Diese Studie wurde von der Mcihael J. Fox Stiftung für Parkinson-Forschung 2011 Rapid Response Innovations Awards-Programm finanziert. Die Geldgeber hatten keine Rolle in Studiendesign, Datenerfassung und Analyse, Entscheidung zur Veröffentlichung oder Vorbereitung des Manuskripts.

Vor der Operation sicherzustellen, dass alle Verfahren, die getan werden durch IACUC und alle zusätzlichen ethischen oder rechtlichen Behörden und benutzen humane Tierbehandlungspraktiken. Dies schließt mit sterilen Operationsbedingungen, betäuben die Maus mit IACUC zugelassenen Methode, Schmier Mäuse Augen mit Salbe Tierarzt während der Operation und die Bereitstellung postoperativen Versorgung. Sie nicht mit der Operation fortzufahren, wenn es irgendeine Frage, ob Aspekte des Verfahrens werden genehmigt. Alle Verfahren durchgeführt, hier wurden von der Boston University Institutional Animal Care und Verwenden Committee genehmigt. 1. Vorbereitung der Tiere und Surgical Supplies <ol><li> Autoklav alle chirurgischen Instruments, die während der Operation verwendet wird. </li><li> Sicherstellen, daß alle Techniken, die durchgeführt werden sollen, werden von den Zulassungsbehörden zugelassenen Tier. </li></ol> 2. Ernten der Schleimhauttransplantat <ol><li> Wählen Sie einen genetisch identischen Maus von ähnlichen Alter wiedie experimentelle Maus und einschläfern es in einer IACUC zugelassenen Methode (hier: Isofluran Ersticken durch Genickbruch folgte). </li><li> Mit chirurgische Scheren, entfernen Sie die Haut um die Nasenregion von Maus-Kopf Aussetzen des Schädels. </li><li> Mit einem Presslufthammer, Filter mit drei Leitungen, von denen zwei seitlich flankieren den Nasenbereich und eine dritte im Einklang mit den Augen, die senkrecht die beiden Leitungen verbindet. </li><li> Drill-down ventral um die Nasenscheidewand aus dem umgebenden Gewebe zu trennen. Ein breiterer Weg wird eine Beschädigung der Schleimhaut zu verhindern, jedoch wird es auch erschwert, um die Membran zu isolieren. Ein schmaler Schnitt näher an der Mittellinie wird empfohlen. </li><li> Mit einer Schere, um das Septum frei von Gewebe, um es halten schneiden und speichern sie in einer sterilen Kochsalzlösung. Zu diesem Zeitpunkt kann das Transplantat bis gereinigt werden, um angeschlossene Gewebe zu entfernen. Die ideale Situation besteht darin, dass unbeschädigte Schleimhautmembranen auf beiden Seiten des Knorpels Septum ausgesetzt. Ein grachtern Membran kann für zwei Mäuse zuzuführen die Oberfläche der Membran ausreichend ist, um die Kraniotomie Gebiete umfassen. Es wird empfohlen, dass das Implantat so schnell wie möglich verwendet und die Forscher geht, sobald das Transplantat isoliert Schritt 3 fort. </li></ol> 3. Chirurgische Implantation von Schleimhauttransplantat <ol><li> Mit Standard-, aseptische murinen chirurgischen Verfahren, betäuben und montieren eine Maus in der stereo Rahmen. Verwenden Sie etwa 2% Isofluran in reinem Sauerstoff mit einem Nagetier Anästhesiegerät. </li><li> Immobilisieren die Maus in einem stereotaktischen Apparat mit Ohr Bars und ein Nasenhalter. Bewerben Augensalbe auf die Augen und reiben Sie die Kopfhaut mit betadine und 75% Ethanol für drei Runden. Entweder mit einer Schere oder einem Haarschneider, entfernen Sie das Fell auf dem Kopf. Expose den Schädel mit einer Rasierklinge und ebnen den Kopf. Führen Sie eine Kraniotomie oberhalb der Stelle des Gehirns, die dosiert werden. Zum Beispiel, wenn gezielt den Striatum schnitt ein 1,25 mmDurchmesser kreisrundes Loch in den Schädel (bei AP zentriert: 1.00 mm, ML: 0,88 mm) mit einem Presslufthammer. Befeuchten Sie die gebohrt Bereich mit steriler Kochsalzlösung und mit einer Rasierklinge, um den Schädel zu entfernen. </li><li> Entfernen Sie vorsichtig die Dura mit der Spitze einer Nadel. Darüber hinaus kann dies durch Auftragen einer minimalen Menge an Gewebekleber auf das feuchte duralen Oberfläche erzielt werden. Sobald diese Schicht ausgehärtet ist, kann eine seitliche Bewegung mit einer Rasierklinge Spitze verwendet