In-vivo-Inokulation von Stammkrebserregern in Pappelblättern zum Testen der Resistenz gegen die Krebskrankheit

Bereiten Sie zunächst eine Pilzkultur für Krebserreger und Pappelmaterial für die Blattimpfung vor. Bei kleinen Blättern inokulieren Sie zwei zuvor präparierte quadratische Pilzmyzelwürfel und PDA-Würfel auf die Oberseite der oberen fünften bis siebten Blätter von Pappelklonen. Stellen Sie sicher, dass das Myzel zu den Blättern zeigt und sich die Impfstellen in der Mitte der halben Blätter befinden.

Impfen Sie vier quadratische Pilzmyzelwürfel und vier PDA-Würfel auf die Oberseite der oberen fünften bis siebten Blätter großer Pappelblätter. Wickeln Sie dann die geimpften Blätter mit transparentem Klebeband ein. Drücken Sie vorsichtig auf das Klebeband, damit es an den Blättern haftet, um die Bewegung und den Wasserverlust der Myzelwürfel während des Experiments zu verhindern.

Anschließend stechen Sie mit einer Fünf-Milliliter-Spritzennadel die Blätter und die Myzelwürfel an fünf Stellen durch, bis die Nadel die Würfel von der oberen zur unteren Oberfläche der Pappelblätter durchdringt. Platzieren Sie eine Einstechstelle in der Mitte und die anderen vier ein bis zwei Millimeter in der Nähe der vier Eckpunkte der Würfel. Untersuchen Sie die beimpften Blätter innerhalb von drei Tagen auf Standortverschiebungen oder Wasserverlust der Myzel-Impfmittel.

Beobachte das Auftreten von nekrotischen Läsionen um die stechenden Wundstellen auf der Unterseite der Blätter. Am Ende des Experiments zupfen Sie alle beimpften Blätter ab und legen Sie sie in Plastikprobenbeutel.