Visualizing Cell-to-cell Transfer of HIV using Fluorescent Clones of HIV and Live Confocal Microscopy

By fusing the green fluorescent protein to their favorite proteins, biologists now have the ability to study living complex cellular processes using ...

University of California, Davis

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Laser tweezers Raman spectroscopy (LTRS) was used to characterize the effect of different chemical fixation procedures on the Raman spectra of normal and leukemia cells. Individual unfixed, paraformaldehyde-fixed, and methanol-fixed normal and transformed lymphocytes from three different cell lines were analyzed with LTRS. When compared to the spectra of unfixed cells, the fixed cell spectra show clear, reproducible changes in the intensity of specific Raman markers commonly assigned to DNA, RNA, protein, and lipid vibrations (e.g. 785, 1230, 1305, 1660 cm(-1)) in mammalian cells, many of which are important markers that have been used to discriminate between normal and cancer lymphocytes. Statistical analyses of the Raman data and classification using principal component analysis and linear discriminant analysis indicate that methanol fixation induces a greater change in the Raman spectra than paraformaldehyde. In addition, we demonstrate that the spectral changes as a result of the fixation process have an adverse effect on the accurate Raman discrimination of the normal and cancer cells. The spectral artifacts created by the use of fixatives indicate that the method of cell preparation is an important parameter to consider when applying Raman spectroscopy to characterize, image, or differentiate between different fixed cell samples to avoid potential misinterpretation of the data.

The effect of cell fixation on the discrimination of normal and leukemia cells with laser tweezers Raman spectroscopy.

Pincettes laser spectroscopie Raman (litres) a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour caract&eacute;riser l&#39;effet des proc&eacute;dures de fixation chimique diff&eacute;rente sur les spectres Raman des cellules normales et de leuc&eacute;mie. Individuels lymphocytes non fix&eacute;es, paraformald&eacute;hyde-correction et m&eacute;thanol-correction normales et transform&eacute;s de trois lign&eacute;es cellulaires diff&eacute;rentes ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;es avec LTRS. En comparaison avec les spectres des cellules non fix&eacute;es, les spectres de cellule fixe montrent clairement, reproductibles changements dans l&#39;intensit&eacute; de Raman sp&eacute;cifique marqueurs couramment assign&eacute;s aux vibrations de l&#39;ADN, ARN, prot&eacute;ines et lipides (p. ex., 785, 1230, 1305, 1660 cm(-1)) dans les cellules de mammif&egrave;res, dont beaucoup sont des marqueurs importants qui ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s pour distinguer les lymphocytes normaux et le cancer. Les analyses statistiques des donn&eacute;es Raman et classification en utilisant l&#39;analyse en composantes principales et l&#39;analyse discriminante lin&eacute;aire indiquent que la fixation m&eacute;thanol induit un plus grand changement dans le spectre Raman de paraformald&eacute;hyde. En outre, nous d&eacute;montrons que les modifications spectrales par suite du processus de fixation ont un effet n&eacute;faste sur la discrimination de Raman pr&eacute;cis des cellules normales et le cancer. Les artefacts spectrales cr&eacute;&eacute;es par l&#39;utilisation de fixateurs indiquent que la m&eacute;thode de pr&eacute;paration de la cellule est un param&egrave;tre important &agrave; consid&eacute;rer lors de l&#39;application de la spectroscopie Raman pour caract&eacute;riser, image, ou de faire la diff&eacute;rence entre les &eacute;chantillons de diff&eacute;rentes cellules fix&eacute;es afin d&#39;&eacute;viter un malentendu &eacute;ventuel des donn&eacute;es.

L&#39;effet de la fixation de la cellule sur la discrimination des cellules normales et leuc&eacute;mie avec des pincettes laser spectroscopie Raman.