werden, um die Membran zu entfernen. </li><li> Legen Sie die Schleimhaut über der Hirnoberfläche unter äußerster Vorsicht, um die Seite zu halten Epithel abgewandten aus der Wunde. Dies wird am besten durch die Übertragung der gesamten Scheidewand an der Oberfläche des Schädels benachbart zu der Kraniotomie Seite mit einer Pinzette durchgeführt. Mit der Spitze eines chirurgische Schere, ziehen die Membran aus der Knorpel und auf den Schädel und Hirnoberfläche. Lassen Sie sich nicht die Membran austrocknen oder berühren sie mit jedem Material aufnehmen. Das Transplantat sollte großzügig überlappen alle knöchernen Rändern der Schädel site. </li><li> Decken Sie das Transplantat mit einer sterilen Stück Nitril. Dies dient dazu, die Haftung der Haut während der Heilung des Transplantats zu verhindern. Das Nitril muss groß genug sein, um die gesamte Schleimhaut abzudecken. Trim übermäßige Membran, wenn nötig. Vermeiden Bewegung des Nitrils, sobald es in Kontakt mit dem Transplantat zu kommen. </li><li> Schließen Sie die Haut mit einer Lauf 5-0 steriles Naht und lassen Sie die Maus wieder für 3-7 Tage, bevor Sie zum nächsten Schritt. Achten Sie darauf, die Nitril-Schranke oder die Schleimhaut-Transplantat bei Hautverschluss stören. </li></ol> 4. Administration of Dosing Lösung <ol><li> Nach dem Befestigen des narkotisierten Maus in der stereotaktischen Rahmen, schneiden Sie den Faden mit Schere und entfernen überschüssige Haut um den Schädel. </li><li> Entfernen Sie die Nitril-Schranke und reinigen Sie die Oberfläche des Schädels. Verwenden steriler Kochsalzlösung und Wattestäbchen zu reinigen Sie den Bereich, bis das Transplantat sichtbar ist. Es kann notwendig sein, um das Transplantat mit einer Rasierklinge geschnitten hat, wenn größer als der d gewachsenesired Oberfläche. </li><li> Wenn das Experiment länger als ein paar Tage zu sein, ist es ratsam, mindestens zwei Schrauben Schädel implantieren, um den Kopf Implantat zu verstärken. </li><li> Zeigen die weit über dem Transplantat so dass die Kanten in Kontakt mit dem Schädel. Gelten Cyanacrylat-Klebstoff an der Verbindungsstelle zwischen der Wanne und dem Schädel. Füllen Sie die gut mit steriler Kochsalzlösung und stellen Sie sicher, dass keine Leckagen. Wells von Spritzennadeln Schnitt gemacht. </li><li> Bewerben Knochenzement auf dem Schädel, die gut zu befestigen. </li><li> Entfernen Sie die Kochsalzlösung aus der gut mit einer Pipette. Die mehrmals gut waschen, um zu überprüfen, dass Klebstoff nicht einge durchgesickert Fügen Sie die gewünschte Lösung; in diesem Fall 50 ul fluoreszierenden Dextran verwendet. Es wird erwartet, dass die wasserlöslichen Verbindungen von ähnlicher Polarität die gleiche wie Dextran verhalten. Lieferung von hydrophoben Verbindungen oder Suspensionen ist mit diesem Verfahren nicht untersucht worden. </li><li> Verschließen Sie die Oberseite der auch durch die Verwendung eines kreisförmiges Stück aus Nitril auf die gesicherttop mit Cyanacrylatklebstoff. Sicherzustellen, dass der Klebstoff nicht in Kontakt mit den Wells kommen. </li></ol> 5. Analyse Transmucosale Liefer <ol><li> Nachdem die gewünschte Menge Zeit vergangen ist, betäuben die Maus und die Inhalte auch mit einer Lösung von Evans-Blau-Farbstoff auszutauschen. Dieser Farbstoff wird verwendet, um zu überprüfen, dass das Transplantat war intakt. </li><li> Nach 30 min, betäuben die Maus stark, entfernen Sie die Farbstofflösung und einschläfern über Enthauptung. </li><li> Manuelles Entfernen des Implantats und entfernen Sie das Gehirn mit chirurgischen Schere. Seien Sie vorsichtig, um das Transplantat an Ort und Stelle zu halten. </li><li> Einmal entfernt, Flash-einfrieren das Gehirn in einer Lösung von Isobutan gekühlt in einem Trockeneis-Bad. </li><li> Betten Sie das Gehirn in Optimale Schneidtemperatur (OCT)-Lösung und Scheibe bei 50 um. </li><li> Zeigen die gewünschten Scheiben direkt auf einem Objektträger. </li><li> Bild der Scheibe mit einem Fluoreszenz-Mikroskop, sobald der Oktober-Lösung getrocknet ist. </li></ol>

