whole-cell-recording-calcium-release-activated-calcium-crac-currents

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium (CRAC) Currents in Human T Lymphocytes

In T lymphocytes, depletion of Ca2+ from the intracellular Ca2+ store leads to activation of plasmalemmal Ca2+ channels, called Calcium Release-Activated ...

University of California, Davis

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The central nervous system is one of the main target organs in cyanide toxicity. In this study, primary cultures of chick embryonic neurons were used to characterize sodium cyanide (NaCN)-induced cell death and to investigate the mechanism of NaCN-mediated preconditioning. After treatment of the cells with 1mM NaCN for 1h followed by a NaCN-free incubation period of 23 h, we observed features of apoptosis such as a reduction in nuclear size, chromatin condensation and nuclear fragmentation as evaluated by nuclear staining with Hoechst 33258 and electron microscopy. In addition, NaCN-induced neurotoxicity was reduced by the protein synthesis inhibitor cycloheximide (CHX) suggesting an active type of cell death. Most of the neurons with condensed chromatin and a shrunken nuclei also showed membrane damage at a late stage. Mitochondrial membrane potential as well as the protein levels of Bcl-2 and Bcl-x(L) decreased 15-60 min and 1-3 h after the exposure to NaCN (1mM, 1h), respectively. Preconditioning caused by incubating chick neurons with 100 microM NaCN for 30 min followed by a NaCN-free interval of 24h significantly protected the neurons against subsequent NaCN (1mM, 1h)-induced damage. Preconditioning prevented NaCN-induced decrease in the mitochondrial membrane potential as well as in the protein levels of Bcl-2 and Bcl-x(L) suggesting that preconditioning-induced neuroprotection is mediated by preserving mitochondrial function.

Preconditioning-induced protection against cyanide-induced neurotoxicity is mediated by preserving mitochondrial function.

Le syst&egrave;me nerveux central est un des organes cibles principaux dans la toxicit&eacute; du cyanure. Dans cette &eacute;tude, des cultures primaires de neurones embryonnaires de poulet ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s pour caract&eacute;riser le cyanure de sodium (NaCN)-induit la mort des cellules et d&#39;&eacute;tudier le m&eacute;canisme de m&eacute;diation NaCN pr&eacute;conditionnement. Apr&egrave;s traitement des cellules avec 1 mM NaCN pendant une heure, suivie d&#39;une p&eacute;riode d&#39;incubation de NaCN libres de 23 h, nous avons observ&eacute; caract&eacute;ristiques de l&#39;apoptose comme la r&eacute;duction &agrave; la taille du noyau, la condensation de la chromatine et fragmentation nucl&eacute;aire telle qu&#39;&eacute;valu&eacute;e par la coloration des noyaux avec Hoechst 33258 et la microscopie &eacute;lectronique. En outre, neurotoxicit&eacute; induite de NaCN r&eacute;duisirent la cycloheximide d&#39;inhibiteur de la synth&egrave;se prot&eacute;ine (CHX) sugg&eacute;rant une active type de mort cellulaire. La plupart des neurones avec la chromatine condens&eacute;e et un noyaux ratatin&eacute;es ont &eacute;galement montr&eacute; dommage membranaire &agrave; un stade avanc&eacute;. Membrane mitochondriale potentielle ainsi que les niveaux de la prot&eacute;ine Bcl-2 et Bcl-x(L) diminu&eacute; 15-60 min et 1-3 h apr&egrave;s l&#39;exposition au NaCN (1 mM, 1 h), respectivement. Pr&eacute;conditionnement caus&eacute; en incubant des neurones de poussin avec 100 microM NaCN pour 30 min, suivie d&#39;un intervalle de 24 heures de NaCN significativement prot&eacute;g&eacute; les neurones contre NaCN ult&eacute;rieur (1 mM, 1 h)-induit des l&eacute;sions. Pr&eacute;conditionnement emp&ecirc;ch&eacute; NaCN induite par la diminution du potentiel de membrane mitochondrial ainsi que dans les niveaux de la prot&eacute;ine Bcl-2 et Bcl-x(L) sugg&eacute;rant que neuroprotection induite par le pr&eacute;conditionnement est m&eacute;di&eacute;e par la pr&eacute;servation de la fonction mitochondriale.

Protection induite par le pr&eacute;conditionnement contre la neurotoxicit&eacute; induite par le cyanure est m&eacute;di&eacute;e par la pr&eacute;servation de la fonction mitochondriale.

Vorkonditionierung-induzierten Schutz gegen Zyanid-induzierten Neurotoxizit&#xE4;t wird durch die Erhaltung der mitochondrialen Funktion vermittelt.

Il sistema nervoso centrale &egrave; uno degli organi bersaglio principale nella tossicit&agrave; del cianuro. In questo studio, colture primarie di neuroni embrionali pulcino sono stati utilizzati per caratterizzare il cianuro di sodio (NaCN)-indotta la morte delle cellule e di indagare il meccanismo di precondizionamento NaCN-mediata. Dopo il trattamento delle cellule con 1 mM NaCN per 1 h seguita da un periodo di incubazione NaCN priva di h 23, abbiamo osservato caratteristiche del apoptosis come una riduzione nella dimensione nucleare, condensazione della cromatina e frammentazione nucleare come valutato dalla colorazione nucleare con Hoechst 33258 e microscopia elettronica. Inoltre, la neurotossicit&agrave; indotta da NaCN &egrave; stata ridotta dalla proteina sintesi inibitore cicloeximide (CHX) suggerendo un tipo attivo della morte delle cellule. La maggior parte dei neuroni con cromatina condensata e una tsantsa nuclei anche ha mostrato danni di membrana in una fase tardiva. Membrana mitocondriale potenziale cos&igrave; come i livelli della proteina Bcl-2 e Bcl-x(L) diminuito 15-60 min e 1-3 h dopo l&#39;esposizione al NaCN (1 mM, 1 h), rispettivamente. Condizionamento causato incubando i neuroni pulcino con 100 microM NaCN per 30 min, seguita da un intervallo di 24 h NaCN-libero significativamente protetti i neuroni contro successive NaCN (1 mM, 1 h)-indotta da danni. Precondizionamento impedito NaCN-indotta diminuzione del potenziale di membrana mitocondriale cos&igrave; come i livelli della proteina Bcl-2 e Bcl-x(L), suggerendo che neuroprotezione precondizionamento-indotta &egrave; mediata da preservare la funzione mitocondriale.

Precondizionamento-indotta di protezione contro la neurotossicit&agrave; indotta da cianuro &egrave; mediata da preservare la funzione mitocondriale.

&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306F;&#x30B7;&#x30A2;&#x30F3;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3072;&#x3088;&#x3053;&#x306E;&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4E00;&#x6B21;&#x6587;&#x5316;&#x30B7;&#x30A2;&#x30F3;&#x5316;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; &#xFF08;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#xFF09; &#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;1 MM &#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x3001;23 h &#x306E;&#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x304C;&#x7D9A;&#x304D;&#x307E;&#x3059; 1 h &#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6838;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x51DD;&#x7E2E;&#x3068;&#x6838;&#x306E;&#x65AD;&#x7247;&#x5316; 33258 &#x3068;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3067;&#x6838;&#x67D3;&#x8272;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30DF;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; (CHX) &#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x51DD;&#x7E2E;&#x3068;&#x7E2E;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6838;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x9045;&#x3044;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x819C;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;.&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E; Bcl 2 &#x3068; Bcl-x(L) &#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A; 15-60 &#x5206; 1 3 h &#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066; &#xFF08;1 mM&#x3001;1 h&#xFF09; &#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x5F8C;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3002;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066; (1 mM&#x3001;1 h) &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x7121;&#x6599; 24 &#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x9593;&#x9694;&#x3092;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x7D9A;&#x304F; 30 &#x5206;&#x3067;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3055;&#x308C;&#x305F; 100 microM &#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x3068;&#x3072;&#x3088;&#x3053;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;-&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3002;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x540C;&#x69D8; bcl-2 &#x86CB;&#x767D;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x9632;&#x6B62;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x8A98;&#x767A;&#x795E;&#x7D4C;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3092;&#x793A;&#x5506; Bcl-x(L) &#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30A2;&#x30F3;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x8A98;&#x8D77;&#x4FDD;&#x8B77;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xB294; &#xCCAD;&#xC0B0;&#xAC00; &#xB9AC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB300;&#xC0C1; &#xAE30;&#xAD00; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xBCD1;&#xC544;&#xB9AC; &#xBC30;&#xC544; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBB38;&#xD654; &#xC2DC;&#xC548; &#xD654; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; (NaCN)&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C;-&#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xB298;&#xC5B4;&#xC9C4; NaCN &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0;. 1Mm NaCN 1 h &#xB4A4;&#xC5D0; 23 h&#xC758; NaCN &#xBB34;&#xB8CC; &#xBD80; &#xD654; &#xAE30;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC140;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAD00;&#xCC30; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC10;&#xC18C; &#xB4F1; apoptosis&#xC758; &#xD575; &#xD06C;&#xAE30;, chromatin &#xC751;&#xCD95; &#xD575; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xD575; &#xC5BC;&#xB8E9; Hoechst 33258 &#xBC0F; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00;. &#xB610;&#xD55C;, neurotoxicity NaCN &#xC720;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; cycloheximide (CHX) &#xD65C;&#xC131; &#xC885;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xC81C;&#xC548;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC555;&#xCD95; &#xB41C; chromatin&#xC640; &#xAE34;&#xCD95;&#xB41C; &#xD575; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xB610;&#xD55C; &#xB2A6;&#xC740; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C9; &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC758; Bcl-2&#xC640; Bcl-x(L) &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC18C; 15-60 &#xBD84; &#xBC0F; 1-3 h NaCN (1mm, 1 &#xC2DC;&#xAC04;)&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xD6C4; &#xAC01;&#xAC01;. 30 &#xBD84; &#xB4A4; NaCN &#xBB34;&#xB8CC; 24 &#xC2DC;&#xAC04; &#xAC04;&#xACA9;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xBCF4;&#xD638; &#xD6C4;&#xC18D; NaCN (1mm, 1 &#xC2DC;&#xAC04;)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 100 microM Nacn&#xC640; &#xBCD1;&#xC544;&#xB9AC; &#xB274;&#xB7F0; &#xC7A0;&#xBCF5;&#xAE30;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778;&#xD55C; &#xB298;&#xC5B4;&#xC9C4;-&#xD53C;&#xD574;&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bcl-2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; NaCN &#xC720;&#xB3C4; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xB298;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xB298;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xC720;&#xB3C4; neuroprotection &#xC81C;&#xC548; bcl-x(l)&#xC740; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC874; &#xD558; &#xC5EC; &#xC911;&#xC7AC;.

&#xCCAD;&#xC0B0;&#xAC00; &#xB9AC; &#xC720;&#xB3C4; neurotoxicity&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; &#xB298;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xC720;&#xB3C4; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC874; &#xD558; &#xC5EC; &#xC911;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El sistema nervioso central es uno de los principales &oacute;rganos en toxicidad del cianuro. En este estudio, se utilizaron cultivos primarios de neuronas embrionarias chick para caracterizar el cianuro de sodio (NaCN)-indujo la muerte celular y para investigar el mecanismo del preacondicionamiento NaCN-mediada. Despu&eacute;s del tratamiento de las c&eacute;lulas con 1 mM NaCN para 1 h seguida de un per&iacute;odo de incubaci&oacute;n de NaCN libre de 23 h, observamos caracter&iacute;sticas de apoptosis como una reducci&oacute;n en el tama&ntilde;o nuclear, la condensaci&oacute;n de la cromatina y la fragmentaci&oacute;n nuclear seg&uacute;n lo evaluado por la coloraci&oacute;n nuclear con Hoechst 33258 y microscopia electr&oacute;nica. Adem&aacute;s, neurotoxicidad inducida por NaCN redujo la cicloheximida de inhibidor de la s&iacute;ntesis de prote&iacute;nas (CHX) sugiriendo un activa tipo de muerte celular. La mayor&iacute;a de las neuronas con cromatina condensada y una disminuida n&uacute;cleos tambi&eacute;n demostr&oacute; da&ntilde;o de membrana en una etapa tard&iacute;a. As&iacute; como los niveles de la prote&iacute;na Bcl-2 y Bcl-x(L) potencial de membrana mitocondrial disminuy&oacute; 15-60 min y 1-3 h despu&eacute;s de la exposici&oacute;n a NaCN (1 mM, 1 h), respectivamente. Preacondicionamiento causada por incubar neuronas chick con 100 microM NaCN por 30 min, seguido de un intervalo de 24 h NaCN significativamente protege las neuronas contra NaCN posterior (1 mM, 1 h)-inducida por da&ntilde;os. Preacondicionamiento impidi&oacute; la disminuci&oacute;n del potencial de membrana mitocondrial inducida por el NaCN as&iacute; como en los niveles de la prote&iacute;na Bcl-2 y Bcl-x(L), sugiriendo neuroprotecci&oacute;n preacondicionamiento-inducida es mediada por preservar la funci&oacute;n mitocondrial.

