Patch Clamp Recordings in Inner Ear Hair Cells Isolated from Zebrafish

Patch  clamp analyses of the voltage-gated channels in sensory hair cells isolated  from a variety of species have been described previously1-4 but this  ...

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from <em>Xenopus</em> Nerve-muscle Co-cultures

Much information about the coupling of  presynaptic ionic currents with the release of neurotransmitter has been obtained  from invertebrate preparations, ...

Pepperdine University

David Geffen School of Medicine at UCLA

&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x819C;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) K(+) (BK &#x6216; Maxi K) &#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x5355;&#x901A;&#x9053;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x6D45;&#x6EE9;&#x6E20;&#x9053;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0E;&#x6210;&#x719F;/&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF1A; &#x91CA;&#x653E;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x9762; bouton &#x6837;&#x7A81;&#x89E6;&#x9759;&#x8109;&#x66F2;&#x5F20;&#x4E0E;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x7684;&#x6700;&#x9AD8;&#x548C;&#x6700;&#x4F4E;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x63A5;&#x89E6;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9759;&#x8109;&#x66F2;&#x5F20;&#x3002;&#x7ECF;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x7684;&#x901A;&#x9053; (K(d) = 7.7 microM + 20 &#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x5728; mV) &#x4F4E;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x7684;&#x6D45;&#x6EE9;&#x6E20;&#x9053;&#x3002;&#x5E0C;&#x5C14;&#x7CFB;&#x6570; 1.5 &#x81F3; 2.8 &#x4E0D;&#x540C;&#x6F5C;&#x80FD;&#x548C;&#x5F00;&#x653E;&#x6982;&#x7387;&#x589E;&#x52A0; e-&#x6298;&#x6BCF; 16 mV &#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x968F;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217; [Ca(2+)](i) 1 microM &#x81F3; 1 &#x6BEB;&#x7C73;&#x3002;&#x6574;&#x4F53;&#x5F0F;&#x9632;&#x9759;&#x7535;&#x5355; BK &#x901A;&#x9053;&#x7535;&#x6D41;&#x6700;&#x5927;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7387;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E9A;&#x6BEB;&#x79D2;&#x7EA7;&#x8303;&#x56F4; &gt; = + 20 &#x6216; mV&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x5927;&#x7EA6; 10 &#x500D;&#x54CD;&#x5E94; [Ca(2+)](i) &#x4ECE; 1 &#x589E;&#x52A0;&#x5230; 100 microM&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EA;&#x6709;&#x7EA6; 2 &#x6298;&#x9875;&#x589E;&#x52A0;&#x7535;&#x538B;&#x53D8;&#x5316;&#x4ECE; + 20 &#x81F3; + 130 mV&#x3002;&#x6700;&#x5FEB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684; BK &#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDE;&#x63A5;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x5728;&#x91CC;&#x9762;&#x51FA;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E0E; [Ca(2+)](i) 100 microM &#x6216;&#x66F4;&#x591A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x5F88;&#x591A;&#x6D45;&#x6EE9;&#x6E20;&#x9053;&#x975E;&#x5E38;&#x63A5;&#x8FD1;&#x9499;&#x901A;&#x9053;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x3002;&#x9274;&#x4E8E;&#x4F4E;&#x7ECF;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x548C;&#x5FEB;&#x901F;&#x7ECF;&#x89E3;&#x9664;&#x7ED1;&#x5B9A;/&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5C5E;&#x6027;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; BK &#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x51C6;&#x5907;&#x9002;&#x5E94;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x662F;&#x672C;&#x5730; [&#x7ECF;] &#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x7406;&#x60F3;&#x8BB0;&#x8005;&#x3002;

&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7684; BK &#x901A;&#x9053;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x7535;&#x673A;&#x795E;&#x7ECF;&#x672B;&#x68A2;&#x3002;

