Bereiten Sie zunächst zwei Milligramm pro Milliliter Zinkoxid-Nanopartikellösung mit DPBS vor. Führen Sie eine zweifache serielle Verdünnung durch, um unterschiedliche Konzentrationen zu erzielen. Geben Sie 100 Mikroliter jeder getesteten Zinkoxid-Nanopartikelkonzentration in eine 96-Well-Platte.
Verdünnen Sie die Bakterienkultur auf eine Million KBE pro Milliliter mit tryptischer Sojabrühe oder TSB-Medien. Geben Sie 100 Mikroliter in jede Vertiefung, die unterschiedliche Konzentrationen von Zinkoxid-Nanopartikellösung enthält. Inkubieren Sie die Platte 24 Stunden lang bei 37 Grad Celsius.
Pipettieren Sie 100 Mikroliter Zinkoxid-Nanopartikel mit Bakterienlösung aus jeder Vertiefung und bereiten Sie verschiedene zehnfache Getreideverdünnungen bis 10 bis minus sechs vor. Übertragen Sie 50 Mikroliter aus vier Verdünnungen auf tryptische Soja-Agar-TSA-Medienplatten. Inkubieren Sie die Agarplatten 24 Stunden lang bei 37 Grad Celsius.
Nachdem Sie einen Verdünnungsfaktor ausgewählt haben, der für jede Gruppe zählbar ist, markieren Sie alle Kolonien in der zählbaren Verdünnungsplatte und berechnen Sie neu, sodass die Konzentration zur Anzahl von KBE pro Milliliter wird. Verwenden Sie die erhaltenen Daten, um den prozentualen Anteil lebender Bakterien im Verhältnis zu denen in der Negativkontrolle darzustellen. Die antibakteriellen Eigenschaften von Zinkoxid-Nanopartikeln wurden an 0,5 Millionen KBE pro Milliliter Pseudomonas aeruginosa-Stamm getestet.
Die antimikrobielle Aktivität der Nanopartikel stieg konzentrationsabhängig an. Eine sichtbare Abnahme der Anzahl der Bakterienkolonien gegenüber der unverdünnten Bakterienkultur war jedoch nicht erkennbar. Beim Test gegen einen MRSA-Stamm von 0,5 Millionen KBE pro Milliliter zeigten diese Nanopartikel eine erhöhte antibakterielle Aktivität, was zu einer signifikanten Verringerung der Bildung von Bakterienkolonien führte.