Laser-Pinzette Raman-Spektroskopie (LTRS) wurde verwendet, um die Wirkung der verschiedenen chemischen Fixierung auf die Raman-Spektren von Normal und Leuk&auml;mie Zellen zu charakterisieren. Individuelle ungebundenen Paraformaldehyd-repariert und Methanol-repariert normale und transformierte Lymphozyten aus drei verschiedenen Zelllinien wurden mit LTRS analysiert. Im Vergleich zu den Spektren nicht fixierten Zellen die feste Zelle-Spektren zeigen klar, reproduzierbare &Auml;nderungen in der Intensit&auml;t der spezifischen Raman Marker h&auml;ufig zugewiesen DNA, RNA, Proteine und Lipide Schwingungen (z.B. 785, 1230, 1305, 1660-cm(-1)) in den S&auml;ugetier-Zellen, von denen viele sind wichtige Markierungen, die verwendet wurden, um den Unterschied zwischen Normal und Krebs Lymphozyten. Statistische Analysen der Raman-Daten und Einreihung Hauptkomponentenanalyse und lineare Diskriminanzanalyse anzugeben, dass die Methanol-Fixierung eine gr&ouml;&szlig;ere &Auml;nderung in den Raman-Spektren als Paraformaldehyd induziert. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass die spektralen &Auml;nderungen infolge der Fixierung-Prozess nachteilig auf die genaue Raman-Diskriminierung der Normal und Krebs Zellen haben. Die spektrale Artefakte erstellt anhand von Fixiermittel zeigen, dass die Methode von Zellenvorbereitung ein wichtiger Parameter ist, die bei Anwendung der Raman-Spektroskopie zu charakterisieren, Bild, oder unterscheiden zwischen verschiedenen festen Zellenproben m&ouml;gliche Fehlinterpretation der Daten zu vermeiden.

Die Wirkung der Zelle Fixierung auf die Diskriminierung von Normal und Leuk&auml;mie-Zellen mit Laser-Pinzette Raman-Spektroskopie.

Pinzette laser spettroscopia Raman (litri) &egrave; stata utilizzata per caratterizzare l&#39;effetto delle procedure di fissazione chimica diversa sugli spettri Raman di cellule normali e leucemia. Singoli slegati, paraformaldeide-fisso e fisso di metanolo normali e trasformati linfociti da tre linee di cellule differenti sono stati analizzati con litri. Quando confrontato con gli spettri delle cellule slegati, gli spettri di cella fisso mostrano chiaro, riproducibile cambiamenti nell&#39;intensit&agrave; del Raman specifici marcatori comunemente assegnate alle vibrazioni del DNA, RNA, proteine e lipidi (ad es. 785, 1230, 1305, 1660 cm(-1)) in cellule di mammiferi, molti dei quali sono importanti marcatori che sono stati utilizzati per discriminare tra linfociti normale e cancro. Analisi statistiche dei dati di Raman e classificazione mediante l&#39;analisi delle componenti principali e analisi discriminante lineare indicano che tale fissazione metanolo induce un cambiamento maggiore negli spettri Raman di paraformaldeide. Inoltre, ci dimostrano che i cambiamenti spettrali a causa del processo di fissazione hanno un effetto negativo sull&#39;accurata discriminazione Raman delle cellule normali e cancro. Gli artefatti spettrali creati mediante l&#39;uso di fissativi indicano che il metodo di preparazione delle cellule &egrave; un parametro importante da considerare quando si applica la spettroscopia Raman per caratterizzare, immagine, o distinguere tra campioni di diverse cellule fisse per evitare potenziali errori di interpretazione dei dati.

L&#39;effetto della fissazione delle cellule sulla discriminazione di cellule normali e leucemia con pinzette laser spettroscopia Raman.

&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC; &#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149; (&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EB;) &#x6B63;&#x5E38;&#x53CA;&#x3073;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3; &#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5316;&#x5B66;&#x56FA;&#x5B9A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x500B;&#x5225;&#x672A;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3001;&#x30D1;&#x30E9;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E0;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x56FA;&#x5B9A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E1;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x56FA;&#x5B9A;&#x901A;&#x5E38;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403; 3 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672A;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x56FA;&#x5B9A;&#x30BB;&#x30EB; &#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x518D;&#x73FE;&#x4E00;&#x822C;&#x7684; DNA&#x3001;RNA&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x632F;&#x52D5;&#x306B;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x8868;&#x793A; (&#x4F8B;: 785, 1230, 1305&#x3001;1660 cm(-1)) &#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x591A;&#x6570;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x6B63;&#x5E38;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x764C;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x533A;&#x5225;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3002;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3; &#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x4E3B;&#x6210;&#x5206;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x7DDA;&#x5F62;&#x5224;&#x5225;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x985E;&#x306E;&#x7D71;&#x8A08;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x305D;&#x306E;&#x30E1;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x56FA;&#x5B9A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3; &#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &#x30D1;&#x30E9;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E0;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x5909;&#x5316;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5DEE;&#x5225;&#x6B63;&#x5E38;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9A;&#x7740;&#x5264;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AF;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8ABF;&#x88FD;&#x6CD5;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x8AA4;&#x89E3;&#x3092;&#x907F;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x9593;&#x306E;&#x533A;&#x5225;&#x306E;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x56FA;&#x5B9A;&#x306F;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC; &#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3068;&#x6B63;&#x5E38;&#x53CA;&#x3073;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5DEE;&#x5225;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3002;

