Chip-based Three-dimensional Cell Culture in Perfused Micro-bioreactors

We have developed a chip-based cell culture system for the three-dimensional cultivation of cells. The chip is typically manufactured from ...

Forschungszentrum Karlsruhe

&#x70ED;&#x5E94;&#x6FC0;&#x86CB;&#x767D;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x6C34;&#x5E73;&#x90FD;&#x88AB;&#x5347;&#x9AD8;&#x540E;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x6E29;&#x3002;Cochaperone HspBP1 &#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x548C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426; HspBP1 &#x7EA7;&#x522B;&#x66F4;&#x6539;&#x65F6;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x6C34;&#x5E73;&#x53D1;&#x751F;&#x4E86;&#x6539;&#x53D8;&#x3002;&#x70ED;&#x5E94;&#x6FC0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x7EA7;&#xFF0C;&#x4F46; HspBP1 &#x6C34;&#x5E73;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x51CB;&#x4EA1;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x836F;&#x7269;&#x559C;&#x6811;&#x78B1;&#x6CBB;&#x7597;&#x964D;&#x4F4E;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x6C34;&#x5E73;&#x5374;&#x518D;&#x6B21;&#x5BF9; HspBP1 &#x6C34;&#x5E73;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x559C;&#x6811;&#x78B1;&#xFF0C;&#x518D;&#x52A0;&#x4E0A;&#x70ED;&#x5E94;&#x6FC0;&#x4E5F;&#x6CA1;&#x6709;&#x5448;&#x73B0;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x5728;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3; HspBP1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5347;&#x9AD8;&#x5BFC;&#x81F4; HspBP1 &#x7EA7;&#x522B;&#x4E0D;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86; 290%&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x548C; HspBP1 &#x534F;&#x8C03;&#x4E0D;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x4F46;&#x63D0;&#x4F9B; HspBP1 &#x7684;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x589E;&#x52A0;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5BF9;&#x51CF;&#x5C11;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x7684;&#x91CF;&#x3002;

&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x534F;&#x8C03;&#x8C03;&#x8282;&#x7684; cochaperone HspBP1 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Intracellular levels of the heat stress protein Hsp70 are elevated following exposure to elevated temperature. The cochaperone HspBP1 is an intracellular protein that is known to bind to and regulate Hsp70 activity. The purpose of this study was to determine if HspBP1 levels changed when Hsp70 levels were altered. Heat stress resulted in an increase in Hsp70 levels but no change in HspBP1 levels. Treatment of cells with the apoptosis inducing drug camptothecin lowered Hsp70 levels but again had no effect on HspBP1 levels. Cells treated with camptothecin plus heat stress did not exhibit an increase in Hsp70 levels. Over-expression in cells stably transfected with HspBP1 cDNA resulted in a 290% increase in HspBP1 levels without a similar change in Hsp70 levels. These results demonstrate that Hsp70 and HspBP1 are not coordinately regulated but provide evidence that an increase in the ratio of HspBP1 to Hsp70 correlates with apoptosis, in a similar way to reducing the amount of Hsp70.

Expression of the cochaperone HspBP1 is not coordinately regulated with Hsp70 expression.

Intracellulaire de la prot&eacute;ine de stress thermique Hsp70 est &eacute;lev&eacute;es apr&egrave;s une exposition &agrave; des temp&eacute;ratures &eacute;lev&eacute;es. Le cochaperon HspBP1 est une prot&eacute;ine intracellulaire qui est connue pour lier &agrave; et de r&eacute;guler l&#39;activit&eacute; de Hsp70. Le but de cette &eacute;tude &eacute;tait de d&eacute;terminer si les niveaux de HspBP1 a chang&eacute; quand Hsp70 niveaux ont &eacute;t&eacute; modifi&eacute;es. Stress thermique a entra&icirc;n&eacute; une augmentation dans Hsp70 niveaux mais aucun changement dans les niveaux de HspBP1. Traitement des cellules avec la camptoth&eacute;cine de drogue induisant l&#39;apoptose baisse des niveaux d&#39;Hsp70, mais encore n&#39;eu aucun effet sur les niveaux de HspBP1. Les cellules trait&eacute;es avec la camptoth&eacute;cine plus stress thermique ne montrent pas une augmentation des niveaux de Hsp70. Surexpression dans des cellules transfect&eacute;es stablement avec HspBP1 ADNc a entra&icirc;n&eacute; une augmentation de 290 % HspBP1 niveaux sans un changement similaire dans les niveaux de Hsp70. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent que Hsp70 et HspBP1 ne sont pas r&eacute;glement&eacute;es de fa&ccedil;on coordonn&eacute;e, mais fournissent la preuve qu&#39;une augmentation du ratio de HspBP1 &agrave; Hsp70 est corr&eacute;l&eacute;e avec l&#39;apoptose, d&#39;une mani&egrave;re similaire &agrave; la r&eacute;duction de la quantit&eacute; de Hsp70.

Expression de la cochaperons HspBP1 n&#39;est pas r&eacute;glement&eacute;e coordonn&eacute;e avec l&#39;expression de Hsp70.