Preacondicionamiento-inducida de protecci&oacute;n contra la neurotoxicidad inducida por cianuro es mediada por preservar la funci&oacute;n mitocondrial.

&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#xFF08;PKA&#xFF09; &#x8C03;&#x8282;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3002;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143;&#xFF0C;PKA &#x57FA;&#x4F53;&#x4E2D;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3001; &#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; N ethylmaleimide &#x654F;&#x611F;&#x56E0;&#x5B50;&#x9644;&#x4EF6;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53; &#xFF08;&#x9677;&#x9631;&#xFF09; &#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x540C;&#x4F19;&#x548C;&#x5176;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0;&#x7A81;&#x89E6;&#x5230;&#x7F51;&#x7F57;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4F9D;&#x8D56; PKA &#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143;&#x5728;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143; S50D&#xFF0C;&#x6A21;&#x4EFF;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8F7B;&#x6613;&#x900F;&#x9732;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x4E2A;&#x522B;&#x56CA;&#x6CE1;&#x91CA;&#x653E;&#x6982;&#x7387;&#x4E0E;&#x6291;&#x90C1;&#x75C7;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x9AD8;&#x9891;&#x7387;&#x523A;&#x6FC0;&#x65F6;&#x3002;&#x6C60;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x6216;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x6982;&#x7387;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143; S50A&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x80FD;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x6539;&#x53D8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x900F;&#x6790;&#x7684; Sp-&#x8425;&#x5730;&#xFF0C;&#x5C06;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7531; PKA&#xFF0C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x8425;&#x5730; nonhydrolyzable &#x6A21;&#x62DF;&#x4E5F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0;&#x7A81;&#x89E6;&#x5773;&#x9677;&#x8D85;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x91CD;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x7684; PKA &#x5EFA;&#x7ACB;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x5728;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143;&#x7684;&#x6307;&#x793A;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143;&#x5BF9;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F20;&#x9012;&#x4ECB;&#x5BFC; PKA &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Use-dependent activation of protein kinase A (PKA) modulates transmitter release, contributing to synaptic plasticity. Snapin, a PKA substrate in neurons, associates with the soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor (SNARE) complex, and its phosphorylation leads to increased binding of synaptotagmin to the SNARE complex. We investigated the role of PKA-dependent phosphorylation of Snapin in hippocampal neurons. Overexpression of Snapin S50D, a mutant mimicking the phosphorylated state, resulted in a decreased number of readily releasable vesicles. In addition, both the release probability of individual vesicles and the depression rate during high-frequency stimulation were increased. Overexpression of Snapin S50A, a mutant that cannot be phosphorylated, did not alter the size of the pool or the probability of release. Furthermore, dialysis of Sp-cAMPS, a nonhydrolyzable analog of cAMP that will promote phosphorylation by PKA, also led to increased synaptic depression in cells overexpressing wild-type Snapin. These results establish Snapin as an important target of PKA in CNS synapses and indicate a role for Snapin in the plasticity of transmitter release.

Effects of PKA-mediated phosphorylation of Snapin on synaptic transmission in cultured hippocampal neurons.

L&#39;activation de d&eacute;pendant de l&#39;utilisation de la prot&eacute;ine kinase A (PKA) module la lib&eacute;ration des transmetteurs, contribuant &agrave; la plasticit&eacute; synaptique. Composant logiciel enfichable, un substrat PKA dans les neurones, les associ&eacute;s avec la sensible au N-&eacute;thylmal&eacute;imide facteur accessoire prot&eacute;ines r&eacute;cepteur soluble (SNARE) complexe et sa phosphorylation m&egrave;ne &agrave; une liaison accrue de synaptotagmine le complexe SNARE. Nous avons &eacute;tudi&eacute; le r&ocirc;le de la phosphorylation d&eacute;pendante du PKA du composant logiciel enfichable dans les neurones de l&#39;hippocampe. La surexpression de Snapin S50D, un mutant imitant l&#39;&eacute;tat phosphoryl&eacute;, sold&eacute;e par un diminution du nombre de v&eacute;sicules facilement lib&eacute;rables. En outre, la probabilit&eacute; de lib&eacute;ration des v&eacute;sicules individuels et le taux de d&eacute;pression au cours de la stimulation &agrave; haute fr&eacute;quence ont augment&eacute;. La surexpression de Snapin S50A, un mutant qui ne peuvent pas &ecirc;tre phosphoryl&eacute;, n&#39;a pas modifi&eacute; la taille de la piscine ou la probabilit&eacute; de lib&eacute;ration. En outre, dialyse de Sp-cAMPS, un analogue non hydrolysable du cAMP qui favoriser la phosphorylation par la PKA, a &eacute;galement conduit &agrave; la d&eacute;pression synaptique accrue dans les cellules surexprimant sauvage du composant logiciel enfichable. Ces r&eacute;sultats &eacute;tablissent du composant logiciel enfichable comme une cible importante de PKA CNS synapses et indiquent un r&ocirc;le pour le composant logiciel enfichable dans la plasticit&eacute; de la lib&eacute;ration des transmetteurs.

Effets de phosphorylation m&eacute;di&eacute;e par le PKA du composant logiciel enfichable sur la transmission synaptique dans les neurones hippocampiques cultiv&eacute;s.

Effekte von PKA-vermittelte Phosphorylierung von Snapin auf die synaptische &#xDC;bertragung in kultivierten hippocampalen Neuronen.

Attivazione di uso-dipendente della chinasi di proteina A (PKA) modula il rilascio del trasmettitore, contribuendo alla plasticit&agrave; sinaptica. Snap-in, un substrato PKA in neuroni, associa con il solubile N-ethylmaleimide-sensibile fattore accessorio proteina recettore (rullante) complesso e sua fosforilazione porta alla maggiore associazione di SHP2 al complesso SNARE. Abbiamo studiato il ruolo della fosforilazione dipendente dalla PKA di snap-in neuroni ippocampali. Sovraespressione di Snapin S50D, un mutante che mimano lo stato fosforilato, ha determinato una riduzione del numero delle vescicole facilmente sganciabile. Inoltre, sono stati aumentati sia la probabilit&agrave; di rilascio di vescicole singole e il tasso di depressione durante la stimolazione ad alta frequenza. Sovraespressione di Snapin S50A, un mutante che non pu&ograve; essere fosforilato, non ha modificato le dimensioni della piscina o la probabilit&agrave; di rilascio. Inoltre, dialisi di Sp-campi, un analogico nonhydrolyzable dell&#39;accampamento che promuover&agrave; la fosforilazione di PKA, port&ograve; anche alla maggiore depressione sinaptica in cellule con sovraesprimono relativa selvaggio-tipo snap-in. Questi risultati stabiliscono snap-in come un obiettivo importante della PKA nelle sinapsi CNS e indicano un ruolo per lo snap-nella plasticit&agrave; del rilascio del trasmettitore.

Effetti della fosforilazione mediata da PKA di snap-in sulla trasmissione sinaptica nei neuroni ippocampali colti.

&#x4F7F;&#x7528;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A(PKA) &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30BF;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x5909;&#x8ABF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;PKA &#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3001;&#x4EF2;&#x9593;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; N n-&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x30DE;&#x30EC;&#x30A4;&#x30DF;&#x30C9;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; &#xFF08;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#xFF09; &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x7D50;&#x5408;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; SNARE &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6D77;&#x99AC;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; PKA &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A4;&#x30F3; S50D&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3067;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x8131;&#x7740;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x653E;&#x51FA;&#x78BA;&#x7387;&#x3068;&#x9AD8;&#x983B;&#x5EA6;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E2D;&#x306B;&#x3046;&#x3064;&#x75C5;&#x7387;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;.&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A4;&#x30F3; S50A&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x78BA;&#x7387;&#x306F;&#x5909;&#x308F;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;PKA&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E; nonhydrolyzable &#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0; Sp &#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x900F;&#x6790;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A4;&#x30F3;&#x904E;&#x5270;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E; PKA &#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x7528;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x57F9;&#x990A;&#x6D77;&#x99AC;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; PKA &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3002;

&#xC0AC;&#xC6A9; &#xC885;&#xC18D; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A (PKA)&#xC758; &#xBCC0;&#xC870; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB97C;, &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC2A4;&#xB0C5;&#xC778;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; N ethylmaleimide &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xCCA8;&#xBD80; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCCB4; (&#xC62C; &#xBB34;) &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0;, &#xD568;&#xAED8; &#xB3D9;&#xB8CC;&#xC640;&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; PKA &#xAE30;&#xD310; &#xC62C; &#xBB34; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; synaptotagmin&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC0AC; hippocampal &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC2A4;&#xB0C5;&#xC778;&#xC758; PKA &#xC885;&#xC18D; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;. &#xC2A4;&#xB0C5;&#xC778; S50D, phosphorylated &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD749;&#xB0B4; &#xB0B8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; overexpression &#xC27D;&#xAC8C; releasable &#xC18C;&#xD3EC; &#xC218;&#xAC00; &#xAC10;&#xC18C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAC1C;&#xBCC4; vesicles &#xCD9C;&#xC2DC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xACFC; &#xB192;&#xC740; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC6B0;&#xC6B8;&#xC99D; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC601;&#xC7A5;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30; &#xB610;&#xB294; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; &#xC2A4;&#xB0C5;&#xC778; S50A, phosphorylated &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; overexpression&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Sp-&#xCEA0;&#xD504;, PKA&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; nonhydrolyzable &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8;&#xC758; &#xD22C; &#xC11D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC6B0;&#xC6B8;&#xC99D; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC2A4;&#xB0C5;&#xC778; overexpressing &#xC140;&#xC744; &#xC774;&#xB04C;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; CNS &#xB0C5;&#xC5D0; &#xC2A4;&#xB0C5;&#xC778; PKA&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC758;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131;&#xC5D0; &#xC2A4;&#xB0C5;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAD50;&#xC591;&#xB41C; hippocampal &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xC2A4;&#xB0C5;&#xC778;&#xC758; PKA &#xC911;&#xC7AC; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;.

Activaci&oacute;n de utilizar-dependiente de la prote&iacute;na quinasa A (PKA) modula la liberaci&oacute;n de transmisor, contribuyendo a la plasticidad sin&aacute;ptica. Complemento, un sustrato PKA en neuronas, asociados con el sensible a N-etilmaleimida factor accesorio prote&iacute;na receptor soluble (trampa) complejo y su fosforilaci&oacute;n conduce a mayor Uni&oacute;n de synaptotagmin para el complejo SNARE. Investigamos el papel de la fosforilaci&oacute;n de PKA dependiente de complemento en las neuronas de hipocampales. Sobreexpresi&oacute;n de Snapin S50D, un mutante m&iacute;mico el estado fosforilado, result&oacute; en una reducci&oacute;n del n&uacute;mero de ves&iacute;culas f&aacute;cilmente separables. Adem&aacute;s, aumentaron la probabilidad de liberaci&oacute;n de ves&iacute;culas individuales tanto la tasa de depresi&oacute;n durante la estimulaci&oacute;n de alta frecuencia. Sobreexpresi&oacute;n de Snapin S50A, un mutante que no puede ser phosphorylated, no alter&oacute; el tama&ntilde;o de la piscina o la probabilidad de liberaci&oacute;n. Adem&aacute;s, la di&aacute;lisis de Sp-campos, un an&aacute;logo de la nonhydrolyzable del campo que promover&aacute; la fosforilaci&oacute;n por PKA, tambi&eacute;n condujo a mayor depresi&oacute;n sin&aacute;ptica en c&eacute;lulas overexpressing salvaje-tipo complemento. Estos resultados establecen complemento como un importante objetivo de PKA en sinapsis CNS e indican un papel de complemento en la plasticidad de la liberaci&oacute;n del transmisor.

Efectos de la fosforilaci&oacute;n mediada por PKA de complemento en la transmisi&oacute;n sin&aacute;ptica en neuronas de hipocampales cultivadas.

