Zu Beginn legen Sie drei bis sechs dechorionierte Embryonen in eine Petrischale, die Danios-Medium enthält, das mit 0,02 % Tricain ergänzt ist. Sobald die Embryonen betäubt sind, übertragen Sie sie in eine 35 x 15 Millimeter große Glasbodenschale mit minimalem Medium. Fügen Sie schnell 300 bis 400 Mikroliter Agarose mit niedrigem Schmelzpunkt mit 1 % niedrigem Schmelzpunkt hinzu, um eine Kuppel zu erzeugen.
Positionieren Sie die Embryonen mit einer Pinzette so, dass sie gerade mit der Bauchseite nach oben in Kontakt mit dem Glas liegen. Als nächstes legen Sie etwa 0,5 Mikroliter magnetische Kügelchen auf die Agarose. Dann einen Tropfen Danios Medium mit 0,02% Tricain auf die Agarose und die Kügelchen geben.
Wählen Sie je nach Probe und Herzgröße die passende Perle aus und legen Sie sie mit einer Pinzette auf das Eigelb des Embryos. Erzeugen Sie mit einem Arm der Pinzette eine Dotterläsion oder ein Loch in der Mitte des Eigelbs. Platzieren Sie die Perle in der Läsion und schieben Sie sie vorsichtig nach vorne, bis sie den Venenpol erreicht.
Wenn der Sog allein nicht ausreicht, um die Perle zu bewegen, schieben Sie sie vorsichtig in Richtung Vorhof und üben Sie genügend Druck aus, um sie in die Perikardhöhle zu führen. Nachdem Sie die magnetischen Kügelchen in die Embryonen transplantiert haben, geben Sie ein bis zwei Milliliter Danios-Medium, das PTU enthält, in die Glasbodenschale. Brechen Sie dann mit einer Pinzette vorsichtig den niedrigen Schmelzpunkt Agarose auf und entfernen Sie vorsichtig die Embryonen.
Zum Schluss übertragen Sie die Embryonen mit einer Pasteur-Pipette in eine neue Petrischale, die Danios-Medium mit PTU enthält, und lassen Sie sie sich bei 28,5 Grad Celsius erholen und entwickeln. Die magnetische Perle wurde korrekt im Vorhof des Zebrafischherzens positioniert, was einen ungehinderten Blutfluss und keine beobachtete Blutung bei gleichbleibenden Herzwänden ermöglichte.
