Beginnen Sie mit einer Spreiztechnik mit einer chirurgischen Schere, um die Atemwege der beschafften Schweinelunge vorsichtig freizulegen. Suchen Sie zunächst den größten Atemweg, der typischerweise einen Durchmesser von zwei bis vier Zentimetern hat. Verwenden Sie dann eine Pinzette, um die Länge der Atemwege bis zu einer Tiefe von einem Zentimeter abzutasten.
Zum Schluss halten Sie die OP-Schere parallel zu den Atemwegen und führen die geschlossenen Spitzen in das Gewebe ein, das die unsichtbaren Atemwege umgibt. Öffnen Sie vorsichtig die chirurgische Schere, um die umgebende Membran auseinanderzuziehen. Nehmen Sie die Schere heraus und schneiden Sie kein Gewebe ab.
Wiederholen Sie diesen Vorgang mit Unterbrechungen, um die Atemwege weiter freizulegen. Schneiden Sie mit der chirurgischen Schere die Atemwege an den Verzweigungspunkten ab und präparieren Sie entlang jeder Äste unabhängig voneinander. Trennen Sie Regionen der Atemwege, sobald Sie sicher sind, dass die intakten Enden identifizierbar und leicht zu lokalisieren bleiben.
Legen Sie durchtrennte Bereiche der Atemwege in den entsprechenden Schlauch, wobei die Größe der durchtrennten Regionen zwischen einem und fünf Zentimetern lang ist und die Breite je nach relativer Position entlang des Atemwegsbaums variiert. Üben Sie sanften Druck auf das Gefäßsystem aus, um es freizulegen, und ziehen Sie es langsam von den Atemwegen weg. Lassen Sie die Gefäße leicht dehnen und verwenden Sie eine chirurgische Schere, um sie weiter von den Atemwegen zu trennen.
Vermeiden Sie es, zu viel Druck auszuüben, da dies das Gefäßsystem zerreißen kann. Sobald die Verzweigungsstelle im Gefäßbaum freigelegt ist, führen Sie die geschlossenen Spitzen der OP-Schere knapp unterhalb der Verzweigungsstelle und zwischen den beiden entsprechenden Gefäßregionen ein. Öffnen Sie dann langsam die Schere, um das darunter liegende Gewebe auseinander zu spreizen.
Verwenden Sie zeitweise eine Pinzette, um das auseinandergespreizte Gewebe und alle anderen Gewebe, die das Gefäßsystem direkt umgeben, zu entfernen. Durchtrennen Sie das Gefäßsystem an einer Verzweigungsstelle, wenn es Regionen der Atemwege bedeckt oder für jeden Dissektionsschritt umständlich wird. Anschließend sezieren Sie entlang eines der beiden Zweige unabhängig voneinander.
Vergewissern Sie sich, dass die beiden Enden des Gefäßsystems identifizierbar und für eine weitere Präparation leicht lokalisiert werden können. Trennen Sie dann die Regionen des Gefäßsystems. Um das Alveolargewebe zu entfernen, lokalisieren Sie eine Region des Gewebes, die sich nicht in der Nähe der Atemwege oder des Gefäßsystems befindet.
Kneifen Sie einen kleinen Bereich des Gewebes zusammen, der frei von Gefäßen oder Atemwegen zu sein scheint, und reißen Sie das eingeklemmte Gewebe aus der Lunge. Alveolargewebe ist in der Lunge weit verbreitet und sollte während der gesamten Dissektion entfernt werden. Beobachten Sie den Bereich des entnommenen Gewebes und bestätigen Sie, ob es sich um Alveolargewebe handelt oder nicht.
Dieses Verfahren wurde auf ein menschliches Lungenmodell angewendet. Eine massenspektrometrische Analyse des exzidierten Gewebes zeigte, dass die EZM-Zusammensetzung zwischen einzelnen Regionen der dezellularisierten Lunge variiert, einschließlich der gesamten Lungen-EZM, der alveolär angereicherten EZM, der Atemwegs-EZM und der Gefäß-EZM. In dezellularisierten Lungen, die von Patienten ohne Lungenerkrankung in der Vorgeschichte gewonnen wurden, stiegen die Basalmembran-assoziierten Proteine in der alveolär angereicherten EZM an.
Gleichzeitig wurde die EZM der Atemwege mit knorpelassoziiertem EZM-Protein wie Aggrecan angereichert. Die Gefäß-EZM wurde mit Fibronektin und anderen löslichen EZM-Proteinen angereichert, die mit Blutgefäßen assoziiert sind.
