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Mechanical Manipulation of Neurons to Control Axonal Development

Cell manipulations and extension of neuronal axons can be accomplished with calibrated glass micro-fibers capable of measuring and applying forces in the ...

Michigan State University, East Lansing

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&#x673A;&#x68B0;&#x5F20;&#x529B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6307;&#x5B9A;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#x3002;

Here we asked whether applied mechanical tension would stimulate undifferentiated minor processes of cultured hippocampal neurons to become axons and whether tension could induce a second axon in an already polarized neuron. Experimental tension applied to minor processes produced extensions that demonstrated axonal character, regardless of the presence of an existing axon. Towed neurites showed a high rate of spontaneous growth cone advance and could continue to grow out for 1-3 d after towing. The developmental course of experimental neurites was found to be similar to that of unmanipulated spontaneous axons. Furthermore, the experimentally elongated neurites showed compartmentation of the axonal markers dephospho-tau and L-1 in towed outgrowth after 24 h. Extension of a second axon from an already polarized neuron does not lead to the loss of the spontaneous axon either immediately or after longer term growth. In addition, we were able to initiate neurites de novo that subsequently acquired axonal character even though spontaneous growth cone advance began while the towed neurite was still no longer than its sibling processes. This suggests that tension rather than the achievement of a critical neurite length determined axonal specification.

Mechanical tension can specify axonal fate in hippocampal neurons.

Ici, nous avons demand&eacute; si la tension m&eacute;canique appliqu&eacute;e stimulerait processus mineurs indiff&eacute;renci&eacute;s des neurones hippocampiques cultiv&eacute;s pour devenir des axones et si la tension risque d&#39;entra&icirc;ner une deuxi&egrave;me axon dans un neurone d&eacute;j&agrave; polaris&eacute;. Tension exp&eacute;rimentale appliqu&eacute;e aux processus mineurs produit les extensions qui ont d&eacute;montr&eacute; le caract&egrave;re axonal, ind&eacute;pendamment de la pr&eacute;sence d&#39;un axone existant. Neurites remorqu&eacute;s a montr&eacute; un taux &eacute;lev&eacute; d&#39;avance de c&ocirc;ne de croissance spontan&eacute;e et pourrait continuer &agrave; cro&icirc;tre sur pendant 1-3 jours apr&egrave;s le remorquage. Le cours du d&eacute;veloppement des neurites exp&eacute;rimentales s&#39;est av&eacute;r&eacute; pour &ecirc;tre similaire &agrave; celle des axones spontan&eacute;es non manipul&eacute;es. En outre, les neurites exp&eacute;rimentalement allong&eacute;es montrent le compartimentage des marqueurs axonal d&eacute;phospho-tau et L-1 dans l&#39;excroissance remorqu&eacute; apr&egrave;s 24 h. Extension d&#39;un deuxi&egrave;me axone d&#39;un neurone d&eacute;j&agrave; polaris&eacute; n&#39;entra&icirc;ne pas la perte de l&#39;axone spontan&eacute;e soit imm&eacute;diatement, soit apr&egrave;s une croissance plus longue terme. En outre, nous avons pu initier des neurites de novo qui par la suite acquis un caract&egrave;re axonal m&ecirc;me s&#39;avance de c&ocirc;ne de croissance spontan&eacute;e a commenc&eacute; alors que les neurites remorqu&eacute; n&#39;&eacute;tait toujours pas plus que les proc&eacute;d&eacute;s de ses fr&egrave;res et soeurs. Cela donne &agrave; penser que la tension plut&ocirc;t que la r&eacute;alisation d&#39;une longueur de neurites critique d&eacute;termin&eacute; sp&eacute;cification axonale.

Tension m&eacute;canique peut sp&eacute;cifier sort axonal dans les neurones de l&#39;hippocampe.

Mechanische Spannung kann axonalen Schicksal in Hippocampus-Neuronen geben.

Qui abbiamo chiesto se applicata tensione meccanica sarebbe stimolare processi minori indifferenziati dei neuroni ippocampali colti a diventare assoni e se la tensione potrebbe indurre un secondo assone di un neurone gi&agrave; polarizzati. Tensione sperimentale applicata ai processi di minori prodotto estensioni che hanno dimostrato carattere assonale, indipendentemente dalla presenza di un assone esistente. Neuriti trainate hanno mostrato un elevato tasso di anticipo cono di crescita spontanea e potrebbero continuare a crescere fuori per 1-3 d dopo il gancio di traino. Il corso dello sviluppo di neuriti sperimentale &egrave; stato trovato per essere simile a quello degli assoni spontanei manipolate. Inoltre, i neuriti sperimentalmente allungata mostr&ograve; suddivisione in compartimenti del marker assonale dephospho-tau e L-1 in trainati escrescenza dopo 24 h. estensione di un secondo assone di un neurone gi&agrave; polarizzati non comporta la perdita di assoni spontaneo immediatamente o dopo la crescita a lungo termine. Inoltre, siamo stati in grado di avviare neuriti de novo che successivamente acquisito carattere assonale anche se inizi&ograve; crescita spontanea cono avanzata mentre il traino dei neuriti era ancora non supera i propri processi di pari livello. Questo suggerisce che la tensione piuttosto che il raggiungimento di una lunghezza dei neuriti critico determinato specifica assonale.

Tensione meccanica pu&ograve; specificare destino assonale in neuroni ippocampali.