Intrazellul&auml;re Ebenen von der Hitze-Stress-Protein Hsp70 sind nach Exposition gegen&uuml;ber hohen Temperaturen erh&ouml;ht. Die Cochaperone HspBP1 ist eine intrazellul&auml;re Protein, das bekannt ist, zu binden und Hsp70-Aktivit&auml;t zu regulieren. Der Zweck dieser Studie war festzustellen, wenn HspBP1 Ebenen ge&auml;ndert beim Hsp70 Ebenen ver&auml;ndert wurden. Hitzebelastung f&uuml;hrte zu eine Zunahme der Hsp70 Ebenen aber keine &Auml;nderung in HspBP1 Ebenen. Behandlung der Zellen mit der Apoptose fehlertr&auml;chtige Droge Camptothecin Hsp70 Niveau gesenkt, aber wieder hatte keine Auswirkung auf HspBP1 Ebenen. Zellen mit Camptothecin plus Hitzebelastung keine Zunahme der Hsp70 Ebenen aufweisen. &Uuml;berexpression in Zellen, die mit HspBP1 cDNA stabil transfected ergab 290 % Anstieg HspBP1 ohne eine solche Ver&auml;nderung Hsp70 Ebenen. Diese Ergebnisse zeigen, dass Hsp70 und HspBP1 nicht coordinately geregelt sind aber nachweisen, die eine Zunahme des Verh&auml;ltnisses der HspBP1 zum Hsp70 korreliert mit Apoptosis, in &auml;hnlicher Weise zur Verringerung des Hsp70.

Ausdruck der Cochaperone HspBP1 ist nicht mit Hsp70 Ausdruck coordinately geregelt.

Intracellulare della proteina dello stress termico Hsp70 sono elevati a seguito di esposizione a temperatura elevata. Cochaperone HspBP1 &egrave; una proteina intracellulare che &egrave; conosciuta per legare e regolare attivit&agrave; di Hsp70. Lo scopo di questo studio era di determinare se i livelli di HspBP1 modificato quando furono alterati livelli di Hsp70. Stress da calore ha provocato un aumento nei livelli di Hsp70 ma nessun cambiamento nei livelli di HspBP1. Trattamento delle cellule con il apoptosis induzione farmaco camptothecin abbassato i livelli di Hsp70 ma ancora una volta ha avuto alcun effetto sui livelli di HspBP1. Le cellule trattate con camptothecin pi&ugrave; stress da calore non ha esibito un aumento nei livelli di Hsp70. Sovraespressione in celle transfected stabilmente con cDNA HspBP1 ha provocato un aumento del 290% HspBP1 livelli senza un simile cambiamento nei livelli di Hsp70. Questi risultati dimostrano che la Hsp70 e HspBP1 non sono coordinately regolamentati ma fornire la prova che un aumento del rapporto di HspBP1 a Hsp70 correla con apoptosi, in modo simile alla riduzione della quantit&agrave; di Hsp70.

Espressione del cochaperone HspBP1 coordinately non &egrave; regolata con espressione Hsp70.

&#x71B1;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; Hsp70 &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x9AD8;&#x6E29;&#x66B4;&#x9732;&#x5F8C;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Cochaperone HspBP1 &#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;Hsp70 &#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F; Hsp70 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D; HspBP1 &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x71B1;&#x5FDC;&#x529B;&#x306E; Hsp70 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; HspBP1 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;&#x85AC;&#x30AB;&#x30F3;&#x30D7;&#x30C8;&#x30C6;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642; Hsp70 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4E0B;&#x3052;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x518D;&#x3073; HspBP1 &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x3068;&#x30AB;&#x30F3;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BB;&#x30B7;&#x30F3;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x71B1;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9; Hsp70 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A; HspBP1 cDNA &#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; HspBP1 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; Hsp70 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x306A;&#x3057;&#x3067; 290 &#xFF05; &#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;Hsp70 &#x304A;&#x3088;&#x3073; HspBP1 &#x30EA;&#x30BA;&#x30DF;&#x30AB;&#x30EB;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068; Hsp70 &#x306B; HspBP1 &#x306E;&#x6BD4;&#x7387;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3059; Hsp70 &#x306E;&#x91CF;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Cochaperone HspBP1 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x30EA;&#x30BA;&#x30DF;&#x30AB;&#x30EB; Hsp70 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#xC5F4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; h s p 70&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC218;&#xC900; &#xB192;&#xC740; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB192;&#xC740; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cochaperone Hspbp1&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; Hsp70 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; HspBP1 &#xB808;&#xBCA8; Hsp70 &#xC218;&#xC900;&#xC774; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5F4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; HspBP1 &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; Hsp70 &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC99D;&#xAC00; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. Apoptosis &#xC720;&#xB3C4; &#xC57D;&#xBB3C; camptothecin &#xC140;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; Hsp70 &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xB0AE; &#xCDC4; &#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4; HspBP1 &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Camptothecin&#xC744; &#xB2E4;&#xB8F0; &#xB54C;&#xB294; &#xC140; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC5F4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; Hsp70 &#xC218;&#xC900; &#xC99D;&#xAC00; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; HspBP1 Cdna&#xC640; &#xD398; &#xC140;&#xC5D0; over-expression Hsp70 &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654; &#xC5C6;&#xC774; HspBP1 &#xB808;&#xBCA8; 290% &#xC99D;&#xAC00; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; Hsp70 &#xBC0F; HspBP1 coordinately &#xD1B5;&#xC81C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; apoptosis, hsp70&#xC5D0; Hspbp1&#xC758; &#xBE44;&#xC728;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; hsp70&#xC758; &#xC591;&#xC744; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cochaperone Hspbp1&#xC758; &#xC2DD; Hsp70 &#xC2DD; coordinately &#xD1B5;&#xC81C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4;.