Single channel properties of Ca(2+)-activated K(+) (BK or Maxi-K) channels have been investigated in presynaptic membranes in Xenopus motoneurone-muscle cell cultures. The occurrence and density of BK channels increased with maturation/synaptogenesis and was not uniform: highest at the release face of bouton-like synaptic varicosities in contact with muscle cells, and lowest in varicosities that did not contact muscle cells. The Ca(2+) affinity of the channel (K(d)= 7.7 microM at a membrane potential of +20 mV) was lower than those of BK channels that have been characterized in other terminals. Hill coefficients varied between 1.5 and 2.8 at different potentials and open probability increased e-fold per 16 mV change in membrane potential over a range of [Ca(2+)](i) from 1 microM to 1 mM. The maximal activation rate of ensembled single BK channel currents was in the submillisecond range at > or =+20 mV. The activation rate increased approximately 10-fold in response to a [Ca(2+)](i) increase from 1 to 100 microM, but increased only approximately 2-fold with a voltage change from +20 to +130 mV. The fastest activation kinetics of BK channels in cell-attached patches resembled that in inside-out patches with [Ca(2+)](i) of 100 microM or more, suggesting that many BK channels are located very close to calcium channels. Given the low Ca(2+) affinity and rapid Ca(2+) binding/unbinding properties, we conclude that BK channels in this preparation are adapted to play an important role in regulation of neurotransmitter release, and they are ideal reporters of local [Ca(2+)] at the inner membrane surface.

Electrophysiological properties of BK channels in Xenopus motor nerve terminals.

Monocanal propri&eacute;t&eacute;s des canaux activ&eacute;s par Ca(2+) k (BK ou Maxi-K) ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;es dans les membranes pr&eacute;synaptiques dans les cultures de cellules de muscle-motoneurones Xenopus. La pr&eacute;sence et la densit&eacute; des canaux de BK augmente avec la maturation/synaptog&eacute;n&egrave;se et n&#39;&eacute;tait pas uniformes : plus haut &agrave; la face de sortie de type bouton synaptiques varicosit&eacute;s au contact des cellules musculaires et le plus bas dans les varicosit&eacute;s qui n&#39;a pas contact&eacute; les cellules musculaires. L&#39;affinit&eacute; de la Ca(2+) du canal (K(d) = 7,7 microM &agrave; un potentiel de membrane de + 20 mV) &eacute;tait inf&eacute;rieur &agrave; celui des canaux de BK qui ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;s dans d&#39;autres terminaux. Coefficients de Hill varient entre 1,5 et 2,8 &agrave; potentiels diff&eacute;rents et la probabilit&eacute; d&#39;ouverture augment&eacute;e e-pli / 16 mV change dans le potentiel de membrane sur une gamme de [Ca(2+)](i) de 1 microM &agrave; 1 mM. Le taux d&#39;activation maximale de &amp;amp; courants des canaux BK unique se situait &agrave; submillisecond &gt; ou = + 20 mV. Le taux d&#39;activation a augment&eacute; d&#39;environ 10 fois en r&eacute;ponse &agrave; un [Ca(2+)](i) augmenter de 1 &agrave; 100 microM, mais a augment&eacute; de seulement environ 2 fois avec un changement de tension de + 20 &agrave; + 130 mV. La cin&eacute;tique d&#39;activation plus rapide des canaux de BK dans les patchs cellule-attach&eacute;e ressemble &agrave; celle de patches inside-out avec [Ca(2+)](i) de microM 100 ou plus, ce qui sugg&egrave;re que de nombreux canaux de BK est tr&egrave;s proches des canaux calciques. Compte tenu de la faible affinit&eacute; Ca(2+) et les propri&eacute;t&eacute;s de liaison/dissocier Ca(2+) rapides, nous concluons que les canaux de BK dans cette pr&eacute;paration sont adapt&eacute;s &agrave; jouer un r&ocirc;le important dans la r&eacute;gulation de la lib&eacute;ration des neurotransmetteurs, et ils sont id&eacute;ales reporters locaux [Ca(2+)] &agrave; la surface de la membrane interne de.

Les propri&eacute;t&eacute;s &eacute;lectrophysiologiques des canaux de BK chez Xenopus automobiles de terminaisons nerveuses.