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	<li>Cardoso, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Looking+at+the+blood-brain+barrier:+Molecular+anatomy+and+possible+investigation+approaches.">Looking at the blood-brain barrier: Molecular anatomy and possible investigation approaches.</a> Brain Res. Rev. 64, 328-363 (2010).</li><li>Pardridge, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+transport+across+the+blood-brain+barrier.">Drug transport across the blood-brain barrier.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 32, 1959-1972 (2012).</li><li>Chen, Y., Liu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modern+methods+for+delivery+of+drugs+across+the+blood-brain+barrier.">Modern methods for delivery of drugs across the blood-brain barrier.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 64, 640-665 (2012).</li><li>Cheng, F. -. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+protects+against+1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine+(MPTP)-induced+neurotoxicity+in+C57BL/6+mice.">Glial cell line-derived neurotrophic factor protects against 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)-induced neurotoxicity in C57BL/6 mice.</a> Neurosci. Lett. 252, 87-90 (1998).</li><li>Grondin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=controlled+GDNF+infusion+promotes+structural+and+functional+recovery+in+advanced+parkinsonian+monkeys.">controlled GDNF infusion promotes structural and functional recovery in advanced parkinsonian monkeys.</a> Brain. 125, 2191-2201 (2002).</li><li>Kirik, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localized+striatal+delivery+of+GDNF+as+a+treatment+for+Parkinson+disease.">Localized striatal delivery of GDNF as a treatment for Parkinson disease.</a> Nat. Neurosci. 7, 105-110 (2004).</li><li>Pardridge, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+and+gene+targeting+to+the+brain+with+molecular+trojan+horses.">Drug and gene targeting to the brain with molecular trojan horses.</a> Nat. Rev. Drug Discov. 1, 131-139 (2002).</li><li>Pardridge, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood-brain+barrier+delivery+of+protein+and+non-viral+gene+therapeutics+with+molecular+Trojan+horses.">Blood-brain barrier delivery of protein and non-viral gene therapeutics with molecular Trojan horses.</a> J. Control. Release. 122, 345-348 (2007).</li><li>Bellavance, M. -. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+blood-brain+barrier+disruption+as+a+CNS+delivery+strategy.">Recent advances in blood-brain barrier disruption as a CNS delivery strategy.</a> AAPS J. 10, 166-177 (2008).</li><li>Merkus, F. H. M., Berg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+nasal+drug+delivery+bypass+the+blood-brain+barrier.">Can nasal drug delivery bypass the blood-brain barrier.</a> Drugs R. D. 8, 133-144 (2007).</li><li>Dhuria, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+to+the+central+nervous+system:+Mechanisms+and+experimental+considerations.">Intranasal delivery to the central nervous system: Mechanisms and experimental considerations.</a> J. Pharm. Sci. 99, 1654-1673 (2010).</li><li>Illum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nasal+drug+delivery-possibilities,+problems+and+solutions.">Nasal drug delivery-possibilities, problems and solutions.</a> J. Control. Release. 87, 187-198 (2003).</li><li>Craft, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+insulin+therapy+for+alzheimer+disease+and+amnestic+mild+cognitive+impairment:+A+pilot+clinical+trial.">Intranasal insulin therapy for alzheimer disease and amnestic mild cognitive impairment: A pilot clinical trial.</a> Arch. Neurol. 69, 29-38 (2012).</li><li>Freiherr, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+insulin+as+a+treatment+for+Alzheimer's+Disease:+A+review+of+basic+research+and+clinical+evidence.">Intranasal insulin as a treatment for Alzheimer's Disease: A review of basic research and clinical evidence.</a> CNS Drugs. 27, 505-514 (2013).</li><li>Gill, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+brain+infusion+of+glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+in+Parkinson+disease.">Direct brain infusion of glial cell line-derived neurotrophic factor in Parkinson disease.</a> Nat. Med. 9, 589-595 (2003).</li><li>Love, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+induces+neuronal+sprouting+in+human+brain.">Glial cell line-derived neurotrophic factor induces neuronal sprouting in human brain.</a> Nat. Med. 11, 703-704 (2005).</li><li>Antunes, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+nasal+septa+for+respiratory+epithelial+air-liquid+interface+cultures.">Murine nasal septa for respiratory epithelial air-liquid interface cultures.</a> BioTechniques. 43, 195-204 (2007).</li><li>Bleier, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeabilization+of+the+blood-brain+barrier+via+mucosal+engrafting:+implications+for+drug+delivery+to+the+brain.">Permeabilization of the blood-brain barrier via mucosal engrafting: implications for drug delivery to the brain.</a> PLoS ONE. 8, (2013).</li><li>Bernal-Sprekelsen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Closure+of+cerebrospinal+fluid+leaks+prevents+ascending+bacterial+meningitis.">Closure of cerebrospinal fluid leaks prevents ascending bacterial meningitis.</a> Rhinology. 43, 277-281 (2005).</li><li>Bleier, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-assisted+cerebrospinal+fluid+leak+repair:+An+animal+model+to+test+feasibility.">Laser-assisted cerebrospinal fluid leak repair: An animal model to test feasibility.</a> Otolaryngol. Head Neck Surg. 137, 810-814 (2007).</li></ol>

Benjamin S. Bleier MD Blei ist Erfinder der provisorischen Patentbelag Methoden der Medikamentenabgabe an das zentrale Nervensystem.