Los niveles intracelulares de la prote&iacute;na de estr&eacute;s t&eacute;rmico Hsp70 se elevan despu&eacute;s de la exposici&oacute;n a temperaturas elevadas. El cochaperone HspBP1 es una prote&iacute;na intracelular que se sabe que se unen a y regular la actividad de la Hsp70. El prop&oacute;sito de este estudio fue determinar si los niveles de HspBP1 cambiaron cuando fueron alterados los niveles de la Hsp70. Estr&eacute;s por calor dio lugar a un aumento en los niveles de Hsp70 pero ning&uacute;n cambio en los niveles de HspBP1. Tratamiento de c&eacute;lulas con la camptotecina de droga que induce apoptosis baja niveles de Hsp70, pero otra vez no tuvo ning&uacute;n efecto sobre los niveles de HspBP1. Las c&eacute;lulas trataron con camptotecina m&aacute;s estr&eacute;s por calor no mostr&oacute; un aumento en los niveles de la Hsp70. Sobreexpresi&oacute;n en c&eacute;lulas transfectadas estable con cDNA HspBP1 traducido en un aumento de 290% en los niveles de HspBP1 sin necesidad de un cambio similar en los niveles de la Hsp70. Estos resultados demuestran que Hsp70 y HspBP1 no est&aacute;n regulados coordinadamente pero aportan pruebas de que un aumento en el cociente de HspBP1 a Hsp70 se correlaciona con la apoptosis, en forma similar a la reducci&oacute;n de la Hsp70.

Expresi&oacute;n de la cochaperone HspBP1 no est&aacute; regulada coordinadamente con expresi&oacute;n de la Hsp70.

&#x636E;&#x62A5;&#x78C1;&#x573A;&#x4E2D;&#x7684;&#x78C1;&#x901A;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x4ECE; microT &#x5230;&#x5C71;&#x8005;&#x80FD;&#x591F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;HSP72 mRNA &#x6216;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x540E;&#x6CBB;&#x7597;&#x8BA1;&#x5212;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E26;&#x6709; flux density &#x7684; 2 &#x5230; 4 mT microT&#xFF0C;&#x9891;&#x7387;&#x4E3A; 50 &#x8D6B;&#x5179;&#x548C;&#x66DD;&#x5149;&#x65F6;&#x95F4;&#x4ECE; 15 &#x5230; 30 &#x5206;&#x949F;&#x7684;&#x7535;&#x78C1;&#x573A; HSP72 mRNA &#x8F6C;&#x5F55;&#x6C34;&#x5E73;&#x5728;&#x4E09;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C; (HL 60&#x3001; H9c2 &#x548C;&#x5409;&#x62C9;&#x5C14;&#x8FEA;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09; &#x548C;&#x4E24;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A; (HL-60 &#x548C;&#x5409;&#x62C9;&#x5C14;&#x8FEA;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684; HSP72 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x542B;&#x91CF;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6216;&#x65B9;&#x5F0F;&#x663E;&#x793A; HSP72 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x4EFB;&#x4F55;&#x91CD;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x867D;&#x7136; HSP72 mRNA &#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x5728;&#x67D0;&#x79CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x4E2D;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x5F88;&#x660E;&#x663E;&#xFF0C;HSP72 mRNA &#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x90FD;&#x4E0D;&#x4E00;&#x5B9A;&#x8026;&#x5408;&#x4E2D;&#x7684;&#x67D0;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x8FD9;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5BF9; HSP72 mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x7535;&#x78C1;&#x573A;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E0D;&#x6307;&#x793A;&#x5BF9;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x9664;&#x975E;&#x589E;&#x52A0;&#x7684; mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0E;&#x589E;&#x52A0; HSP72 &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6C34;&#x5E73;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x3002;

HSP72 &#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x4E2D;&#x7684;&#x6781;&#x4F4E;&#x9891;&#x7535;&#x78C1;&#x573A;&#x66B4;&#x9732;&#x540E;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;

It has been reported that magnetic fields with flux densities ranging from microT to mT are able to induce heat shock factor, HSP72 mRNA or heat shock proteins in various cells. In this study we investigated changes in the HSP72 mRNA transcription level in three cell lines (HL-60, H9c2, and Girardi heart cells) and in the intracellular HSP72 protein content in two cell lines (HL-60 and Girardi heart cells) after treatment schemes using electromagnetic fields with a flux density of 2 microT to 4 mT, a frequency of 50 Hz and exposure times from 15 to 30 min. None of the treatments or modalities showed any significant effect on the HSP72 protein level, although HSP72 mRNA could be induced, at least to some extent, with one of the parameter combinations in all cell lines tested. Obviously, HSP72 mRNA transcription and translation are not necessarily coupled in certain cells. This leads to the conclusion that electromagnetic field effects on HSP72 mRNA levels are not indicative for downstream effects unless increased mRNA levels can be correlated with increased HSP72 protein levels as well.

Expression of HSP72 after ELF-EMF exposure in three cell lines.