&#x3053;&#x3053;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x5F35;&#x529B;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x6D77;&#x99AC;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3057;&#x3001;&#x7DCA;&#x5F35; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3067;&#x65E2;&#x306B;&#x504F;&#x5149;&#x795E;&#x7D4C;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5C0B;&#x306D;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7DCA;&#x5F35;&#x65E2;&#x5B58;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x6587;&#x5B57;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x62E1;&#x5F35;&#x5B50;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x66F3;&#x822A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306F;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x4E8B;&#x524D;&#x306E;&#x9AD8;&#x7387;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x727D;&#x5F15;&#x5F8C; 1-3 d &#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x7D99;&#x7D9A;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x767A;&#x9054;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9; unmanipulated &#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x7D30;&#x9577;&#x3044;&#x7A81;&#x8D77;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x533A;&#x753B;&#x5316;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; dephospho-&#x30BF;&#x30A6;&#x3068; L 1 &#x306E;&#x727D;&#x5F15;&#x306E;&#x526F;&#x7523;&#x7269;&#x3067; 24 h. &#x62E1;&#x5F35;&#x5B50;&#x306F; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3059;&#x3067;&#x306B;&#x504F;&#x5149;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x5C0E;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x5F8C;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9577;&#x3044;&#x671F;&#x9593;&#x6210;&#x9577;&#x5F8C;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x66F3;&#x822A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x304C;&#x305D;&#x306E;&#x5144;&#x5F1F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x307E;&#x3060;&#x3082;&#x306F;&#x3084;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x4E8B;&#x524D;&#x3092;&#x59CB;&#x3081;&#x305F;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x6587;&#x5B57;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77; de novo &#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x8EF8;&#x7D22;&#x4ED5;&#x69D8;&#x306E;&#x9054;&#x6210;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x7DCA;&#x5F35;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5EC;&#xBD80; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xAE34;&#xC7A5; undifferentiated &#xC0AC;&#xC18C;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; axons &#xB420; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; hippocampal &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC790;&#xADF9; &#xAC83; &#xAE34;&#xC7A5; &#xC774;&#xBBF8; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC720;&#xB3C4; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xBB3C;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBD80; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xAE34;&#xC7A5; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xAE30;&#xC874; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; axonal &#xBB38;&#xC790;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xD655;&#xC7A5;. &#xACAC;&#xC778;&#xB41C; neurites&#xC758; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xC0AC;&#xC804; &#xB192;&#xC740; &#xBE44;&#xC728; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xBA70; &#xACAC;&#xC778; &#xD6C4; 1-3 d&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xAE30;&#xB97C; &#xACC4;&#xC18D;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xD5D8; neurites&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACFC;&#xC815; unmanipulated &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; axons &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE38;&#xCB49;&#xD55C; neurites &#xBCF4;&#xC5EC; axonal &#xB9C8;&#xCEE4; dephospho-&#xD0C0;&#xC6B0;&#xC640; L-1&#xC758; compartmentation &#xACAC;&#xC778;&#xB41C; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC190;&#xC2E4; 24 h. &#xC774;&#xBBF8; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5; &#xB9AC;&#xB4DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD6C4; &#xC989;&#xC2DC; &#xB610;&#xB294; &#xB354; &#xAE34; &#xAE30;&#xAC04; &#xC131;&#xC7A5; &#xD6C4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xCF58; &#xC0AC;&#xC804; &#xC2DC;&#xC791; &#xACAC;&#xC778;&#xB41C; neurite&#xB294; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xD615;&#xC81C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; axonal &#xBB38;&#xC790; &#xC778;&#xC218; &#xC2DC;&#xC791; neurites &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; neurite &#xAE38;&#xC774;&#xC758; &#xC131;&#xACFC; &#xACB0;&#xC815; axonal &#xC0AC;&#xC591; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xADF8; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE30;&#xACC4;&#xC2DD; &#xC7A5;&#xB825; hippocampal &#xB274;&#xB7F0; axonal &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xC9C0;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Aqu&iacute; preguntamos si la tensi&oacute;n mec&aacute;nica aplicada estimular procesos menores indiferenciados de neuronas de hipocampales cultivadas para convertirse en axones y si la tensi&oacute;n podr&iacute;a inducir un segundo ax&oacute;n en una neurona ya polarizada. Tensi&oacute;n experimental aplicada a procesos menores produce extensiones que demostraron car&aacute;cter axonal, independientemente de la presencia de un ax&oacute;n existente. Neuritas remolcado mostraron una alta tasa de avance del cono de crecimiento espont&aacute;neo y podr&iacute;an seguir creciendo hacia fuera para 1-3 d despu&eacute;s de remolque. El curso del desarrollo de neuritas experimental fue encontrado para ser similar a la de unmanipulated axones espont&aacute;neas. Adem&aacute;s, las neuritas experimentalmente alargada demostraron compartimentaci&oacute;n de los marcadores axonal dephospho-tau y L-1 en consecuencia remolcado despu&eacute;s de 24 h. extensi&oacute;n de un segundo ax&oacute;n de una neurona ya polarizado no conduce a la p&eacute;rdida del axon espont&aacute;nea ya sea inmediatamente o despu&eacute;s de crecimiento largo plazo. Adem&aacute;s, hemos podido iniciar neuritas de novo que posteriormente adquiri&oacute; car&aacute;cter axonal aunque avance de cono de crecimiento espont&aacute;neo comenz&oacute; mientras el arrastre neurita estaba todav&iacute;a no superar&aacute; los procesos de sus hermano. Esto sugiere la tensi&oacute;n en lugar de la realizaci&oacute;n de una longitud cr&iacute;tica neurita hab&iacute;a determinada especificaci&oacute;n axonal.

Tensi&oacute;n mec&aacute;nica puede especificar destino axonal en las neuronas de hipocampales.

&#x5355; 8 &#x5929;&#x9E21;&#x80DA;&#x524D;&#x8111;&#x7684;&#x79BB;&#x89E3;&#x4EA7;&#x751F; &gt; 10(7) &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x51E0;&#x4E4E;&#x7EAF;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5141;&#x8BB8;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x5178;&#x578B;&#x9525;&#x4F53;&#x5F62;&#x72B6;&#x540E;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6; &#xFF08;&#xFF09; &#x5355;&#x5143;&#x683C;/cm2&#xFF09; &#x5728;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684; 3-4 &#x5929;&#x7684;&#x5B9A;&#x578B;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684; 50-70%&#x3002;&#x5C0F;&#x9E21;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x5F02;&#x4E4E;&#x5BFB;&#x5E38;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x7B80;&#x5355;&#x3001; &#x4EF7;&#x683C;&#x4F4E;&#x5EC9;&#x548C;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x672C;&#x79D1;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x7EC3;&#x4E60;&#x3002;&#x89E3;&#x5256;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5206;&#x79BB;&#x662F;&#x5BB9;&#x6613;&#x548C;&#x5FEB;&#x901F;&#xFF0C;&#x8981;&#x6C42;&#x4E0D;&#x5C11;&#x4E8E; 30 &#x5206;&#x949F;&#x4ECE;&#x88C2;&#x89E3;&#x6253;&#x5F00;&#x9E21;&#x86CB;&#x7535;&#x9540;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x5927;&#x7EA6;&#x4E00;&#x5468;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x80F6;&#x8D28;&#x7684;&#x652F;&#x6301;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x751F;&#x957F;&#x5728;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; CO2 (&#x4E2D;&#x671F; 199) &#x6216;-10%&#x80CE;&#x725B;&#x8840;&#x6E05;&#x548C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6587;&#x5316;&#x7ECF;&#x5178; N2 &#x8865;&#x8865;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB; (Liebovitz L15) &#x5A92;&#x4F53;&#x805A;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x6CBB;&#x7597;&#x6587;&#x5316;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x3002;

&#x5C0F;&#x9E21;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x3002;

Dissociation of the forebrain of a single 8-day chick embryo produces > 10(7) neurons in nearly pure culture. Our methods allow 50-70% of these neurons to develop an axon and typical pyrimidal shape after 3-4 days in culture at low density (10(4) cells/cm2) by a stereotyped developmental sequence similar to that of rat hippocampal neurons. The culture method for chick forebrain neurons is unusually rapid, inexpensive, simple, and could be used in undergraduate laboratory exercises. The dissection and dissociation of the tissue are easy and rapid, requiring less than 30 min from cracking open the chicken egg to plating the cells. Axonal development by these neurons and growth for about a week do not require glial support. The neurons are grown on polylysine-treated culture surfaces in either CO2-dependent (Medium 199) or -independent (Liebovitz L15) media with 10% fetal bovine serum and a supplement based on the classic N2 supplement for neuronal culture.

The culture of chick forebrain neurons.

Dissociation du cerveau ant&eacute;rieur d&#39;un embryon unique poussin 8 jours produit &gt; 10.7 neurones en culture presque pure. Nos m&eacute;thodes permettent &agrave; 50-70 % de ces neurones &agrave; d&eacute;velopper un axone et la forme typique pyrimidal apr&egrave;s 3-4 jours de culture &agrave; faible densit&eacute; (10 4 cellules/cm2) par une s&eacute;quence st&eacute;r&eacute;otyp&eacute;e de d&eacute;veloppement semblable &agrave; celui des neurones hippocampal de rat. La m&eacute;thode de culture pour les neurones du cerveau ant&eacute;rieur poussin est exceptionnellement rapide, peu co&ucirc;teux, simple et pourrait &ecirc;tre utilis&eacute;e dans des exercices de laboratoire de premier cycle. La dissection et la dissociation du tissu sont faciles et rapides, n&eacute;cessitant moins de 30 min de fissuration ouvert l&#39;oeuf de la poule pour les cellules de placage. D&eacute;veloppement axonal par ces neurones et de la croissance pour environ une semaine ne n&eacute;cessitent pas de soutien glial. Les neurones sont cultiv&eacute;s sur des surfaces de culture polylysine trait&eacute;s en CO2-d&eacute;pendante (milieu 199) ou - des m&eacute;dias ind&eacute;pendants (Liebovitz L15) avec 10 % s&eacute;rum de veau f&oelig;tal et un compl&eacute;ment bas&eacute; sur le classique suppl&eacute;ment N2 pour culture neuronale.