&#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xD540;&#xC14B; &#xB77C;&#xB9CC; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559; (LTRS) &#xBCF4;&#xD1B5; &#xBC0F; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB77C;&#xB9CC; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD654;&#xD559; &#xC815;&#xCC29; &#xC808;&#xCC28;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xBCC4; &#xACE0;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; paraformaldehyde &#xACE0;&#xC815; &#xBC0F; &#xBA54;&#xD0C4;&#xC62C; &#xACE0;&#xC815; &#xC815;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xBCC0;&#xD615; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; LTRS &#xD568;&#xAED8; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACE0;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC140;&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xC140; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;, &#xD2B9;&#xC815; &#xB77C;&#xB9CC; &#xAC15;&#xB3C4; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD45C;&#xC2DD; &#xD45C;&#xC2DC; DNA, RNA, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC9C4;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD560;&#xB2F9; &#xB41C; (&#xC608;: 785, 1230, 1305, &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; 1660 cm(-1))&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xC815;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DD;. &#xB77C;&#xB9CC; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC640; &#xC8FC;&#xC131;&#xBD84; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC120;&#xD615; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xD310;&#xBCC4;&#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xB958;&#xC758; &#xD1B5;&#xACC4; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xBA54;&#xD0C4;&#xC62C; &#xC815;&#xCC29; &#xC720;&#xB3C4; paraformaldehyde &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB77C;&#xB9CC; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC5D0; &#xD070; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC815;&#xCC29; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xBCC0;&#xD654;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xB77C;&#xB9CC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Fixatives &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CC;&#xB4E0; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC544;&#xD2F0;&#xD329;&#xD2B8; &#xC140; &#xC900;&#xBE44;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xD2B9;&#xC9D5;, &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;, &#xB610;&#xB294; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC624;&#xD574;&#xB97C; &#xD53C;&#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xC140; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC744; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xD558; &#xB77C;&#xB9CC; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC744; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xB54C; &#xACE0;&#xB824;&#xD574; &#xC57C; &#xD560; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xB77C;&#xB9CC; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xD1B5; &#xBC0F; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC815;&#xC740; &#xC140;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;.

Pinzas l&aacute;ser espectroscop&iacute;a Raman (LTRS) fue utilizada para caracterizar el efecto de los procedimientos de fijaci&oacute;n qu&iacute;mica diferente en los espectros Raman de c&eacute;lulas sanas y leucemia. Individuales no fijados, paraformaldehido-fijo y metanol-fijo normales y se transforma linfocitos de tres diferentes l&iacute;neas celulares se analizaron con LTRS. En comparaci&oacute;n con los espectros de las c&eacute;lulas no fijadas, los espectros de celular fijo Mostrar claros, reproducibles cambios en la intensidad de Raman espec&iacute;fico marcadores com&uacute;nmente asignados a las vibraciones de ADN, ARN, prote&iacute;nas y l&iacute;pidos (p. ej. 785, 1230, 1305, 1660 cm(-1)) en c&eacute;lulas de mam&iacute;feros, muchos de los cuales son importantes marcadores que se han utilizado para discriminar entre los linfocitos normales y c&aacute;ncer. An&aacute;lisis estad&iacute;stico de los datos de Raman y clasificaci&oacute;n mediante an&aacute;lisis de componentes principales y an&aacute;lisis discriminante lineal indican que la fijaci&oacute;n metanol induce un mayor cambio en los espectros Raman de paraformaldehido. Adem&aacute;s, demostramos que los cambios espectrales como resultado del proceso de fijaci&oacute;n tienen un efecto adverso sobre la discriminaci&oacute;n de Raman precisa de las c&eacute;lulas sanas y cancer&iacute;genas. Los artefactos espectrales creados mediante el uso de fijadores indican que el m&eacute;todo de preparaci&oacute;n de la c&eacute;lula es un par&aacute;metro importante a tener en cuenta al aplicar la espectroscop&iacute;a Raman para caracterizar, imagen, o distinguir entre muestras de diferentes celulares fijos para evitar posibles interpretaciones err&oacute;neas de los datos.