Der schwierigste Schritt der hier beschriebenen Verfahren ist der erfolgreiche Transfer von einer genügend großen, Schleimhaut auf der Hirnoberfläche. Dieser Schritt wird wesentlich erleichtert, wenn die geerntet Nasenscheidewand ist groß genug und gut gereinigt. Wenn der ventralen Abschnitt der Scheidewand abgeschnitten wird, sollte eine neue Transplantat erhalten werden. Der Bohrwinkel sollte senkrecht zu der Maus Kopf sein, um sicherzustellen, dass die Schleimhautmembran nicht durch den Bohrer beschädigt wird. W...

Die Behandlung von neurologischen und psychiatrischen Krankheiten ist durch das Vorhandensein der Blut-Hirn-Schranke (BBB), die mehr als 95% aller potentiellen pharmazeutischen Wirkstoffen vom Erreichen des zentralen Nervensystems verhindert 1-3 behindert. Beispielsweise Gliazellen stammenden neurotrophen Faktor (GDNF) gezeigt wurde, wirksam bei der Behandlung der Parkinson-Krankheit, wenn sie direkt in das Gehirn injiziert wird, ist jedoch unwirksam, wenn sie systemisch zugeführt, weil es die BBB 4-6 nicht durchdringen kann. Zahlreiche fahren wurden entwickelt, um zu versuchen, dieses Problem zu umgehen. Verbesserung der systemischen Verabreichung von neurotheraputics wurde durch die Verwendung Wirkstoff-Konjugate Antikörper selektiv für Transportproteine ​​auf das Gehirn Kapillarendothels befindet haltigen nachgewiesen worden; aber diese Methode ist nicht gezeigt worden anwendbar für eine breite Palette von Arzneimitteln 7,8 sein. Zusätzlich osmotische Öffnung der BHS ist verwendet worden, KlinikVerbündeter, aber diese Verfahren leidet systemische Medikamentendosierung im Gegensatz zu einer direkten Lieferung an den Hirnregion von Interesse 9. Große Sorgfalt wurde in die Optimierung transnasalen Lieferung in der Hoffnung, sich direkt auf das Gehirn 10 bis 12 gesetzt. Obgleich ein gewisser Erfolg erzielt worden ist, sind aussagekräftige Ergebnisse nur für Medikamente, die endogene Rezeptoren wie Insulin 13,14 aufweisen, erhalten wurde. Außerdem ist der Mechanismus der transnasalen Lieferung ist umstritten, Anhaltspunkte dafür, mit indirekter Einführung in das Gehirn über olfaktorische Neuron-Aufnahme oder über die Blutbahn 11. Direkte Zustellung mit transcranial implantierbaren Kathetern erreicht wurde, jedoch ist dieses Verfahren hochinvasiv und mit zahlreichen Komplikationen 15,16 verbunden. Bis heute gibt es keine allgemeine, minimal invasiven Verfahren zu hochmolekularen Verbindungen in das Gehirn zu liefern. Hierin präsentierten ein muriner chirurgische Verfahrendas erzeugt eine halbdurchlässige Grenzfläche mit dem Gehirn. Dies wird durch eine Schleimhaut-Transplantations Explantat 17 über eine chirurgische Schädeldefekt in einer Maus durchgeführt. Unter Verwendung dieses Verfahrens wurde gezeigt, daß lösliche Verbindungen bis zu 500 kDa in das zentrale Nervensystem (direkt in Gehirnparenchym als auch in Liquor) sowohl in einer Zeit und einem Molekulargewicht abhängigen Weise 18 geliefert werden. Diese Methode der Umgehung des BBB ist ein Modell für Schädelbasisdefekt Reparaturen in den Menschen, die gefäßSchleimhautTransplantationen verwendet, um Löcher in den Schädel zu reparieren folgenden transnasalen endoskopische Chirurgie 19,20.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:848px;" width="849">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:220px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:263px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">mice</td>
			<td style="width:220px;">Taconic</td>
			<td>C57BL/6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:220px;">Piramal Healthcare</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Student Fine Scissors</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>91461-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">pneumatic drill</td>
			<td style="width:220px;">MTI Dental</td>
			<td style="width:119px;">333-CB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">drill bit</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">forcepts</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>91106-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">0.9% Sodium Chloride Injection USP</td>
			<td style="width:220px;">Abbott Laboratories</td>
			<td>4925</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Polystyrene Detri Dish</td>
			<td style="width:220px;">Fisher</td>
			<td>08-757-12</td>
			<td>for temporarily storing graft</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bead Sterilizer</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxygen/Isoflurane System</td>
			<td style="width:220px;">SurgiVet</td>
			<td>V720100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Temperature Control System</td>
			<td style="width:220px;">Physitemp</td>
			<td style="width:119px;">TCAT-2LV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Animal Stereotaxic Instrument</td>
			<td style="width:220px;">KOPF</td>
			<td style="width:119px;">Model 940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye Ointment</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td style="width:220px;">Fisher</td>
			<td>23-400-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">7.5% Provadone Iodine</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Betadine surgical scrub</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Surgical Blade Stainless</td>
			<td style="width:220px;">Feather</td>
			<td style="width:119px;">2976#10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Scalpel Handle - #3</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3% Hydogen Peroxide</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>for cleaning the skull</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Vetbond Tissue Adhesive</td>
			<td style="width:220px;">3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">needles</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>305176</td>
			<td>needle tip cut off and used as well</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309597</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">nitrile gloves</td>
			<td style="width:220px;">Denville Scientific Inc</td>
			<td>G4162</td>
			<td>for well closure and protection of graft</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5-0 Nylon Suture Thread</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Student Halsey Needle Holder</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>91201-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">cyanoacrylate adhesive</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>commecially available super glue</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dental Cement Kit, 1 lb, Pink Opaque</td>
			<td style="width:220px;">Stoelting</td>
			<td>51458</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">isobutane (2-methylbutane)</td>
			<td style="width:220px;">Aldrich</td>
			<td>M32631</td>
			<td>for dry ice bath</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">dry ice</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