La culture des neurones du cerveau ant&eacute;rieur de poussin.

Die Kultur der K&#xFC;ken Vorderhirn Neuronen.

Dissociazione del proencefalo di un embrione unico 8-giorno pulcino produce &amp;gt; 10 neuroni in coltura quasi pura. Nostri metodi consentono a 50-70% di questi neuroni di sviluppare un assone e forma tipica pyrimidal dopo 3-4 giorni in coltura a bassa densit&agrave; (recano le cellule/cm2) di una sequenza evolutiva stereotipata simile a quello dei neuroni ippocampali di ratto. Il metodo di coltura per i neuroni proencefalo pulcino &egrave; insolitamente rapido, poco costoso, semplice e potrebbe essere utilizzato nelle esercitazioni di laboratorio dello studente non laureato. La dissezione e la dissociazione del tessuto sono di facile e rapida, che richiede meno di 30 min da cracking aperto l&#39;uovo di pollo di placcatura delle cellule. Sviluppo assonale da questi neuroni e la crescita per circa una settimana non richiedono supporto glia. I neuroni sono coltivati su superfici trattate con polilisina cultura in CO2-dipendente (Medium 199) o - media indipendenti (Liebovitz L15) con 10% di siero bovino fetale e un supplemento basato sul classico N2 supplemento per cultura neuronale.

La cultura di neuroni proencefalo pulcino.

&#x5358;&#x4E00; 8 &#x65E5;&#x306E;&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30EA;&#x80DA;&#x306E;&#x524D;&#x8133;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x751F;&#x6210;&#x76EE; 10 (7) &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x7D14;&#x7C8B;&#x306A;&#x6587;&#x5316;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5; 50-70% &#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3068;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A; pyrimidal &#x5F62;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6; (10 (4) &#x7D30;&#x80DE;/cm 2&#xFF09; &#x3067;&#x6587;&#x5316;&#x306B; 3-4 &#x65E5;&#x5F8C;&#x7D0B;&#x5207;&#x308A;&#x578B;&#x767A;&#x9054;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x6D77;&#x99AC;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3072;&#x3088;&#x3053;&#x524D;&#x8133;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x6CD5;&#x306F;&#x7570;&#x5E38;&#x306B;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5B89;&#x4FA1;&#x306A;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x3068;&#x5B66;&#x90E8;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x3067;&#x6F14;&#x7FD2;&#x3092;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x90ED;&#x6E05;&#x3068;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x306F;&#x3001;&#x7C21;&#x5358;&#x304B;&#x3064;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x5272;&#x308C;&#x304B;&#x3089; 30 &#x5206;&#x672A;&#x6E80;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x3081;&#x3063;&#x304D;&#x3059;&#x308B;&#x9D8F;&#x306E;&#x5375;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x7D04; 1 &#x9031;&#x9593;&#x306F;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x6271;&#x308F;&#x6587;&#x5316;&#x9762; CO2 &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B; (&#x5A92;&#x4F53; 199) &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB; (Liebovitz L15) &#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2; 10% &#x725B;&#x80CE;&#x5150;&#x8840;&#x6E05;&#x3068;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A; N2 &#x30B5;&#x30D7;&#x30EA;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EA;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x683D;&#x57F9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3072;&#x3088;&#x3053;&#x524D;&#x8133;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3002;

&#xB2E8;&#xC77C; 8 &#xC77C; &#xBCD1;&#xC544;&#xB9AC; &#xD0DC;&#xC544; &#xAC1C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xC131; &amp;gt; 10(7) &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC70;&#xC758; &#xC21C;&#xC218;&#xD55C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xC950; hippocampal &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC9C4;&#xBD80;&#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC21C;&#xC11C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB0AE;&#xC740; &#xBC00;&#xB3C4; (10(4) &#xC140;/cm2)&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; 3-4 &#xC77C; &#xD6C4; &#xCD95; &#xC0AD;&#xACFC; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; pyrimidal &#xC170;&#xC774;&#xD504;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; 50-70%&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xC790; &#xAC1C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBB38;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2E0;&#xC18D;, &#xC800;&#xB834;, &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0;, &#xC774;&#xBA70; &#xD559;&#xBD80; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xC5F0;&#xC2B5;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD574; &#xBD80; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBD80; &#xC624;&#xD508;&#xC5D0;&#xC11C; 30 &#xBD84; &#xBBF8;&#xB9CC; &#xC140; &#xB3C4;&#xAE08; &#xB2ED;&#xACE0;&#xAE30; &#xB2EC;&#xAC40;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; 1 &#xC8FC;&#xC77C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; axonal &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAD50; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xC774; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; CO2 &#xC885;&#xC18D; (&#xC911;&#xAC04; 199) &#xB610;&#xB294;-10% &#xD0DC;&#xC544; &#xC18C; &#xD608; &#xCCAD; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACE0;&#xC804;&#xC801;&#xC778; N2 &#xBCF4;&#xC644;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBCF4;&#xCDA9; &#xB3C5;&#xB9BD; (Liebovitz L15) &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4; &#xBB38;&#xD654; polylysine &#xCC98;&#xB9AC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC7AC;&#xBC30; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5EC; &#xC790;&#xAC00; &#xAC1C; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xBB38;&#xD654;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Disociaci&oacute;n del forebrain de un embri&oacute;n &uacute;nico de 8 d&iacute;as de pollo produce &gt; 10 neuronas en cultivo casi puro. Nuestros m&eacute;todos permiten 50-70% de estas neuronas para desarrollar un ax&oacute;n y pyrimidal t&iacute;pica forma despu&eacute;s de 3-4 d&iacute;as en cultura de baja densidad (4 10 c&eacute;lulas/cm2) por una secuencia estereotipada de desarrollo similar de las neuronas de hipocampo de rata. El m&eacute;todo de cultivo de neuronas del cerebro anterior de chick es inusualmente r&aacute;pido, barato, simple y podr&iacute;a ser utilizado en ejercicios de laboratorio de pregrado. La disecci&oacute;n y la disociaci&oacute;n del tejido son f&aacute;ciles y r&aacute;pidas, que requieren menos de 30 min de agrietamiento abierto el huevo de gallina a las c&eacute;lulas de la galjanoplastia. Desarrollo axonal por estas neuronas y crecimiento para alrededor de una semana no requieren apoyo glial. Las neuronas se cultivan en superficies de cultura tratados con polylysine en CO2-dependiente (medio 199) o - medios independientes (Liebovitz L15) con 10% de suero bovino fetal y un suplemento basado en el cl&aacute;sico suplemento de N2 para cultura neuronal.

La cultura de neuronas del cerebro anterior de polluelo.

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Here we describe the design and fabrication of an inexpensive cell culture incubator for the stage of an inverted light microscope for use in live cell imaging. This device maintains the temperature of the cell culture at 37 degrees C with great stability and, after reaching equilibrium, provides focal stability of an image for 20-25 min with oil-immersion lenses. We describe two versions of the incubator: one for use with standard 60-mm plastic culture dishes, and the other version for imaging of cells on glass coverslips. Either can be made for less than $400. Most components are widely available commercially, and it requires only simple wiring and 3 h to assemble. Although the device is generally useful for live cell imaging on an inverted microscope, it is particularly suitable for work in which instruments are introduced into the culture, such as electrophysiology or micromanipulation. The design is based on the principle that control performance is limited by the lag time between detection and response. The key element of the design is a heated, temperature-controlled aluminum ring serving as a mini-incubator surrounding the culture vessel. For this reason, we call our design a "ringcubator."

