Legen Sie zunächst die Röhrchen mit 25 Millilitern vorbereitetem kaltem, fortschrittlichem DMEM/F-12-Medium auf Eis. Geben Sie die aufgetauten Matrizen in jedes Röhrchen. Mischen Sie die Suspension miteinander und achten Sie darauf, dass sich keine Klumpen bilden.
Pipettieren Sie nun 250 Mikroliter der verdünnten Matrices in jede Vertiefung einer 24-Well-Platte. Kippen Sie die Platte, um die Beschichtungslösung gleichmäßig zu verteilen. Verwenden Sie nach der Inkubation eine serologische Pipette, um die überschüssige Lösung vorsichtig zu entfernen, ohne die beschichteten Oberflächen zu zerkratzen.
Pipettieren Sie sofort 250 Mikroliter warmes vollständiges Stammzellmedium in jede Vertiefung. Um die Gewebekulturplatten mit Matrix 4 Xenol-freiem Hydrogel zu beschichten, erwärmen Sie das Hydrogel zunächst auf Raumtemperatur. Geben Sie zwei Volumen des Hydrogels in ein Röhrchen mit einem Volumen von 3x Stammzellen-Kulturmedium.
Pipettieren Sie die Lösung auf und ab, um sie gründlich zu mischen. Übertragen Sie 250 Mikroliter des Hydrogels in die Vertiefungen einer 24-Well-Gewebekulturplatte. Kippen Sie dann die Platte, um das Hydrogel gleichmäßig zu verteilen.
Nach 10 bis 15 Minuten sind die beschichteten Platten nun bereit für die Kultivierung von induzierten pluripotenten Stammzellen.