SV2 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE; &#xFF08;SV2A &#x548C; SV2B&#xFF09; &#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x548C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x672A;&#x6210;&#x5E74; (SV2C) &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x3002;SV2A &#x548C; SV2B &#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#x8981;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x80DE;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;SV2A&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; SV2B&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0E; 1&#xFF0C;&#x7A81;&#x89E6;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x80DE; Ca2 + &#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426; SV2B &#x53EF;&#x4EE5;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5168;&#x957F;&#x7A81;&#x89E6; 1&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x8111;&#x86CB;&#x767D;&#x63D0;&#x53D6;&#x6267;&#x884C; immunoprecipitations&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0; SV2B &#x5F3A;&#x70C8;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7A81;&#x89E6; 1 &#x5728;&#x6D17;&#x6DA4;&#x5242;&#x8010;&#xFF0C;Ca2 +-&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x672C;&#x673A; SV2A &#x548C;&#x7A81;&#x89E6; 1 &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x63A2;&#x6D4B;&#x3002;SV2B &#x7A81;&#x89E6;&#x590D;&#x6742; 1 &#x8FD8;&#x8F7D;&#x6709;&#x7A81;&#x89E6; t &#x7F51;&#x7F57;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; syntaxin 1 &#x548C;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143; 25&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; SV2B &#x53EF;&#x53C2;&#x52A0;&#x80DE;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x7A81;&#x89E6; 1 &#x4E0E; t &#x7F51;&#x7F57;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;SV2B &#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5728;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8131;&#x79BB;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6; 1 &#x6746;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7A81;&#x89E6;&#xFF0C;&#x662F;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8868;&#x8FBE;&#x53EA;&#x6709; SV2B &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x5728;&#x7EA7;&#x522B;&#x4E2D;&#x8F83;&#x5F3A;&#x7684;&#x8FD8;&#x539F;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4ED6;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0D;&#x53D7; SV2B &#x6316;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x67D0;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x7A81;&#x89E6; 1 &#x7EA7;&#x522B;&#x4E3A; SV2B &#x8868;&#x793A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; SV2B &#x7A81;&#x89E6; 1 &#x590D;&#x6742;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7A81;&#x89E6; 1 &#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;/&#x6216;&#x8D29;&#x8FD0;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; SV2B &#x7A81;&#x89E6; 1 &#x53EF;&#x80FD;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7A81;&#x89E6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x65B0;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

SV2B &#x8C03;&#x8282;&#x7A81;&#x89E6; 1 &#x901A;&#x8FC7;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x3002;

SV2 proteins are abundant synaptic vesicle proteins expressed in two major (SV2A and SV2B) and one minor (SV2C) isoform. SV2A and SV2B have been shown to be involved in the regulation of synaptic vesicle exocytosis. Previous studies found that SV2A, but not SV2B, can interact with the cytoplasmic domain of synaptotagmin 1, a Ca2+ sensor for synaptic vesicle exocytosis. To determine whether SV2B can interact with full-length synaptotagmin 1, we performed immunoprecipitations from brain protein extracts and found that SV2B interacts strongly with synaptotagmin 1 in a detergent-resistant, Ca2+ -independent manner. In contrast, an interaction between native SV2A and synaptotagmin 1 was not detectable under these conditions. The SV2B-synaptotagmin 1 complex also contained the synaptic t-SNARE proteins, syntaxin 1 and SNAP-25, suggesting that SV2B may participate in exocytosis by modulating the interaction of synaptotagmin 1 with t-SNARE proteins. Analysis of retinae in SV2B knock-out mice revealed a strong reduction in the level of synaptotagmin 1 in rod photoreceptor synapses, which are unique in that they express only the SV2B isoform. In contrast, other synaptic vesicle proteins were not affected by SV2B knock out, indicating a specific role for SV2B in the regulation of synaptotagmin 1 levels at certain synapses. These experiments suggest that the SV2B-synaptotagmin 1 complex is involved in the regulation of synaptotagmin 1 stability and/or trafficking. This study has demonstrated a new role of SV2B as a regulator of synaptotagmin 1 that is likely mediated by direct interaction of these two synaptic proteins.

SV2B regulates synaptotagmin 1 by direct interaction.

SV2 prot&eacute;ines sont des prot&eacute;ines des v&eacute;sicules synaptiques abondantes exprim&eacute;es dans deux importantes (SV2A et SV2B) et un mineure (SV2C) isoforme. SV2A et SV2B ont d&eacute;montr&eacute; d&#39;&ecirc;tre impliqu&eacute;s dans la r&eacute;gulation de l&#39;exocytose des v&eacute;sicules synaptiques. Des &eacute;tudes ant&eacute;rieures trouvent qui peut SV2A, mais pas SV2B, interagir avec le domaine cytoplasmique de synaptotagmine 1, un capteur de Ca2 + pour l&#39;exocytose des v&eacute;sicules synaptiques. Pour d&eacute;terminer si SV2B peuvent interagir avec le long m&eacute;trage synaptotagmine 1, nous immunopr&eacute;cipitation effectu&eacute;e &agrave; partir d&#39;extraits de prot&eacute;ines de cerveau et qu&#39;il a trouv&eacute; que les SV2B interagit fortement avec synaptotagmine 1 dans un d&eacute;tersif-r&eacute;sistante, Ca2 +-mani&egrave;re ind&eacute;pendante. En revanche, une interaction entre les indig&egrave;nes SV2A et synaptotagmine 1 n&#39;&eacute;tait pas d&eacute;tectable dans ces conditions. Le SV2B-synaptotagmine 1 complexe contenait &eacute;galement les prot&eacute;ines synaptiques t-SNARE, syntaxine 1 et SNAP-25, ce qui sugg&egrave;re que les SV2B peuvent participer &agrave; l&#39;exocytose en modulant l&#39;interaction de synaptotagmine 1 avec des prot&eacute;ines SNARE-t. Analyse des r&eacute;tines chez les souris knock-out SV2B a r&eacute;v&eacute;l&eacute; une forte r&eacute;duction du niveau de la synaptotagmine 1 dans les synapses de photor&eacute;cepteur de tige, qui sont uniques en ce qu&#39;elles expriment seulement l&#39;isoforme SV2B. En revanche, autres v&eacute;sicules synaptiques prot&eacute;ines n&#39;&eacute;taient pas affect&eacute;s par la SV2B assommer, indiquant un r&ocirc;le sp&eacute;cifique pour SV2B dans la r&eacute;gulation de niveaux synaptotagmine 1 &agrave; certaines synapses. Ces exp&eacute;riences sugg&egrave;rent que le SV2B-synaptotagmine 1 complexe est impliqu&eacute; dans la r&eacute;gulation de la synaptotagmine 1 stabilit&eacute; et/ou le trafic. Cette &eacute;tude a d&eacute;montr&eacute; un nouveau r&ocirc;le de SV2B en tant que r&eacute;gulateur de la synaptotagmine 1 qui est probablement attribuable &agrave; une interaction directe de ces deux prot&eacute;ines synaptiques.

SV2B r&egrave;gle synaptotagmine 1 par interaction directe.

SV2B regelt Synaptotagmin 1 durch eine direkte Interaktion.

Proteine SV2 sono abbondanti Vescicola sinaptica proteine espresse in due principali (SV2A e SV2B) e minore (SV2C) una isoforma. SV2A e SV2B hanno dimostrato di essere coinvolti nella regolazione della esocitosi della vescicola sinaptica. Precedenti studi ha trovato che SV2A, ma non SV2B, pu&ograve; interagire con il dominio citoplasmico di SHP2 1, un sensore di Ca2 + per esocitosi della vescicola sinaptica. Per determinare se SV2B pu&ograve; interagire con full-length SHP2 1, abbiamo eseguito immunoprecipitazione da estratti di proteine del cervello e trovato che SV2B interagisce fortemente con SHP2 1 in un detergente-resistente, Ca2 +-modo indipendente. Al contrario, un&#39;interazione tra nativi SV2A e SHP2 1 non era rilevabile in queste condizioni. SV2B-SHP2 1 complesso conteneva anche la proteine sinaptiche t-SNARE, 1 Sintaxina e SNAP-25, suggerendo che SV2B possono partecipare esocitosi modulando l&#39;interazione di SHP2 1 con proteine t-SNARE. Analisi della retinae nei topi knock-out SV2B hanno rivelato una forte riduzione del livello di SHP2 1 nelle sinapsi fotorecettore rod, che sono unici in quanto essi esprimono solo l&#39;isoforma SV2B. Al contrario, altre Vescicola sinaptica le proteine non sono state influenzate da SV2B knock out, che indica un ruolo specifico per SV2B nella regolazione dei livelli SHP2 1 a determinate sinapsi. Questi esperimenti suggeriscono che la SV2B-SHP2 1 complesso &egrave; coinvolto nella regolazione della stabilit&agrave; SHP2 1 e/o traffico. Questo studio ha dimostrato un nuovo ruolo di SV2B come regolatore di SHP2 1 che &egrave; probabilmente mediata dall&#39;interazione diretta di queste due proteine sinaptiche.

SV2B regola SHP2 1 di interazione diretta.

SV2 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (SV2A &#x304A;&#x3088;&#x3073; SV2B) &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC; &#xFF08;SV2C) &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x8C4A;&#x304B;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SV2A &#x3068; SV2B &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x305D;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; SV2A &#x304C;&#x306A;&#x3044; SV2B&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1&#x3001;ca 2 + &#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC; &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SV2B &#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9; &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x8133;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A8;&#x30AD;&#x30B9;&#x304B;&#x3089; immunoprecipitations &#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x3001;SV2B &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x306E;&#x6D17;&#x5264;-&#x8010;&#x6027;&#x3068;&#x5F37;&#x304F;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B; ca 2 +-&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E; SV2A &#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;.SV2B &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x307E;&#x305F;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9; t SNARE &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; 1&#x3001;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;-25 SV2B &#x958B;&#x53E3;&#x653E;&#x51FA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 t SNARE &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x6790; SV2B &#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x307F; SV2B &#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x610F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; SV2B &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x4ED6;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; SV2B &#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F; SV2B &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x3057;&#x3066; SV2B &#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SV2B &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 1 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x76F4;&#x63A5;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SV2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xB450; &#xBA85;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; (SV2A &#xBC0F; SV2B) &#xBC0F; 1 &#xBD80; (SV2C) isoform &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. SV2A &#xBC0F; SV2B &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; exocytosis &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; SV2A, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; SV2B &#xC218; &#xC788;&#xB294; synaptotagmin 1, Ca2 + &#xC13C;&#xC11C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; exocytosis &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB1CC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; immunoprecipitations&#xB97C; &#xC218;&#xD589; sv2b&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; synaptotagmin 1&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD55C; &#xC138;&#xC81C; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294;&#xC5D0;&#xC11C; synaptotagmin 1&#xC640; SV2B &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; Ca2 +-&#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; sv2a&#xC640; synaptotagmin 1 &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. SV2B synaptotagmin 1 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; t SNARE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, syntaxin 1 &#xBC0F; &#xC2A4;&#xB0C5;-25, SV2B synaptotagmin 1 t SNARE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558; &#xC5EC; exocytosis&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. SV2B &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; retinae&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; synaptotagmin 1 SV2B isoform &#xD45C;&#xD604; &#xD55C;&#xB2E4;&#xB294; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xB0C5;&#xC5D0; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAC15;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC1C;&#xD45C;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; sv2b&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC;, &#xD2B9;&#xC815; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; synaptotagmin 1 &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0; sv2b&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB178;&#xD06C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; SV2B synaptotagmin 1 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; synaptotagmin 1 &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xBC0F;/&#xB610;&#xB294; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xAD00;&#xB828; &#xC81C;&#xC548;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294;&#xC774; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC0C1;&#xD638; &#xC911;&#xC7AC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; 1 synaptotagmin&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xC11C; sv2b&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;.

SV2B synaptotagmin 1 &#xC9C1;&#xC811; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC808;.

SV2 prote&iacute;nas son prote&iacute;nas abundantes ves&iacute;culas sin&aacute;pticas expresadas en dos grandes (SV2A y SV2B) y una menor isoforma de (SV2C). SV2A y SV2B han demostrado que intervienen en la regulaci&oacute;n de la exocitosis de la ves&iacute;cula sin&aacute;ptica. Estudios previos encontraron que SV2A, pero no SV2B, puede interactuar con el dominio citopl&aacute;smico de synaptotagmin 1, un sensor de Ca2 + para la exocitosis de la ves&iacute;cula sin&aacute;ptica. Para determinar si SV2B puede interactuar con el cuerpo entero synaptotagmin 1, realizamos immunoprecipitations de extractos proteicos de cerebro y encontramos que SV2B interact&uacute;a fuertemente con synaptotagmin 1 en un detergente-resistente, Ca2 +-manera independiente. Por el contrario, una interacci&oacute;n entre nativos SV2A y synaptotagmin 1 no era perceptible en estas condiciones. El SV2B-synaptotagmin 1 complejo tambi&eacute;n contiene las prote&iacute;nas sin&aacute;pticas t-SNARE, sintaxina 1 y SNAP-25, lo que sugiere que los SV2B pueden participar en exocitosis modulando la interacci&oacute;n de synaptotagmin 1 con prote&iacute;nas t-SNARE. El an&aacute;lisis de las retinas de ratones knock-out de SV2B revel&oacute; una fuerte reducci&oacute;n en el nivel de synaptotagmin 1 en sinapsis de fotorreceptor de barra, que son &uacute;nicas en que expresan s&oacute;lo la isoforma SV2B. En cambio, otro ves&iacute;cula sin&aacute;ptica prote&iacute;nas no fueron afectadas por SV2B knock out, indicando un papel espec&iacute;fico para SV2B en la regulaci&oacute;n de los niveles de synaptotagmin 1 en ciertas sinapsis. Estos experimentos sugieren que el SV2B-synaptotagmin 1 complejo est&aacute; implicado en la regulaci&oacute;n de la estabilidad synaptotagmin 1 y/o tr&aacute;fico. Este estudio ha demostrado un nuevo papel de SV2B como un regulador de synaptotagmin 1 que probablemente est&aacute; mediada por la interacci&oacute;n directa de estas dos prote&iacute;nas sin&aacute;pticas.