Open-dish incubator for live cell imaging with an inverted microscope.

Ici, nous d&eacute;crivons la conception et la fabrication d&#39;un incubateur de culture cellulaire peu co&ucirc;teux pour la sc&egrave;ne d&#39;un microscope invers&eacute; l&eacute;ger pour une utilisation dans l&#39;imagerie de cellules vivantes. Ce dispositif maintient la temp&eacute;rature de la culture cellulaire &agrave; 37 degr&eacute;s C avec grande stabilit&eacute; et, apr&egrave;s avoir atteint l&#39;&eacute;quilibre, offre une stabilit&eacute; focale d&#39;une image pendant 20-25 min avec lentilles immersion dans l&#39;huile. Les auteurs d&eacute;crivent deux versions de l&#39;incubateur : l&#39;un pour une utilisation avec des plats de culture en plastique standard de 60 mm et l&#39;autre version pour l&#39;imagerie des cellules sur les lamelles en verre. Ou l&#39;autre peut le faire pour moins de 400 $. La plupart des composants sont largement disponibles sur le march&eacute;, et n&eacute;cessite seulement de c&acirc;blage simple et de 3 h &agrave; assembler. Bien que l&#39;appareil est g&eacute;n&eacute;ralement utile pour l&#39;imagerie de cellules vivantes sur un microscope invers&eacute;, il est particuli&egrave;rement adapt&eacute; pour le travail dans quels instruments sont introduits dans la culture, telles que l&#39;&eacute;lectrophysiologie ou micromanipulation. La conception est bas&eacute;e sur le principe que les performances de contr&ocirc;le sont limit&eacute;es par le laps de temps entre la d&eacute;tection et la r&eacute;pression. L&#39;&eacute;l&eacute;ment cl&eacute; de la conception est un anneau d&#39;aluminium chauff&eacute;e, temp&eacute;rature contr&ocirc;l&eacute;e servant un mini-incubator entourant le r&eacute;cipient de culture. Pour cette raison, nous appelons notre conception une &laquo; ringcubator &raquo;.

Open-plat incubateur pour l&#39;imagerie de cellules vivantes avec un microscope invers&eacute;.

Open-Sch&#xFC;ssel Inkubator f&#xFC;r Live Cell Imaging mit einem inversen Mikroskop.

Qui descriviamo la progettazione e la realizzazione di un incubatore di cultura cellulare poco costoso per il palcoscenico di un microscopio ottico invertito per uso live cell imaging. Questo dispositivo mantiene la temperatura di coltura delle cellule a 37 gradi C con grande stabilit&agrave; e, dopo aver raggiunto l&#39;equilibrio, fornisce stabilit&agrave; focale di un&#39;immagine per 20-25 min con lenti a immersione in olio. Descriviamo due versioni dell&#39;incubatore: uno per l&#39;uso con piatti standard cultura plastica 60 mm e l&#39;altra versione per l&#39;imaging delle cellule su lamelle di vetro. O pu&ograve; essere fatto per meno di $400. La maggior parte dei componenti sono ampiamente disponibili in commercio, e richiede solo cablaggio semplice e 3 h da assemblare. Anche se il dispositivo &egrave; in genere utile per imaging cellulare dal vivo su un microscopio invertito, &egrave; particolarmente adatto per il lavoro in cui gli strumenti vengono introdotti nella cultura, come ad esempio elettrofisiologia o micromanipolazione. Il design &egrave; basato sul principio che le prestazioni di controllo sono limitata dal tempo di ritardo tra il rilevamento e la risposta. L&#39;elemento chiave del design &egrave; un anello di alluminio riscaldata, temperatura controllata che serve come un mini-incubator che circondano la nave di cultura. Per questo motivo, noi chiamiamo il nostro disegno di un &quot;ringcubator&quot;.

Incubatore Open-piatto per imaging cellulare dal vivo con un microscopio rovesciato.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x5B89;&#x4FA1;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4F5C;&#x88FD;&#x5012;&#x7ACB;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BB;&#x30EB; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x7D20;&#x6674;&#x3089;&#x3057;&#x3044;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068; 37 &#x2103; &#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;&#x5E73;&#x8861;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x7126;&#x70B9;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x6CB9;&#x6D78;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306B; 20-25 &#x5206;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;: &#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A; 60 mm &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x6587;&#x5316;&#x6599;&#x7406;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; &#x30AC;&#x30E9;&#x30B9; coverslips &#x4E0A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3002;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x672A;&#x6E80; 400 &#x30C9;&#x30EB;&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5546;&#x696D;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5E83;&#x304F;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306A;&#x914D;&#x7DDA;&#x3068;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B; 3 h &#x306E;&#x307F;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x5012;&#x7ACB;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BB;&#x30EB; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x4FBF;&#x5229;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3069;&#x306E;&#x697D;&#x5668;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30CB;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x691C;&#x51FA;&#x3068;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5236;&#x5FA1;&#x6027;&#x80FD;&#x304C;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x539F;&#x5247;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30AD;&#x30FC;&#x8981;&#x7D20;&#x306F;&#x6587;&#x5316;&#x5BB9;&#x5668;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5DFB;&#x304F; mini-incubator &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3001;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x6E29;&#x6C34;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30DF;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&quot;ringcubator&quot;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x547C;&#x3073;&#x51FA;&#x3059;

&#x5012;&#x7ACB;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BB;&#x30EB; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x76BF;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3002;

&#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC70;&#xAFB8;&#xB85C; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC758; &#xBB34;&#xB300;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xB834; &#xD55C; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xC778;&#xD050;&#xBCA0;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xC81C;&#xC870; &#xAE30;&#xC220;. &#xC774; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC88B;&#xC740; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; 37 &#xC12D;&#xC528; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; &#xC628;&#xB3C4; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0;, &#xD3C9;&#xD615;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD558;&#xBA74; &#xC624;&#xC77C;-&#xC9D1;&#xC911; &#xB80C;&#xC988; 20-25 &#xBD84;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xC758; &#xCD08;&#xC810; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAE30;&#xC220; &#xC778;&#xD050;&#xBCA0;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC84;&#xC804;: &#xC720;&#xB9AC; coverslips &#xC140;&#xC758; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD45C;&#xC900; 60 mm &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1; &#xBB38;&#xD654; &#xC694;&#xB9AC;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC84;&#xC804;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD558;&#xB098;. &#xC911; 400 &#xB2EC;&#xB7EC; &#xBBF8;&#xB9CC; &#xB300; &#xD55C; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xC0C1;&#xC5C5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418; &#xACE0; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBC30;&#xC120; &#xBC0F; &#xC870;&#xB9BD; 3 h &#xD544;&#xC694;. &#xAC70;&#xAFB8;&#xB85C; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC5D0; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC6A9;, &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xAC83;&#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC545;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xAE30; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559; &#xB610;&#xB294; micromanipulation &#xAC19;&#xC740; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xC18C;&#xAC1C;. &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC131;&#xB2A5; &#xAC10;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xC751;&#xB2F5; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC6D0;&#xCE59;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xBB38;&#xD654; &#xC120;&#xBC15;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; mini-incubator&#xB85C;&#xAC00; &#xC5F4;, &#xC628;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC54C;&#xB8E8;&#xBBF8;&#xB284; &#xB9C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC774;&#xC720;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &quot;ringcubator&quot; &#xD638;&#xCD9C;

&#xAC70;&#xAFB8;&#xB85C; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC624;&#xD508; &#xC811;&#xC2DC; &#xC778;&#xD050;&#xBCA0;&#xC774;&#xD130;.

Aqu&iacute; describimos el dise&ntilde;o y la fabricaci&oacute;n de una incubadora de cultivo celular de bajo costo para la etapa de un microscopio invertido para su uso en proyecci&oacute;n de imagen de c&eacute;lulas vivas. Este dispositivo mantiene la temperatura del cultivo celular a 37 grados C con gran estabilidad y, despu&eacute;s de alcanzar el equilibrio, proporciona estabilidad focal de una imagen por 20-25 min con lentes de inmersi&oacute;n en aceite. Describimos dos versiones de la incubadora: uno para el uso con platos de cultivo pl&aacute;stico est&aacute;ndar de 60 mil&iacute;metros y la otra versi&oacute;n para la proyecci&oacute;n de imagen de c&eacute;lulas en cubreobjetos de vidrio. Cualquiera puede hacerse por menos de $400. Mayor&iacute;a de los componentes est&aacute; ampliamente disponible comercialmente, y requiere solamente cableado simple y 3 h para montar. Aunque el dispositivo es generalmente &uacute;til para la proyecci&oacute;n de imagen de c&eacute;lulas vivas en un microscopio invertido, es particularmente conveniente para el trabajo en los instrumentos que se introducen en la cultura, como electrofisiolog&iacute;a o micromanipulaci&oacute;n. El dise&ntilde;o se basa en el principio de que el funcionamiento del control est&aacute; limitado por el tiempo entre la detecci&oacute;n y respuesta. El elemento clave del dise&ntilde;o es un anillo de aluminio caliente, temperatura controlada que sirve como un mini-incubator que rodea la nave de la cultura. Por esta raz&oacute;n, llamamos a nuestro dise&ntilde;o un &quot;ringcubator&quot;.

Incubadora abierta-plato para la proyecci&oacute;n de imagen de c&eacute;lulas vivas con un microscopio invertido.

&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x6846;&#x67B6;&#x662F;&#x5426;&#x662F;&#x56FA;&#x5B9A;&#x6216;&#x79FB;&#x52A8;&#x662F;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E2D;&#x592E;&#x8FA9;&#x8BBA;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x7406;&#x89E3;&#x6B64;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x7EB3;&#x5165;&#x90E8;&#x961F;&#x4EE3;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x3001; &#x7C98;&#x5F39;&#x6027;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x7C98;&#x8FDE;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x886C;&#x5E95;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x6570;&#x5B66;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B66;&#x529B;&#x6821;&#x51C6;&#x9488;&#x5934;&#x9002;&#x7528;&#x548C;&#x8861;&#x91CF;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684;&#x529B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x505C;&#x9760;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6807;&#x8BB0;&#x6765;&#x76D1;&#x6D4B;&#x8F74;&#x7A81;&#x6846;&#x67B6;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x51CF;&#x5C11;&#x4ECE;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684;&#x8FDE;&#x8D2F;&#x8F74;&#x7A81;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x901F;&#x5EA6;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x548C;&#x5728;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#xFF0C;&#x5E76;&#x901A;&#x8FC7;&#x6539;&#x53D8;&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x8F74;&#x9644;&#x4EF6; coverslip &#x6240;&#x65BD;&#x52A0;&#x7684;&#x529B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F30;&#x8BA1;&#x503C;&#x8F74;&#x5411;&#x7C98;&#x5EA6;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81; &#xFF08;3 x 10(6) + 2.4 x 10(6) Pa.s) &#x548C;&#x6CBF;&#x8F74;&#x7A81; 10 &#xFF08;3 (9.6 x&#xFF09; + 10 &#xFF08;3&#xFF09; x 7.5 Pa.s&#xFF09; &#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D; polyornithine &#x57FA;&#x4E8E;&#x7C98;&#x8FDE;&#x7684;&#x6469;&#x64E6;&#x7CFB;&#x6570;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x8868;&#x660E;&#x662F;&#x5426;&#x63D0;&#x793A;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x62C9;&#x957F;&#x6216;&#x62C9;&#x4F38;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5728;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684;&#x90E8;&#x961F;&#x7EC4;&#x5EFA;&#x7684;&#x7EA7;&#x522B;&#x3001; &#x7C98;&#x5EA6;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x6CBF;&#x8F74;&#x7A81;&#x7C98;&#x8FDE;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x65AD;&#x88C2;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x7269;&#x7406;&#x6A21;&#x578B;&#xFF1A; &#x6B66;&#x529B;&#x3001; &#x7C98;&#x5EA6;&#x3001; &#x548C;&#x7C98;&#x8FDE;&#x6CBB;&#x7406;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x4EA7;&#x7269;&#x3002;

Whether the axonal framework is stationary or moves is a central debate in cell biology. To better understand this problem, we developed a mathematical model that incorporates force generation at the growth cone, the viscoelastic properties of the axon, and adhesions between the axon and substrate. Using force-calibrated needles to apply and measure forces at the growth cone, we used docked mitochondria as markers to monitor movement of the axonal framework. We found coherent axonal transport that decreased away from the growth cone. Based on the velocity profiles of movement and the force applied at the growth cone, and by varying the attachment of the axonal shaft to the coverslip, we estimate values for the axial viscosity of the axon (3 x 10(6) +/- 2.4 x 10(6) Pa.s) and the friction coefficient for laminin/polyornithine-based adhesions along the axon (9.6 x 10(3) +/- 7.5 x 10(3) Pa.s). Our model suggests that whether axons elongate by tip growth or stretching depends on the level of force generation at the growth cone, the viscosity of the axon, and the level of adhesions along the axon.

A physical model of axonal elongation: force, viscosity, and adhesions govern the mode of outgrowth.

Que le cadre axonale est &#xE0; l&#x26;#39;arr&#xEA;t ou se d&#xE9;place est un d&#xE9;bat central de la biologie cellulaire. Pour mieux comprendre ce probl&#xE8;me, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un mod&#xE8;le math&#xE9;matique qui int&#xE8;gre de g&#xE9;n&#xE9;ration de force au niveau du c&#xF4;ne de croissance, les propri&#xE9;t&#xE9;s visco&#xE9;lastiques de l&#x26;#39;axone, et des adh&#xE9;rences entre l&#x26;#39;axone et le substrat. Utilisation de la force-calibr&#xE9; aiguilles d&#x26;#39;appliquer et de mesurer les forces au niveau du c&#xF4;ne de croissance, nous avons utilis&#xE9; amarr&#xE9; mitochondries comme marqueurs pour surveiller les mouvements du cadre axonale. Nous avons trouv&#xE9; coh&#xE9;rente du transport axonal, qui a r&#xE9;duit l&#x26;#39;&#xE9;cart &#xE0; partir du c&#xF4;ne de croissance. Sur la base des profils de vitesse de mouvement et la force exerc&#xE9;e au niveau du c&#xF4;ne de croissance, et en faisant varier la fixation de l&#x26;#39;arbre axonal &#xE0; la lamelle, nous estimons les valeurs de la viscosit&#xE9; axiale de l&#x26;#39;axone (3 x 10 (6) + / - 2,4 x 10 (6) Pa.s) et le coefficient de frottement de la laminine / polyornithine &#xE0; base adh&#xE9;rences suivant la axone (9,6 x 10 (3) + / - 7,5 x 10 (3) Pa.s). Notre mod&#xE8;le sugg&#xE8;re que si les axones allong&#xE9;e par la croissance pointe ou d&#x26;#39;&#xE9;tirement d&#xE9;pend du niveau de g&#xE9;n&#xE9;ration de force au niveau du c&#xF4;ne de croissance, la viscosit&#xE9; de l&#x26;#39;axone, et le niveau d&#x26;#39;adh&#xE9;rences le long de l&#x26;#39;axone.

Un mod&#xE8;le physique de l&#x26;#39;&#xE9;longation axonale: Force, viscosit&#xE9;, et adh&#xE9;sions r&#xE9;gissent le mode de l&#x26;#39;excroissance

Ob axonale Rahmen ist station&auml;r oder bewegt, ist eine zentrale Debatte in der Zellbiologie. Um dieses Problem besser zu verstehen, entwickelten wir ein mathematisches Modell, das Kraft-Generation bei den Wachstumskegel, die viskoelastischen Eigenschaften des Axon und Adh&auml;sionen zwischen Axon und Substrat enth&auml;lt. Mit Kraft-kalibriert Nadeln anwenden und Messen Kr&auml;fte bei den Wachstumskegel, zur wir angedockte Mitochondrien als Marker Bewegung der axonalen Rahmen eingesetzt. Wir fanden die koh&auml;rente axonale Transport, der Weg von der Wachstumskegel zur&uuml;ckgegangen. Basierend auf den Profilen der Geschwindigkeit der Bewegung und Kraft an den Wachstumskegel und durch Variation der Anlage der axonalen Welle auf das Deckglas, sch&auml;tzen wir die Werte f&uuml;r die axiale Viskosit&auml;t des Axon (3 X 10-6 +/-2,4 X 10 6 Pa.s) und die Reibungszahl f&uuml;r Laminin/Polyornithine-basierte Adh&auml;sionen entlang dem Axon (9,6 X 10 Absatz 3 +/-7,5 X 10 Absatz 3 Pa.s). Unser Modell legt nahe, dass ob Axone durch Tipp-Wachstum verl&auml;ngern oder Dehnung h&auml;ngt von der Ebene der Kraft-Generation auf dem Wachstumskegel, die Viskosit&auml;t des Axon und das Niveau der Adh&auml;sionen entlang dem Axon.

Ein physikalisches Modell der axonalen Dehnung: Kraft, Viskosit&auml;t und Adh&auml;sionen regieren den Modus der Auswuchs.

Se il quadro assonale &egrave; fermo o si muove &egrave; un dibattito centrale nella biologia delle cellule. Per capire meglio questo problema, abbiamo sviluppato un modello matematico che incorpora la generazione di forza presso il cono di crescita, le propriet&agrave; viscoelastiche dell&#39;assone e aderenze fra l&#39;assone ed il substrato. Utilizzando aghi calibrato di forza da applicare e misurare le forze presso il cono di crescita, abbiamo usato i mitocondri ancorati come marcatori per monitorare il movimento del quadro assonale. Abbiamo trovato coerente trasporto assonale che &egrave; diminuito dal cono di crescita. Basato sui profili di velocit&agrave; di movimento e la forza applicata presso il cono di crescita e variando l&#39;attaccamento dell&#39;albero assonale per il vetrino coprioggetti, stimiamo i valori per la viscosit&agrave; assiale dell&#39;assone (3 x 10 + 10 x 2,4 apparecchiatura) e il coefficiente di attrito per aderenze laminina/polyornithine-based lungo l&#39;assone (9,6 x 10 + /-7,5 x 10, paragrafo 3 apparecchiatura). Il nostro modello suggerisce che se assoni allungare di crescita tip o allungamento dipende dal livello di forza generazione presso il cono di crescita, la viscosit&agrave; dell&#39;assone e il livello di adesioni lungo l&#39;assone.

Un modello fisico di allungamento assonale: forza, viscosit&agrave; e aderenze regolano la modalit&agrave; di escrescenza.

&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;&#x9759;&#x6B62;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3001;&#x52D5;&#x304D;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x3088;&#x308A;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x7C98;&#x5F3E;&#x6027;&#x7279;&#x6027;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3068;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x7652;&#x7740;&#x3067;&#x529B;&#x767A;&#x751F;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3093;&#x3060;&#x6570;&#x7406;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3067;&#x306E;&#x529B;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x529B;&#x8F03;&#x6B63;&#x91DD;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x304C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C9;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x304B;&#x3089;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3067;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x529B;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x8EF8;&#x7D22;&#x8EF8;&#x306E;&#x30A2;&#x30BF;&#x30C3;&#x30C1;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x7C98;&#x5EA6;&#xFF08;3&#x306E;&#x5024;&#x3092;&#x898B;&#x7A4D;&#x3082;&#x308B;&#xD7;10&#xFF08;6&#xFF09;+ /  -  2.4 &#xD7;10&#xFF08;6&#xFF09;Pa.s&#xFF09;&#x3068;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;/&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30EB;&#x30CB;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x7652;&#x7740;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6469;&#x64E6;&#x4FC2;&#x6570;&#xFF08;9.6&#xD7;10&#xFF08;3&#xFF09;+ /  -  7.5&#xD7;10&#xFF08;3&#xFF09;Pa.s&#xFF09;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F38;&#x9577;&#x3084;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C1;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x304C;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x7C98;&#x5EA6;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x7652;&#x7740;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x529B;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x8EF8;&#x7D22;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#xFF1A;&#x529B;&#x3001;&#x7C98;&#x5EA6;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7652;&#x7740;&#x306F;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;

&#xC5EC;&#xBD80; axonal &#xD504;&#xB808;&#xC784; &#xC6CC;&#xD06C;&#xB294; &#xACE0;&#xC815; &#xB610;&#xB294; &#xC774;&#xB3D9; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC559; &#xB17C;&#xC7C1; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xB354; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD1B5;&#xD569; &#xD798; &#xC0DD;&#xC131; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;, &#xCD95; &#xC0AD;, &#xCD95; &#xC0AD;&#xACFC; &#xAE30;&#xD310; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC720;&#xCC29;&#xC758; &#xC810; &#xD0C4;&#xC131; &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD559;&#xC801; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD798; &#xBCF4;&#xC815; &#xBC14;&#xB298;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xB825;&#xC744; &#xCE21;&#xC815;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB370; &#xB3C4;&#xD0B9; &#xB41C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB85C; axonal &#xD504;&#xB808;&#xC784; &#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;. &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; axonal &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xCD94; &#xAC70;&#xB9AC; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B4;&#xB3D9;&#xACFC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xBC0F; axonal &#xC0E4;&#xD504;&#xD2B8; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC5D0;&#xB294; coverslip &#xB2EC;&#xB9AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC801;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xD798;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, (10 3 (9.6 x) 7.5 x 10 (3) Pa.s +) &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xC720;&#xCC29; laminin/polyornithine-&#xAE30;&#xBC18;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9C8;&#xCC30; &#xACC4;&#xC218; &#xBC0F; &#xCD95; &#xCD95; &#xC0AD; (3 &#xC5D1;&#xC2A4; &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; 2.4 x &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; Pa.s +) &#xC810;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xAC12; &#xC608;&#xC0C1;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC5EC;&#xBD80; axons &#xD301; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xB610;&#xB294; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC15;&#xC81C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xC131;&#xC758; &#xC218;&#xC900;, &#xCD95; &#xC0C9;, &#xC810;&#xB3C4; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xC720;&#xCC29;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xCE6D; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Axonal &#xC5F0;&#xC2E0; &#xC728;&#xC758; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xBAA8;&#xB378;: &#xD798;, &#xC810;&#xB3C4;, &#xBC0F; &#xC720;&#xCC29; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Si el marco axonal est&#xE1; parado o se mueve es un debate central en la biolog&#xED;a celular. Para entender mejor este problema, hemos desarrollado un modelo matem&#xE1;tico que incorpora la generaci&#xF3;n de fuerzas en el cono de crecimiento, las propiedades viscoel&#xE1;sticas del ax&#xF3;n, y adherencias entre el ax&#xF3;n y el sustrato. El uso de fuerza calibrado agujas para aplicar y medir fuerzas en el cono de crecimiento, hemos utilizado las mitocondrias se acopl&#xF3; como marcadores para monitorear el movimiento de la estructura axonal. Encontramos el transporte axonal coherente que la disminuci&#xF3;n fuera del cono de crecimiento. En base a los perfiles de velocidad de movimiento y la fuerza ejercida en el cono de crecimiento, y variando la fijaci&#xF3;n del eje axonal al cubreobjetos, estimamos valores para la viscosidad axial del ax&#xF3;n (3 x 10 (6) + / - 2,4 x 10 (6) Pa.s) y el coeficiente de fricci&#xF3;n para laminina / adherencias poliornitina basados &#x200B;&#x200B;a lo largo del ax&#xF3;n (9,6 x 10 (3) + / - 7,5 x 10 (3) Pa.s). Nuestro modelo sugiere que si los axones alargado por el crecimiento de la punta o estiramiento depende del nivel de generaci&#xF3;n de fuerza en el cono de crecimiento, la viscosidad del ax&#xF3;n, y el nivel de adherencias a lo largo del ax&#xF3;n.