heterotopic mucosal engrafting procedure for direct drug delivery to the brain in mice

Abgabe von Therapeutika in das Gehirn durch die Gegenwart von Blut-Hirn-Schranke (BBB), die den Durchtritt von polaren und hochmolekulare Verbindungen aus dem Blut und in Hirngewebe beschränkt behindert. Einige direkte Lieferung Erfolg bei den Menschen wurde durch Implantation von Kathetern transkranielle erreicht worden; jedoch ist dieses Verfahren hochinvasiv und mit zahlreichen Komplikationen verbunden. Eine weniger invasive Alternative wäre das Gehirn durch eine chirurgisch implantiert, semipermeable Membran, wie die Nasenschleimhaut, die verwendet wird, um Defekte zu reparieren Schädelbasis folgende endoskopische transnasale Tumorentfernung Operation beim Menschen zu dosieren. Arzneimittelübertragungs wenn diese Membran würde effektiv umgehen die BBB und diffundieren direkt in das Gehirn und in der cerebrospinalen Flüssigkeit. Inspiriert von diesem Ansatz wurde ein chirurgischer Ansatz bei Mäusen entwickelt, die ein Spender Septum-Schleimhaut über eine extrakranielle chirurgischen BBB Defekt eingepflanzt verwendet. Dieses Modell hat sich gezeigt, effektivden Durchgang von hochmolekularen Verbindungen in das Gehirn. Da zahlreiche Wirkstoff-Kandidaten nicht in der Lage über den BBB sind, ist dieses Modell für die Durchführung wertvolle präklinische Prüfung von neuen Therapien für neurologische und psychiatrische Erkrankungen.

Erhalten einer ausreichend großen Nasenscheidewand-Explantat ist entscheidend für die weiteren Schritte. Dies kann durch Bohren an der Stelle der in Fig. 1a gezeigten Spendermaus Schädel durchgeführt werden. Schneiden entlang diesem Weg wird ein Explantat von ausreichender Größe zu erzeugen, wie in Fig. 1b gezeigt. Wenn die Bohrtiefe ist nicht tief genug ist, wird das Transplantat abgeschnitten sein, und es wird schwer sein, eine ausreichend große Membran, um die Gehirnoberfläch...

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Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Ein Maus-Modell der menschlichen endoskopische Schädelbasis Wiederaufbau entwickelt worden, das eine halbdurchlässige Schnittstelle zwischen Gehirn und Nase mit Nasenschleimhauttransplantate schafft. Dieses Verfahren ermöglicht es den Forschern, die Lieferung an das zentrale Nervensystem von hohem Molekulargewicht Therapeutika, die sonst durch die Blut-Hirn-Schranke ausgeschlossen sind, wenn sie systemisch verabreicht zu studieren.