SV2B regula synaptotagmin 1 por interacci&oacute;n directa.

&#x9F20;&#x6807;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E86;&#x89E3;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x7840;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;best-characterized &#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x529F;&#x80FD;&#x533A;&#x6837;&#x5F0F;&#x7A81;&#x89E6;&#x662F; nonmammalian &#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x7EA0;&#x6B63;&#x8FD9;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x95EE;&#x662F;&#x5426;&#x53EF;&#x80FD;&#x8981;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x4F7F;&#x7528;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7535;&#x5BB9;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x53CC;&#x6781;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x52A8;&#x6001;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x819C;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x89E6;&#x53D1;&#x662F;&#x7ECF;&#x4F9B;&#x517B;&#x548C;&#x9650;&#x4E8E;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x80DE;&#x7684;&#x819C;&#x7535;&#x5BB9;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8BB0;&#x5F55;&#x4ECE;&#x5B8C;&#x597D;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x53CC;&#x6781;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BB9;&#x6613;&#x7D22;&#x739B;&#x7684;&#x7535;&#x5BB9;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x632F;&#x5E45;&#x662F;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x8BB0;&#x5F55;&#x76F4;&#x63A5;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x578B;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x7EC8;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x7CBE;&#x6311;&#x7EC6;&#x9009; 463.&#x8FD9;&#x91CC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5728;&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x62B5;&#x6297;&#x4E0D;&#x5F53;&#x524D;&#x6D41;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x5927;&#x969C;&#x788D;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x731C;&#x60F3;&#x662F;&#x7531;&#x88AB;&#x52A8;&#x819C;&#x6027;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x4E0E;&#x6BD4;&#x8F83;&#x819C;&#x7535;&#x5BB9;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x7A81;&#x89E6;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x4E0D;&#x652F;&#x6301;&#x548C;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E86;&#x5BF9;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x7535;&#x5BB9;&#x589E;&#x52A0;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x6B63;&#x5F26;&#x6CE2;&#x9891;&#x7387; &#xFF08;200 1,600 &#x8D6B;&#x5179;&#xFF09; &#x7F3A;&#x4E4F;&#x3002;&#x7535;&#x5BB9;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x89C4;&#x6A21;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0E;&#x7ECF;&#x6761;&#x76EE;&#xFF0C;&#x76F4;&#x81F3;&#x9AD8;&#x539F;&#x8FBE;&#x6210;&#x7EA6; 600 &#x7A7A;&#x95F4;&#x5E73;&#x5747; intraterminal &#x9499; nM&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x89E3;&#x91CA;&#x8FD9;&#x9AD8;&#x539F;&#xFF0C;&#x540D;&#x4E49;&#x4E0A; 30 fF&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x5E94;&#x4E8E;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x8C03;&#x6574;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x6C60;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x63AA;&#x65BD;&#x7684;&#x9C81;&#x68D2;&#x6027;&#x8868;&#x660E;&#x7535;&#x5BB9;&#x6D4B;&#x91CF;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x5728;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x53CC;&#x6781;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD4;&#x8F83;&#x6CBB;&#x7597;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x6C60;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x3002;

&#x7535;&#x5BB9;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E2D;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x53CC;&#x6781;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BC6;&#x522B;&#x53EF;&#x8C03;&#x6574;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x7684;&#x6C60;&#x3002;

The mouse is an important model system for understanding the molecular basis of neuronal signaling and diseases of synaptic communication. However, the best-characterized retinal ribbon-style synapses are those of nonmammalian vertebrates. To remedy this situation, we asked whether it would be feasible to track synaptic vesicle dynamics in the isolated mouse rod bipolar cell using time-resolved capacitance measurements. The results demonstrate that membrane depolarization triggered an increase in membrane capacitance that was Ca(2+) dependent and restricted to the synaptic compartment, consistent with exocytosis. The amplitude of the capacitance response recorded from the easily accessible soma of an intact mouse rod bipolar cell was identical to that recorded directly from the small synaptic terminal, suggesting that in the carefully selected cohort of cells presented here, axonal resistance was not a significant barrier to current flow. This supposition was supported by the analysis of passive membrane properties and a comparison of membrane capacitance measurements in cells with and without synaptic terminals and reinforced by the lack of an effect of sine-wave frequency (200-1,600 Hz) on the measured capacitance increase. The magnitude of the capacitance response increased with Ca(2+) entry until a plateau was reached at a spatially averaged intraterminal calcium of about 600 nM. We interpret this plateau, nominally 30 fF, as corresponding to a releasable pool of synaptic vesicles. The robustness of this measure suggests that capacitance measurements may be used in the mouse rod bipolar cell to compare pool size across treatment conditions.

Capacitance measurements in the mouse rod bipolar cell identify a pool of releasable synaptic vesicles.

La souris est un important syst&egrave;me mod&egrave;le pour comprendre les bases mol&eacute;culaires de la signalisation neuronale et maladies de communication synaptique. Toutefois, les synapses plus style ruban r&eacute;tinienne sont ceux des vert&eacute;br&eacute;s non-mammif&egrave;res. Pour rem&eacute;dier &agrave; cette situation, nous avons demand&eacute; s&#39;il serait possible de suivre la dynamique des v&eacute;sicules synaptiques dans la cellule bipolaire de tige isol&eacute;s de souris en utilisant des mesures de la capacit&eacute; de r&eacute;solution temporelle. Les r&eacute;sultats d&eacute;montrent que la d&eacute;polarisation membranaire a d&eacute;clench&eacute; une augmentation de capacit&eacute; de membrane qui a &eacute;t&eacute; Ca(2+) d&eacute;pendantes et restreint au compartiment synaptique, conforme &agrave; l&#39;exocytose. L&#39;amplitude de la r&eacute;ponse de capacitance enregistr&eacute;e dans le soma facilement accessible d&#39;une cellule bipolaire de souris intactes tige &eacute;tait identique &agrave; celui enregistr&eacute; directement &agrave; partir de la petite borne synaptique, sugg&eacute;rant que dans la cohorte soigneusement s&eacute;lectionn&eacute;e des cellules pr&eacute;sent&eacute;es ici, r&eacute;sistance axonale n&#39;&eacute;tait pas un obstacle majeur &agrave; l&#39;&eacute;coulement du courant. Cette hypoth&egrave;se a &eacute;t&eacute; soutenue par l&#39;analyse des propri&eacute;t&eacute;s des membranes passives et une comparaison des mesures de capacit&eacute; de membrane en cellules avec ou sans terminaux synaptiques et renforc&eacute;e par l&#39;absence d&#39;effet de la fr&eacute;quence de l&#39;onde sinuso&iuml;dale (200-1 600 Hz) sur l&#39;augmentation de la capacit&eacute; mesur&eacute;e. L&#39;ampleur de la r&eacute;ponse de la capacit&eacute; a augment&eacute; avec entr&eacute;e Ca(2+) jusqu&#39;&agrave; un plateau a &eacute;t&eacute; atteint &agrave; un moyen spatiale calcium intraterminal d&#39;environ 600 nM. Nous interpr&eacute;tons ce plateau, nominalement 30 fF, comme correspondant &agrave; un pool lib&eacute;rable de v&eacute;sicules synaptiques. La robustesse de cette mesure donne &agrave; penser que les mesures de capacit&eacute; peuvent &ecirc;tre utilis&eacute;es dans la cellule bipolaire de tige de souris pour comparer la taille du pool dans l&#39;ensemble des conditions de traitement.

Mesures de capacit&eacute; dans la cellule bipolaire de tige de souris identifient un pool de v&eacute;sicules synaptiques lib&eacute;rables.

Die Maus ist ein wichtiges Modellsystem f&uuml;r das Verst&auml;ndnis der molekularen Basis neuronaler signalisieren und Krankheiten der synaptische Kommunikation. Die best-characterized Netzhaut Ribbon-Style-Synapsen sind jedoch diejenigen der Nonmammalian Wirbeltiere. Um hier Abhilfe zu schaffen, haben wir gefragt, ob es machbar w&auml;re, synaptische Vesikel Dynamik in der isolierten Maus Stab bipolare Zelle mit Kapazit&auml;tsmessungen Zeit aufgel&ouml;st zu verfolgen. Die Ergebnisse zeigen, dass die Membran-Depolarisierung eine Zunahme der Membran Kapazitiv ausgel&ouml;st, die Ca(2+) angewiesen und auf die synaptische Fach, mit Exozytose beschr&auml;nkt war. Die Amplitude der Kapazitiv-Antwort aus den leicht zug&auml;nglichen Soma einer intakten Maus Stab bipolare Zelle aufgenommen war identisch mit dem direkt aus dem kleinen synaptische Terminal, was darauf hindeutet, dass in der sorgf&auml;ltig ausgew&auml;hlten Kohorte von Zellen, die hier vorgestellten, axonale Widerstand kein ernsthaftes Hindernis f&uuml;r Stromfluss war aufgezeichnet. Diese Vermutung wurde unterst&uuml;tzt durch die Analyse der passiven Membran-Eigenschaften und einen Vergleich der Membran Kapazit&auml;tsmessungen in Zellen mit und ohne synaptische Klemmen und verst&auml;rkt durch das Fehlen eines Effekts der Sinus-Wellen-Frequenz (200-1.600 Hz) gemessene Kapazit&auml;t zunimmt. Das Ausma&szlig; der Kapazitiv Antwort mit Ca(2+) Eintrag erh&ouml;ht, bis ein Plateau, bei einer r&auml;umlich gemittelte intraterminal Kalzium von etwa 600 erreicht wurde nM. Wir interpretieren diese Hochebene, die nominell 30 fF, dass eine l&ouml;sbare Pool von synaptische Vesikel entsprechen. Die Robustheit dieser Ma&szlig;nahme schl&auml;gt Kapazit&auml;tsmessungen in der Maus Stab bipolare Zelle verwendet werden k&ouml;nnen, um die Gr&ouml;&szlig;e des Pufferpools Behandlung Bedingungen vergleichen.

Kapazit&auml;tsmessungen in der Maus Stab Bipolare Zellen identifizieren einen Pool von l&ouml;sbare synaptische Vesikel.

Il mouse &egrave; un importante modello sistema per capire le basi molecolari della segnalazione neuronale e malattie di comunicazione sinaptica. Tuttavia, le sinapsi best-characterized retinica nastro-stile sono quelli dei vertebrati nonmammalian. Per porre rimedio a questa situazione, abbiamo chiesto se sarebbe fattibile per monitorare la dinamica della vescicola sinaptica della cella di bipolare asta isolata del mouse utilizzando misurazioni capacitanza time-resolved. I risultati dimostrano che depolarizzazione della membrana innescato un aumento nella capacit&agrave; di membrana che era Ca(2+) dipendente e limitate al compartimento sinaptico, coerenza con esocitosi. L&#39;ampiezza della risposta capacitanza registrata da soma facilmente accessibile di una cellula bipolare di asta intatta del mouse era identica a quella registrata direttamente dal terminale sinaptico piccolo, suggerendo che nella coorte attentamente selezionata di celle qui presentato, assonale resistenza non era un ostacolo significativo al flusso di corrente. Questa supposizione &egrave; stata supportata da analisi delle propriet&agrave; della membrana passiva e un confronto tra le misure di capacit&agrave; di membrana nelle cellule con e senza terminali sinaptici e rinforzata dalla mancanza di un effetto di frequenza sinusoidale (200-1.600 Hz) l&#39;aumento di capacit&agrave; misurata. La grandezza della risposta capacit&agrave; aumentata con Ca(2+) voce fino a quando &egrave; stato raggiunto un plateau a un calcio intraterminal spazialmente una media di circa 600 nM. Interpretiamo questo altopiano, nominali 30 fF, come corrispondente a un pool di rilascio delle vescicole sinaptiche. La robustezza di questa misura suggerisce che le misure di capacit&agrave; possono essere utilizzate nella cella del mouse asta bipolare per confrontare le dimensioni del pool attraverso condizioni di trattamento.