Un modelo f&#xED;sico de elongaci&#xF3;n axonal: Fuerza, la viscosidad y adherencias rige la modalidad de TRANSFORMACIONES

&#x673A;&#x68B0;&#x7D27;&#x5F20;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x7279;&#x522B;&#x6709;&#x6548;&#x523A;&#x6FC0;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5173;&#x4E8E;&#x5B83;&#x5982;&#x4F55;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x65B0;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x6240;&#x77E5;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x6B64;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x8F74;&#x7A81;&#x5206;&#x652F;&#x70B9;&#x7684;&#x79FB;&#x52A8;&#x3001; &#x73E0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x76D1;&#x6D4B;&#x8F74;&#x7A81;&#x5BBD;&#x5EA6;&#x540C;&#x65F6;&#x505C;&#x9760;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6807;&#x8BB0;&#x8868;&#x660E;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x611F;&#x52A8;&#x7C98;&#x5F39;&#x6027;&#x62C9;&#x4F38;&#x548C;&#x5377;&#x6CBF;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x8865;&#x5145;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&quot;&#x5EF6;&#x957F;&quot;&#x4E0E;&quot;&#x589E;&#x957F;&quot;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8026;&#x5408;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x540C;&#x65F6;&#x53C8;&#x8FEB;&#x4F7F;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x6210;&#x957F;&#x548C;&#x7136;&#x540E;&#x6682;&#x505C;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A7;&#x5236;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x6216;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x7684;&#x5F20;&#x529B;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x7684;&#x5BBD;&#x5EA6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x8584;&#x671F;&#x95F4;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x9AD8;&#x548C;&#x52A0;&#x539A;&#x65F6;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x5904;&#x4E8E;&#x9759;&#x6B62;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x90E8;&#x961F;&#x5EF6;&#x957F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4F38;&#x5C55;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x51FA;&#x73B0;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x5728;&#x677E;&#x6563;&#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6CBF;&#x8F74;&#x7A81;&#x6570;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;

&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x4F38;&#x957F;&#x5185;&#x548C;&#x6CBF;&#x8F74;&#x7A81;&#x3002;

Mechanical tension is a particularly effective stimulus for axonal elongation, but little is known about how it leads to the formation of new axon. To better understand this process, we examined the movement of axonal branch points, beads bound to the axon, and docked mitochondria while monitoring axonal width. We found these markers moved in a pattern that suggests elongation occurs by viscoelastic stretching and volume addition along the axon. To test the coupling between "lengthening" and "growth," we measured axonal width while forcing axons to grow and then pause by controlling the tension applied to the growth cone or to the cell body. We found axons thinned during high rates of elongation and thickened when the growth cones were stationary. These findings suggest that forces cause lengthening because they stretch the axon and that growth occurs, in a loosely coupled step, by volume addition along the axon.

Growth and elongation within and along the axon.

La tension m&#xE9;canique est un stimulus particuli&#xE8;rement efficace pour une &#xE9;longation axonale, mais peu est connu sur la fa&#xE7;on dont elle conduit &#xE0; la formation de l&#x26;#39;axone nouvelle. Pour mieux comprendre ce processus, nous avons examin&#xE9; le mouvement de points de branchement axonal, perles li&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;axone, et a accost&#xE9; mitochondries tout en surveillant la largeur axonale. Nous avons trouv&#xE9; ces marqueurs d&#xE9;plac&#xE9; dans un sch&#xE9;ma qui sugg&#xE8;re l&#x26;#39;allongement se fait par visco&#xE9;lastique d&#x26;#39;&#xE9;tirement et de plus de volume le long de l&#x26;#39;axone. Pour tester le couplage entre &#x26;quot;allongement&#x26;quot; et &#x26;quot;croissance&#x26;quot;, nous avons mesur&#xE9; la largeur axonale tout en for&#xE7;ant les axones &#xE0; se d&#xE9;velopper et puis faire une pause en contr&#xF4;lant la tension appliqu&#xE9;e au c&#xF4;ne de croissance ou vers le corps cellulaire. Nous avons trouv&#xE9; des axones &#xE9;claircis au cours des taux &#xE9;lev&#xE9;s d&#x26;#39;allongement et &#xE9;paissi lorsque les c&#xF4;nes de croissance &#xE9;tait stationnaire. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que les forces de provoquer l&#x26;#39;allongement parce qu&#x26;#39;ils &#xE9;tirer l&#x26;#39;axone et que la croissance se produit, dans une &#xE9;tape &#xE0; couplage l&#xE2;che, par addition du volume le long de l&#x26;#39;axone.

La croissance et l&#x26;#39;&#xE9;longation en de&#xE7;&#xE0; et long de l&#x26;#39;axone

Mechanische Spannung ist besonders effektiv, Ansporn f&uuml;r axonale Dehnung, aber &uuml;ber wie es zur Bildung von neuen Axon f&uuml;hrt ist wenig bekannt. Um diesen Prozess besser zu verstehen wir die Bewegung der axonalen Zweigpunkte gepr&uuml;ft, Perlen an das Axon gebunden und Mitochondrien w&auml;hrend der &Uuml;berwachung axonale Breite angedockt. Wir fanden diese Marker in einem Muster, die vorschl&auml;gt, dass Dehnung erfolgt durch Viskoelastische Dehnung und Band zus&auml;tzlich entlang dem Axon bewegt. Um die Kopplung zwischen &quot;Verl&auml;ngerung&quot; und &quot;Wachstum&quot; zu testen, messen wir axonale Breite w&auml;hrend Axone wachsen und dann durch die Kontrolle der Spannung auf der Wachstumskegel angewendet oder auf dem Zellk&ouml;rper innehalten zwingen. Wir fanden die Axone verd&uuml;nnt, w&auml;hrend hohe Dehnung und verdickt, wenn die Wachstums-Zapfen station&auml;re waren. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass die Truppen, die Ursache verl&auml;ngern, denn sie das Axon Strecken und Wachstum, in einem lose gekoppelten Schritt durch Addition der Band entlang dem Axon auftritt.

Wachstum und Dehnung innerhalb und entlang dem Axon.