Heterotope Mucosal-Transplantationsverfahren für Direkt Drug Delivery zum Gehirn bei Mäusen

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

10.7K Aufrufe.  Boston University.  Ein Maus-Modell der menschlichen endoskopische Schädelbasis Wiederaufbau entwickelt worden, das eine halbdurchlässige Schnittstelle zwischen Gehirn und Nase mit Nasenschleimhauttransplantate schafft. Dieses Verfahren ermöglicht es den Forschern, die Lieferung an das zentrale Nervensystem von hohem Molekulargewicht Therapeutika, die sonst durch die Blut-Hirn-Schranke ausgeschlossen sind, wenn sie systemisch verabreicht zu studieren. 

Serie: Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to stimulate microcirculation. The choice of delivery method for these agents is important because the route of administration profoundly affects the bioactivity and efficacy of these agents1,2. In this article, we demonstrate how to locally administer a substance in ischemic hindlimbs by using a catheterized osmotic pump. This pump can deliver a fixed volume of aqueous solution continuously for an allotted period of time. We also present our mouse model of unilateral hindlimb ischemia induced by ligation of the common femoral artery proximal to the origin of profunda femoris and epigastrica arteries in the left hindlimb. Lastly, we describe the in vivo cannulation and ligation of the infrarenal abdominal aorta and perfusion of the hindlimb vasculature with Microfil, a silicone radiopaque casting agent. Microfil can perfuse and fill the entire vascular bed (arterial and venous), and because we have ligated the major vascular conduit for exit, the agent can be retained in the vasculature for future ex vivo imaging with the use of small specimen micro-CT3.

We show here the in vivo insertion of an osmotic pump for constant local drug delivery and the creation of hindlimb ischemia in a mouse model. Moreover, the hindlimb vasculature is perfused with Microfil, a silicone radiopaque agent, to prepare for micro-computed tomography (micro-CT) imaging.

Osmotic Drug Delivery zu ischämischen Hinterbeine und Perfusion von Blutgefäßen mit Microfil für Mikro-Computertomographie

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to ...

Forschung

Medizin

Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these diseases. Chronic retinal diseases such as retinal oedema or neovascularization usually require multiple intraocular injections to effectively treat the condition. However, the risks associated with these injections increase with repeated delivery of the drug. Therefore, alternative delivery methods need to be established in order to minimize the risks of reinjection. Several other investigations have developed methods to deliver drugs over extended time, through materials capable of releasing chemicals slowly into the eye. In this investigation, we outline the use of Elvax 40W, a copolymer resin, to act as a vehicle for drug delivery to the adult rat retina. The resin is made and loaded with the drug. The drug-resin complex is then implanted into the vitreous cavity, where it will slowly release the drug over time. This method was tested using 2-amino-4-phosphonobutyrate (APB), a glutamate analogue that blocks the light response of the retina. It was demonstrated that the APB was slowly released from the resin, and was able to block the retinal response by 7 days after implantation. This indicates that slow-release drug delivery using this copolymer resin is effective for treating the retina, and could be used therapeutically with further testing.

This paper details how Elvax 40W can be used as a slow-release method for drug delivery to the adult rat retina. The protocol for preparing, loading, and delivering the drug-resin complex to the eye is described.

Slow-Release-Drug Delivery durch Elvax 40W, um die Ratte Retina: Implikationen für die Behandlung von chronischen Erkrankungen

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these ...

Direct Mouse Trauma/Burn Model of Heterotopic Ossification

Heterotopic ossification (HO) is the formation of bone outside of the skeleton which forms following major trauma, burn injuries, and orthopaedic surgical procedures. The majority of animal models used to study HO rely on the application of exogenous substances, such as bone morphogenetic protein (BMP), exogenous cell constructs, or genetic mutations in BMP signaling. While these models are useful they do not accurately reproduce the inflammatory states that cause the majority of cases of HO. Here we describe a burn/tenotomy model in mice that reliably produces focused HO. This protocol involves creating a 30% total body surface area partial thickness contact burn on the dorsal skin as well as division of the Achilles tendon at its midpoint. Relying solely on traumatic injury to induce HO at a predictable location allows for time-course study of endochondral heterotopic bone formation from intrinsic physiologic processes and environment only. This method could prove instrumental in understanding the inflammatory and osteogenic pathways involved in trauma-induced HO. Furthermore, because HO develops in a predictable location and time-course in this model, it allows for research to improve early imaging strategies and treatment modalities to prevent HO formation.

An Achilles tenotomy and burn injury model of heterotopic ossification allows for the reliable study of trauma induced ectopic bone formation without the application of exogenous factors.

Direkter Maus Trauma / Brennen Modell heterotoper Ossifikationen

Heterotopic ossification (HO) is the formation of bone outside of the skeleton which forms following major trauma, burn injuries, and orthopaedic surgical ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient&#8217;s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.