El efecto de la fijaci&oacute;n de la c&eacute;lula en la discriminaci&oacute;n de c&eacute;lulas sanas y leucemia con pinzas l&aacute;ser espectroscop&iacute;a Raman.

&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x53EF;&#x7531;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x76F4;&#x63A5;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A5;&#x89E6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x79F0;&#x4E3A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6; (VS)&#x3002;&#x671F;&#x95F4; VS &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;virions &#x5728;&#x76EE;&#x6807;&#x5355;&#x5143;&#x683C; endosomes &#x5185;&#x5806;&#x79EF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7A7F;&#x8D8A; VS &#x540E;, &#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7ECF;&#x5386;&#x6210;&#x719F;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;VS &#x8F6C;&#x8BA9;&#x540E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x51FA;&#x73B0;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684; virions &#x5411;&#x75C5;&#x4EBA;&#x8840;&#x6E05;&#x76F8;&#x6BD4;&#x6210;&#x719F;&#x3001; &#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x663E;&#x793A;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7C92;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x9700;&#x8981;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684; virions &#x63A5;&#x53D7;&#x627F;&#x5151;&#x4EBA;&#x7EC6;&#x80DE; endosomes&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x65F6;&#x5185;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6210;&#x719F;&#x3002;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x8868;&#x660E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x878D;&#x5408;&#x53EF;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x5DF2;&#x8FC1;&#x79BB; VS &#x7684;&#x8F66;&#x53A2;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9897;&#x7C92;&#x6210;&#x719F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x878D;&#x5408;&#x5728;&#x76EE;&#x6807; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE; endosomes &#x4EE5;&#x4E0B;&#x901A;&#x8FC7; VS &#x4F20;&#x8F93;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9003;&#x907F;&#x6297;&#x4F53;&#x4E2D;&#x548C;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x7684; endosomal &#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x6210;&#x719F;&#x3002;

HIV-1 can infect T cells by cell-free virus or by direct virion transfer between cells through cell contact-induced structures called virological synapses (VS). During VS-mediated infection, virions accumulate within target cell endosomes. We show that after crossing the VS, the transferred virus undergoes both maturation and viral membrane fusion. Following VS transfer, viral membrane fusion occurs with delayed kinetics and transferred virions display reduced sensitivity to patient antisera compared to mature, cell-free virus. Furthermore, particle fusion requires that the transferred virions undergo proteolytic maturation within acceptor cell endosomes, which occurs over several hours. Rapid, live cell confocal microscopy demonstrated that viral fusion can occur in compartments that have moved away from the VS. Thus, HIV particle maturation activates viral fusion in target CD4+ T cell endosomes following transfer across the VS and may represent a pathway by which HIV evades antibody neutralization.

Cell-to-cell transfer of HIV-1 via virological synapses leads to endosomal virion maturation that activates viral membrane fusion.

VIH-1 peut infecter des cellules T par acellulaire virus ou par transfert direct entre virion cellules &#xE0; travers de cellules de contact induites structures appel&#xE9; synapses virologiques (VS). Au cours de VS-m&#xE9;diation infection, les virions s&#x26;#39;accumulent dans la cellule cible endosomes. Nous montrons que, apr&#xE8;s avoir travers&#xE9; la VS, le virus transmis subit &#xE0; la fois la maturation et la fusion des membranes virale. Apr&#xE8;s le transfert VS, la fusion des membranes virale se produit avec une cin&#xE9;tique retard&#xE9;s et des virions transf&#xE9;r&#xE9;es s&#x26;#39;affichent une sensibilit&#xE9; r&#xE9;duite &#xE0; antis&#xE9;rums patient par rapport &#xE0; maturit&#xE9;, sans cellule du virus. En outre, la fusion des particules exige que les virions transmis subissent une maturation prot&#xE9;olytique dans la cellule accepteur endosomes, qui se produit pendant plusieurs heures. Rapide, la microscopie confocale de cellules vivantes ont d&#xE9;montr&#xE9; que la fusion virale peut se produire dans les compartiments qui ont d&#xE9;m&#xE9;nag&#xE9; loin de la VS. Ainsi, la maturation des particules VIH active la fusion virale des cellules CD4 + lymphocytes T cibles endosomes apr&#xE8;s le transfert &#xE0; travers le VS et peut repr&#xE9;senter une voie par laquelle le VIH &#xE9;chappe la neutralisation des anticorps.