Einkanal-Eigenschaften Ca(2+) aktivierte K(+) (BK oder Maxi-K)-Kan&auml;le wurden in pr&auml;synaptischen Membranen in Xenopus-Motoneurone-Muskel-Zellkulturen untersucht. Das auftreten und die Dichte der BK-Kan&auml;le mit Reifung/Synaptogenese erh&ouml;ht und war nicht einheitlich: auf das Freigabe-Gesicht des synaptische Bouton-wie Krampfadern in Kontakt mit Muskelzellen h&ouml;chsten und am niedrigsten in Varikose, die Muskelzellen nicht kontaktiert. Die Ca(2+)-Affinit&auml;t des Kanals (K(d) = 7.7 MicroM eine Membran-Potential von + 20 mV) war niedriger als die der BK-Kan&auml;le, die in anderen Terminals gepr&auml;gt haben. Hill-Koeffizienten schwankte zwischen 1,5 und 2,8 auf unterschiedliche Potentiale und offene Wahrscheinlichkeit erh&ouml;ht e-Fach pro 16 mV &Auml;nderung der Membran potenzielle &uuml;ber einen Bereich von [Ca(2+)](i) aus 1 MicroM bis 1 mM. Die maximale Aktivierung ensembled einzelnen BK Kanal Str&ouml;me lag im Bereich von submillisekundenschnelle bei &gt; oder = + 20 mV. Die Aktivierung erh&ouml;ht etwa 10fach verbesserter in Reaktion auf eine [Ca(2+)](i) von 1 auf 100 MicroM erh&ouml;hen, sondern erh&ouml;ht nur ca. 2-fach mit einer Spannungs&auml;nderung von + 20 bis + 130 mV. Die schnellste Aktivierung-Kinetik der BK-Kan&auml;le in Zelle verbundene Flecken &auml;hnelte dem Inside-Out-Patches mit [Ca(2+)](i) von MicroM 100 oder mehr, was darauf hindeutet, dass viele BK-Kan&auml;le befinden sich ganz in der N&auml;he von Kalzium-Kan&auml;le. Angesichts der niedrigen Ca(2+) Affinit&auml;t und schnelle Ca(2+) binden/Bindung an Eigenschaften, schlie&szlig;en wir, dass die BK-Kan&auml;le in dieser Zubereitung eine wichtige Rolle in der Regulierung der Neurotransmitter-Freisetzung spielen angepasst sind und sie sind ideale Reporter der lokalen [Ca(2+)] an die innere Membran-Oberfl&auml;che.

Elektrophysiologische Eigenschaften des BK-Kan&auml;le in Xenopus motor Nervenenden.

Propriet&agrave; del singolo canale dei canali attivati da Ca(2+) K(+) (BK o Maxi-K) sono state indagate in membrane presinaptiche in colture cellulari di Xenopus motoneurone-muscolare. La ricorrenza e la densit&agrave; di canali BK aumentato con maturazione/pervasivi e non era uniforme: pi&ugrave; alto il volto di rilascio di simil-bouton sinaptico varicosit&agrave; a contatto con le cellule muscolari e pi&ugrave; basso in varicosit&agrave; che ha fatto non a contatto con le cellule muscolari. L&#39;affinit&agrave; di Ca(2+) del canale (K(d) = 7,7 microM a un potenziale di membrana di + 20 mV) era inferiore a quelli dei canali BK che sono state caratterizzate in altri terminali. Coefficienti di Hill variavano tra 1,5 e 2,8 a potenziali differenti e aperto probabilit&agrave; aumentata e piega per 16 mV cambiamento nel potenziale di membrana in un intervallo di [Ca(2+)](i) da 1 microM di 1 mM. Il tasso di attivazione massimale di ensembled correnti di canale BK singole era nella gamma submillisecond a &amp;gt; o = + 20 mV. Il tasso di attivazione aumentata circa 10 volte in risposta a un [Ca(2+)](i) aumentare da 1 a 100 microM, ma solo circa 2 volte maggiore con una variazione di tensione da + 20 a + 130 mV. La cinetica di attivazione pi&ugrave; veloce dei canali BK in cella-attached patch che assomigliava in inside out patch con [Ca(2+)](i) di 100 microM o pi&ugrave;, suggerendo che molti canali BK sono situati molto vicino ai canali del calcio. Data la bassa affinit&agrave; Ca(2+) e propriet&agrave; di associazione/disassocia rapida Ca(2+), concludiamo che BK canali in questa preparazione sono adattati a svolgere un ruolo importante nella regolazione del rilascio di neurotrasmettitore, e sono ideali ai giornalisti locali [Ca(2+)] alla superficie della membrana interna.

