&#xB150; &#xBC0F; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC740; &#xC9C1;&#xC811; biocoating &#xC0BD;&#xC785;&#xD615; &#xAE08;&#xC18D; &#xD2F0;&#xD0C0;&#xB284;&#xACFC; &#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xBF08; &#xC804;&#xCCB4;&#xC801; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 2&#xC640; &#xAC19;&#xC740; (BMP-2) cementless &#xBF08; &#xB610;&#xB294; &#xCE58;&#xACFC; prostheses &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xD65C;&#xC131; &#xD45C;&#xBA74; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; juxtacrine &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD608;. &#xCC38;&#xC870;&#xB294; &#xD2F0;&#xD0C0;&#xB284; &#xC784; &#xD50C; &#xB780; &#xD2B8;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC591; &#xBC0F; &#xD1A0;&#xB07C;&#xB294; BMP-2 &#xCF54;&#xD305; &#xAC10;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; osteoinductive &#xC99D;&#xAC00; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAC00;&#xC18D;&#xD654; &#xBC0F; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; osteointegration biocoated &#xBF08; &#xC804;&#xCCB4;&#xC801; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 2 (BMP-2)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC784; &#xD50C; &#xB780; &#xD2B8;.

Un concepto y la metodolog&iacute;a se presentan para la biocoating directa de implantables metales como el titanio y acero inoxidable con prote&iacute;nas morfogen&eacute;ticas de hueso 2 (BMP-2) para futuras aplicaciones como hueso no cementado o pr&oacute;tesis dentales. Tales superficies bioactivas pueden influir en las c&eacute;lulas y tejidos por quimiot&aacute;cticos as&iacute; como mecanismos de yuxtacrina. Se hace referencia a los primeros experimentos en ovejas y conejos en cuales BMP-2 capas aumentaron impresionantemente el Osteoinductor potencial de implantes de titanio.

Acelerado y mejorado de osteointegraci&oacute;n de los implantes biocoated con prote&iacute;nas morfogen&eacute;ticas de hueso 2 (BMP-2).

&#x758F;&#x6C34;&#x5C42;&#x6790; (HIC) &#x662F;&#x751F;&#x7269;&#x79D1;&#x5B66;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x5B83;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5DF2;&#x4E0D;&#x76F8;&#x540C;&#x5728;&#x636E;&#x70B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5316;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6C47;&#x8F91; &#x300B; &#x56E0;&#x4E3A;&#x6709;&#x4EB2;&#x548C;&#x5C42;&#x6790;&#x6216;&#x79BB;&#x5B50;&#x4EA4;&#x6362;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x53EF;&#x9006;&#x5438;&#x9644;&#x7684;&#x4E00;&#x822C;&#x4F18;&#x5316;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x548C;&#x6D17;&#x8131;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x8981;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5546;&#x4E1A;&#x7684;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x5438;&#x9644;&#x5242;&#x4E0D;&#x591F;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x6027;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E0B;&#x6E38;&#x52A0;&#x5DE5;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5A92;&#x4F53;&#x90FD;&#x592A;&#x758F;&#x6C34;&#x548C;&#x6D17;&#x8131;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x5176;&#x672C;&#x673A;&#x72B6;&#x6001;&#x4E2D;&#x7684;&#x5F80;&#x5F80;&#x662F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x51FA;&#x73B0;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5728; 1970 bioscientist &#x7684;&#x4ECA;&#x5929;&#x5DF2;&#x80FD;&#x591F;&#x5408;&#x6210;&#x758F;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x4ED6;&#x6216;&#x5979;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7136;&#x540E;&#x9009;&#x62E9;&#x548C;&#x4F18;&#x5316;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x7279;&#x522B;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x7406;&#x60F3;&#x77E9;&#x9635;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x578B;&#x56FE;&#x4E66;&#x9986;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x73B0;&#x5728;&#x5DF2;&#x5236;&#x5B9A;&#x96C7;&#x7528;&#x5173;&#x952E;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x6982;&#x5FF5;&#x7684;&#x4E00;&#x822C;&#x4F18;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5E94;&#x5141;&#x8BB8;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x8FC4;&#x4ECA;&#x975E;&#x7EAF;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; HIC &#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7AE0;&#xFF0C;&#x8BFB;&#x8005;&#x662F;&#x9996;&#x5148;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7ED9;&#x7406;&#x8BBA;&#x80CC;&#x666F; &#xFF08;&#x591A;&#x4EF7;&#x3001; &#x6D88;&#x6781;&#x4F9D;&#x4ECE;&#xFF0C;&#x5438;&#x9644;&#x6EDE;&#x540E;&#xFF09; &#x7684;&#x7EA6;&#x675F;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x7684;&#x652F;&#x6301;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x72EC;&#x7ACB; HIC &#x9002;&#x5E94;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x7136;&#x540E;&#x7B80;&#x5355;&#x65E0;&#x6BD2;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5408;&#x6210; HIC &#x51DD;&#x80F6;&#x56FE;&#x4E66;&#x9986;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x672A;&#x5145;&#x7535;&#x70F7;&#x57FA; Sepharoses &#x7684;&#x4E09;&#x79CD;&#x94FE;&#x957F;&#x5EA6; &#xFF08;&#x4E01;&#x3001; &#x620A;&#x916F;&#x548C;&#x743C;&#x8102;&#x7CD6;&#x51DD;&#x80F6;&#x5DF1;&#xFF09; &#x7F16;&#x5199;&#x4E86;&#x4E0D;&#x540C;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x51DD;&#x80F6;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9009;&#x62E9;&#x7136;&#x540E;&#x4F1A;&#x53D7;&#x96C7;&#x4E3A;&#x5173;&#x952E;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x751F;&#x5883;&#x8054;&#x76DF;&#x3002;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x793A;&#x4F8B;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4EBA;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x662F;&#x65E2;&#x7136;&#x66FE;&#x53D7;&#x96C7;&#x4E3A;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x7684;&#x7EAF;&#x5316;&#x4E00;&#x6B65;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

&#x758F;&#x6C34;&#x4F5C;&#x7528;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#xFF1A; &#x5229;&#x7528;&#x591A;&#x4EF7;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x51C0;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

Hydrophobic interaction chromatography (HIC) is one of the basic purification procedures in the biosciences. However, because of its complexity, it has not gained the same foothold in the methodological repertoire of protein chemistry as has affinity chromatography or ion exchange chromatography. This is mainly a result of the lack of a general optimization procedure for the reversible adsorption and elution of a novel protein to be purified. Further problems arise from the fact that most commercial hydrophobic adsorbents are inadequate for an ideal performance in downstream processing procedures, because these media are too hydrophobic and elution of proteins in their native state is often impossible. Therefore, as in the 1970s, a bioscientist of today has to be capable of synthesizing a small library of hydrophobic gels from which he or she can then select and optimize the ideal matrix for their special needs. In addition, a general optimization method employing the critical hydrophobicity concept has now been devised that should allow the application of HIC methodology to many hitherto unpurified proteins. In this chapter, the reader is first introduced to the theoretical background (multivalence, negative cooperativity, adsorption hysteresis) of the binding of protein ligands to hydrophobic supports, so that they will be capable of independently adapting HIC to a novel protein. Then a simple nontoxic method is described for the synthesis of HIC-gel libraries consisting of a homologous series of uncharged alkyl-Sepharoses of three chain lengths (butyl, pentyl, and hexyl Sepharose) prepared with different degrees of separation. From this series a critical hydrophobicity gel can then be selected and employed for critical hydrophobicity HIC. A detailed example for the chromatography of human fibrinogen is given that has been employed as a one-step procedure for the purification of fibrinogen from human plasma.

Hydrophobic interaction chromatography: harnessing multivalent protein-surface interactions for purification procedures.