Il a &#xE9;t&#xE9; rapport&#xE9; que les champs magn&#xE9;tiques avec des densit&#xE9;s de flux allant de microT &#xE0; mT sont capables d&#x26;#39;induire facteur de choc thermique, HSP72 ARNm ou de prot&#xE9;ines de choc thermique dans diverses cellules. Dans cette &#xE9;tude, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les variations du niveau de transcription ARNm HSP72 dans trois lign&#xE9;es cellulaires (HL-60, H9c2, et les cellules cardiaques Girardi) et dans le intracellulaire HSP72 teneur en prot&#xE9;ines dans deux lign&#xE9;es cellulaires (HL-60 et des cellules cardiaques Girardi) apr&#xE8;s le traitement syst&#xE8;mes utilisant des champs &#xE9;lectromagn&#xE9;tiques avec une densit&#xE9; de flux de 2 &#xE0; 4 microT mT, une fr&#xE9;quence de 50 Hz et temps d&#x26;#39;exposition de 15 &#xE0; 30 min. Aucun des traitements ou des modalit&#xE9;s montr&#xE9; aucun effet significatif sur le niveau HSP72 prot&#xE9;ines, bien que HSP72 ARNm peut &#xEA;tre induite, au moins dans une certaine mesure, avec l&#x26;#39;une des combinaisons de param&#xE8;tres dans toutes les lign&#xE9;es cellulaires test&#xE9;es. De toute &#xE9;vidence, HSP72 transcription de l&#x26;#39;ARNm et la traduction ne sont pas n&#xE9;cessairement coupl&#xE9;e dans certaines cellules. Cela conduit &#xE0; la conclusion que les effets des champs &#xE9;lectromagn&#xE9;tiques sur les niveaux d&#x26;#39;ARNm HSP72 ne sont pas indicatifs des effets en aval, sauf les niveaux d&#x26;#39;ARNm augmentation peut &#xEA;tre corr&#xE9;l&#xE9;e avec l&#x26;#39;augmentation des taux de prot&#xE9;ines HSP72 ainsi.

L&#x26;#39;expression de HSP72 Apr&#xE8;s ELF-EMF exposition dans trois lign&#xE9;es cellulaires

Es wurde berichtet, dass Magnetfelder mit Flux dichten von MicroT bis hin zu mT Hitzeschock induzieren k&ouml;nnen Faktor, HSP72-mRNA oder Hitze-Schock-Proteine in verschiedenen Zellen. In dieser Studie untersuchten wir Ver&auml;nderungen des HSP72 mRNA Transkription in drei Zelllinien (HL-60, H9c2 und Girardi Herzzellen) und die intrazellul&auml;re HSP72 Protein-Inhalt in beiden Zelllinien (HL-60 und Girardi Herzzellen) nach Behandlung-Systeme verwenden elektromagnetische Felder mit einer Flux density von 2 MicroT bis 4 Meter, eine Frequenz von 50 Hz und Belichtungszeiten von 15 bis 30 min. Keine der Behandlungen oder Modalit&auml;ten zeigten keine wesentlichen Auswirkungen auf der Ebene der HSP72 Protein, obwohl HSP72 mRNA konnte, zumindest teilweise induziert werden, getestet mit einem des Parameters Kombinationen in allen Zelllinien. Nat&uuml;rlich sind HSP72 mRNA-Transkription und &Uuml;bersetzung m&ouml;glicherweise nicht in bestimmten Zellen unbedingt gekoppelt. Dies f&uuml;hrt zu dem Schluss, dass elektromagnetische Feld Auswirkungen auf HSP72 mRNA-Stufen nicht indikativ f&uuml;r nachgelagerte Effekte sind, sofern nicht mit erh&ouml;hten HSP72 Protein-Ebene sowie erh&ouml;hte mRNA-Konzentration korreliert werden k&ouml;nnen.

Ausdruck von HSP72 nach ELF-EMF-Exposition in drei Zelllinien.

&Egrave; stato riferito che i campi magnetici con densit&agrave; di flusso che vanno da microT a mT sono in grado di indurre la scossa di calore di fattore, le proteine di scossa mRNA o calore di HSP72 in varie cellule. In questo studio abbiamo valutato cambiamenti nel livello di trascrizione di mRNA HSP72 in tre linee di cellule (cellule HL-60, H9c2 e Girardi del cuore) e il contenuto di proteine intracellulare HSP72 in due linee cellulari (cellule HL-60 e Girardi del cuore) dopo i regimi di trattamento utilizzando campi elettromagnetici con un flux density di microT 2 a 4 mT, una frequenza di 50 Hz e tempi di esposizione da 15 a 30 min. Nessuno dei trattamenti o modalit&agrave; ha mostrato alcun effetto significativo sul livello di proteina HSP72, sebbene HSP72 mRNA potrebbe essere indotta, almeno in una certa misura, con uno del parametro combinazioni in tutte le linee cellulari testate. Ovviamente, traduzione e trascrizione di mRNA HSP72 non sono necessariamente accoppiati in alcune cellule. Questo porta alla conclusione che gli effetti del campo elettromagnetico sui livelli di mRNA di HSP72 non sono indicativi per gli effetti a valle a meno che aumentati livelli di mRNA possono essere correlati con aumentati livelli di proteina HSP72 pure.

Espressione dell&#39;HSP72 dopo esposizione ELF-EMF in tre linee cellulari.