Tensione meccanica &egrave; uno stimolo particolarmente efficacia per allungamento assonale, ma poco si sa circa quanto conduce alla formazione di nuovi assoni. Per capire meglio questo processo, abbiamo esaminato il movimento dei punti di ramo assonale, perline associato all&#39;assone e ancorato mitocondri mentre monitoraggio larghezza assonale. Abbiamo trovato questi marcatori si trasfer&igrave; in un modello che suggerisce l&#39;allungamento si verifica tramite l&#39;aggiunta di volume e allungamento viscoelastico lungo l&#39;assone. Per verificare l&#39;accoppiamento tra &quot;allungamento&quot; e &quot;crescita&quot;, abbiamo misurato la larghezza assonale mentre costringendo assoni di crescere e poi pausa controllando la tensione applicata per il cono di crescita o per il corpo cellulare. Abbiamo trovato assoni assottigliata durante alti tassi di allungamento e addensato quando i coni di crescita sono stati stazionari. Questi risultati suggeriscono che le forze di causa allungamento perch&eacute; si allunga l&#39;assone e che crescita si verifica, in una fase di accoppiamento, con aggiunta di volume lungo l&#39;assone.

Crescita e allungamento all&#39;interno e lungo l&#39;assone.

&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x5F35;&#x529B;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x523A;&#x6FC0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x5206;&#x5C90;&#x70B9;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x5E45;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C9;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306F;&#x4F38;&#x3073;&#x304C;&#x4F38;&#x3073;&#x7C98;&#x5F3E;&#x6027;&#x3068;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x6DFB;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x5F35;&#x529B;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x4E00;&#x6642;&#x505C;&#x6B62;&#x3057;&#x3066;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3001;&#x5F37;&#x5236;&#x7684;&#x306B;&#x4E2D;&#x306B; &#x26;quot;&#x5EF6;&#x9577;&#x26;quot;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F; &#x26;quot;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x3001;&#x26;quot;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x5E45;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x4F38;&#x9577;&#x7387;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x6642;&#x306B;&#x9593;&#x4F10;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x304C;&#x9759;&#x6B62;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x539A;&#x304F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3092;&#x4F38;&#x3070;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x304C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x6DFB;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x758E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x305F;&#x3081;&#x8ECD;&#x306F;&#x9577;&#x304F;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x8EF8;&#x7D22;&#x5185;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x4F38;&#x3073;

&#xAE30;&#xACC4;&#xC2DD; &#xC7A5;&#xB825; axonal &#xC2E0;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC57D;&#xAC04; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCD95; &#xC0AD; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xB9AC;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; axonal &#xBD84;&#xAE30; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784; &#xAC80;&#xC0AC;, &#xAD6C;&#xC2AC; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xBA70; axonal &#xD3ED;&#xC744; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xB97C; &#xB3C4;&#xD0B9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xC9C0;&#xB2C8;&#xB294; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xCE6D; &#xBC0F; &#xBCFC;&#xB968; &#xCD94;&#xAC00; &#xC81C;&#xC548; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xC774;&#xB3D9;&#xC774; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &quot;&#xAE38;&#xC774;&quot;&#xC640; &quot;&#xC131;&#xC7A5;&quot; &#xAC04;&#xC758; &#xACB0;&#xD569; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;, axons &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xB610;&#xB294; &#xC140; &#xBC14;&#xB514; &#xC801;&#xC6A9; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; &#xC77C;&#xC2DC; &#xC911;&#xC9C0;&#xB97C; &#xAC15;&#xC694; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; axonal &#xB108;&#xBE44;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xC2E0; &#xC728;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC911; &#xBC15; &#xD615; &#xACE0; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xACE0;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C; &#xB450;&#xAEBC;&#xC6CC; axons&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xCE6D;&#xACFC; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC1C;&#xC0DD;, &#xB290;&#xC2A8;&#xD558;&#xAC8C; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xBCFC;&#xB968; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xAE38;&#xC5B4; &#xC6D0;&#xC778; &#xAC15;&#xC81C;&#xB85C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xB0B4;&#xACFC; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xB530;&#xB77C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La tensi&#xF3;n mec&#xE1;nica es un est&#xED;mulo particularmente eficaz para la elongaci&#xF3;n axonal, pero poco se sabe sobre la forma en que conduce a la formaci&#xF3;n del ax&#xF3;n nuevo. Para entender mejor este proceso, se analiz&#xF3; el movimiento de los puntos de ramificaci&#xF3;n axonal, cuentas ligadas al ax&#xF3;n, y se acopl&#xF3; mitocondrias mientras que el control de ancho axonal. Hemos encontrado estos marcadores movido en un patr&#xF3;n que sugiere alargamiento se produce por viscoel&#xE1;stico estiramiento y adem&#xE1;s el volumen a lo largo del ax&#xF3;n. Para probar el acoplamiento entre el &#x26;quot;alargamiento&#x26;quot; y &#x26;quot;crecimiento&#x26;quot; medido que ancho axonal mientras que obliga a los axones de crecer y luego hacer una pausa por el control de la tensi&#xF3;n aplicada al cono de crecimiento o para el cuerpo celular. Hemos encontrado los axones adelgazados en las altas tasas de elongaci&#xF3;n y se espes&#xF3; cuando los conos de crecimiento eran estacionarios. Estos hallazgos sugieren que las fuerzas de provocar el alargamiento porque estiran el ax&#xF3;n y que el crecimiento se produce, en una etapa de acoplamiento flexible, mediante la adici&#xF3;n de volumen a lo largo del ax&#xF3;n.

El crecimiento y el alargamiento dentro ya lo largo del ax&#xF3;n

&#x968F;&#x7740;&#x5E74;&#x9F84;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x4E00;&#x7EA7;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x4EC0;&#x4E48;&#x51FA;&#x73B0;&#x8FD9;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0D;&#x5F88;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;

&#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x653E;&#x7F13;&#x662F;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x589E;&#x52A0;&#x8F74;&#x7A81;&#x7C98;&#x5EA6;&#x9648;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x3002;

As we age, the speed of axonal regeneration declines. At the biophysical level, why this occurs is not well understood.

Slowing of axonal regeneration is correlated with increased axonal viscosity during aging.

Comme nous vieillissons, la vitesse de la baisse de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration axonale. Au niveau biophysique, pourquoi cela se produit n&#x26;#39;est pas bien comprise.

Le ralentissement de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration axonale est corr&#xE9;l&#xE9;e avec une viscosit&#xE9; accrue axonale Au cours du vieillissement

Wenn wir &auml;lter werden, sinkt die Geschwindigkeit der axonalen Regeneration. Auf der biophysikalischen Ebene, warum dies geschieht ist nicht gut verstanden.

Verlangsamung der axonalen Regeneration ist mit erh&ouml;hten axonale Viskosit&auml;t w&auml;hrend der Alterung korreliert.

Come l&#39;et&agrave;, la velocit&agrave; di rigenerazione assonale declina. A livello biofisico, perch&eacute; questo si verifica non &egrave; ben compreso.

Rallentamento della rigenerazione assonale &egrave; correlata con la maggiore viscosit&agrave; assonale durante l&#39;invecchiamento.

&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x5E74;&#x9F62;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x4E0B;&#x843D;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C9;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x7406;&#x7531;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x8EF8;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x6E1B;&#x901F;&#x306F;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E2D;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x8EF8;&#x7D22;&#x7C98;&#x5EA6;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2DC;&#xB300;, axonal &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xC720;&#xB294; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Axonal &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xB454;&#xD654;&#xB294; &#xB178;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC99D;&#xAC00; axonal &#xC810;&#xB3C4;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;.

A medida que envejecemos, disminuye la velocidad de la regeneraci&#xF3;n axonal. A nivel biof&#xED;sico, &#xBF;por qu&#xE9; esto ocurre no se entiende bien.

Phillip Lamoureux

Department of Zoology

Michigan State University, East Lansing

Mechanical Manipulation of Neurons to Control Axonal Development

Phillip Lamoureux

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Zoology

Michigan State University, East Lansing

Mechanical Manipulation of Neurons to Control Axonal Development

Department of Zoology