Le misure di capacit&agrave; nella cellula bipolare del mouse rod identificano un pool di vescicole sinaptiche rilasciabile.

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x795E;&#x7D4C;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x76E4;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;best-characterized &#x7DB2;&#x819C;&#x30EA;&#x30DC;&#x30F3; &#x30B9;&#x30BF;&#x30A4;&#x30EB; &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9; nonmammalian &#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x72B6;&#x6CC1;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x9759;&#x96FB;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x8A08;&#x6E2C;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x96E2;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x53CC;&#x6975;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5C0B;&#x306D;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x8A98;&#x767A;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3067;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x819C;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30ED;&#x30C3;&#x30C9; &#x30D0;&#x30A4;&#x30DD;&#x30FC;&#x30E9; &#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x76F8;&#x99AC;&#x304B;&#x3089;&#x8A18;&#x9332;&#x5BB9;&#x91CF;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x632F;&#x5E45;&#x306F;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53B3;&#x9078;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30C8;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#xFF0C; &#x8EF8;&#x7D22;&#x62B5;&#x6297;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x3078;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x969C;&#x5BB3;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x76F4;&#x63A5;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9; &#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x8A18;&#x9332;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D1;&#x30C3;&#x30B7;&#x30D6;&#x819C;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x7AEF;&#x5B50;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x819C;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x6B63;&#x5F26;&#x6CE2;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570; (200 1,600 Hz) &#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x3067;&#x88DC;&#x5F37;&#x3002;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D1;&#x30B7;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x304C;&#x7D04; 600 &#x3067;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x5E73;&#x5747;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306E; intraterminal &#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306F;&#x9AD8;&#x539F;&#x306B;&#x5230;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x307E;&#x3067; nM&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x9AD8;&#x539F;&#x306F;&#x3001;&#x540D;&#x76EE;&#x4E0A; 30 &#x89E3;&#x91C8; fF &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x8131;&#x7740;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BB9;&#x91CF;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x53CC;&#x6975;&#x7D30;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7642;&#x6761;&#x4EF6;&#x9593;&#x3067;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xACE0; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC758; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, best-characterized &#xB9DD;&#xB9C9; &#xB9AC;&#xBCF8; &#xC2A4;&#xD0C0;&#xC77C; &#xB0C5;&#xC740; nonmammalian &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC0C1;&#xD669;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD574;&#xACB0; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB9C9;&#xB300; &#xC591;&#xADF9; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xC5ED;&#xD559; &#xCD94;&#xC801; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xAC83;&#xC774; &#xC9C0; &#xBB3C;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xB9C9; depolarization &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; Ca(2+) &#xC885;&#xC18D; &#xBC0F; exocytosis&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB9C9;&#xB300; &#xC591;&#xADF9; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC811;&#xADFC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC18C;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB85D; &#xB41C; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xB3D9;&#xC77C; &#xC140; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC2DC;&#xC758; &#xC5C4;&#xC120; &#xB41C; &#xCF54; &#xD638;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; axonal &#xC800;&#xD56D; &#xC5C6;&#xC74C;&#xC744; &#xD604;&#xC7AC; &#xD750;&#xB984;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC29; &#xBCBD;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC740; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811; &#xAE30;&#xB85D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC0C1;&#xC0C1; &#xC218;&#xB3D9; &#xB9C9; &#xC18D;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC5C6;&#xC774; &#xB9C9; &#xC815;&#xC804; &#xC6A9;&#xB7C9; &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xB418; &#xACE0; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC778; &#xD30C; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; (200-1600 Hz)&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC15;&#xD654;. &#xB300; &#xC9C0; &#xC57D; 600&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xD3C9;&#xADE0;&#xB41C; intraterminal &#xCE7C;&#xC298;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD588;&#xB2E4; &#xB54C;&#xAE4C;&#xC9C0; Ca(2+) &#xD56D;&#xBAA9;&#xACFC; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4; &#xC751;&#xB2F5; &#xD06C;&#xAE30; &#xC99D;&#xAC00; nM. &#xC774; &#xACE0;&#xC6D0;, &#xBA85;&#xBAA9;&#xC0C1; 30 &#xD574;&#xC11D; fF releasable &#xD480; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xB428;. &#xC774; &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xACAC;&#xACE0;&#xC131;&#xC744; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xD480; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50;&#xD560; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4; &#xCE21;&#xC815; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB9C9;&#xB300; &#xC591;&#xADF9; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;.

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB9C9;&#xB300; &#xC591;&#xADF9; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4; &#xCE21;&#xC815; releasable synaptic vesicles&#xC758; &#xD480;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El rat&oacute;n es un sistema modelo importante para entender las bases moleculares de la se&ntilde;alizaci&oacute;n neuronal y enfermedades de comunicaci&oacute;n sin&aacute;ptica. Sin embargo, las sinapsis de la retina best-characterized cinta-estilo son las de vertebrados nonmammalian. Para remediar esta situaci&oacute;n, nos pregunt&oacute; si ser&iacute;a factible realizar un seguimiento de la din&aacute;mica de la ves&iacute;cula sin&aacute;ptica en las c&eacute;lulas bipolares de la barra de rat&oacute;n aislados utilizando mediciones de capacitancia resuelta en el tiempo. Los resultados demuestran que despolarizaci&oacute;n de la membrana desencaden&oacute; un aumento en la capacitancia de la membrana que fue CA dependiente y restringido del compartimiento sin&aacute;ptica, consistente con la exocitosis. La amplitud de la respuesta de capacitancia grabada desde el soma f&aacute;cilmente accesible de una c&eacute;lula bipolar de la barra rat&oacute;n intacto fue id&eacute;ntica a la registrada directamente en la peque&ntilde;a terminal sin&aacute;ptica, sugiriendo que en la cohorte cuidadosamente seleccionada de las c&eacute;lulas que presentamos, axonal resistencia no era un obst&aacute;culo importante para el flujo de corriente. Esta suposici&oacute;n fue apoyada por el an&aacute;lisis de propiedades de la membrana pasivo y una comparaci&oacute;n de las mediciones de capacitancia de la membrana en c&eacute;lulas con y sin terminales sin&aacute;pticos y reforzada por la falta de un efecto de frecuencia de onda sinusoidal (1.600-200 Hz) sobre el aumento de la capacitancia medido. La magnitud de la respuesta de la capacitancia aumenta con la entrada de CA hasta una meseta fue alcanzada en un calcio intraterminal espacial promedio de cerca de 600 nM. Interpretamos esta meseta, nominalmente 30 fF, como corresponde a una agrupaci&oacute;n liberable de ves&iacute;culas sin&aacute;pticas. La robustez de esta medida sugiere que las mediciones de capacitancia pueden utilizarse en las c&eacute;lulas bipolares de la barra de rat&oacute;n para comparar el tama&ntilde;o de la piscina a trav&eacute;s de condiciones de tratamiento.

Medici&oacute;n de capacitancia en las c&eacute;lulas bipolares de la barra de rat&oacute;n identifica un grupo de ves&iacute;culas sin&aacute;pticas liberables.

&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8131;&#x9897;&#x7C92;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7BA1;&#x63A7;&#x3001; &#x9499;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x8BB8;&#x591A;&#x75C5;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6025;&#x6027;&#x708E;&#x75C7;&#x4ECB;&#x8D28;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7A81;&#x89E6;-2&#xFF0C;&#x9499;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x80DE;&#x5410;&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x5728;&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x884C;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x8BBE;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x53EF;&#x80FD;&#x53C2;&#x4E0E;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8C03;&#x8282;&#x80DE;&#xFF0C;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x6210;&#x7A81;&#x89E6; 2 &#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6765;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D4B;&#x4E88;&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8C03;&#x8282;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x672C;&#x6784;&#x80DE;&#x548C; nonexocytic &#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6548;&#x5E94;&#x53CD;&#x5E94;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x7F3A;&#x9677;&#x4E0E;&#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x51CF;&#x5C11;&#x88AB;&#x52A8;&#x76AE;&#x80A4;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6B64;&#x7F3A;&#x9677;&#x4E0D;&#x662F;&#x7EE7;&#x53D1;&#x7578;&#x5F62;&#x53D1;&#x5C55;&#x3001; &#x6210;&#x719F;&#x3001; &#x8FC1;&#x79FB;&#x3001; &#x5F62;&#x6001;&#x3001; &#x5408;&#x6210;&#xFF0C;&#x548C;&#x708E;&#x75C7;&#x4ECB;&#x8D28;&#x5B58;&#x50A8;&#x6216;&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9499;&#x77AC;&#x53D8;&#x7684;&#x3002;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6; 2 &#x7F3A;&#x4E4F;&#x4E0D;&#x662F;&#x589E;&#x52A0;&#x81EA;&#x53D1;&#x6027;&#x80DE;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x3002;

&#x7A81;&#x89E6; 2 &#x63A7;&#x5236;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x80DE;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Mast cell degranulation is a highly regulated, calcium-dependent process, which is important for the acute release of inflammatory mediators during the course of many pathological conditions. We previously found that Synaptotagmin-2, a calcium sensor in neuronal exocytosis, was expressed in a mast cell line. We postulated that this protein may be involved in the control of mast cell-regulated exocytosis, and we generated Synaptotagmin-2 knock-out mice to test our hypothesis. Mast cells from this mutant animal conferred an abnormally decreased passive cutaneous anaphylaxis reaction on mast cell-deficient mice that correlated with a specific defect in mast cell-regulated exocytosis, leaving constitutive exocytosis and nonexocytic mast cell effector responses intact. This defect was not secondary to abnormalities in the development, maturation, migration, morphology, synthesis, and storage of inflammatory mediators, or intracellular calcium transients of the mast cells. Unlike neurons, the lack of Synaptotagmin-2 in mast cells was not associated with increased spontaneous exocytosis.

Synaptotagmin-2 controls regulated exocytosis but not other secretory responses of mast cells.

D&eacute;granulation des mastocytes est un processus fortement r&eacute;glement&eacute;, d&eacute;pendant du calcium, ce qui est important pour la lib&eacute;ration aigu&euml; de m&eacute;diateurs inflammatoires au cours de nombreuses pathologies. Pr&eacute;c&eacute;demment, nous avons trouv&eacute; que la synaptotagmine-2, un capteur de calcium dans les neurones exocytose, est exprim&eacute;e dans une lign&eacute;e de cellules de m&acirc;t. Nous avons postul&eacute; que cette prot&eacute;ine pourrait &ecirc;tre impliqu&eacute;e dans le contr&ocirc;le d&#39;exocytose r&eacute;gul&eacute;e des mastocytes, et nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; des souris knock-out synaptotagmine-2 pour v&eacute;rifier notre hypoth&egrave;se. Mastocytes de cet animal mutant a conf&eacute;r&eacute; une r&eacute;action d&#39;anaphylaxie cutan&eacute;e passive anormalement r&eacute;duite sur des souris d&eacute;ficientes en mastocytes qui en corr&eacute;lation avec un d&eacute;faut sp&eacute;cifique dans l&#39;exocytose r&eacute;gul&eacute;e des mastocytes, laissant nonexocytic et exocytose constitutive r&eacute;ponses effectrices mastocytes intact. Ce d&eacute;faut n&#39;&eacute;tait pas secondaire &agrave; des anomalies dans le d&eacute;veloppement, la maturation, migration, morphologie, synth&egrave;se et stockage de m&eacute;diateurs inflammatoires, ou transitoires de calcium intracellulaire des cellules de m&acirc;t. Contrairement aux neurones, l&#39;absence de la synaptotagmine-2 dans les cellules de m&acirc;t n&#39;&eacute;tait pas associ&eacute;e &agrave; l&#39;exocytose augmentation spontan&eacute;e.

Synaptotagmine-2 contr&ocirc;le exocytose r&eacute;gul&eacute;e mais pas d&#39;autres r&eacute;ponses s&eacute;cr&eacute;toires des mastocytes.

Mastzelle Degranulation ist ein stark regulierten, Kalzium-abh&auml;ngigen Prozess, der im Laufe der vielen pathologischen Bedingungen f&uuml;r die akute Freisetzung von entz&uuml;ndlichen Mediatoren wichtig ist. Vorher finden wir, dass Synaptotagmin-2, ein Kalzium-Sensor im neuronalen Exozytose in eine Mastzell-Linie ausgedr&uuml;ckt wurde. Wir postuliert, dass dieses Protein die Kontrolle der Mastzell-regulierten Exozytose beteiligt sein kann, und wir Synaptotagmin-2 Knock-out-M&auml;use generiert um unsere Hypothese zu testen. Mastzellen von dieser mutant Tier &uuml;bertragen eine abnorm verringerte passive kutane Anaphylaxie-Reaktion auf Mastzell-defizienten M&auml;usen, die mit bestimmten Mastzell-regulierten Exozytose, intakt konstitutive Exozytose und Nonexocytic Mastzelle Effektor Antworten korreliert. Dieser Fehler war nicht zu Abweichungen in der Entwicklung, Reifung, Migration, Morphologie, Synthese und Lagerung von entz&uuml;ndlichen Mediatoren oder intrazellul&auml;re Kalzium Transienten von den Mastzellen zweitrangig. Im Gegensatz zu Neuronen war das Fehlen von Synaptotagmin-2 in Mastzellen nicht erh&ouml;hte spontane Exozytose zugeordnet.