&#x305D;&#x308C;&#x306F;microT&#x304B;&#x3089;MT&#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x78C1;&#x675F;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x78C1;&#x754C;&#x306F;&#x3001;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;HSP72 mRNA&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#xFF08;HL-60&#x3001;H9C2&#x3001;&#x3068;&#x30B8;&#x30E9;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;HSP72&#x306E;mRNA&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;HSP72&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x542B;&#x91CF;&#xFF08;HL-60&#x3068;&#x30B8;&#x30E9;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;15&#x301C;30&#x5206;&#x301C;2 microT&#x301C;4 mT&#x306E;&#x78C1;&#x675F;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3068;&#x96FB;&#x78C1;&#x754C;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;50 Hz&#x3068;&#x9732;&#x51FA;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x306F;&#x500D;&#x3002; HSP72 mRNA&#x306F;&#x8A66;&#x9A13;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x3042;&#x308B;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304C;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x3084;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x3082;&#x3001;HSP72&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3001;HSP72 mRNA&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x7FFB;&#x8A33;&#x306F;&#x3001;&#x5FC5;&#x305A;&#x3057;&#x3082;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;mRNA&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3082;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;HSP72&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x9650;&#x308A;&#x3001;HSP72&#x306E;mRNA&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x96FB;&#x78C1;&#x754C;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

3&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ELF-EMF&#x66DD;&#x9732;&#x5F8C;&#x306E;HSP72&#x306E;&#x767A;&#x73FE;

Microt&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xB294; &#xC790; &#xC18D; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC640; &#xC790;&#xAE30;&#xC7A5; &#xC720;&#xB3C4; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC694;&#xC18C;, &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; HSP72 mRNA &#xB610;&#xB294; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; 4 &#xC0B0;&#xC744; 2 Microt&#xC758; flux density, 50hz &#xBC0F; &#xB178;&#xCD9C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; 15-30 &#xBD84;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC804;&#xC790;&#xAE30; &#xD544;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACC4;&#xD68D; &#xD6C4; HSP72 mRNA &#xC804;&#xC0AC; &#xB808;&#xBCA8; 3 &#xC140; &#xB77C;&#xC778; (HL-60, H9c2, &#xBC0F; Girardi &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;)&#xC640; &#xB450; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; (HL-60 Girardi &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;)&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; HSP72 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD568;&#xB7C9;&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCE58;&#xB8CC; &#xB610;&#xB294; modalities &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; HSP72 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xD070; &#xC601;&#xD5A5; HSP72 mRNA &#xC218; &#xC720;&#xB3C4; &#xB420;, &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xC5B4;&#xB290; &#xC815;&#xB3C4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC911; &#xD558; &#xB098;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xBB3C;&#xB860;, HSP72 mRNA &#xC804;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xBC88;&#xC5ED; &#xD558;&#xC9C0; &#xBC18;&#xB4DC;&#xC2DC; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC99D;&#xAC00; HSP72 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC5F0;&#xAD00;&#xC73C;&#xB85C; mRNA &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xD55C; HSP72 mRNA &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC790;&#xAE30;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xD45C;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;&#xC744;&#xC774; &#xB048;&#xB2E4;.

3 &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5D8; &#xD504; EMF &#xB178;&#xCD9C; &#xD6C4; hsp72&#xC758; &#xD45C;&#xD604;.

Se ha informado de que los campos magn&#xE9;ticos con densidades de flujo que van desde microT a MT son capaces de inducir factor de choque t&#xE9;rmico, el ARNm HSP72 o prote&#xED;nas de choque t&#xE9;rmico en diversas c&#xE9;lulas. En este estudio se investigaron los cambios en el nivel de ARNm de transcripci&#xF3;n HSP72 en tres l&#xED;neas celulares (HL-60, H9c2, y las c&#xE9;lulas del coraz&#xF3;n Girardi) y en el contenido intracelular de prote&#xED;nas HSP72 en dos l&#xED;neas celulares (HL-60 y las c&#xE9;lulas del coraz&#xF3;n Girardi) despu&#xE9;s del tratamiento esquemas que utilizan campos electromagn&#xE9;ticos con una densidad de flujo de 2 a 4 microT mT, una frecuencia de 50 Hz y tiempos de exposici&#xF3;n de 15 a 30 min. Ninguno de los tratamientos o modalidades mostr&#xF3; ning&#xFA;n efecto significativo en el nivel de prote&#xED;na HSP72, aunque HSP72 mRNA puede ser inducida, al menos en cierta medida, con una de las combinaciones de par&#xE1;metros en todas las l&#xED;neas celulares ensayadas. Obviamente, HSP72 transcripci&#xF3;n y la traducci&#xF3;n de ARNm no est&#xE1;n necesariamente acoplado en ciertas c&#xE9;lulas. Esto conduce a la conclusi&#xF3;n de que los efectos del campo electromagn&#xE9;tico en HSP72 niveles de mRNA no son indicativas de efectos aguas abajo a menos que el aumento de los niveles de mRNA se puede correlacionar con el aumento de los niveles de prote&#xED;na HSP72 tambi&#xE9;n.

La expresi&#xF3;n de HSP72 despu&#xE9;s de la exposici&#xF3;n los CEM-ELF en tres l&#xED;neas celulares

Descriviamo una piattaforma polivalente per la coltura tridimensionale dei tessuti. Il dispositivo &egrave; composto da polimeri chip dotato di un&#39;area di 1-2 cm(2) microstrutturata. Il chip &egrave; costruito come una griglia di micro-contenitori di misura 120-300 x 300 x 300 microm (h x l x w), o come una matrice di rientranze rotonde (300 microm di diametro, profondo 300 microm). I micro-contenitori possono essere separatamente dotati indirizzabili 3D-micro-elettrodi, che consentono la stimolazione elettrica delle cellule eccitabili e misurazioni in loco dei parametri elettrochimicamente accessibile. Il sistema &egrave; applicabile per la coltivazione delle densit&agrave; alta cella di fino a 8 cellule di 10 x e, a causa del layout di griglia rettangolare, permette l&#39;analisi microscopica automatizzato delle cellule coltivate. Pi&ugrave; di 1000 micro-contenitori consentono l&#39;analisi parallela di diversi parametri in condizioni superfusion/perfusione. Utilizzando polimeri diversi chip in combinazione con vari tipi di bioreattori abbiamo dimostrato l&#39;idoneit&agrave; principale del bioreattore chip-based per applicazioni di coltura del tessuto. Linee cellulari primarie e stabilito sono stati coltivati con successo e analizzati per le propriet&agrave; funzionali. Quando le cellule sono state coltivate in fiches non perfuso, nel corso del tempo un notevole grado di apoptosi potrebbe essere osservato che indica la necessit&agrave; di un&#39;attiva perfusione. Il sistema qui presentato &egrave; stato applicato anche per l&#39;analisi di differenziazione delle cellule staminali embrionali pluripotenti e pu&ograve; essere adatto per l&#39;analisi della nicchia delle cellule staminali.