Chromatographie hydrophobe (HIC) est l&#39;une des proc&eacute;dures de base de purification dans les biosciences. Toutefois, en raison de sa complexit&eacute;, il n&#39;a pas gagn&eacute; le pied m&ecirc;me dans le r&eacute;pertoire m&eacute;thodologique de la chimie des prot&eacute;ines comme a chromatographie d&#39;affinit&eacute; ou chromatographie &eacute;changeuse d&#39;ions. C&#39;est principalement le r&eacute;sultat de l&#39;absence d&#39;une proc&eacute;dure d&#39;optimisation g&eacute;n&eacute;rale pour l&#39;adsorption r&eacute;versible et &eacute;lution d&#39;une nouvelle prot&eacute;ine &agrave; purifier. D&#39;autres probl&egrave;mes d&eacute;coulent du fait que plupart des adsorbants hydrophobes sont inad&eacute;quates pour une performance id&eacute;ale dans les proc&eacute;dures de traitement en aval, parce que ces m&eacute;dias sont trop hydrophobes et &eacute;lution des prot&eacute;ines dans leur &eacute;tat natif est souvent impossible. Par cons&eacute;quent, comme dans les ann&eacute;es 1970, un bioscientist d&#39;aujourd&#39;hui doit &ecirc;tre capable de synth&eacute;tiser une petite biblioth&egrave;que de gels hydrophobes d&#39;o&ugrave; il ou elle peut alors s&eacute;lectionner et optimiser la matrice id&eacute;ale pour leurs besoins particuliers. En outre, une m&eacute;thode d&#39;optimisation g&eacute;n&eacute;rale employant le concept de l&#39;hydrophobicit&eacute; critique a maintenant &eacute;t&eacute; &eacute;labor&eacute;e qui devrait permettre l&#39;application de la m&eacute;thodologie HIC &agrave; plusieurs prot&eacute;ines jusqu&#39;ici non-purifi&eacute;s. Dans ce chapitre, le lecteur est d&#39;abord introduit &agrave; l&#39;arri&egrave;re-plan th&eacute;orique (multivalence, coop&eacute;rativit&eacute; n&eacute;gative, hyst&eacute;r&eacute;sis adsorption) de la fixation des ligands de prot&eacute;ine aux supports hydrophobes, afin qu&#39;ils soient capables de mani&egrave;re ind&eacute;pendante s&#39;adapter HIC pour une nouvelle prot&eacute;ine. Ensuite, une m&eacute;thode non toxique simple est d&eacute;crite pour la synth&egrave;se de biblioth&egrave;ques de HIC-gel consistant en une s&eacute;rie homologue d&#39;alkyl-Sepharoses sans inculpation de trois longueurs de cha&icirc;ne (butyl, pentyle et hexyl S&eacute;pharose) pr&eacute;par&eacute;e avec diff&eacute;rents degr&eacute;s de s&eacute;paration. De cette s&eacute;rie un gel d&#39;hydrophobicit&eacute; critique ensuite s&eacute;lectionnables et employ&eacute; pour l&#39;hydrophobicit&eacute; critique HIC. Un exemple d&eacute;taill&eacute; pour la chromatographie de fibrinog&egrave;ne humain est donn&eacute; qu&#39;a &eacute;t&eacute; employ&eacute; comme une proc&eacute;dure en une &eacute;tape pour la purification de fibrinog&egrave;ne du plasma humain.

Chromatographie hydrophobe : exploiter les interactions de prot&eacute;ine-surface MULTIVALENTES pour les proc&eacute;dures de purification.

Hydrophobchromatographie: Nutzung der multivalenten Protein-Oberfl&#xE4;chen-Wechselwirkungen f&#xFC;r Reinigungsverfahren.

Cromatografia di interazione idrofobica (HIC) &egrave; una delle procedure di purificazione base nelle scienze biologiche. Tuttavia, a causa della sua complessit&agrave;, non ha guadagnato la stessa appiglio nel repertorio metodologico della chimica della proteina come ha la cromatografia di affinit&agrave; o cromatografia a scambio ionico. Questo &egrave; principalmente il risultato di mancanza di una procedura di ottimizzazione generale per l&#39;adsorbimento reversibile ed eluizione di una proteina novella di essere purificata. Ulteriori problemi nascono dal fatto che pi&ugrave; commerciale adsorbenti idrofobiche sono inadeguati per una performance ideale nelle procedure di elaborazione a valle, perch&eacute; questi mezzi sono troppo idrofobi ed eluizione delle proteine nel loro stato nativo &egrave; spesso impossibile. Pertanto, come nel 1970, un bioscientist di oggi deve essere in grado di sintetizzare una piccola biblioteca di gel idrofobi che lui o lei pu&ograve; allora selezionare e ottimizzare la matrice ideale per i loro bisogni speciali. Inoltre, un metodo di ottimizzazione generale che impiegano il concetto di idrofobicit&agrave; critico ora &egrave; stato ideato che dovrebbe consentire l&#39;applicazione della metodologia HIC a molte proteine finora non depurate. In questo capitolo, il lettore &egrave; introdotto per il background teorico (multivalence, cooperativit&agrave; negativa, isteresi di adsorbimento) dell&#39;associazione di ligandi proteine ai supporti idrofobici, cos&igrave; che essi saranno in grado di adattarsi autonomamente HIC ad una proteina del romanzo. Poi &egrave; descritto un metodo semplice e non tossico per la sintesi delle librerie HIC-gel costituito da una serie omologa di uncharged alchil-Sepharoses di tre lunghezze di catena (butile, pentile ed esilico Sepharose) preparata con diversi gradi di separazione. Da questa serie un gel idrofobicit&agrave; critica quindi pu&ograve; essere selezionato e impiegato per critica idrofobicit&agrave; HIC. Un esempio dettagliato per il cromatografia di fibrinogeno umano &egrave; dato che &egrave; stato impiegato come procedura One-Step per la purificazione di fibrinogeno da plasma umano.

Cromatografia idrofoba di interazione: sfruttando le interazioni proteina-superficie polivalente per le procedure di purificazione.

&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; (HIC)&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x6D44;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB; &#x30C6;&#x30A3;&#x30FC; &#x30FB; &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x4EA4;&#x63DB;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x540C;&#x3058;&#x8DB3;&#x5834;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5316;&#x5B66;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x7684;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x5F97;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x4E3B;&#x306B;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x5438;&#x7740;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x3068;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6EB6;&#x51FA;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x554F;&#x984C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x3082;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x6EB6;&#x51FA;&#x306F;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x5E02;&#x8CA9;&#x306E;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x5438;&#x7740;&#x5264;&#x304C;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; &#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x624B;&#x9806;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4E8B;&#x5B9F;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;1970 &#x5E74;&#x4EE3;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x4ECA;&#x65E5;&#x306E; bioscientist &#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x304B;&#x3089;&#x5F7C;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5F7C;&#x5973;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7279;&#x5225;&#x306A;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x884C;&#x5217;&#x3092;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x306E;&#x6982;&#x5FF5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x624B;&#x6CD5;&#x304C;&#x4ECA;&#x8003;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C; 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(&#x30D6;&#x30C1;&#x30EB;&#x3001;&#x30DA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30EB;&#x3001;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB; &#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30FC;&#x30BA;) &#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B; HIC &#x30B2;&#x30EB; &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x304B;&#x3089;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x758E;&#x6C34;&#x30B2;&#x30EB;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x3066;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x758E;&#x6C34; HIC &#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x4F8B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; &#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x30EF;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x624B;&#x9806;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x63A1;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E0E;&#x3048;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; (HIC)&#xB294; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xACFC;&#xD559;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC815;&#xD654; &#xC808;&#xCC28; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC5BB;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD654;&#xD559;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95; &#xB860; &#xC801; &#xB808; &#xD37C; &#xD1A0;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBC1C;&#xD310; &#xCE5C;&#xD654;&#xC131; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xB610;&#xB294; &#xC774;&#xC628; &#xAD50;&#xD658; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xB294;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xAC00;&#xC5ED; &#xD761;&#xCC29;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xC808;&#xCC28;&#xC758; &#xBD80;&#xC871; &#xD558; &#xACE0; &#xC815;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC18C;&#xC124; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCC28;&#xC785;&#xC758; &#xC8FC;&#xB85C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB354; &#xBB38;&#xC81C;&#xB294; &#xC774;&#xB4E4;&#xC774; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xB294; &#xB108;&#xBB34; &#xC18C;&#xC218;&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC6D0;&#xC2DC; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCC28;&#xC785;&#xC740; &#xC885;&#xC885; &#xBD88;&#xAC00;&#xB2A5; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC0C1;&#xC6A9; &#xC18C;&#xC218; adsorbents &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xB2A5; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC808;&#xCC28;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC0AC;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; 1970 &#xB144;&#xB300; &#xCC98;&#xB7FC; &#xC624;&#xB298;&#xB0A0;&#xC758; bioscientist&#xB294; &#xADF8;&#xAC00; &#xB610;&#xB294; &#xADF8;&#xB140;&#xAC00; &#xC218; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC120;&#xD0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD2B9;&#xBCC4; &#xD55C; &#xC694;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC824;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xB3C4;&#xC11C;&#xAD00;&#xC744; &#xD569;&#xC131; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; hydrophobicity &#xAC1C;&#xB150;&#xC744; &#xCC44;&#xC6A9; &#xC77C;&#xBC18; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95; &#xC9C0;&#xAE08; &#xACE0;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xD55C;, HIC &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; unpurified &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xC790; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; ligands&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC758; &#xC774;&#xB860;&#xC801; &#xBC30;&#xACBD; (multivalence, &#xB124;&#xAC70;&#xD2F0;&#xBE0C; cooperativity, &#xD761;&#xCC29; &#xD788;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC2DC;&#xC2A4;)&#xC744; &#xB3C4;&#xC785; &#xBA3C;&#xC800; &#xADF8;&#xB807;&#xAC8C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; HIC&#xB97C; &#xC801;&#xC751; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC744; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. HIC &#xC824; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978;&#xB3C4; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xCCB4;&#xC778; &#xAE38;&#xC774; (&#xBD80; &#xD2F8;, pentyl, &#xBC0F; hexyl Sepharose)&#xC758; uncharged &#xC54C; &#xD0AC; Sepharoses &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xB97C; &#xB3D9;&#xC885;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; nontoxic &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC74C;. &#xC774; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; hydrophobicity &#xC824; &#xC120;&#xD0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; hydrophobicity HIC&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xC608;&#xC81C;&#xB294; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC815;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC808;&#xCC28;&#xB85C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5B4; &#xADF8;.

&#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;: &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD45C;&#xBA74; &#xB610;&#xD55C; &#xC815;&#xD654; &#xC808;&#xCC28;&#xB97C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cromatograf&iacute;a de interacci&oacute;n hidr&oacute;foba (HIC) es uno de los procedimientos de purificaci&oacute;n b&aacute;sica de las biociencias. Sin embargo, debido a su complejidad, no ha ganado el mismo hueco en el repertorio metodol&oacute;gico de la qu&iacute;mica de la prote&iacute;na como cromatograf&iacute;a de afinidad o cromatograf&iacute;a de intercambio i&oacute;nico. Esto es principalmente el resultado de la falta de un procedimiento de optimizaci&oacute;n para la adsorci&oacute;n reversible y eluci&oacute;n de una nueva prote&iacute;na para purificarme. Otros problemas surgen del hecho de que m&aacute;s comerciales hidrof&oacute;bicos adsorbentes son inadecuadas para un funcionamiento ideal en procedimientos de procesamiento de aguas abajo, porque estos medios son demasiado hidrof&oacute;bicos y eluci&oacute;n de prote&iacute;nas en su estado nativo es a menudo imposible. Por lo tanto, al igual que en la d&eacute;cada de 1970, un bioscientist de hoy tiene que ser capaz de sintetizar una peque&ntilde;a biblioteca de geles hidr&oacute;fobos de que &eacute;l o ella puede entonces seleccionar y optimizar la matriz ideal para sus necesidades especiales. Adem&aacute;s, ahora ha ideado un m&eacute;todo de optimizaci&oacute;n que emplean el concepto de hidrofobicidad cr&iacute;tica que debe permitir que la aplicaci&oacute;n de la metodolog&iacute;a HIC muchas prote&iacute;nas hasta ahora. En este cap&iacute;tulo, el lector se introdujo a la base te&oacute;rica (polivalencia, cooperatividad negativa, hist&eacute;resis de adsorci&oacute;n) de la Uni&oacute;n de ligandos de prote&iacute;na a soportes hidrof&oacute;bicos, para que sean capaces de adaptarse independientemente HIC a una nueva prote&iacute;na. Luego se describe un m&eacute;todo simple no t&oacute;xico para la s&iacute;ntesis de las bibliotecas de HIC-gel que consiste en una serie hom&oacute;loga de alquil-Sepharoses descargada de tres longitudes de cadena (butilo, pentilo y hexil Sepharose) preparada con diferentes grados de separaci&oacute;n. De esta serie un gel de hidrofobicidad cr&iacute;tica puede seleccionado y empleado para la cr&iacute;tica hidrofobicidad HIC. Un ejemplo detallado para la cromatograf&iacute;a de fibrin&oacute;geno humano es dado que se ha empleado como un procedimiento de un solo paso para la purificaci&oacute;n del fibrin&oacute;geno del plasma humano.

Cromatograf&iacute;a de interacci&oacute;n hidr&oacute;foba: aprovechamiento multivalentes interacciones prote&iacute;na-superficie para procedimientos de purificaci&oacute;n.

&#x758F;&#x6C34;&#x5C42;&#x6790; (HIC) &#x5728;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x7406;&#x5E94;&#x7528;&#x4E00;&#x76F4;&#x662F;&#x4E2A;&#x8C1C;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1; 30 &#x591A;&#x5E74;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x53C2;&#x6570;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x4ECE;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684; n-&#x70F7;&#x57FA;&#x743C;&#x8102;&#x7CD6;&#x51DD;&#x80F6; 4B (Seph-Cn) &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x7684;&#x9002;&#x5E94; HIC &#x51DD;&#x80F6;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x4E3A;&#x6B64;&#x76EE;&#x7684; HIC &#x51DD;&#x80F6; (C4 Seph &#x5230; Seph C6) &#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7684;&#x70F7;&#x57FA;&#x6B8B;&#x7559;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x5E93;&#x662F;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x725B;&#x8840;&#x6D46;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x4E0E;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D53;&#x7F29;&#x7CFB;&#x5217;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x5BFC;&#x81F4; sigmoidal &#x7ED1;&#x5B9A;&#x66F2;&#x7EBF;&#x3002;&#x683C;&#x5B50;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6A21;&#x578B; Seph C5 &#x6570;&#x636E;&#x5206;&#x6790; 5 &#x548C; 10 &#x6307;&#x793A; 5-10 &#x683C;-&#x7AD9;&#x70B9; &#xFF08;&#x70F7;&#x57FA;&#x6B8B;&#x7559;) multivalently &#x4EA4;&#x4E92;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x5206;&#x5B50;&#x5438;&#x9644;&#x5728;&#x4F4E;&#x79BB;&#x5B50;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4EA7;&#x751F;&#x5438;&#x9644;&#x7CFB;&#x6570; (nS)&#x3002;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x6676;&#x683C;&#x534A;&#x9971;&#x548C;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x89E3;&#x79BB;&#x4F4D;&#x4E8E; 21 &#x548C; 25 &#x6469;&#x5C14;/&#x6BEB;&#x5347;&#x88C5;&#x51DD;&#x80F6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x70F7;&#x57FA;&#x94FE;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x53EF;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x3002;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x51C0;&#x5316;&#x5173;&#x952E; hydrohobicity &#x51DD;&#x80F6;&#xFF0C;Seph C5 &#xFF08;13 &#x6469;&#x5C14;/&#x6BEB;&#x5347;&#x88C5;&#x51DD;&#x80F6;&#xFF09;&#xFF0C;&#x88AB;&#x9009;&#x3002;&#x52A9;&#x6EB6;&#x5242;&#x7684;&#x5E2E;&#x52A9;&#x4E0B;&#x6C2F;&#x5316;&#x94A0;&#x6216;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x5B8C;&#x5168;&#x53EF;&#x9006;&#x5438;&#x9644;&#x5C06;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5BF9;&#x5173;&#x952E;&#x618E;&#x6C34;&#x6027;&#x51DD;&#x80F6;&#x3002;&#x5728;&#x4EBA;&#x529B;&#x548C;&#x725B;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5E94;&#x7528;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5355;&#x6B65;&#x7EAF;&#x5316;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x542B;&#x91CF;&#x9AD8;&#x7684;&#x4EA7;&#x91CF;&#x3002;&#x53E4;&#x5178;&#x7EAF;&#x5316;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x4E0E;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x758F;&#x6C34;&#x6027; HIC (&#x65F6;&#x5C1A;) &#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5411; ca.1 h &#x6F14;&#x793A;&#x4ECE;&#x51E0;&#x5929;&#x7684;&#x51C6;&#x5907;&#x65F6;&#x95F4;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;HIC &#x51C0;&#x5316;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8840;&#x6D46;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x7684;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7ED3;&#x6784;&#x7B49;&#x540C;&#x4E8E;&#x7ECF;&#x5178;&#x7EAF;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5728;&#x725B;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x4F46;&#x662F; HIC &#x7EAF;&#x51C0;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7ED3;&#x6784;&#x5728;&#x8FD9;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x7684; Aalpha &#x94FE;&#x4E86; ca.5 kDa &#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x3002;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x65B0;&#x6B65;&#x6CD5;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x6027;&#x548C;&#x907F;&#x7A0E;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;

&#x4E0E; n alkylagaroses &#x53CA;&#x5173;&#x952E;&#x758F;&#x6C34;&#x758F;&#x6C34;&#x4F5C;&#x7528;&#x8272;&#x8C31;&#x7EAF;&#x5316;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

A rational application of hydrophobic interaction chromatography (HIC) to the purification of proteins has remained an enigma in spite of over 30 years of research. The critical hydrophobicity parameter, which can be determined from a concentration series of n-alkyl Sepharose 4B (Seph-Cn) offers the possibility of adapting the HIC gel to the needs of purification. To this end a library of HIC gels (Seph-C4 to Seph-C6) of different immobilized alkyl residue concentrations was synthesized and tested with purified bovine fibrinogen. Binding of fibrinogen to such a concentration series resulted in sigmoidal binding curves. Analysis of the Seph-C5 data according to the lattices-site binding model yielded adsorption coefficients (nS) between 5 and 10 indicating that 5-10 lattice-sites (alkyl residues) interact multivalently with a fibrinogen molecule for adsorption at low ionic strength. The apparent lattice-site half-saturation constant of dissociation lies between 21 and 25 micromol/ml packed gel. For each alkyl chain length a critical hydrophobicity could be determined. For fibrinogen purification the critical hydrohobicity gel, Seph-C5 (13 micromol/ml packed gel), was selected. With the help of the cosolvents NaCl or glycine a fully reversible adsorption of fibrinogen could be facilitated on the critical hydrophobicity gel. Application of the method to human and bovine blood plasma resulted in a single step purification of fibrinogen in high yields. A comparison of the classical purification of fibrinogen with the critical hydrophobicity HIC (CHIC) method demonstrates a reduction in preparation time from several days to ca. 1 h. The subunit structure of HIC-purified human fibrinogen is identical to the classically purified protein. In the case of bovine fibrinogen however HIC-purified fibrinogen displayed a different subunit structure in that the Aalpha chain of fibrinogen had a ca. 5 kDa higher molecular mass. This may be due to the rapidity of the new one-step method and an avoidance of proteolysis.

Interaction of fibrinogen with n-alkylagaroses and its purification by critical hydrophobicity hydrophobic interaction chromatograpy.

Une application rationnelle de chromatographie hydrophobe (HIC) pour la purification de prot&eacute;ines est rest&eacute; une &eacute;nigme en d&eacute;pit de plus de 30 ann&eacute;es de recherche. Le param&egrave;tre critique hydrophobie, qui peut &ecirc;tre d&eacute;termin&eacute; &agrave; partir d&#39;une s&eacute;rie de concentrations de n-alkyl S&eacute;pharose 4 b (EERH-Cn) offre la possibilit&eacute; d&#39;adapter le gel HIC pour les besoins de purification. &Agrave; cette fin, une biblioth&egrave;que de gels HIC (EERH-C4 &agrave; C6-Seph) des concentrations de r&eacute;sidus diff&eacute;rents alkyl immobilis&eacute; a &eacute;t&eacute; synth&eacute;tis&eacute;e et test&eacute;e avec le fibrinog&egrave;ne bovin purifi&eacute;. Liaison du fibrinog&egrave;ne &agrave; une telle s&eacute;rie de concentration a entra&icirc;n&eacute; des courbes de liaison sigmo&iuml;de. Analyse les donn&eacute;es de l&#39;EERH-C5 selon le mod&egrave;le de liaison de treillis-site a produit des coefficients d&#39;adsorption (nS) entre 5 et 10 indiquant que 5 &agrave; 10 sites-r&eacute;seau (r&eacute;sidus d&#39;alkyle) interagissent multivalently avec une mol&eacute;cule de fibrinog&egrave;ne pour l&#39;adsorption &agrave; faible force ionique. La constante de demi-saturation treillis apparent-site de dissociation se situe entre 21 et 25 micromol/ml rempli de gel. Pour chaque longueur de la cha&icirc;ne alkyle une hydrophobie critique pourrait &ecirc;tre d&eacute;termin&eacute;e. Pour la purification de fibrinog&egrave;ne le gel hydrohobicity critique, Seph-C5 (13 micromol/ml rempli de gel), a &eacute;t&eacute; s&eacute;lectionn&eacute;. Avec l&#39;aide des cosolvants NaCl ou glycine une adsorption r&eacute;versible enti&egrave;rement de fibrinog&egrave;ne pourrait &ecirc;tre facilit&eacute; sur le gel de l&#39;hydrophobicit&eacute; critique. Application de la m&eacute;thode sur le plasma sanguin humain et bovin a entra&icirc;n&eacute; une seule &eacute;tape de purification du fibrinog&egrave;ne avec des rendements &eacute;lev&eacute;s. Une comparaison de la purification classique de fibrinog&egrave;ne avec l&#39;hydrophobie critique m&eacute;thode HIC (CHIC) montre une r&eacute;duction du temps de pr&eacute;paration de plusieurs jours &agrave; env. 1 h. La structure de la sous-unit&eacute; de fibrinog&egrave;ne humain purifi&eacute; HIC est identique &agrave; la prot&eacute;ine purifi&eacute;e de fa&ccedil;on classique. Dans le cas de fibrinog&egrave;ne bovin toutefois purifi&eacute; HIC fibrinog&egrave;ne affiche une structure des sous-unit&eacute;s diff&eacute;rentes en ce que la cha&icirc;ne al&#39;alpha du fibrinog&egrave;ne a une sup&eacute;rieure env. 5 kDa masse mol&eacute;culaire. C&#39;est peut-&ecirc;tre en raison de la rapidit&eacute; de la nouvelle m&eacute;thode en une &eacute;tape et un &eacute;vitement de la prot&eacute;olyse.

Interaction du fibrinog&egrave;ne avec n-alkylagaroses et sa purification par hydrophobicit&eacute; critique interaction hydrophobe chromatograpy.

Eine rationale Anwendung der hydrophobe Interaktion Chromatographie (HIC) zur Reinigung von Proteinen ist ein R&auml;tsel, trotz 30 Jahren der Forschung geblieben. Den kritischen Hydrophobie-Parameter, der aus einer Konzentration-Serie von n-Alkyl Sepharose 4B bestimmt werden kann (Seph-Cn) bietet die M&ouml;glichkeit der Anpassung des HIC-Gels auf die Bed&uuml;rfnisse der Reinigung. Zu diesem Zweck wurde eine Bibliothek von HIC Gele (Seph-C4 Seph-C6) der verschiedenen immobilisierte Alkyl R&uuml;ckstand Konzentrationen synthetisiert und getestet mit gereinigtem Rinder Fibrinogen. Bindung von Fibrinogen, eine solche Konzentration Reihe f&uuml;hrte sigmoiden Bindung Kurven. Analyse der Seph-C5 Daten nach dem Gitter-Website Bindungsmodell ergab Adsorption Koeffizienten (nS) zwischen 5 und 10, die darauf hinweist, dass 5-10-Gitter-Websites (Alkyl R&uuml;ckst&auml;nde) multivalently mit einem Fibrinogen-Molek&uuml;l f&uuml;r die Adsorption an niedrige Ionenst&auml;rke interagieren. Die scheinbare Gitter-Website-H&auml;lfte-S&auml;ttigung-Konstante der Dissoziation liegt zwischen 21 und 25 Mikromol/ml Gel verpackt. F&uuml;r jede Alkyl-Kettenl&auml;nge konnte eine kritische Hydrophobie ermittelt werden. F&uuml;r Fibrinogen Reinigung der kritischen Hydrohobicity Gel, Seph-C5 (13 Mikromol/ml Gel verpackt) ausgew&auml;hlt wurde. Mit Hilfe der Cosolvens konnte NaCl oder Glycin eine vollst&auml;ndig reversible Adsorption von Fibrinogen auf dem kritischen Hydrophobie-Gel erleichtert werden. Anwendung der Methode auf menschliche und Rinder Blutplasma ergab eine Einzelschritt-Reinigung von Fibrinogen in hohe Ertr&auml;ge. Ein Vergleich der klassischen Reinigung von Fibrinogen mit der kritischen Hydrophobie HIC (CHIC)-Methode zeigt einen R&uuml;ckgang der Vorbereitungszeit von mehreren Tagen bis ca. 1 h. Die Untereinheit Struktur des menschlichen Fibrinogen HIC-gereinigt ist identisch mit der klassisch gereinigtes Protein. Bei Rindern Fibrinogen jedoch HIC-gereinigt Fibrinogen angezeigt eine unterschiedliche Untereinheit-Struktur, die Aalpha-Kette von Fibrinogen ein ca. 5 kDa h&ouml;her hatte molare Masse. Dies kann aufgrund der Schnelligkeit, mit der die neue One-Step-Methode und eine Vermeidung von Proteolyse sein.

Zusammenspiel von Fibrinogen mit n-Alkylagaroses und seine Reinigung durch kritische Hydrophobie hydrophobe Interaktion Chromatograpy.

Una razionale applicazione della cromatografia di interazione idrofobica (HIC) per la purificazione delle proteine &egrave; rimasta un enigma nonostante pi&ugrave; di 30 anni di ricerca. Il parametro critico idrofobicit&agrave;, che pu&ograve; essere determinato da una serie di concentrazione di n-alchile Sepharose 4B (Seph-Cn) offre la possibilit&agrave; di adattare il gel HIC alle necessit&agrave; di purificazione. A tal fine una libreria di gel HIC (Seph-C4 a C6-Seph) delle concentrazioni di residui alchilici immobilizzati diversi &egrave; stata sintetizzata e testata con fibrinogeno bovino purificato. Associazione di fibrinogeno per tali una serie di concentrazione ha provocato nelle curve di associazione sigmoidal. Analisi dei dati secondo il modello di associazione di reticoli-sito Seph-C5 ha reso i coefficienti di adsorbimento (nS) tra 5 e 10 che indica che il 5-10 siti reticolari (residui alchilici) interagiscano multivalently con una molecola di fibrinogeno per adsorbimento a bassa forza ionica. La costante di met&agrave;-saturazione apparente reticolo-sito di dissociazione si trova tra 21 e 25 micromol/ml imballato gel. Per ogni lunghezza di catena alchilica potrebbe essere determinato un critico idrofobicit&agrave;. Per la purificazione di fibrinogeno il gel hydrohobicity critico, Seph-C5 (13 micromol/ml imballato gel), &egrave; stato selezionato. Con l&#39;aiuto di cosolventi i NaCl o glicina un adsorbimento completamente reversibile di fibrinogeno pu&ograve; agevolare sul gel critico idrofobicit&agrave;. Applicazione del metodo di plasma di sangue umano e bovino ha provocato una purificazione passo a passo di fibrinogeno in alte rese. Un confronto tra la classica purificazione del fibrinogeno con il hydrophobicity critico Metodo HIC (CHIC) dimostra una riduzione del tempo di preparazione da diversi giorni a ca. 1 h. La struttura secondaria del fibrinogeno umano purificato HIC &egrave; identica alla proteina purificata classicamente. Nel caso di fibrinogeno bovino tuttavia fibrinogeno purificato HIC visualizzata una struttura differenti subunit&agrave; in quanto la catena al&#39;alfa del fibrinogeno aveva un ca. 5 kDa maggiore massa molecolare. Ci&ograve; pu&ograve; essere dovuto la rapidit&agrave; del nuovo metodo One-Step e un&#39;elusione della proteolisi.

Interazione del fibrinogeno con n-alkylagaroses e la sua purificazione di idrofobicit&agrave; critica interazione idrofoba chromatograpy.

&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; (HIC) &#x306E;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x5FDC;&#x7528;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x306B; 30 &#x5E74;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x30A8;&#x30CB;&#x30B0;&#x30DE;&#x306B;&#x3068;&#x3069;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x9023;&#x306E; n &#x2010; &#x30A2;&#x30EB;&#x30AD;&#x30EB; &#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30FC;&#x30BA; 4 b &#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; (&#x30BB;&#x30D5; Cn) HIC &#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x306E;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x672B;&#x5C3E;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AD;&#x30EB;&#x6B8B;&#x7559;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E; HIC &#x30B2;&#x30EB; (&#x30BB;&#x30D5; C6 &#x306B;&#x30BB;&#x30D5; C4) &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30B7; &#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x3068;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B7;&#x30B0;&#x30E2;&#x30A4;&#x30C9; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x66F2;&#x7DDA;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x683C;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x30BB;&#x30D5; C5 &#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306F; 5 &#xFF5E; 10 &#x306E; 5-10 &#x30E9;&#x30C1;&#x30B9; &#xFF08;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AD;&#x30EB;&#x6B8B;&#x57FA;&#xFF09; &#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x5206;&#x5B50;&#x5438;&#x7740;&#x4F4E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3068; multivalently &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x5438;&#x7740;&#x4FC2;&#x6570; (nS) &#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x89E3;&#x96E2;&#x306E;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x683C;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x534A;&#x98FD;&#x548C;&#x5B9A;&#x6570; 21 &#x3068; 25 micromol/&#x30B2;&#x30EB;&#x5145;&#x3066;&#x3093;&#x30DF;&#x30EA;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5404;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AD;&#x30EB;&#x9396;&#x9577;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x6D44;&#x5316;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AB;&#x30EB; hydrohobicity &#x30B2;&#x30EB; &#x30BB;&#x30D5; C5 (13 micromol/&#x30B2;&#x30EB;&#x5145;&#x3066;&#x3093; ml) &#x304C;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Cosolvents &#x306E;&#x52A9;&#x3051;&#x3092;&#x501F;&#x308A;&#x3066; NaCl &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x5B8C;&#x5168;&#x53EF;&#x9006;&#x5438;&#x7740;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x758E;&#x6C34;&#x30B2;&#x30EB;&#x306B;&#x5BB9;&#x6613;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6CD5;&#x306E;&#x9069;&#x7528;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x725B;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x3001;&#x9AD8;&#x53CE;&#x7387;&#x3067;&#x306E;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB; &#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x53E4;&#x5178;&#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x758E;&#x6C34; HIC &#xFF08;&#x30B7;&#x30C3;&#x30AF;&#xFF09; &#x6CD5;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x6E96;&#x5099;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x77ED;&#x7E2E;&#x304B;&#x3089;&#x6570;&#x65E5; ca&#x3002; 1 h &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HIC &#x7CBE;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x6D44;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x725B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x5834;&#x5408;&#x305F;&#x3060;&#x3057; HIC &#x7CBE;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x8868;&#x793A;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x69CB;&#x9020; Aalpha &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E; ca&#x3002; 5 kDa &#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x56FA;&#x307E;&#x308A;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EF;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x901F;&#x3055;&#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x56DE;&#x907F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

N-alkylagaroses &#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D44;&#x5316;&#x3068;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xD654;&#xB97C; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; (HIC)&#xC758; &#xD569;&#xB9AC;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xC5F0;&#xAD6C; 30 &#xB144; &#xC774;&#xC0C1; &#xBD88;&#xAD6C; &#xC218;&#xC218;&#xAED8;&#xB07C; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. N-&#xC54C; &#xD0AC; Sepharose 4b&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xC815; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; hydrophobicity &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; (Seph-Cn) &#xC815;&#xD654;&#xC758; &#xD544;&#xC694;&#xC5D0; HIC &#xC824; &#xC801;&#xC751; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC704;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xC9C0; &#xC54C; &#xD0AC; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; HIC &#xC824; (Seph-C4 Seph C6) &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xD569;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC21C;&#xD654; &#xC18C; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xB97C; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC790;&#xD615; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xACE1;&#xC120; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xACA9;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBAA8;&#xB378; Seph C5 &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; 5 10 5-10 &#xACA9;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (&#xC54C; &#xD0AC; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;) multivalently &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xBD84;&#xC790; &#xD761;&#xCC29; &#xB0AE;&#xC740; &#xC774;&#xC628; &#xAC15;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xD761;&#xCC29; &#xACC4;&#xC218; (nS)&#xB97C; &#xC5BB;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xB9AC;&#xC758; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xACA9;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC18; &#xD3EC;&#xD654; &#xC0C1;&#xC218; 21 &#xBC0F; 25 micromol/ml &#xC824; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xC0AC;&#xC774; &#xB193;&#xC5EC; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC01; &#xC54C; &#xD0AC; &#xCCB4;&#xC778; &#xAE38;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; hydrophobicity &#xACB0;&#xC815; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xC815;&#xD654; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; hydrohobicity &#xC824; Seph c 5&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; (13 micromol/ml &#xC824; &#xD3EC;&#xC7A5;), &#xC120;&#xC815; &#xB410;&#xB2E4;. Cosolvents &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; NaCl &#xB610;&#xB294; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0;&#xC758; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xAC00;&#xC5ED; &#xD761;&#xCC29; &#xC911;&#xC694; hydrophobicity &#xC824;&#xC5D0; &#xCD09;&#xC9C4; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC18C;&#xACFC; &#xD608;&#xC561; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xB9C8;&#xB97C; &#xC751;&#xC6A9; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC775;&#xB960;&#xC5D0; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xBC88; &#xC815;&#xD654; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; hydrophobicity HIC (&#xCE59;) &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xACE0;&#xC804; &#xC815;&#xD654;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; ca. 1 &#xC2DC;&#xAC04;&#xC744; &#xBA70;&#xCE60;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC900;&#xBE44; &#xC2DC;&#xAC04; &#xAC10;&#xC18C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; HIC &#xC815;&#xD654;&#xC758; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xACE0;&#xC804;&#xC801;&#xC778; &#xC815;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC18C; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; HIC &#xC815;&#xD654; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xC54C;&#xD30C; &#xCCB4;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4; ca. 5 kDa &#xB192;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C8;&#xB7C9;. &#xC774; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; 1 &#xB2E8;&#xACC4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC2E0;&#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xC758; &#xD68C;&#xD53C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

N alkylagaroses &#xBC0F; &#xC911;&#xC694; hydrophobicity &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; chromatograpy&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC815;&#xD654;&#xC640; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;.

Un uso racional de la cromatograf&iacute;a de interacci&oacute;n hidr&oacute;foba (HIC) para la purificaci&oacute;n de prote&iacute;nas sigue siendo un enigma a pesar m&aacute;s de 30 a&ntilde;os de investigaci&oacute;n. El par&aacute;metro cr&iacute;tico hidrofobicidad, que puede determinarse a partir de una serie de la concentraci&oacute;n de n-Alquil-Sepharose 4B (Seph-Cn) ofrece la posibilidad de adaptar el gel HIC a las necesidades de purificaci&oacute;n. Para ello una librer&iacute;a de geles HIC (Seph-C4 a C6-Seph) de las concentraciones de residuos de diferentes alquil inmovilizados fue sintetizada y probada con fibrin&oacute;geno bovino purificado. Uni&oacute;n del fibrin&oacute;geno a tal una serie de concentraci&oacute;n dio lugar a curvas sigmoidales vinculante. An&aacute;lisis de los datos de la Seph-C5 seg&uacute;n el modelo de enlace de enrejados-sitio rindi&oacute; coeficientes de adsorci&oacute;n (nS) entre 5 y 10, que indica que 5-10-sitios del enrejado (residuos alkyl) multivalently interact&uacute;an con una mol&eacute;cula de fibrin&oacute;geno de adsorci&oacute;n en baja fuerza i&oacute;nica. La constante de saturaci&oacute;n media aparente enrejado-sitio de disociaci&oacute;n se encuentra entre 21 y 25 micromol/ml lleno de gel. Para cada longitud de cadena alquil podr&iacute;a determinarse una cr&iacute;tica hidrofobicidad. Para la purificaci&oacute;n del fibrin&oacute;geno el gel de hydrohobicity cr&iacute;tica, Seph-C5 (13 micromol/ml lleno de gel), fue seleccionado. Con la ayuda de los cosolventes NaCl o glicina una adsorci&oacute;n completamente reversible del fibrin&oacute;geno podr&iacute;a facilitarse en el gel de hidrofobicidad cr&iacute;tica. Aplicaci&oacute;n del m&eacute;todo de plasma de sangre humano y bovino dio lugar a una purificaci&oacute;n de escal&oacute;n de fibrin&oacute;geno en altos rendimientos. Una comparaci&oacute;n de la purificaci&oacute;n cl&aacute;sica de fibrin&oacute;geno con la hidrofobicidad cr&iacute;tico m&eacute;todo de HIC (CHIC) demuestra una reducci&oacute;n en el tiempo de preparaci&oacute;n de varios d&iacute;as a aprox. 1 h. La estructura de la subunidad de fibrin&oacute;geno humano purificado HIC es id&eacute;ntica a la prote&iacute;na purificada cl&aacute;sico. En el caso de fibrin&oacute;geno bovino sin embargo fibrin&oacute;geno HIC-purificada muestra una estructura de la subunidad diferentes en que la cadena de Aalpha de fibrin&oacute;geno ten&iacute;a un ca. 5 kDa mayor masa molecular. Esto puede ser debido a la rapidez de la nueva modalidad de un solo paso y una evitaci&oacute;n de prote&oacute;lisis.

Interacci&oacute;n del fibrin&oacute;geno con n-alkylagaroses y su purificaci&oacute;n por chromatograpy de interacci&oacute;n hidrof&oacute;bica de hidrofobicidad cr&iacute;tica.

&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50; (NP)-&#x57FA;&#x4E8E;&#x7684;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x5177;&#x6709;&#x4E86;&#x6539;&#x5584;&#x6CBB;&#x7597;&#x5242;&#x7684;&#x6548;&#x529B;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;&#x725B;&#x8840;&#x6E05;&#x767D;&#x86CB;&#x767D; (BSA) NPs&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x51DD;&#x805A;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x88AB;&#x9759;&#x7535;&#x5438;&#x9644;&#x7684;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x805A;&#x4E59;&#x70EF;&#x4E9A;&#x80FA; (PEI) &#x4FEE;&#x6539;&#x5230;&#x9AA8;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2 (&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2&#xFF09; &#x4EA4;&#x4ED8;&#x7684; NP &#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x4E0D;&#x540C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x88F4;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x6D82;&#x6599; BSA NPs &#x4EE5;&#x7A33;&#x5B9A;&#x80F6;&#x4F53;&#x4F53;&#x7CFB;&#x5E76;&#x63A7;&#x5236;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2 &#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;NPs &#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x7531;&#x5927;&#x5C0F;&#x548C; zeta &#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x626B;&#x63CF;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x548C;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x3002;&#x5C01;&#x88C5;&#x6548;&#x7387;&#x901A;&#x5E38;&#x662F; &gt; NP &#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x7B79;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x4E2D;&#x7684; 90%&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x91CA;&#x653E;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x7528;&#x4E8E;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x6D82;&#x6599; NPs &#x7684;&#x88F4;&#x6D53;&#x5EA6;&#x63A7;&#x5236;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x9010;&#x6B65;&#x653E;&#x6162;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E3A;&#x671F; 10 &#x5929;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x671F;&#x95F4;&#x6301;&#x7EED;&#x91CA;&#x653E;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x5C01;&#x88C5;&#x7684;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2 &#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684; NPs &#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x78B1;&#x6027;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; (ALP) &#x611F;&#x5E94;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C; mtt&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4F7F;&#x7528; C2C12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x88F4;&#x662F; NP &#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;BSA NPs &#x6D82;&#x6577; 0.1 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#x88F4;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5FCD;&#x53D7;&#x6BD2;&#x6027;&#x3001; &#x4FDD;&#x7559;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2&#x3001; &#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x51CF;&#x7F13;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2 &#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x7387;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2 &#x5C01;&#x88C5;&#x5728; BSA NPs &#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x9AA8;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;-2 &#x4EA4;&#x8D27;&#x7684;&#x805A;&#x4E59;&#x70EF;&#x4E9A;&#x80FA;&#x6D82;&#x5C42;&#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x3002;

Nanoparticle (NP)-based delivery has gained importance for improving the potency of therapeutic agents. The bovine serum albumin (BSA) NPs, obtained by a coacervation process, was modified by electrostatic adsorption of cationic polyethylenimine (PEI) to NP surfaces for delivery of bone-inducing growth factor, bone morphogenetic protein-2 (BMP-2). Different concentrations of PEI were utilized for coating BSA NPs to stabilize the colloidal system and to control the release of BMP-2. The NPs were characterized by size and zeta potential measurements, as well as by Scanning Electron Microscopy and Atomic Force Microscopy. The encapsulation efficiency was typically >90% in all NP preparations. In vitro release kinetics showed that the PEI concentration used for coating the NPs efficiently controlled the release of BMP-2, demonstrating a gradual slowing, sustained release pattern during a 10-day study period. The bioactivity of the encapsulated BMP-2 and the toxicity of the NPs were examined by the alkaline phosphatase (ALP) induction assay and the MTT assay, respectively, using C2C12 cells. The results indicated that PEI was the primary determinant of NP toxicities, and BSA NPs coated with 0.1 mg/mL PEI demonstrated tolerable toxicity, retained the bioactivity of BMP-2, and efficiently slowed the release rate of BMP-2. We conclude that BMP-2 encapsulated in BSA NPs might be an efficient way to deliver the protein for in vivo bone induction.

Polyethylenimine-coated albumin nanoparticles for BMP-2 delivery.

Nanoparticules (NP)-fonction livraison a gagn&eacute; en importance pour l&#39;am&eacute;lioration de l&#39;activit&eacute; des agents th&eacute;rapeutiques. Les NPs d&#39;albumine s&eacute;rique bovine (BSA), obtenues par un proc&eacute;d&eacute; coacervation, a &eacute;t&eacute; modifi&eacute; par adsorption &eacute;lectrostatique de cationique polyethylenimine (PEI) aux surfaces de NP pour l&#39;administration de facteur de croissance induisant OS, OS prot&eacute;ine morphog&eacute;n&eacute;tique-2 (BMP-2). Diff&eacute;rentes concentrations de PEI ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es pour le rev&ecirc;tement de BSA NPs pour stabiliser le syst&egrave;me collo&iuml;dal et pour contr&ocirc;ler les rejets de BMP-2. Les NPs ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;s par des mesures de potentiels taille et zeta, ainsi qu&#39;en microscopie &eacute;lectronique &agrave; balayage et en microscopie &agrave; Force atomique. L&#39;efficacit&eacute; d&#39;encapsulation a &eacute;t&eacute; g&eacute;n&eacute;ralement &gt; 90 % dans toutes les pr&eacute;parations de NP. Cin&eacute;tique de lib&eacute;ration in vitro ont montr&eacute; que la concentration de PEI utilis&eacute;e pour le rev&ecirc;tement de la SNPP efficacement la lib&eacute;ration contr&ocirc;l&eacute;e de BMP-2, montrant un ralentissement progressif, a subi motif de lib&eacute;ration au cours d&#39;une p&eacute;riode d&#39;&eacute;tude de 10 jours. La bioactivit&eacute; de la BMP-2 encapsul&eacute; et la toxicit&eacute; de la SNPP ont &eacute;t&eacute; examin&eacute;s par le dosage de l&#39;induction de la phosphatase alcaline (ALP) et de l&#39;analyse de MTT, respectivement, en utilisant des cellules C2C12. Les r&eacute;sultats ont indiqu&eacute; que PEI a &eacute;t&eacute; le principal facteur d&eacute;terminant de la toxicit&eacute; du NP, et BSA NPs recouvert de 0,1 mg/mL PEI a d&eacute;montr&eacute; la toxicit&eacute; tol&eacute;rable, conserv&eacute; &agrave; la bioactivit&eacute; du BMP-2 et efficacement a ralenti la vitesse de lib&eacute;ration de la BMP-2. Nous concluons que la BMP-2 encapsul&eacute; dans NPs BSA pourrait &ecirc;tre un moyen efficace pour livrer la prot&eacute;ine pour l&#39;induction de l&#39;OS in vivo.

Nanoparticules d&#39;albumine polyethylenimine-enduit pour la livraison de la BMP-2.

Nanopartikel (NP)-je Lieferung hat Bedeutung f&uuml;r die Verbesserung der Wirksamkeit von Therapeutika gewonnen. Der NPs Rinderserumalbumin (BSA), die durch einen Coacervation-Prozess durch elektrostatische Adsorption von kationischen Polyethylenimin (PEI), NP Oberfl&auml;chen f&uuml;r die Lieferung von Knochen-induzierende Wachstumsfaktor, Knochen morphogenetische Protein-2 (BMP-2) ge&auml;ndert wurde. Verschiedene Konzentrationen von PEI wurden f&uuml;r die Beschichtung von BSA NPs das kolloidale System zu stabilisieren und die Freisetzung von BMP-2 Steuerung eingesetzt. Die NPs zeichneten sich durch Gr&ouml;&szlig;e und Zeta potenzielle Messungen sowie durch Scanning Electron Microscopy und Atomic Force Microscopy. Die Kapselung-Effizienz war in der Regel &gt; 90 % bei allen NP-Vorbereitungen. W&auml;hrend einen zehnt&auml;gigen Studienaufenthalt erlittenen in-vitro-Version-Kinetik, die zeigte, dass die PEI-Konzentration f&uuml;r die Beschichtung der NPs effizient verwendet die Freigabe von BMP-2, zeigen eine allm&auml;hliche Verlangsamung, kontrollierte Freigabe-Muster. Die Bioaktivit&auml;t der gekapselten BMP-2 und die Toxizit&auml;t von der NPs wurden untersucht durch die alkalische Phosphatase (ALP)-Induktion-Assay und der MTT-Assay, jeweils mit C2C12 Zellen. Die Ergebnisse zeigten, dass PEI der prim&auml;re Faktor f&uuml;r NP Toxizit&auml;ten war und BSA NPs beschichtet mit 0,1 mg/mL PEI gezeigt tolerierbaren Toxizit&auml;t, behielt die Bioaktivit&auml;t der BMP-2 und effizient verlangsamt die Freigabe-Rate von BMP-2. Wir schlie&szlig;en, dass BMP-2 gekapselt in BSA NPs eine effiziente M&ouml;glichkeit, das Protein f&uuml;r in-vivo Knochen Induktion liefern k&ouml;nnte.

Polyethylenimin beschichtete Albumin Nanopartikel f&uuml;r BMP-2 Lieferung.