Synaptotagmin-2 Steuerelemente regulierten Exozytose aber nicht andere sekretorischen Antworten von Mastzellen.

Degranulazione dei mastociti &egrave; un processo altamente regolato, calcio-dipendente, che &egrave; importante per il rilascio di mediatori infiammatori acuto nel corso di numerose condizioni patologiche. Abbiamo trovato in precedenza che Shp2-2, un sensore di calcio nella esocitosi neuronale, &egrave; stata espressa in una linea di mastociti. Abbiamo ipotizzato che questa proteina possa essere coinvolti nel controllo della esocitosi regolata da mastociti, e abbiamo generato Shp2-2 topi knock-out per testare la nostra ipotesi. Mastociti da questo animale mutante ha conferito una reazione di anafilassi cutanea passiva anormalmente ridotta su topi carenti mastociti che correlato con un difetto specifico nella esocitosi regolata da mastociti, lasciando nonexocytic ed esocitosi costitutiva risposte effettrici mastociti intatti. Questo difetto non era secondario ad anomalie nello sviluppo, maturazione, migrazione, morfologia, sintesi e stoccaggio di mediatori infiammatori, o transitori di calcio intracellulare delle cellule dell&#39;albero. A differenza dei neuroni, la mancanza di Shp2-2 in cellule dell&#39;albero non &egrave; stata associata con aumento esocitosi spontanea.

Esocitosi regolata Shp2-2 controlli ma non altre risposte secretorie dei mastociti.

&#x30DE;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8131;&#x9846;&#x7C92;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x4E2D;&#x306B;&#x306F;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC; &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 2 &#x30DE;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;, &#x80A5;&#x6E80;&#x7D30;&#x80DE;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 2 &#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x751F;&#x6210;&#x3092;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x52D5;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x30DE;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7570;&#x5E38;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x53D7;&#x8EAB;&#x76AE;&#x819A;&#x30A2;&#x30CA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30AD;&#x30B7;&#x30FC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x69CB;&#x6210;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068; nonexocytic &#x30DE;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x6B8B;&#x3057;&#x3001;&#x80A5;&#x6E80;&#x7D30;&#x80DE;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306E;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x305F;&#x80A5;&#x6E80;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6388;&#x4E0E;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x4E8C;&#x6B21;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x6210;&#x719F;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x3001;&#x5F62;&#x614B;&#x3001;&#x5408;&#x6210;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B8;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DE;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x30DE;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 2 &#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306F;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BF;&#x30B0;&#x30DF;&#x30F3; 2 &#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x4ED6;&#x30DE;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; degranulation &#xB9CE;&#xC740; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; &#xC870;&#xAC74; &#xC911; &#xAE09;&#xC131; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xADDC;&#xC81C;, &#xCE7C;&#xC298; &#xC885;&#xC18D; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xACBD; exocytosis &#xCE7C;&#xC298; &#xC13C;&#xC11C; Synaptotagmin 2 &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC; postulated&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; exocytosis &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; Synaptotagmin 2 &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3DB;&#xB300; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xADDC;&#xC81C; exocytosis, &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xC81C;&#xC815; exocytosis &#xBC0F; nonexocytic &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC815; &#xACB0;&#xD568; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC218;&#xB3D9; &#xD53C;&#xBD80; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xBC18;&#xC751; &#xC218; &#xC5EC;. &#xC774; &#xACB0;&#xD568;&#xC740; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xC131;&#xC219;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;, &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;, &#xD569;&#xC131;, &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790;&#xC758; &#xC800;&#xC7A5; &#xB610;&#xB294; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xCE7C;&#xC298; &#xACFC;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC774;&#xC0C1; &#xBCF4;&#xC870;. &#xB274;&#xB7F0;, &#xB2EC;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; Synaptotagmin 2 &#xBD80;&#xC871; &#xC99D;&#xAC00; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; exocytosis&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Synaptotagmin-2 &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xADDC;&#xC81C; exocytosis &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBD84; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558;&#xC9C0;.

Degranulaci&oacute;n de mastocitos es un proceso altamente regulado, dependiente de calcio, que es importante para la aguda liberaci&oacute;n de mediadores inflamatorios en el transcurso de muchas condiciones patol&oacute;gicas. Previamente, encontramos que Synaptotagmin-2, un sensor de calcio en la exocitosis neuronal, se expres&oacute; en una l&iacute;nea de mastocitos. Postulamos que esta prote&iacute;na puede estar involucrada en el control de la exocitosis regulada mastocitos, y hemos generado ratones knock-out de Synaptotagmin-2 para probar nuestra hip&oacute;tesis. Mastocitos de este animal mutante confer&iacute;a una reacci&oacute;n de anafilaxia cut&aacute;nea pasiva anormalmente disminuida en ratones deficientes en mastocitos que correlacion&oacute; con un defecto espec&iacute;fico en la exocitosis regulada mastocitos, dejando nonexocytic y exocitosis constitutiva respuestas efectoras de mastocitos intacto. Este defecto no era secundaria a anormalidades en el desarrollo, maduraci&oacute;n, migraci&oacute;n, morfolog&iacute;a, s&iacute;ntesis y almacenamiento de mediadores inflamatorios u oscilaciones de calcio intracelular de las c&eacute;lulas del m&aacute;stil. A diferencia de las neuronas, la falta de Synaptotagmin-2 en las c&eacute;lulas del m&aacute;stil no se asoci&oacute; con aumento espont&aacute;neo exocitosis.

Exocitosis regulada Synaptotagmin-2 controles pero no otras respuestas secretores de mastocitos.

2 (SV2) &#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6B63;&#x5E38;&#xFF0C;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x766B;&#x75EB;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E86;&#x89E3;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x6240;&#x77E5;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x4E2D;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684; SV2 &#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x662F;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x9AD8;&#x7A0B;&#x90FD;&#x4F11;&#x606F;&#x548C;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7ECF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x589E;&#x52A0;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3001; &#x7A81;&#x89E6;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x7684; SV2B(-/-) &#x5206;&#x6CCC;&#x578B;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x77ED;&#x671F;&#x7E41;&#x6B96;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x795E;&#x7ECF;&#x672B;&#x68A2;&#x7ECF;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x8F6C;&#x8F7D;&#x4E86; SV2B(-/-) &#x5206;&#x6CCC;&#x578B;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x7ECF; SV2B(-/-) &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x6551;&#x63F4;&#x514D;&#x9664; SV2B(-/-) &#x5206;&#x6CCC;&#x578B;&#x7684;&#x65B9;&#x65B9;&#x9762;&#x9762;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;SV2 &#x63A7;&#x5236;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B83;&#x80FD;&#x591F;&#x8C03;&#x8282;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7ECF;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x6CBB;&#x7597;&#x766B;&#x75EB;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E72;&#x9884;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x65B0;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;

SV2 &#x901A;&#x8FC7;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x9499;&#x8C03;&#x8282;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;

Synaptic vesicle 2 (SV2) proteins, critical for proper nervous system function, are implicated in human epilepsy, yet little is known about their function. We demonstrate, using direct approaches, that loss of the major SV2 isoform in a central nervous system nerve terminal is associated with an elevation in both resting and evoked presynaptic Ca(2+) signals. This increase is essential for the expression of the SV2B(-/-) secretory phenotype, characterized by changes in synaptic vesicle dynamics, synaptic plasticity, and synaptic strength. Short-term reproduction of the Ca(2+) phenotype in wild-type nerve terminals reproduces almost all aspects of the SV2B(-/-) secretory phenotype, while rescue of the Ca(2+) phenotype in SV2B(-/-) neurons relieves every facet of the SV2B(-/-) secretory phenotype. Thus, SV2 controls key aspects of synaptic functionality via its ability to regulate presynaptic Ca(2+), suggesting a potential new target for therapeutic intervention in the treatment of epilepsy.

SV2 acts via presynaptic calcium to regulate neurotransmitter release.

Les v&eacute;sicules synaptiques 2 (SV2), critiques pour la fonction correcte du syst&egrave;me nerveux, les prot&eacute;ines sont impliqu&eacute;es dans l&#39;&eacute;pilepsie humaine, mais on conna&icirc;t mal leur fonction. Nous d&eacute;montrer, en utilisant des approches directes, que la perte de l&#39;isoforme SV2 majeur dans un terminal de nerf du syst&egrave;me nerveux central est associ&eacute;e &agrave; une &eacute;l&eacute;vation dans les deux au repos et &eacute;voqu&eacute; des signaux Ca(2+) pr&eacute;synaptiques. Cette augmentation est essentielle pour l&#39;expression du ph&eacute;notype s&eacute;cr&eacute;toire SV2B(-/-), caract&eacute;ris&eacute;e par des changements dans la dynamique de la v&eacute;sicule synaptique, la plasticit&eacute; synaptique et force synaptique. Reproduction &agrave; court terme du ph&eacute;notype Ca(2+) dans les terminaisons nerveuses de type sauvage reproduit presque tous les aspects du ph&eacute;notype s&eacute;cr&eacute;toire SV2B(-/-), tandis que le sauvetage du ph&eacute;notype Ca(2+) dans les neurones SV2B(-/-) soulage toutes les facettes du ph&eacute;notype s&eacute;cr&eacute;toire SV2B(-/-). Ainsi, SV2 contr&ocirc;le les principaux aspects de la fonctionnalit&eacute; synaptique gr&acirc;ce &agrave; sa capacit&eacute; &agrave; r&eacute;guler la Ca(2+) pr&eacute;synaptique, sugg&eacute;rant une nouvelle cible potentielle pour une intervention th&eacute;rapeutique dans le traitement de l&#39;&eacute;pilepsie.

SV2 agit via pr&eacute;synaptique calcium pour r&eacute;guler la lib&eacute;ration des neurotransmetteurs.

Synaptische Vesikel 2 (SV2) Proteine, kritische f&uuml;r ordnungsgem&auml;&szlig;e Nervensystem Funktion in menschlichen Epilepsie verwickelt sind, doch ist wenig bekannt &uuml;ber ihre Funktion. Wir demonstrieren, direkte Ans&auml;tze, diesen Verlust der wichtigen SV2-Isoform in einem zentralen Nervensystems Nerve Terminal mit einer H&ouml;he in beiden ruhelosigkeit zugeordnet ist und pr&auml;synaptischen Ca(2+) Signale hervorgerufen. Dieser Anstieg ist wesentlich f&uuml;r den Ausdruck des SV2B(-/-) sekretorischen Ph&auml;notyps, zeichnet sich durch &Auml;nderungen in synaptische Vesikel Dynamik, synaptische Plastizit&auml;t und synaptische St&auml;rke. Kurzfristige Reproduktion des Ph&auml;notyps in Wildtyp Nervenenden Ca(2+) reproduziert fast alle Aspekte des SV2B(-/-) sekretorischen Ph&auml;notyps, w&auml;hrend Rettung des Ph&auml;notyps Ca(2+) in SV2B(-/-) Neuronen jede Facette des SV2B(-/-) sekretorischen Ph&auml;notyps entlastet. So steuert SV2 Schl&uuml;sselaspekte der synaptischen Funktionen &uuml;ber seine F&auml;higkeit zur Regulierung der pr&auml;synaptischen Ca(2+), was auf ein potenzielles neues Ziel f&uuml;r therapeutische Intervention bei der Behandlung von Epilepsie.

SV2 agiert &uuml;ber pr&auml;synaptische Kalzium, Neurotransmitter-Freisetzung zu regulieren.

Vescicola sinaptica 2 (SV2) proteine, critiche per la funzione adeguata del sistema nervoso, sono implicate nell&#39;epilessia umana, ancora poco si sa circa la loro funzione. Noi dimostrare, utilizzando approcci diretti, che la perdita dell&#39;importante isoforma SV2 in un terminale del nervo del sistema nervoso centrale &egrave; associato con un&#39;elevazione in entrambi a riposo ed evocato presinaptiche segnali Ca(2+). Questo aumento &egrave; essenziale per l&#39;espressione del fenotipo secretorio SV2B(-/-), caratterizzato da cambiamenti nella dinamica della vescicola sinaptica, plasticit&agrave; sinaptica e forza sinaptica. Riproduzione a breve termine del fenotipo Ca(2+) nei terminali nervosi wild-type riproduce quasi tutti gli aspetti del fenotipo secretorio SV2B(-/-), mentre il salvataggio del fenotipo Ca(2+) in neuroni SV2B(-/-) allevia ogni sfaccettatura del fenotipo secretorio SV2B(-/-). Cos&igrave;, SV2 controlla gli aspetti chiave di funzionalit&agrave; sinaptica attraverso la sua capacit&agrave; di regolare Ca(2+) presinaptica, suggerendo un nuovo potenziale obiettivo per l&#39;intervento terapeutico nel trattamento dell&#39;epilessia.