The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.

Heterotope Cervical Herztransplantation bei Mäusen

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The simple murine AVF model was combined with intraluminal administration of drug solution to the venous endothelium at the same time as fistula creation. Technical aspects of this model are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The infra-renal aorta and IVC are dissected for clamping. After proximal and distal clamping, the puncture site is exposed and a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta and into the IVC. Immediately after the puncture, a reporter gene-expressing viral vector was infused in the IVC via the same needle, followed by 15 min of incubation. The intraluminal administration method enabled more robust viral gene delivery to the venous endothelium compared to administration by the external route. This novel method of delivery will facilitate studies that explore the role of the endothelium in AVF maturation and enable intraluminal drug delivery at the time of surgical operation.

After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.

Intraluminale Drug Delivery auf die Maus arteriovenöse Fistel Endothel

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening pulmonary manifestations. Ivacaftor (IVA) and ivacaftor-lumacaftor (LUMA) combination are two new breakthrough CF drugs that directly modulate the activity and trafficking of the defective CFTR-protein. However, there is still a dearth of understanding on pharmacokinetic/pharmacodynamic parameters and the pharmacology of ivacaftor and lumacaftor. The HPLC-MS technique for the simultaneous analysis of the concentrations of ivacaftor, hydroxymethyl-ivacaftor, ivacaftor-carboxylate, and lumacaftor in biological fluids in patients receiving standard ivacaftor or ivacaftor-lumacaftor combination therapy has previously been developed by our group and partially validated to FDA standards. However, to allow the high-throughput analysis of a larger number of patient samples, our group has optimized the reported method through the use of a smaller pore size reverse-phase chromatography column (2.6 &#181;m, C8 100 &#197;; 50 x 2.1 mm) and a gradient solvent system (0-1 min: 40% B; 1-2 min: 40-70% B; 2-2.7 min: held at 70% B; 2.7-2.8 min: 70-90% B; 2.8-4.0 min: 90% B washing; 4.0-4.1 min: 90-40% B; 4.1-6.0 min: held at 40% B) instead of an isocratic elution. The goal of this study was to reduce the HPLC-MS analysis time per sample dramatically from ~15 min to only 6 min per sample, which is essential for the analysis of a large amount of patient samples. This expedient method will be of considerable utility for studies into the exposure-response relationships of these breakthrough CF drugs.

Ivacaftor and ivacaftor-lumacaftor combination are two new CF drugs. However, there is still a dearth of understanding on their PK/PD and pharmacology. We present an optimized HPLC-MS technique for the simultaneous analysis of ivacaftor and its major metabolites, and lumacaftor.

Optimierte LC-MS/MS-Methode für die Hochdurchsatz-Analyse der klinischen Proben von Ivacaftor, seinen Hauptmetaboliten und Lumacaftor in biologischen Flüssigkeiten von Mukoviszidose-Patienten

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) models based on pBECs in mono-culture (MC), MC with astrocyte-conditioned medium (ACM), and non-contact co-culture (NCC) with astrocytes of porcine or rat origin. pBECs were isolated and cultured from fragments of capillaries from the brain cortices of domestic pigs 5-6 months old. These fragments were purified by careful removal of meninges, isolation and homogenization of grey matter, filtration, enzymatic digestion, and centrifugation. To further eliminate contaminating cells, the capillary fragments were cultured with puromycin-containing medium. When 60-95% confluent, pBECs growing from the capillary fragments were passaged to permeable membrane filter inserts and established in the models. To increase barrier tightness and BBB characteristic phenotype of pBECs, the cells were treated with the following differentiation factors: membrane permeant 8-CPT-cAMP (here abbreviated cAMP), hydrocortisone, and a phosphodiesterase inhibitor, RO-20-1724 (RO). The procedure was carried out over a period of 9-11 days, and when establishing the NCC model, the astrocytes were cultured 2-8 weeks in advance. Adherence to the described procedures in the protocol has allowed the establishment of endothelial layers with highly restricted paracellular permeability, with the NCC model showing an average transendothelial electrical resistance (TEER) of 1249 &#177; 80 &#937; cm2, and paracellular permeability (Papp) for Lucifer Yellow of 0.90 10-6 &#177; 0.13 10-6 cm sec-1 (mean &#177; SEM, n=55). Further evaluation of this pBEC phenotype showed good expression of the tight junctional proteins claudin 5, ZO-1, occludin and adherens junction protein p120 catenin. The model presented can be used for a range of studies of the BBB in health and disease and, with the highly restrictive paracellular permeability, this model is suitable for studies of transport and intracellular trafficking.

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

The aim of the protocol is to present an optimized procedure for the establishment of an in vitro blood-brain barrier (BBB) model based on primary porcine brain endothelial cells (pBECs). The model shows high reproducibility, high tightness, and is suitable for studies of transport and intracellular trafficking in drug discovery.