Una piattaforma basata su chip per la generazione in vitro di tessuti nell&#39;organizzazione tridimensionale.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x591A;&#x76EE;&#x7684;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;1-2&#x30BB;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#x5FAE;&#x7D30;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x305F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x304C;120&#x304B;&#x3089;300&#xD7;300&#xD7;300&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF08;hxlxw&#xFF09;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x51F9;&#x90E8;&#xFF08;300&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x76F4;&#x5F84;&#x306F;&#x3001;300&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x6DF1;&#x3044;&#xFF09;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x306F;&#x3001;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x3068;&#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30AA;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30B9;&#x6307;&#x5B9A;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;3&#x6B21;&#x5143;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x96FB;&#x6975;&#x3092;&#x88C5;&#x5099;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x6700;&#x5927;8&#xD7;10&#xFF08;6&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x9AD8;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x683D;&#x57F9;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x306A;&#x305C;&#x306A;&#x3089;&#x3001;&#x9577;&#x65B9;&#x5F62;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x30EC;&#x30A4;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x52D5;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 1000&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x306F;&#x3001;&#x704C;&#x6D41;/&#x704C;&#x6D41;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x4E26;&#x5217;&#x89E3;&#x6790;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3068;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7D44;&#x7E54;&#x57F9;&#x990A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x683D;&#x57F9;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x975E;&#x704C;&#x6D41;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x7D4C;&#x904E;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x704C;&#x6D41;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x5FDC;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;in vitro&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC30;&#xC591;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB2E4;&#xBAA9;&#xC801; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xAE30;&#xC220;. &#xC7A5;&#xCE58; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xCE69; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC73C;&#xB85C; 1-2 cm(2) microstructured &#xC601;&#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE69; &#xAD6C;&#xC131; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCEE8;&#xD14C;&#xC774;&#xB108; 120-300 x 300 x 300 microm &#xCE21;&#xC815; &#xB208;&#xAE08;&#xC73C;&#xB85C; (h l x w x), &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xD734;&#xC2DD; (300 microm &#xC9C0;&#xB984;, &#xAE4A;&#xC774; 300 microm)&#xC758; &#xBC30;&#xC5F4; &#xB610;&#xB294;. &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCEE8;&#xD14C;&#xC774;&#xB108; &#xC8FC;&#xC18C; &#xC9C0;&#xC815;&#xC774; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; 3D-&#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xC804;&#xADF9;, &#xACE0;&#xB974;&#xAE30;&#xAC00; &#xC140;&#xC758; &#xC804;&#xAE30; &#xC790;&#xADF9; &#xBC0F; &#xD604;&#xC7A5; &#xCE21;&#xC815; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xBCC4;&#xB3C4;&#xB85C; &#xAC16;&#xCDB0;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC740; &#xCD5C;&#xB300; 8 x &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; &#xC140;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC140; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xAC01;&#xD615; &#xBAA8;&#xB208; &#xB808;&#xC774;&#xC544;&#xC6C3; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC7AC;&#xBC30; &#xC140;&#xC758; &#xC790;&#xB3D9;&#xB41C; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9;. 1000 &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCEE8;&#xD14C;&#xC774;&#xB108; superfusion/&#xAD00;&#xB958; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xC758; &#xBCD1;&#xB82C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC9C1; &#xBB38;&#xD654; &#xC560;&#xD50C;&#xB9AC;&#xCF00;&#xC774;&#xC158;&#xC6A9; &#xCE69; &#xAE30;&#xBC18; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC8FC; &#xC801;&#xD569;&#xC131; &#xC99D;&#xBA85; bioreactors&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xB958;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xCE69;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xBC0F; &#xC124;&#xB9BD; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC7AC;&#xBC30; &#xACE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC18D;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140; &#xCE69; &#xBE44; &#xB07C;&#xC5B9;&#xB294;&#xB2E4; &#xACBD;&#xC791; &#xD588;&#xB2E4; &#xB54C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC815;&#xB3C4;&#xC758; apoptosis &#xAD00;&#xCC30; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xD65C;&#xC131; &#xAD00;&#xB958;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC138;&#xB300; &#xCE69; &#xAE30;&#xBC18; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;.

&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x8BE5;&#x8BBE;&#x5907;&#x662F;&#x82AF;&#x7247;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5177;&#x6709; 1-2 cm(2) &#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x9886;&#x57DF;&#x3002;&#x82AF;&#x7247;&#x6784;&#x9020;&#x4E3A;&#x7F51;&#x683C;&#x7684;&#x5FAE;&#x578B;&#x5BB9;&#x5668;&#x6D4B;&#x91CF; 120 300 x 300 x 300 microm (h x l x w&#xFF09;&#xFF0C;&#x6216;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6570;&#x7EC4;&#x7684;&#x5706;&#x5F62;&#x51F9;&#x69FD; 300 microm &#x6DF1; 300 microm &#x76F4;&#x5F84;&#xFF09;&#x3002;&#x5FAE;&#x5BB9;&#x5668;&#x53EF;&#x80FD;&#x5355;&#x72EC;&#x914D;&#x5907;&#x53EF;&#x5BFB;&#x5740; 3D-&#x5FAE;&#x7535;&#x6781;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5141;&#x8BB8;&#x53EF;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x523A;&#x6FC0;&#x548C;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x8BBF;&#x95EE;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x73B0;&#x573A;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8FBE; 8 x 10(6) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57F9;&#x517B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7531;&#x4E8E;&#x77E9;&#x5F62;&#x7F51;&#x683C;&#x5E03;&#x5C40;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x5141;&#x8BB8;&#x8015;&#x5730;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x52A8;&#x663E;&#x5FAE;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x8D85;&#x8FC7; 1000&#x5E74;&#x5FAE;&#x5BB9;&#x5668;&#x542F;&#x7528;&#x5E76;&#x884C;&#x5206;&#x6790; superfusion/&#x704C;&#x6CE8;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x53C2;&#x6570;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x5404;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x7EC4;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x82AF;&#x7247;&#x8BC1;&#x660E;&#x7EC4;&#x57F9;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x4E3B;&#x8981;&#x9002;&#x5408;&#x3002;&#x5C0F;&#x5B66;&#x548C;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x6210;&#x529F;&#x683D;&#x57F9;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x5F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x4E2D;&#x975E;&#x704C;&#x6D41;&#x82AF;&#x7247;&#x65F6;&#xFF0C;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#x6709;&#x76F8;&#x5F53;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6307;&#x793A;&#x9700;&#x8981;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x704C;&#x6CE8;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8FD8;&#x7533;&#x8BF7;&#x591A;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x9002;&#x5408;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5DE2;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

&#x4E09;&#x7EF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x751F;&#x6210;&#x57FA;&#x4E8E;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

We describe a multi-purpose platform for the three-dimensional cultivation of tissues. The device is composed of polymer chips featuring a microstructured area of 1-2 cm(2). The chip is constructed either as a grid of micro-containers measuring 120-300 x 300 x 300 microm (h x l x w), or as an array of round recesses (300 microm diameter, 300 microm deep). The micro-containers may be separately equipped with addressable 3D-micro-electrodes, which allow for electrical stimulation of excitable cells and on-site measurements of electrochemically accessible parameters. The system is applicable for the cultivation of high cell densities of up to 8 x 10(6) cells and, because of the rectangular grid layout, allows the automated microscopical analysis of cultivated cells. More than 1000 micro-containers enable the parallel analysis of different parameters under superfusion/perfusion conditions. Using different polymer chips in combination with various types of bioreactors we demonstrated the principal suitability of the chip-based bioreactor for tissue culture applications. Primary and established cell lines have been successfully cultivated and analysed for functional properties. When cells were cultured in non-perfused chips, over time a considerable degree of apoptosis could be observed indicating the need for an active perfusion. The system presented here has also been applied for the differentiation analysis of pluripotent embryonic stem cells and may be suitable for the analysis of the stem cell niche.

A chip-based platform for the in vitro generation of tissues in three-dimensional organization.

On d&#xE9;crit une plateforme &#xE0; usages multiples pour la culture tridimensionnelle des tissus. Le dispositif est compos&#xE9; de copeaux de polym&#xE8;res pr&#xE9;sentant une zone microstructur&#xE9;e de 1-2 cm (2). La puce est r&#xE9;alis&#xE9;e soit par une grille de micro-r&#xE9;cipients de mesure de 120 &#xE0; 300 x 300 x 300 microm&#xE8;tre (HxLxP), ou en tant que tableau d&#x26;#39;&#xE9;videments ronds (300 diam&#xE8;tre microm&#xE8;tre, 300 microm&#xE8;tre profonde). Les micro-conteneurs peuvent &#xEA;tre s&#xE9;par&#xE9;ment &#xE9;quip&#xE9; adressables 3D-micro-&#xE9;lectrodes, qui permettent pour la stimulation &#xE9;lectrique des cellules excitables et sur place de mesures des param&#xE8;tres accessibles par voie &#xE9;lectrochimique. Le syst&#xE8;me est applicable pour la culture de fortes densit&#xE9;s cellulaires pouvant aller jusqu&#x26;#39;&#xE0; 8 x 10 (6) cellules et, en raison de la pr&#xE9;sentation de la grille rectangulaire, permet l&#x26;#39;analyse automatis&#xE9;e de microscopie des cellules cultiv&#xE9;es. Plus de 1000 micro-conteneurs permettre l&#x26;#39;analyse parall&#xE8;le de diff&#xE9;rents param&#xE8;tres en vertu de surfusion / conditions de perfusion. Utilisation de polym&#xE8;res diff&#xE9;rents jetons en combinaison avec diff&#xE9;rents types de bior&#xE9;acteurs on a d&#xE9;montr&#xE9; l&#x26;#39;aptitude principale du bior&#xE9;acteur puce-base pour des applications de culture de tissus. Lign&#xE9;es de cellules primaires et &#xE9;tabli ont &#xE9;t&#xE9; cultiv&#xE9;es avec succ&#xE8;s et analys&#xE9;s pour les propri&#xE9;t&#xE9;s fonctionnelles. Lorsque les cellules ont &#xE9;t&#xE9; cultiv&#xE9;es dans la non-perfus&#xE9;s puces, au fil du temps un degr&#xE9; consid&#xE9;rable de l&#x26;#39;apoptose pourrait &#xEA;tre observ&#xE9;e, indiquant la n&#xE9;cessit&#xE9; d&#x26;#39;une perfusion active. Le syst&#xE8;me pr&#xE9;sent&#xE9; ici a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9;e pour l&#x26;#39;analyse de la diff&#xE9;renciation des cellules souches pluripotentes embryonnaires et peut &#xEA;tre adapt&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;analyse de la niche de cellules souches.