SV2 agisce tramite calcio presinaptico di regolare rilascio del neurotrasmettitore.

&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE; 2 (SV2&#xFF09; &#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x3001;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A; SV2 &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x672B;&#x7AEF;&#x3067;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;&#x6607;&#x683C;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;, &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F37;&#x5EA6;&#x5909;&#x5316;&#x304C;&#x7279;&#x5FB4;&#x306E; SV2B(-/-) &#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x5F62;&#x8CEA;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x6B20;&#x304B;&#x305B;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x6551;&#x52A9; SV2B(-/-) &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E; SV2B(-/-) &#x5206;&#x6CCC;&#x578B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x548C;&#x3089;&#x3052;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x77ED;&#x671F;&#x518D;&#x73FE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D42;&#x672B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E; SV2B(-/-) &#x5206;&#x6CCC;&#x578B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x3092;&#x518D;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;SV2 &#x306F;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x7684;&#x4ECB;&#x5165;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SV2 &#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; 2 (SV2) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC04; &#xC9C8;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC544;&#xC9C1; &#xC791;&#xC740; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC;, &#xC9C1;&#xC811; &#xC811;&#xADFC;, &#xC911;&#xCD94; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xC694; SV2 isoform&#xC758; &#xADF8; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; &#xB450; &#xD734;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xBC0F; presynaptic Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xBD88;&#xB7EC; &#xC77C;&#xC73C;&#xCF30;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xC5ED;&#xD559;, &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD798;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; SV2B(-/-) &#xBD84; &#xD615;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC5D0; Ca(2+) &#xD615;&#xC758; &#xB2E8;&#xAE30; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB3D9;&#xC548; SV2B(-/-) &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; Ca(2+) &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xD574;&#xC18C; SV2B(-/-) &#xBD84; &#xD615;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC77C; &#xBA74; SV2B(-/-) &#xBD84; &#xD615;&#xC758; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xCE21;&#xBA74;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC0B0; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, SV2 presynaptic Ca(2+), &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xAC04; &#xC9C8; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xAC1C;&#xC785;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD0A4; &#xCE21;&#xBA74;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

SV2 presynaptic &#xCE7C;&#xC298;&#xC774; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC791;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Ves&iacute;cula sin&aacute;ptica 2 (SV2) prote&iacute;nas, esenciales para la funci&oacute;n adecuada del sistema nervioso, est&aacute;n implicadas en la epilepsia humana, sin embargo, poco se sabe sobre su funci&oacute;n. Nosotros demostrar, usando el enfoque directo, que la p&eacute;rdida de la isoforma SV2 importante en un terminal de nervio del sistema nervioso central se asocia a una elevaci&oacute;n en ambos descansando y evocado presin&aacute;pticas se&ntilde;ales de CA. Este aumento es esencial para la expresi&oacute;n del fenotipo secretor SV2B(-/-), caracterizado por los cambios en la din&aacute;mica de la ves&iacute;cula sin&aacute;ptica y plasticidad sin&aacute;ptica fuerza sin&aacute;ptica. Reproducci&oacute;n a corto plazo del fenotipo CA en terminales nerviosas salvaje-tipo reproduce casi todos los aspectos del fenotipo secretor SV2B(-/-), mientras que el rescate del fenotipo CA en las neuronas SV2B(-/-) alivia todas las facetas del fenotipo secretor SV2B(-/-). As&iacute;, SV2 controla aspectos clave de la funcionalidad sin&aacute;ptica mediante su capacidad para regular la presin&aacute;ptica CA, lo que sugiere un potencial nuevo objetivo para la intervenci&oacute;n terap&eacute;utica en el tratamiento de la epilepsia.

SV2 act&uacute;a v&iacute;a presin&aacute;ptica calcio para regular la liberaci&oacute;n de neurotransmisores.

&#x6052;&#x6E29;&#x6052;&#x6E7F;&#x7A7A;&#x8C03;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x901A;&#x9053;&#x4ECB;&#x5BFC; Ca &#xFF08;2 +&#xFF09; &#x6761;&#x76EE;&#x4E2D;&#x7684; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5177;&#x6709;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x589E;&#x5F3A; Ca (2 +) &#x4FE1;&#x53F7;&#x76F8;&#x6BD4;&#x9759;&#x606F; T &#x7EC6;&#x80DE; &#xFF1B;&#x8FD9;&#x90E8;&#x5206;&#x662F;&#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E;&#x6052;&#x6E29;&#x6052;&#x6E7F;&#x7A7A;&#x8C03;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x901A;&#x9053;&#x8868;&#x8FBE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x53E3;&#x8BED;&#x548C;&#x4F34;&#x5BB6;&#x65CF;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x522B;&#x7F16;&#x7801;&#x6052;&#x6E29;&#x6052;&#x6E7F;&#x7A7A;&#x8C03;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x901A;&#x9053;&#x7ED3;&#x6784;&#x5143;&#x7D20;&#x548C;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5728; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E86;&#x6709;&#x4E89;&#x8BAE;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x8BA8;&#x8FC7;&#x4F11;&#x606F;&#xFF0C;&#x53E3;&#x8BED;&#x53CA;&#x4F34;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x548C; Jurkat T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;Orai1 &#x8A8A;&#x672C;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x4EBA;&#x7C7B; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6052;&#x6E29;&#x6052;&#x6E7F;&#x7A7A;&#x8C03;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x901A;&#x9053;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x6C34;&#x5E73;&#x5DEE;&#x522B;&#x4E0D;&#x5927;&#x4F11;&#x606F; T &#x548C;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x53E3;&#x8BED;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x7684;&#x603B;&#x91D1;&#x989D;&#x9AD8;&#x4E8E; 2 &#x6298;&#x9875;&#x4E2D;&#x6BD4;&#x5728;&#x9759;&#x606F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;Orai1 &#x548C;&#x603B;&#x7684;&#x53E3;&#x8BED;&#x8C08;&#x8BDD;&#x5185;&#x5BB9;&#x6C34;&#x5E73;&#x5728;&#x660E;&#x663E;&#x9AD8;&#x4E8E; Jurkat T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD4;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5728;&#x9759;&#x606F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4F34;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0A;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x6700;&#x5927;&#x6052;&#x6E29;&#x6052;&#x6E7F;&#x7A7A;&#x8C03;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x632F;&#x5E45;&#x662F; 1.4 &#x548C; 2.3-fold &#x4E2D;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C; Jurkat T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x6BD4;&#x5728;&#x9759;&#x606F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x9759;&#x606F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x79EF;&#x5C0F;&#xFF0C;&#x8868;&#x9762;&#x88C2;&#x7EB9;&#x901A;&#x9053;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x662F; 2.5-fold &#x548C; 1.6-fold &#x9AD8;&#x5728;&#x9759;&#x606F;&#x6BD4;&#x4E2D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; Jurkat T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x80DE;&#x6D46; Ca2 + &#x63D0;&#x5347;&#x4F7F;&#x7528;&#x6052;&#x6E29;&#x6052;&#x6E7F;&#x7A7A;&#x8C03;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x901A;&#x9053;&#x7535;&#x6D41;&#x548C;&#x8868;&#x660E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5377;&#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x6570;&#x503C;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7387; &lt; &#x4E8C;&#x6298;&#x589E;&#x52A0;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6052;&#x6E29;&#x6052;&#x6E7F;&#x7A7A;&#x8C03;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x901A;&#x9053;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0D;&#x80FD;&#x8003;&#x8651;&#x589E;&#x5F3A;&#x7387;&#x7684;&#x5E97;&#x9762;&#x5F0F;&#x7ECF;&#x8425;&#x76F8;&#x6BD4;&#x9759;&#x606F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; Ca &#xFF08;2 +&#xFF09; &#x6761;&#x76EE;&#x3002;

&#x529F;&#x80FD;&#x7684; Ca &#xFF08;2 +&#xFF09; &#x91CA;&#x653E;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca (2 +) (&#x6052;&#x6E29;&#x6052;&#x6E7F;&#x7A7A;&#x8C03;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF09; &#x7684;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x9891;&#x9053; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;

CRAC channel-mediated Ca ( 2+) Â entry plays a crucial role in T lymphocyte activation. Activated T cells display enhanced Ca ( 2+) Â signaling compared with resting T cells; this is partially attributed to activation-induced upregulation of CRAC channel expression.Â OraiÂ andÂ StimÂ family genes encode CRAC channel structural elements and regulatory proteins, respectively, but studies of their expression in T cells have led to controversial results. We re-examined Orai and Stim gene expression in resting, activated, and Jurkat T cells. Levels ofÂ Orai1Â transcripts, encoding the human T cell CRAC channel subunit, were not significantly different between resting T and activated T cells. The total amount of allÂ OraiÂ transcripts was 2-fold higher in activated T cells than in resting T cells.Â Orai1Â and totalÂ OraiÂ transcript levels were significantly higher in Jurkat T cells than those in resting T cells.Â StimÂ expression did not vary significantly among cell types. Maximal whole-cell CRAC current amplitudes were 1.4-fold and 2.3-fold higher in activated and Jurkat T cells, respectively, than in resting T cells. Due to the small size of resting T cells, the surface CRAC channel density was 2.5-fold and 1.6-fold higher in resting T cells than in activated and Jurkat T cells, respectively. Predicted the rates of cytosolic Ca2+ elevation calculated using the average values of CRAC channel currents and cell volumes showed that < 2-fold increase in the functional CRAC channel expression level cannot account for the enhanced rate of store-operated Ca ( 2+) Â entry in activated T cells compared with resting T cells.

Density of functional Ca ( 2+) release-activated Ca ( 2+) (CRAC) channels declines after T-cell activation.

CRAC canal m&#xE9;diation Ca (2 +) entr&#xE9;e joue un r&#xF4;le crucial dans l&#x26;#39;activation des lymphocytes T. Cellules T activ&#xE9;es affichage am&#xE9;lior&#xE9; Ca (2 +) de signalisation par rapport &#xE0; des cellules T au repos, ce qui est attribuable en partie &#xE0; l&#x26;#39;activation induite par la r&#xE9;gulation positive de l&#x26;#39;expression du canal CRAC. Orai et les g&#xE8;nes de la famille Stim coder des &#xE9;l&#xE9;ments de canaux CRAC structurelles et prot&#xE9;ines de r&#xE9;gulation, respectivement, mais les &#xE9;tudes de leur expression dans les cellules T ont abouti &#xE0; des r&#xE9;sultats controvers&#xE9;s. Nous avons r&#xE9;examin&#xE9; Orai et l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes dans Stim repos, actif, et les cellules T Jurkat. Les niveaux de Orai1 transcriptions, codant pour la cellule humaine T canal sous-unit&#xE9; CRAC, n&#x26;#39;&#xE9;taient pas significativement diff&#xE9;rente entre les T au repos et activ&#xE9;s les lymphocytes T. Le montant total de tous les transcrits Orai &#xE9;tait 2 fois plus &#xE9;lev&#xE9;e dans les cellules T activ&#xE9;es que dans les cellules T au repos. Orai1 et le total des niveaux de transcription Orai &#xE9;taient significativement plus &#xE9;lev&#xE9;s dans les cellules T Jurkat que ceux des cellules T au repos. Expression Stim ne varie pas significativement entre les types de cellules. Maximales de cellules enti&#xE8;res CRAC amplitudes de courant &#xE9;taient 1,4 fois et 2,3 fois plus &#xE9;lev&#xE9;e dans les cellules Jurkat activ&#xE9;es et T, respectivement, que dans les cellules T au repos. En raison de la petite taille des lymphocytes T, la densit&#xE9; de canaux de surface CRAC &#xE9;tait 2,5 fois et 1,6 fois plus &#xE9;lev&#xE9;e dans les cellules T au repos que dans activ&#xE9;es et les cellules T Jurkat, respectivement. Pr&#xE9;vision des taux de Ca 2 + cytosolique &#xE9;l&#xE9;vation calcul&#xE9;e en utilisant les valeurs moyennes des courants des canaux CRAC et des volumes cellulaires ont montr&#xE9; que &#x26;lt;2 fois plus &#xE9;lev&#xE9;e dans le niveau fonctionnel CRAC expression du canal ne peut pas expliquer le taux bonifi&#xE9; de magasin fonctionnant Ca (2 +) entr&#xE9;e dans les cellules T activ&#xE9;es par rapport &#xE0; des cellules T au repos.