Verbesserte Methode für die Einrichtung einer In-vitro- Blut - Hirn-Schranke Modell auf porcinen Endothelzellen Gehirnzellen basiert

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

Trans-Tympanic Drug Delivery for the Treatment of Ototoxicity

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could interfere with the chemotherapeutic efficacy of the primary drugs. This is especially true for the drug cisplatin, whose anticancer actions are attenuated by antioxidants which provide adequate protection against hearing loss. Other current or potential otoprotective agents could pose a similar problem, if administered systemically. The application of various biologicals or protective agents directly to the cochlea would allow for high levels of these agents locally with limited systemic side effects. In this report, we demonstrate a trans-tympanic method of delivery of various drugs or biological reagents to the cochlea, which should enhance basic science research on the cochlea and provide a simple way of directing the use of otoprotective agents in the clinics. This report details a method of trans-tympanic drug delivery and provides examples of how this technique has been used successfully in experimental animals to treat cisplatin ototoxicity.

We present a technique for localized administration of drugs through the trans-tympanic route into the cochlea. Drug delivery through this route would not interfere with the anti-cancer efficacy of the chemotherapeutic drugs such as cisplatin.

Trans-Trommelfells Drug-Delivery für die Behandlung von Ototoxizität

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could ...

In Vivo Photolabeling of Cells in the Colon to Assess Migratory Potential of Hematopoietic Cells in Neonatal Mice

Enteric bacterial communities are established early in life and influence immune cell development and function. The neonatal microbiota is susceptible to numerous external influences including antibiotics use and diet, which impacts susceptibility to autoimmune and inflammatory diseases. Disorders such as Inflammatory Bowel Disease (IBD) are characterized by a massive influx of immune cells to the intestines. However, immune cells conditioned by the microbiota may additionally emigrate out of the intestines to influence immune responses at extra-intestinal sites. Thus, there is a need to identify and characterize cells that may carry microbial messages from the intestines to distal sites. Here, we describe a method to label cells in the colon of newborn mice in vivo that enables their identification at extra-intestinal sites after migration.

In Vivo Photolabeling of Cells in the Colon to Assess Migratory Potential of Hematopoietic Cells in Neonatal Mice

The protocol described here utilizes a photolabeling approach in newborn mice to specifically identify immune cells that emigrate from the colon to extra-intestinal sites. This strategy will be useful to study host-microbiome interactions in early life.

In Vivo Photolabeling von Zellen im Darm wandernden Potential der hämatopoetischen Zellen bei Neugeborenen Mäusen zu bewerten

Enteric bacterial communities are established early in life and influence immune cell development and function. The neonatal microbiota is susceptible to ...

Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain barrier. However, there have been few reports regarding not only the quantitative analysis but also optimal administration conditions and dosing regimens for investigations of nose-to-brain delivery. The limited progress in research on nose-to-brain pathway mechanisms using rodents represents a significant impediment in terms of designing nose-to-brain delivery systems for candidate drugs.
To gain some headway in this regard, we developed and evaluated two novel methods of stable intranasal administration under inhalation anesthesia for experimental animals. We also describe a method for the evaluation of drug distribution levels in the brain via the nose-to-brain pathway using radio-labeled [14C]-inulin (molecular weight: 5,000) as a model substrate of water-soluble macromolecules.
Initially, we developed a pipette-based intranasal administration protocol using temporarily openable masks, which enabled us to perform reliable administration to animals under stable anesthesia. Using this system, [14C]-inulin could be delivered to the brain with little experimental error.
We subsequently developed an intranasal administration protocol entailing reverse cannulation from the airway side through the esophagus, which was developed to minimize the effects of mucociliary clearance (MC). This technique led to significantly higher levels of [14C]-inulin, which was quantitatively detected in the olfactory bulb, cerebrum, and medulla oblongata, than the pipette method. This appears to be because retention of the drug solution in the nasal cavity was substantially increased by active administration using a syringe pump in a direction opposite to the MC into the nasal cavity.
In conclusion, the two methods of intranasal administration developed in this study can be expected to be extremely useful techniques for evaluating pharmacokinetics in rodents. The reverse cannulation method, in particular, could be useful for evaluating the full potential of nose-to-brain delivery of drug candidates.

Here, we describe two novel methods of stable intranasal administration under inhalation anesthesia with minimal physical stress for experimental animals. We also describe a method for quantitative evaluation of drug distribution levels in the brain via the nose-to-brain pathway using radiolabeled [14C]-inulin as a model substrate of water-soluble macromolecules.

Neuartige Methoden für intranasale Verabreichung unter Inhalation Anästhesie auszuwertende Nase zu Gehirn Drug Delivery

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain ...