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Method Article
Protokolle für die Nutzung offenes System fließen Biofilmen mit Tropf Strömungsreaktoren und rotierenden Scheibe Reaktoren sind im Detail vorgestellt.
Die meisten Mikroben in der Natur gedacht, als Aufputz-assoziierten Gemeinschaften in Biofilmen existieren. 1 Bakterielle Biofilme sind in einer Matrix umgeben und an einer Oberfläche. 2 Biofilmbildung und Entwicklung sind häufig im Labor mit der Batch-Systeme, wie Mikrotiterplatten oder Durchfluss studiert Systeme, wie zB Flow-Zellen. Diese Methoden sind nützlich für das Screening von Mutanten und chemischen Bibliotheken (Mikrotiterplatten) 3 oder wachsende Biofilme zur Visualisierung (flow-Zellen) 4. Hier präsentieren wir Ihnen detaillierte Protokolle für den Anbau von Staphylococcus aureus in zwei weitere Arten von Flow-System Biofilme: die Tropf-Flow Biofilmreaktor und der rotierenden Scheibe Biofilmreaktor.
Drip flow Biofilm Reaktoren sind für die Untersuchung von Biofilmen unter geringer Scherung Bedingungen angebaut konzipiert. 5 Der Tropf Reaktor besteht aus vier parallelen Test-Kanäle, einer Kapazität von jeweils einem Standard-Glasobjektträger großen Coupon oder eine Länge von Katheter oder Stint. Die Tropf-Flow-Reaktor ist ideal für Mikrosensorik Überwachung, allgemeine Biofilm Studien, Biofilm Kryoschneiden Proben, hohe Produktion von Biomasse, medizinisches Material Auswertungen und innewohnenden medical device testing. 6,7,8,9
Die rotierende Scheibe Reaktor besteht aus einem Teflon-Platte mit Aussparungen für herausnehmbare Coupons. 10 Die herausnehmbare Coupons können von jedem zerspanbaren Material. Der Boden der rotierenden Scheibe enthält einen Stabmagneten, damit Plattenrotation zu Flüssigkeitsoberfläche Scher über flächenbündige Coupons zu erstellen. Die gesamte Festplatte mit 18 Coupons ist in einem 1000 mL Glas Seitenarm Reaktor vorgelegt. Eine flüssige Nährmedien wird durch den Behälter zirkuliert, während die Festplatte durch einen Magnetrührer gedreht wird. Die Coupons werden aus dem Reaktor entnommen und dann abgeschabt, um den Biofilm Probe für weitere Untersuchungen oder Mikroskopie zu sammeln. Rotating Disc Reaktoren sind für Laboruntersuchungen von Biozid-Wirksamkeit, Biofilmentfernung und Leistung von Anti-Fouling-Materialien entwickelt. 9,11,12,13
1. Die Drip Flow-Biofilm-Reaktor
2. Die rotierende Scheibe Biofilm Reactor
3. Repräsentative Ergebnisse
Ein Beispiel für eine Einrichtung Tropf Reaktor ist, wenn Abbildung 1 dargestellt. Nach drei Tagen fließen reichlich Biofilm wird auf dem Coupon Oberfläche, 2A akkumulieren. Die gesamte Biomasse ist abhängig von Bakterienstämmen und präzise Wachstumsbedingungen. Eine rasterelektronenmikroskopische Aufnahme eines S. aureus Biofilm in den Tropf Reaktor aufgewachsen ist in Abbildung 2B gezeigt.
Eine rotierende Scheibe Reaktor ist in Abbildung 3A gezeigt. Das Protokoll beschrieben, kann auf die spezifischen Anforderungen in der Regel keine Mikroorganismus, der Bildung eines Biofilms angepasst werden. Abbildung 3B zeigt die sich drehende Scheibe mit 18 Kunststoff-Platten angebracht. Diese Platte gewachsenen Biofilmen sind besonders gut für antimikrobielle Tests geeignet und liefern gut reproduzierbare Ergebnisse 11.
Abbildung 1. Der Tropf Reaktor-Setup. Wichtige Komponenten sind beschriftet.
Abbildung 2. Beispiel für einen Tropf flow S. aureus Biofilm. A) Dieser Biofilm wurde drei Tage nach dem beschriebenen Protokoll gewachsen. Deckel aus den ersten beiden Kammern des Reaktors entfernt werden, um die gelbe S. zeigen aureus Biofilm Biomasse. B) Sacnning elektronenmikroskopische Aufnahme eines S. aureus Biofilm in den Tropf Reaktor aufgewachsen.
Abbildung 3. Die rotierende Scheibe Reaktor. A) Beispiel für ein laufendes Spinning-Disk-Reaktor. Key-Komponente gekennzeichnet sind. B) Nahaufnahme einer sich drehenden Scheibe.
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Biofilme in verschiedenen Reaktoren gezüchtet wird, haben oft unterschiedliche Eigenschaften und jeden Reaktor verfügt über verschiedene Anwendungen. In dieser Arbeit beschreiben wir die Verwendung von zwei Biofilmreaktoren: einen Tropf flow Biofilmreaktor und einer rotierenden Scheibe Reaktor. Drip Strömungsreaktoren sind nützlich für den Anbau von geringer Scherung Biofilmen bei einem Luft-Flüssigkeit-Grenzfläche und sind für eine Vielzahl von Bedingungen. Wir finden sie sehr bequem für Studien, in denen ein...
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NIAID gewähren K22AI081748.
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Name | Company | Catalog Number | Comments |
Drip Flow Reactors | BioSurface Technologies Corporation | DFR 110 | |
Rotating Disk Reactors | BioSurface Technologies Corporation |
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