Cell-&#xE0;-cellule de transfert du VIH-1 via les synapses virologiques m&#xE8;ne &#xE0; la maturation Virion endosomal qui active Fusion membrane virale

HIV-1 T-Zellen durch zellfreien Virus infizieren kann oder durch direkte Virion &Uuml;bertragung von Zellen durch Zelle Kontakt induziert Strukturen genannt virologischen Synapsen (VS). Sammeln Sie w&auml;hrend der VS-vermittelte Infektion Virionen innerhalb deiner Zelle Endosomen. Wir zeigen, dass das &uuml;bertragene Virus nach dem &Uuml;berqueren der VS, Reifung und virale Membrane Fusion durchl&auml;uft. Nach VS-Transfer virale Membran Verschmelzung tritt bei verz&ouml;gerten Kinetik und &uuml;bertragene Virionen geringere Empfindlichkeit f&uuml;r Patienten im Vergleich zu Reifen, zellfreien Virus Antiseren anzuzeigen. Partikel Fusion erfordert dar&uuml;ber hinaus, dass die &uuml;bertragenen Virionen proteolytische Reifung innerhalb Akzeptor Zelle Endosomen, unterziehen, die &uuml;ber mehrere Stunden auftritt. Schnelle, live Zelle confocal Mikroskopie gezeigt, dass virale Verschmelzung in den Abteilen auftreten kann, die Weg von der VS verschoben haben. Daher aktiviert HIV-Partikel-Reifung virale Schmelzverfahren in deiner CD4 + T Zelle Endosomen Folgendes &uuml;ber die VS &uuml;bertragen und kann einen Weg durch den HIV Antik&ouml;rper Neutralisierung entzieht.

Zell-Zell-&Uuml;bertragung von HIV-1 &uuml;ber virologischen Synapsen f&uuml;hrt zu Endosomen Virion Reifung, die virale Membran Verschmelzung aktiviert wird.

HIV-1 possono infettare le cellule T dal virus senza cellula o di trasferimento diretto virione tra cellule attraverso strutture cellulari indotta dal contatto chiamati virologiche sinapsi (VS). Durante l&#39;infezione VS-mediata, virioni si accumulano all&#39;interno endosomes delle cellule bersaglio. Mostriamo che dopo aver attraversato il VS, il virus trasferito subisce la maturazione e la fusione della membrana virale. In seguito VS trasferimento, fusione della membrana virale avviene con ritardo cinetica e virioni trasferiti visualizzazione ridotta sensibilit&agrave; al pazienti antisieri rispetto al virus maturo, privo di cella. Inoltre, la fusione delle particelle richiede che i virioni trasferiti sottoposti a maturazione proteolitica entro accettore cella endosomes, che si verifica sopra parecchie ore. Microscopia confocale cella rapida, diretta ha dimostrato che la fusione virale pu&ograve; verificarsi in compartimenti che hanno allontanato la VS. Cos&igrave;, maturazione della particella HIV attiva fusione virale nel bersaglio CD4 + T cell endosomes seguente trasferimento attraverso la VS e possono rappresentare un percorso da cui l&#39;HIV sfugge neutralizzazione dell&#39;anticorpo.

Trasferimento a cella di HIV-1 via sinapsi virologiche conduce alla maturazione del virione endosomal che attiva la fusione della membrana virale.

HIV-1&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#xFF08;VS&#xFF09;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x8EE2;&#x9001;&#x306B;&#x3088;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; VS-&#x5A92;&#x4ECB;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7C92;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5185;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;VS&#x3092;&#x6A2A;&#x65AD;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x8EE2;&#x9001;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304C;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; VS&#x8EE2;&#x9001;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x53CD;&#x5FDC;&#x901F;&#x5EA6;&#x3084;&#x8EE2;&#x9001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x60A3;&#x8005;&#x8840;&#x6E05;&#x306B;&#x611F;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x9001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x6570;&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5185;&#x3067;&#x5206;&#x89E3;&#x719F;&#x6210;&#x3092;&#x7D4C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8FC5;&#x901F;&#x3001;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306F;VS&#x304B;&#x3089;&#x96E2;&#x308C;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x305F;&#x533A;&#x753B;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;HIV&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;CD4&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;+ T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;VS&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;HIV&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x4E2D;&#x548C;&#x3092;&#x5FCC;&#x907F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;

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&#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; virological &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xC140; &#xC811;&#xCD09; &#xC720;&#xBC1C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC140; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; virion &#xC1A1;&#xAE08; synapses (&#xB300;). VS &#xC911;&#xC7AC; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; virions &#xB300;&#xC0C1; &#xC140; endosomes &#xB0B4;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;. &#xC6B0;&#xB9AC; VS &#xAC74;&#xB108; &#xD6C4; &#xC131;&#xC219;&#xACFC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC218;&#xD589;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300; &#xC804;&#xC1A1; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; virions &#xD658;&#xC790; antisera &#xC131;&#xC219;, &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xAC10;&#xB3C4; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC785;&#xC790; &#xD4E8;&#xC804; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; virions &#xC218;&#xC220; &#xBA87; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB77D;&#xC790; &#xC140; endosomes &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC131;&#xC219; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xD4E8;&#xC804; VS &#xBA40;&#xB9AC; &#xC774;&#xB3D9; &#xB41C; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; HIV &#xC785;&#xC790; &#xC131;&#xC219; &#xB300;&#xC0C1; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC; endosomes &#xB2E4;&#xC74C; &#xBE44;&#xAD50;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; HIV &#xD56D; &#xCCB4; &#xC911;&#xD654;&#xB97C; evades &#xD1B5;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Virological &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; h i V-1&#xC758; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; endosomal virion &#xC131;&#xC219;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

VIH-1 puede infectar a las c&#xE9;lulas T de c&#xE9;lulas libres de virus o viri&#xF3;n transferencia directa entre las c&#xE9;lulas a trav&#xE9;s de c&#xE9;lulas inducidas por contacto-estructuras llamadas sinapsis virol&#xF3;gicas (VS). Durante la infecci&#xF3;n VS-mediada, los viriones se acumulan en la c&#xE9;lula diana endosomas. Se demuestra que despu&#xE9;s de cruzar el VS, el virus se transfiere sufre la maduraci&#xF3;n y la fusi&#xF3;n de la membrana viral. Despu&#xE9;s de la transferencia de VS, la fusi&#xF3;n de la membrana viral se produce con retraso y la cin&#xE9;tica de viriones transferidas aparecen disminuci&#xF3;n de la sensibilidad a la paciente en comparaci&#xF3;n con antisueros madura, c&#xE9;lulas libres de virus. Adem&#xE1;s, la fusi&#xF3;n de part&#xED;culas requiere que los viriones transferidos someterse a la maduraci&#xF3;n proteol&#xED;tica dentro de la celda aceptor endosomas, que se produce durante varias horas. Microscopio r&#xE1;pido, celular confocal en vivo demostr&#xF3; que la uni&#xF3;n del virus puede ocurrir en compartimientos que se han alejado de los SV. De este modo, la maduraci&#xF3;n de las part&#xED;culas del VIH activa la uni&#xF3;n del virus en las c&#xE9;lulas CD4 + de destino de las c&#xE9;lulas T endosomas despu&#xE9;s de su traslado a trav&#xE9;s de la SV y puede representar una v&#xED;a por la cual el VIH evade la neutralizaci&#xF3;n de anticuerpos.

De la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transferencia del VIH-1 trav&#xE9;s de las sinapsis virol&#xF3;gicas lleva a la maduraci&#xF3;n del viri&#xF3;n endosomal que activa fusi&#xF3;n de la membrana viral

Deanna L. Thompson

NSF Center for Biophotonics

University of California, Davis

Visualizing Cell-to-cell Transfer of HIV using Fluorescent Clones of HIV and Live Confocal Microscopy

Deanna L. Thompson

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University of California, Davis

Visualizing Cell-to-cell Transfer of HIV using Fluorescent Clones of HIV and Live Confocal Microscopy

NSF Center for Biophotonics