Human Endometrial Tissue Embedding and Sectioning for Immunohistochemistry and Digital Image Analysis

Wählen Sie zunächst eine geeignete Einbettform aus, die der Größe der dehydrierten Endometriumprobe entspricht. Füllen Sie es mit Paraffinwachs, das auf 70 Grad Celsius erhitzt wird. Legen Sie das dehydrierte menschliche Endometriumgewebe sofort in die Form.

Verwenden Sie eine Pinzette, um das Gewebe vorsichtig anzupassen, um sicherzustellen, dass es mittig platziert wird. Übertragen Sie nun die Form auf die Kühlplatte und drücken Sie das Gewebe vorsichtig mit einer Pinzette an, während das Paraffin am Boden erstarrt. Lege die eingebettete Kassette über die Form und bedecke sie mit mehr Wachs.

Stellen Sie die Form dann wieder auf die Kühlplatte. Sobald das Paraffin vollständig erstarrt ist, nehmen Sie den Block und die daran befestigte Kassette aus der Form. Zum Schneiden setzen Sie den Block auf die Probenklammer des Mikrotoms.

Setzen Sie die Klinge in die Halterung ein und stellen Sie den Winkel zwischen der Blockebene und der Klinge ein. Stellen Sie nun die Dicke des Abschnitts auf vier Mikrometer ein. Drehen Sie dann das Handrad, um mit dem Schneiden zu beginnen.

Schneiden Sie dünne Schnitte aus dem Block, um die entsprechende Gewebeoberfläche freizulegen. Verwenden Sie den Pinsel, um die fortlaufenden und vollständigen Abschnitte zu sammeln. Sobald genügend Abschnitte vorhanden sind, entfernen Sie mit einer Pinzette die unqualifizierten Abschnitte an der Vorderseite.

Mit einem Pinsel die Partien in ein warmes, auf 42 Grad Celsius erhitztes Wasserbad geben. Wenn die Abschnitte vollständig abgeflacht sind, verwenden Sie Anti-Ablöse-Schieber, um sie anzuheben. Als nächstes backst du sie in einem Schiebewärmer bei 65 Grad Celsius über 60 Minuten, bevor du sie herausnimmst.