Densit&#xE9; de la fonctionnelle Ca (2 +) de sortie activ&#xE9;s par Ca (2 +) baisse Cha&#xEE;nes (CRAC) Apr&#xE8;s activation des cellules T

CRAC Kanal-vermittelte Ca (2 +) Eintrag spielt eine entscheidende Rolle in T-Lymphozyten-Aktivierung. Aktivierte T-Zellen anzeigen verbesserte Ca (2 +) signalisieren gegen&uuml;ber ruhen T-Zellen; Dies wird teilweise Aktivierung-induzierte Hochregulation von CRAC Kanal Ausdruck zugeschrieben.&nbsp;Orai und Stim Familie Gene kodieren CRAC Kanal Strukturelemente und regulatorischen Proteine, bzw., aber Studien &uuml;ber ihren Ausdruck in den T-Zellen zu umstrittenen Ergebnissen gef&uuml;hrt haben. Wir &uuml;berpr&uuml;ft Orai und Stim-Genexpression in ruhen, aktiviert, und Jurkat T Zellen. Ebenen der Orai1 Abschriften, Codierung der menschlichen T Zelle CRAC Kanal Untereinheit waren nicht signifikant verschieden zwischen ruhenden T und aktivierten T-Zellen. Der Gesamtbetrag der alle Orai Abschriften wurde 2-fach h&ouml;her aktivierten T-Zellen als in Ruhe T-Zellen.&nbsp;Orai1 und total Orai Abschrift Ebenen waren signifikant h&ouml;her in Jurkat T-Zellen als in Ruhe T-Zellen.&nbsp;STIM Ausdruck unter Zelltypen nicht erheblich variieren. Maximale gesamte-Zelle CRAC aktuelle Amplituden waren 1.4-fold und 2.3-fold in h&ouml;her aktiviert und Jurkat T-Zellen, bzw. als in Ruhe T-Zellen. Aufgrund der geringen Gr&ouml;&szlig;e der ruhelosigkeit T-Zellen die Oberfl&auml;chendichte des CRAC-Kanal war 2.5-fold und 1.6-fold h&ouml;her in Ruhe T-Zellen als in aktiviert und Jurkat T-Zellen, beziehungsweise. Prognostiziert die Preise der cytosolic Ca2 + H&ouml;he berechnet unter Verwendung der durchschnittlichen Werte CRAC Kanal Str&ouml;me und Zelle-B&auml;nde, die zeigten, dass &lt; 2-fold Zunahme der Funktionsebene des CRAC-Kanal-Ausdruck kann nicht die erh&ouml;hte Rate von Speicher-betrieben von Ca (2 +)-Eintrag im aktivierten T-Zellen, die ruhelosigkeit T-Zellen gegen&uuml;ber entfallen.

Dichte der funktionalen Ca (2 +) Freigabe aktiviert Ca (2 +) (CRAC) Kan&auml;le sinkt nach T-Zell-Aktivierung.

Ingresso di Ca (2++) canale-mediata CRAC gioca un ruolo cruciale nell&#39;attivazione dei linfociti T. Cellule T attivate visualizzazione avanzata di Ca (2++) segnalazione rispetto a riposo le cellule T; Questo &egrave; parzialmente attribuito al upregulation indotta da attivazione dell&#39;espressione canale CRAC.&nbsp;Orai e Stim famiglia geni codificano per gli elementi strutturali del canale CRAC e proteine regolatorie, rispettivamente, ma gli studi della loro espressione in cellule T hanno portato a risultati controversi. Abbiamo riesaminato Orai e Stim espressione genica in riposo, attivato, e le cellule Jurkat T. Livelli di trascrizioni Orai1, codifica per la human T cell CRAC canale subunit&agrave;, non erano significativamente differenti tra riposo T e cellule T attivate. La quantit&agrave; totale di tutte le trascrizioni Orai era 2 volte superiore in cellule T attivate rispetto a cellule T a riposo.&nbsp;Orai1 e livelli di trascrizione Orai totali erano significativamente pi&ugrave; elevati nelle cellule Jurkat T rispetto a quelli di riposo delle cellule T.&nbsp;Stim espressione ha fatto non variano significativamente tra i tipi di cellule. Massimale corrente ampiezze di cellule intere CRAC erano 1.4-fold e 2.3-fold superiore in attivato e cellule Jurkat T, rispettivamente, rispetto a cellule T a riposo. A causa delle piccole dimensioni delle cellule T a riposo, la densit&agrave; superficiale di canale CRAC era d&#39;e 1.6-fold superiore in quanto attivato in cellule T di riposo e cellule Jurkat T, rispettivamente. Predisse le tariffe di elevazione citosolico del Ca2 + calcolato utilizzando i valori medi delle correnti di canale CRAC e volumi delle cellule ha mostrati che &lt; 2 volte aumento del livello di espressione di canale CRAC funzionale non pu&ograve; tenere conto per il tasso maggiore di entrata di Ca (2++) operati da negozio in cellule T attivate rispetto a cellule T a riposo.

Densit&agrave; di funzionale Ca (2++) attivato dal rilascio Ca (2++) (CRAC) canali declina dopo l&#39;attivazione delle cellule T.

CRAC&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306B;&#x306F;&#x3001;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x4F11;&#x6B62;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5F37;&#x5316;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;CRAC&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F80;&#x6765;&#x3068;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;CRAC&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x8981;&#x7D20;&#x3068;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x200B;&#x200B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8AD6;&#x4E89;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5F80;&#x6765;&#x3068;&#x4F11;&#x606F;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x3001;Jurkat T&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x518D;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;T&#x7D30;&#x80DE;CRAC&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;Orai1&#x8EE2;&#x5199;&#x7269;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x4F11;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;T&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5F80;&#x6765;&#x8EE2;&#x5199;&#x7269;&#x306E;&#x5408;&#x8A08;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;2&#x500D;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; Orai1&#x3068;&#x7DCF;&#x5F80;&#x6765;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x4F11;&#x6B62;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x3001;Jurkat T&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x307F;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x5168;&#x7D30;&#x80DE;CRAC&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x632F;&#x5E45;&#x306F;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Jurkat T&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;1.4&#x500D;&#x3001;2.3&#x500D;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4F11;&#x6B62;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x304C;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x306E;CRAC&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Jurkat T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x4F11;&#x6B62;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;2.5&#x500D;&#x3068;1.6&#x500D;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30BE;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;+ CRAC&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x96FB;&#x6D41;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BB9;&#x7A4D;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x5024;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x8A08;&#x7B97;&#x3057;&#x3001;&#x6A19;&#x9AD8;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;CRAC&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x26;lt;2&#x500D;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3067;&#x3001;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x7387;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x4F11;&#x6B62;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x8F9E;&#x9000;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5F8C;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#xFF08;CRAC&#xFF09;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;

CRAC &#xCC44;&#xB110; &#xC911;&#xC7AC; Ca (2 +) &#xD56D;&#xBAA9; T &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; T &#xC138;&#xD3EC;; &#xD734;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; Ca (2 +) &#xC2E0;&#xD638; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; CRAC &#xCC44;&#xB110; &#xC2DD;&#xC758; upregulation &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.&nbsp;&#xD560;&#xAE4C;&#xC694; &#xBC0F; Stim &#xAC00;&#xC871; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; CRAC &#xCC44;&#xB110; &#xAD6C;&#xC870; &#xC694;&#xC18C; &#xBC0F; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC01;&#xAC01; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB17C;&#xB780; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xC5B4;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xD560;&#xAE4C;&#xC694; &#xBC0F; Stim &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD734;&#xC2DD;, &#xD65C;&#xC131;&#xD654;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Jurkat T &#xC138;&#xD3EC;. Orai1 &#xC0AC;&#xBCF8;, &#xC18C;&#xB294; &#xC778;&#xAC04; T &#xC138;&#xD3EC; CRAC &#xCC44;&#xB110; &#xB2E8;&#xC704;, &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD734;&#xC2DD; T&#xC640; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD588;&#xB2E4;. T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD734;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD560;&#xAE4C;&#xC694; &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C;&#xC758; &#xCD1D; &#xAE08;&#xC561; 2-fold &#xB192;&#xC558;&#xB2E4;.&nbsp;Orai1 &#xBC0F; &#xCD1D; &#xD560;&#xAE4C;&#xC694; &#xB300; &#xBCF8; &#xC218;&#xC900; &#xD588;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; Jurkat T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD734;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;.&nbsp;Stim &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; CRAC &#xC804;&#xB958; &#xC9C4;&#xD3ED;&#xC740; 1.4-fold &#xBC0F; 2.3-fold&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; Jurkat T &#xC138;&#xD3EC; &#xAC01;&#xAC01;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD734;&#xC2DD;. T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD734;&#xC2DD;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xD06C;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xD45C;&#xBA74; CRAC &#xCC44;&#xB110; &#xBC00;&#xB3C4; 2.5-fold &#xBC0F; 1.6-fold T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD734;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xAC01;&#xAC01; Jurkat T &#xC138;&#xD3EC;. Cytosolic Ca2 + &#xC0C1;&#xC2B9; CRAC &#xCC44;&#xB110; &#xC804;&#xB958; &#xBC0F; &#xC140; &#xBCFC;&#xB968; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xADF8;&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xAC12;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACC4;&#xC0B0;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC608;&#xCE21; &lt; &#xAE30;&#xB2A5; CRAC &#xCC44;&#xB110; &#xC2DD; &#xC218;&#xC900; 2-fold &#xC99D;&#xAC00; &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C; &#xC6B4;&#xC601; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD734;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; Ca (2 +) &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC815; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; Ca (2 +) &#xCD9C;&#xC2DC; &#xD65C;&#xC131; Ca (2 +) (CRAC)&#xC758; &#xBC00;&#xB3C4; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD6C4; &#xD558;&#xB77D; &#xCC44;&#xB110;.

CRAC canal mediada por Ca (2 +) de entrada juega un papel crucial en la activaci&#xF3;n de los linfocitos T. Las c&#xE9;lulas T activadas muestran una mayor Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en comparaci&#xF3;n con c&#xE9;lulas T en reposo, lo que se atribuye parcialmente a la activaci&#xF3;n inducida por la regulaci&#xF3;n positiva de la expresi&#xF3;n de los canales CRAC. ORAI y los genes de la familia Stim codificar los elementos estructurales de los canales CRAC y las prote&#xED;nas reguladoras, respectivamente, pero los estudios de su expresi&#xF3;n en las c&#xE9;lulas T han dado lugar a resultados controvertidos. Hemos reexaminado ORAI y la expresi&#xF3;n de genes en Stim reposo, activo, y las c&#xE9;lulas T Jurkat. Los niveles de Orai1 transcripciones, que codifican la c&#xE9;lula T humana CRAC subunidad del canal, no fueron significativamente diferentes entre T en reposo y c&#xE9;lulas T activadas. La cantidad total de todas las transcripciones ORAI fue 2 veces mayor en las c&#xE9;lulas T activadas que en c&#xE9;lulas T en reposo. Orai1 y el total de los niveles de transcripci&#xF3;n ORAI fueron significativamente mayores en c&#xE9;lulas Jurkat T que los de c&#xE9;lulas T en reposo. Expresi&#xF3;n Stim no vari&#xF3; significativamente entre los tipos de c&#xE9;lulas. M&#xE1;ximas de c&#xE9;lulas enteras amplitudes de corriente CRAC eran 1,4 veces y 2,3 veces mayor en activado y las c&#xE9;lulas Jurkat T, respectivamente, que en las c&#xE9;lulas T en reposo. Debido al tama&#xF1;o peque&#xF1;o de c&#xE9;lulas T en reposo, la densidad superficial CRAC canal fue de 2,5 veces y 1,6 veces mayor en c&#xE9;lulas T en reposo y activadas que en c&#xE9;lulas Jurkat T, respectivamente. Predicci&#xF3;n de las tasas de citos&#xF3;lica de Ca2 + elevaci&#xF3;n calculada usando los valores medios de CRAC corrientes del canal y el volumen de c&#xE9;lulas mostr&#xF3; que &#x26;lt;2 veces el aumento en el nivel de expresi&#xF3;n funcional CRAC canal no puede dar cuenta de la tasa de aumento de la tienda que funciona con Ca (2 +) entrada en las c&#xE9;lulas T activadas en comparaci&#xF3;n con las c&#xE9;lulas T en reposo.

Densidad de la funcional de Ca (2 +) Publicaci&#xF3;n activados por Ca (2 +) (CRAC) La disminuci&#xF3;n Canales despu&#xE9;s de la activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T

Pratima Thakur

Department of Physiology and Membrance Biology

University of California, Davis

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium (CRAC) Currents in Human T Lymphocytes