Vorbereitung von Serumproben für die Stabilitätsbewertung des humanen Adenosin-Deaminase-1-Enzyms mittels Mikrotiterplatten-Assay

Bereiten Sie zunächst eine 10-fache Brühe HsADA1 in 1x PBS bei pH 7,4 vor, um eine Endkonzentration von 10 Mikromolar zu erreichen. Erwärmen Sie ein aufgetautes 15-Milliliter-Aliquot des gepoolten Humanserums auf 37 Grad Celsius. Fügen Sie dann 100 Mikroliter des 10x HsADA1-Stammes zu 900 Mikrolitern gepooltem Humanserum und PBS hinzu, die in zwei separaten Mikrozentrifugenröhrchen mit geringer Bindung eingenommen werden.

Verdünnen Sie 100 Mikroliter jedes Enzyms und jeder Nicht-Enzymmischung eins zu eins mit 30% Glycerin, hergestellt in 1x PBS. Die Röhrchen mit flüssigem Stickstoff schockfrosten und bei minus 80 Grad Celsius lagern. Verschließen Sie alle Röhrchen mit transparenter Folie und legen Sie sie in einen 37 Grad Celsius heißen Inkubator.