Propriet&agrave; elettrofisiologiche dei canali BK in Xenopus motore di terminali nervosi.

Ca(2+) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x65BC;&#x3044;&#x3066;&#x30DE;&#x30AD;&#x30B7; K (BK) &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB; motoneurone &#x7B4B;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x819C;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;.&#x767A;&#x751F;&#x3068; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5897;&#x52A0;&#x6210;&#x719F;/&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x5747;&#x4E00;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;: &#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9; varicosities &#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x9854;&#x3067;&#x6700;&#x9AD8;&#x3068;&#x6700;&#x4F4E;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9023;&#x7D61;&#x3092;&#x53D6;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F; varicosities &#x3067;&#x3002;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x89AA;&#x548C;&#x6027; (K(d) = 7.7 microM &#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092; +20 mV) &#x4ED6;&#x306E;&#x7AEF;&#x672B;&#x3067;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3088;&#x308A;&#x4F4E;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;1.5 &#x3068;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3068;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x78BA;&#x7387;&#x306E;&#x5897;&#x52A0; e &#x500D; 16 mV &#x306E;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x5909;&#x5316;&#x3042;&#x305F;&#x308A; 2.8 &#x306E;&#x9593;&#x4E18;&#x4FC2;&#x6570;&#x3092;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306F; 1 microM &#x304B;&#x3089; i &#x306F; 1 mM&#x3002;Ensembled &#x5358;&#x4E00; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x7387;&#x3067;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DF;&#x30EA;&#x79D2;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x76EE;&#x307E;&#x305F;&#x306F; = +20 mV&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x7387;&#x306F;&#x7D04; 10 &#x500D;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;[Ca(2+)](i) 1 &#x304B;&#x3089; 100 &#x306E; microM &#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x3001;+20 &#x304B;&#x3089; 130 &#x306E;&#x96FB;&#x5727;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x307F;&#x7D04;&#x500D;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F; mV&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x6700;&#x901F;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x8AD6;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9; &#x30A2;&#x30A6;&#x30C8; &#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3068; i 100 microM &#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x4F4E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3068;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;/&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x89E3;&#x9664;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3053;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x306F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB; [&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;] &#x5185;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x3067;&#x306E;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x8A18;&#x8005;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D42;&#x672B;&#x3092;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