Nanoparticelle (NP)-basata di consegna ha guadagnato importanza per migliorare la potenza degli agenti terapeutici. NPs albumina di siero bovino (BSA), ottenuto mediante un processo di coacervo, &egrave; stato modificato da adsorbimento elettrostatico di polyethylenimine cationico (PEI) per superfici di NP per la consegna di osso di induzione del fattore di crescita, bone morphogenetic protein-2 (BMP-2). Diverse concentrazioni di PEI sono state utilizzate per il rivestimento di BSA NPs per stabilizzare il sistema colloidale e per controllare il rilascio di BMP-2. NPs sono stato caratterizzato da dimensioni e zeta misure potenziali, nonch&eacute; da microscopia a scansione e microscopia a forza atomica. L&#39;efficienza di incapsulamento era tipicamente &amp;gt; 90% in tutte le preparazioni di NP. Cinetica di rilascio in vitro hanno dimostrato che la concentrazione di PEI utilizzata per il rivestimento in modo efficiente il NPs controllato il rilascio di BMP-2, dimostrando un rallentamento graduale, sostenuta rilascio modello durante un periodo di 10 giorni di studio. La bioattivit&agrave; del BMP-2 incapsulati e la tossicit&agrave; di NPs sono stati esaminati per il dosaggio di induzione della fosfatasi alcalina (ALP) e il saggio MTT, rispettivamente, utilizzando cellule C2C12. I risultati hanno indicato che PEI era il determinante primario della tossicit&agrave; di NP, e BSA NPs rivestita di 0.1 mg/mL PEI dimostrata tossicit&agrave; tollerabile, mantenne la bioattivit&agrave; di BMP-2 e rallentato in modo efficiente il tasso di rilascio di BMP-2. Concludiamo che BMP-2 incapsulati in NPs BSA potrebbe essere un modo efficace per fornire le proteine per l&#39;induzione dell&#39;osso in vivo.

Rivestito in polyethylenimine albumina nanoparticelle per la consegna di BMP-2.

&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50; (NP)-&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x306F;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x85AC;&#x306E;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F97;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B3;&#x30A2;&#x30BB;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30B7;&#x8840;&#x6E05;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3; (BSA) &#x306E; NPs &#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x6027;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3; &#xFF08;PEI&#xFF09; &#x306E;&#x9759;&#x96FB;&#x5438;&#x7740;&#x306B;&#x3088;&#x308B; NP &#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x9AA8;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6210;&#x56E0;&#x5B50;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 2 (BMP 2&#xFF09; &#x914D;&#x4FE1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6FC3;&#x5EA6; PEI &#x306E; BSA NPs &#x30B3;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3068; BMP 2 &#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;NPs &#x306F;&#x3001;&#x8D70;&#x67FB;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3001;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x30BC;&#x30FC;&#x30BF;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x901A;&#x5E38;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x52B9;&#x7387;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x76EE; NP &#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x3067; 90%&#x3002;NPs &#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528; PEI &#x6FC3;&#x5EA6; BMP-2&#x3001;&#x6F38;&#x9032;&#x7684;&#x306A;&#x6E1B;&#x901F;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; in vitro &#x653E;&#x51FA;&#x52D5;&#x614B;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092; 10 &#x65E5;&#x9593;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x671F;&#x9593;&#x4E2D;&#x306B;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x3002;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F; BMP 2 &#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068; NPs &#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC; (ALP) &#x8A98;&#x5C0E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3068; MTT &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C; C2C12 &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PEI NP &#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3068; BSA NPs 0.1 mg/mL &#x5B9F;&#x8A3C; PEI &#x8A31;&#x5BB9;&#x6BD2;&#x6027;&#x3068;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;BMP 2 &#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B; BMP 2 &#x306E;&#x89E3;&#x653E;&#x7387;&#x920D;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;BSA NPs &#x3067;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F; BMP 2 in vivo &#x9AA8;&#x8A98;&#x5C0E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DD;&#x30EA;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3; &#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3; &#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E; BMP 2 &#x914D;&#x4FE1;&#x3002;

&#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790; (NP)-&#xAE30;&#xBC18;&#xB41C; &#xBC30;&#xB2EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC81C;&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC5BB;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. Coacervation &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5BB;&#xC740; &#xC18C; &#xD608; &#xCCAD; &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; (BSA) NPs &#xBF08; &#xC720;&#xB3C4; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;, &#xBF08; &#xC804;&#xCCB4;&#xC801; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-2 (BMP-2)&#xC758; &#xB0A9;&#xD488;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; NP &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC591;&#xC774;&#xC628; polyethylenimine (&#xD398;&#xC774;)&#xC758; &#xC815;&#xC804;&#xAE30; &#xD761;&#xCC29;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC14;&#xB00C;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. PEI&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xB18D;&#xB3C4; BSA NPs &#xCF5C; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; BMP-2&#xC758; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xCF54;&#xD305;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. Nps&#xB294; &#xC2A4;&#xCE90;&#xB2DD; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xC81C;&#xD0C0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xD6A8;&#xC728;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &amp;gt; &#xBAA8;&#xB4E0; NP &#xC900;&#xBE44;&#xC5D0;&#xC11C; 90%. Nps&#xB97C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCF54;&#xD305;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xD398;&#xC774; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4; BMP-2, &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801; &#xB454;&#xD654; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; 10 &#xC77C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xC9C0;&#xC18D;. &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xB41C; BMP-2 bioactivity &#xBC0F; Nps&#xC758; &#xB3C5;&#xC131; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; (ALP) &#xC720;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; MTT &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xAC01;&#xAC01;, C2C12 &#xC140;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xACB0;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB09C; &#xD398;&#xC774; NP &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBC0F; BSA NPs 0.1 mg/mL &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD398;&#xC774; &#xCF8C;&#xD65C; &#xB3C5;&#xC131; &#xCF54;&#xD305; BMP-2, bioactivity&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; BMP-2&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB454;&#xD654;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; BMP-2 BSA Nps&#xC5D0; in vivo &#xBF08; &#xC720;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACB0;&#xB860; &#xC9C0;&#xC5C8;&#xB2E4;.

BMP-2 &#xB0A9;&#xD488;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; Polyethylenimine &#xCF54;&#xD305; &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790;.

Nanopart&iacute;culas (NP)-base entrega ha cobrado importancia para mejorar la potencia de agentes terap&eacute;uticos. El NPs de alb&uacute;mina s&eacute;rica bovina (BSA), obtenido por un proceso de coacervaci&oacute;n, fue modificado por adsorci&oacute;n electrost&aacute;tica de los cati&oacute;nico polietilenimina (PEI) a las superficies de NP para la entrega del factor de crecimiento que inducen hueso, hueso morphogenetic protein-2 (BMP-2). Diferentes concentraciones de PEI fueron utilizadas para el revestimiento de NPs de BSA para estabilizar el sistema coloidal y controlar la liberaci&oacute;n de BMP-2. El NPs se caracterizaron por tama&ntilde;o y zeta medidas potenciales, as&iacute; como por microscop&iacute;a electr&oacute;nica y microscop&iacute;a de fuerza at&oacute;mica. La eficacia de encapsulaci&oacute;n era t&iacute;picamente &gt; 90% en todas las preparaciones de NP. Cin&eacute;tica de liberaci&oacute;n in vitro demostrada que la concentraci&oacute;n de PEI utilizada para recubrir el NPs eficientemente la liberaci&oacute;n controlada de BMP-2, demostrando una desaceleraci&oacute;n gradual, sostenido patr&oacute;n de liberaci&oacute;n durante un per&iacute;odo de 10 d&iacute;as de estudio. La bioactividad de los encapsulados BMP-2 y la toxicidad de los NPs fueron examinados por el ensayo de inducci&oacute;n de la fosfatasa alcalina (ALP) y el ensayo MTT, respectivamente, utilizando c&eacute;lulas C2C12. Los resultados indicaron que PEI fue el principal determinante de toxicidades NP y NPs BSA hab&iacute;a recubierta de 0.1 mg/mL PEI demostrada toxicidad tolerable, retuvo la bioactividad de BMP-2 y eficientemente se redujo la tasa de liberaci&oacute;n de BMP-2. Concluimos que el encapsulado en BSA NPs BMP-2 podr&iacute;a ser una manera eficiente de entregar la prote&iacute;na para la inducci&oacute;n del hueso in vivo.

Herbert P. Jennissen

Institute for Physiological Chemistry,
Department of Biochemical Endocrinology,
Institute for Physiological Chemistry, Department of Biochemical Endocrinology

University of Duisburg-Essen

Chick ex ovo Culture and ex ovo CAM Assay: How it Really Works

Herbert P. Jennissen

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University of Duisburg-Essen

Chick ex ovo Culture and ex ovo CAM Assay: How it Really Works

Institute for Physiological Chemistry,
Department of Biochemical Endocrinology,
Institute for Physiological Chemistry, Department of Biochemical Endocrinology