Une plate-forme bas&#xE9;e sur puce pour la production in vitro de tissus dans l&#x26;#39;organisation tridimensionnelle

Wir beschreiben eine Mehrzweck-Plattform f&uuml;r den dreidimensionalen Anbau von Geweben. Das Ger&auml;t besteht aus Polymer-Chips mit eine mikrostrukturierte Gegend von 1-2 cm(2). Der Chip wird erstellt, entweder als ein Raster von Mikro-Beh&auml;lter 120-300 X 300 X 300 Microm Messen (h x l x b), oder als Array von Runde Aussparungen (300 Microm Durchmesser, Tiefe 300 Microm). Mikro-Beh&auml;lter k&ouml;nnen separat mit adressierbaren 3D-Mikro-Elektroden, die elektrische Stimulation von excitable Zellen und vor-Ort-Messung elektrochemisch zug&auml;ngliche Parameter erm&ouml;glichen, ausger&uuml;stet sein. Das System gilt f&uuml;r den Anbau von hohen Zelldichten von bis zu 8 X 10 6 Zellen und aufgrund des rechteckigen Raster-Layouts, erm&ouml;glicht die automatisierte mikroskopische Analyse der kultivierten Zellen. Mehr als 1000 Mikro-Beh&auml;lter erm&ouml;glichen die parallele Analyse verschiedener Parameter unter Superfusion/Perfusion Bedingungen. Mit verschiedenen Polymer-Chips in Kombination mit verschiedenen Arten von Bioreaktoren zeigten wir die wichtigste Eignung der Chip-basierten Bioreaktor f&uuml;r Gewebekultur-Anwendungen. Prim&auml;r- und etablierte Zelllinien wurden erfolgreich kultiviert und funktionellen Eigenschaften untersucht. Wenn Zellen in nicht-perfused Chips kultiviert wurden, konnte im Laufe der Zeit ein betr&auml;chtliches Ma&szlig; an Apoptose beobachtet werden, die Notwendigkeit einer aktiven Perfusion angibt. Das hier vorgestellte System ist auch f&uuml;r die Analyse der Differenzierung von pluripotenten embryonalen Stammzellen angewendet wurde und geeignet f&uuml;r die Analyse der Stammzelle Nische.

Eine Chip-basierte Plattform zur in-vitro-Erzeugung von Geweben in dreidimensionalen Organisation.

Se describe una plataforma multi-prop&#xF3;sito para el cultivo tridimensional de los tejidos. El dispositivo se compone de chips de pol&#xED;mero que ofrecen un &#xE1;rea microestructurado de 1-2 cm (2). El chip se construye ya sea como una red de micro-contenedores de medici&#xF3;n 120-300 x 300 x 300 micras (hxlxw), o como una matriz de rebajes circulares (300 micras de di&#xE1;metro, 300 micras de profundidad). Los contenedores de micro-puede ser separado equipado con direccionables 3D micro-electrodos, que permiten la estimulaci&#xF3;n el&#xE9;ctrica de las c&#xE9;lulas excitables y mediciones in situ de par&#xE1;metros accesibles por v&#xED;a electroqu&#xED;mica. El sistema es aplicable para el cultivo de altas densidades de c&#xE9;lulas de hasta 8 x 10 (6) las c&#xE9;lulas y, debido a la disposici&#xF3;n de la rejilla rectangular, permite el an&#xE1;lisis automatizado microsc&#xF3;pico de las c&#xE9;lulas cultivadas. M&#xE1;s de 1000 micro-contenedores permitir el an&#xE1;lisis paralelo de diferentes par&#xE1;metros bajo superfusi&#xF3;n / condiciones de perfusi&#xF3;n. Utilizando chips de diferentes pol&#xED;meros en combinaci&#xF3;n con varios tipos de biorreactores hemos demostrado la idoneidad principal del biorreactor basado en chips para aplicaciones de cultivo de tejidos. L&#xED;neas celulares primarias y constantes han sido cultivado con &#xE9;xito y se analizaron las propiedades funcionales. Cuando las c&#xE9;lulas fueron cultivadas en no-perfundidos virutas, con el tiempo un grado considerable de la apoptosis se pudo observar que indica la necesidad de una perfusi&#xF3;n activo. El sistema que aqu&#xED; se presenta se ha aplicado tambi&#xE9;n para el an&#xE1;lisis de la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre pluripotentes embrionarias y puede ser adecuado para el an&#xE1;lisis del nicho de c&#xE9;lulas madre.

Brigitte Lahni

Institute for Biological Interfaces

Forschungszentrum Karlsruhe

Chip-based Three-dimensional Cell Culture in Perfused Micro-bioreactors

Brigitte Lahni

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Forschungszentrum Karlsruhe

Chip-based Three-dimensional Cell Culture in Perfused Micro-bioreactors

Institute for Biological Interfaces