(&#xBCF4; &#xB9AC; &#xB610;&#xB294; &#xB9E5;&#xC2DC;-K) K(+) Ca(2+) &#xD65C;&#xC131; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xCC44;&#xB110; &#xC18D;&#xC131; Xenopus motoneurone &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; presynaptic &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC1C;&#xC0DD;&#xACFC; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC131;&#xC219;/synaptogenesis&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xB2C8;&#xD3FC;&#xC774; &#xC544;&#xB2C8;&#xC5C8;&#xB2E4;: bouton &#xAC19;&#xC740; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; varicosities &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC811;&#xCD09;&#xC758; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC5BC;&#xAD74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xACE0; &#xBC0F; &#xCD5C;&#xC800; varicosities &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC5F0;&#xB77D; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xCC44;&#xB110;&#xC758; Ca(2+) &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; (K(d) + 20&#xC758; &#xB9C9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC5D0; 7.7 microM = mV) &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xB9D0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC758; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740;. [1Mm 1 Microm&#xC5D0;&#xC11C; Ca(2+)](i) &#xBC94;&#xC704; 1.5&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC640; &#xC624;&#xD508; &#xD655;&#xB960; &#xC99D;&#xAC00; &#xC804;&#xC790; &#xBC30; &#xB9C9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; 16 mV &#xBCC0;&#xD654; &#xB2F9; 2.8 &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD790; &#xACC4;&#xC218;. Ensembled &#xB2E8;&#xC77C; BK &#xCC44;&#xB110; &#xC804;&#xB958; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; submillisecond &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &amp;gt; &#xB610;&#xB294; + 20 = mV. &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC57D; &#xC0AC;&#xC9C4;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558;&#xB294; [Ca(2+)](i) 100 microM 1&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC804;&#xC555; &#xBCC0;&#xACBD; + 20&#xC5D0;&#xC11C; + 130&#xB9CC; &#xC57D; 2-fold &#xC99D;&#xAC00; mV. &#xC140; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD328;&#xCE58;&#xC5D0; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xBE60;&#xB978; &#xC778;&#xC99D; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC544;&#xC6C3; &#xD328;&#xCE58; [Ca(2+)](i) 100 microM &#xC774;&#xC0C1; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110;&#xC740; &#xCE7C;&#xC298; &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC00;&#xAE5D;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC640; &#xADF8;&#xB97C; &#xB2EE;&#xC740;. &#xB0AE;&#xC740; Ca(2+) &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xBE60;&#xB978; Ca(2+) &#xBC14;&#xC778;&#xB529;/&#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xAC10;&#xC548;&#xD560; &#xB54C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC774; &#xC900;&#xBE44; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110; &#xC801;&#xC751; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB85C;&#xCEEC; [Ca(2+)] &#xB0B4;&#xBD80; &#xB9C9; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xC790;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;.

&#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110; Xenopus electrophysiological &#xC18D;&#xC131; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;.

Propiedades de canal &uacute;nico de canales de k Ca(2+)-activado (BK o Maxi-K) han sido investigados en las membranas presin&aacute;pticas en cultivos de c&eacute;lulas de m&uacute;sculo motoneurona Xenopus. La ocurrencia y la densidad de los canales BK aument&oacute; con maduraci&oacute;n/sinaptog&eacute;nesis y no fue uniformes: mayor en la cara de la liberaci&oacute;n de v&aacute;rices sin&aacute;pticas bouton-como en contacto con las c&eacute;lulas musculares y menor en v&aacute;rices que no contacto con las c&eacute;lulas musculares. La afinidad de la CA del canal (K(d) = 7.7 microM en un potencial de membrana de + 20 mV) fue inferior a los de los canales BK que se han caracterizado en otros terminales. Coeficientes de colina variaron entre 1.5 y 2.8 en diferentes potenciales y abierto probabilidad aumentada e veces por 16 mV cambio en el potencial de membrana en un rango de [Ca(2+)](i) de 1 microM a 1 mM. La tasa m&aacute;xima activaci&oacute;n de armados corrientes de canal BK solas estaba en la gama de submillisecond en &gt; = + 20 mV. La tasa de activaci&oacute;n aument&oacute; aproximadamente 10 veces en respuesta a una [Ca(2+)](i) aumentar de 1 a 100 microM, pero aument&oacute; s&oacute;lo aproximadamente 2 con un cambio de voltaje de + 20 a + 130 mV. La cin&eacute;tica de activaci&oacute;n m&aacute;s r&aacute;pida de los canales BK en parches de conexi&oacute;n celular asemej&oacute; en parches de adentro hacia afuera con [Ca(2+)](i) de microM 100 o m&aacute;s, lo que sugiere que muchos canales de BK se encuentra muy cerca de los canales de calcio. Dada la baja afinidad de CA y propiedades de uni&oacute;n/desuni&oacute;n de CA r&aacute;pidas, concluimos que los canales BK en esta preparaci&oacute;n se adaptan a desempe&ntilde;ar un papel importante en la regulaci&oacute;n de la liberaci&oacute;n de neurotransmisores, y son ideales reporteros locales [CA] en la superficie de la membrana interna.

Bruce Yazejian

Natural Science Division

Pepperdine University

Patch Clamp Recordings in Inner Ear Hair Cells Isolated from Zebrafish

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

Bruce Yazejian

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Pepperdine University

Patch Clamp Recordings in Inner Ear Hair Cells Isolated from Zebrafish

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

Natural Science Division