Studien, die sich auf Herz-Kreislauf-Erkrankungen, kardiovaskuläre therapeutische Ziele oder pharmazeutische Wirkstoffe konzentrieren, erfordern die Beurteilung von systemischen arteriellen Druck- und Herzrhythmusänderungen. Femoralarterienkanulation ist eine wirtschaftliche Methode zur Erfassung von intraarteriellen Druckwellenformen, die mit Standardausrüstung in einer Tieranlage durchgeführt werden können. Demonstriert wird das Verfahren von Hsin-Ting Lin, einem Techniker aus meinem Labor.
Bevor Sie mit dem Experiment beginnen, legen Sie die anästhesierte Ratte in eine Rückenlage auf einem chirurgischen Brett und bestätigen Sie die fehlende Reaktion auf Zehenkneifen. Befestigen Sie die Beine mit Gummibändern, um den Körper zu immobilisieren, und richten Sie die Blutdruck- und Elektrokardiogramm-Instrumente für die Aufnahme ein, einschließlich einer analogen Eingangseinheit, um die Signale zu erfassen, einen Druckwandler mit einer kompatiblen Nabe, drei bipolare Elektrokardiogrammleitungen mit Nadelspitze und einen Computer mit geeigneter Software. Entfernen Sie vor Beginn der Blutdruckaufzeichnung die Druckmanschette von einem Standard-Sphygmomanometer und verbinden Sie den Dreiwege-Stopphahn am Aufblasrohr mit dem Druckaufnehmer des Datenerfassungssystems.
Schrauben Sie das Luftentriegelungsventil im Uhrzeigersinn und behalten Sie das Messgerät im Auge, während Sie die Aufblaslampe pumpen. Wenn das Messgerät 100 Millimeter Quecksilber anzeigt, öffnen Sie den Drei-Wege-Stopphahn, um ihn mit dem Druckaufnehmer zu verbinden. Der Umrechnungsfaktor für die Blutdruckberechnung wird automatisch ermittelt.
Um den Druck zu lösen, schrauben Sie das Luftentriegelungsventil gegen den Uhrzeigersinn, bis der Druck des Sphygmomanometers wieder auf Null ist. Wiederholen Sie die Kalibrierung mit 200 Millimeter Quecksilberdruck, und lösen Sie dann den Druckaufnehmer vom Quecksilber-Sphygmomanometer. Schließen Sie den Druckaufnehmer an den Dreiwege-Stopphahn des PE-Katheters an und überprüfen Sie die Anschlussübergänge des Dreiwege-Stopphahns.
Für die Identifizierung von Oberflächenmarkierungen, lokalisieren Sie die Leistenfalte an der Kreuzung zwischen Bauch und Oberschenkel und heben Sie die volle Hautschicht in der Mitte der Falte. Verwenden Sie eine Schere, um die angehobene Haut in einer Ausrichtung etwa parallel zum ipsilateralen Oberschenkel zu schneiden. Der Oberschenkelnerv und die Gefäße befinden sich unter dem exponierten Unterhautgewebe.
Sezieren Sie die Gewebeschicht schichtweise mit feinspitzen Zangen und stoppen Sie die Sezieren auf der Ebene der Femoralgefäße. Löschen Sie vorsichtig das Weichgewebe entlang des Oberschenkelnervs und der Gefäße, um einen guten Blick auf den faserähnlichen Nerv zu erhalten. Die Vene ist dunkelviolett und die Arterie pulsatil.
Wenn die Gewebesektion zu femoralen Gefäßen greift, schalten und gehen Sie die Zange, um beschädigte Gefäße zu verhindern. Verwenden Sie dann Zangen mit abgewinkelten Spitzen, um die exponierte Länge der Oberschenkelarterie und Vene zu verlängern. Um die Oberschenkelarterie zu lösen, verwenden Sie die Zange, um die Femoralvene von der Arterie zu trennen und eine Bulldogge klemme so kranially wie möglich an der Oberschenkelarterie aufzutragen.
Machen Sie eine lose Krawatte der beiden Seidensaiten, eine knapp unter der Bulldoggeklemme und die andere am kaudalen Ende der freiliegenden Femoralarterie. Verwenden Sie Mikroschere, um ein kleines Loch über der ventralen Seite der Femoralarterie zu machen und legen Sie die Spitze eines Polyethylen- oder PE-Katheters durch das kleine Loch. Den Katheter kranich voranbringen.
Ein Blutspülung in den Katheter nach dem Entfernen der Klemme zeigt an, dass die Katheterspitze das Femoralarterienlumen erreicht hat. Ziehen Sie die obere Seide fest, um die Position des Katheters zu sichern, und ziehen Sie die untere Seide fest, um Blutungen von der kaudalen Seite der Oberschenkelarterie zu verhindern. Um den Erfolg der Konservenus zu bestätigen, verwenden Sie eine Ein-Milliliter-Spritze, um 0,1 bis 0,2 Milliliter heparinisierte Salin in die Oberschenkelarterie zu injizieren.
Dann überprüfen Sie, ob Sie sich um die Kanulationsstelle herumtaufhalten und die Stelle mit einer nassen Baumwollkugel bedecken. Um eine Blutdruckaufzeichnung durchzuführen, befestigen Sie den PE-Katheter und den Drei-Wege-Stoppamhahn am Druckaufnehmer-Stopphahn und stellen Sie sicher, dass sich keine Luftblasen im Kanulationssystem befinden. Überprüfen Sie dann die Verbindungsknoten des Drei-Wege-Stopphahns.
Wenn das Gerät fertig ist, starten Sie das Datenerfassungssystem mit einer Abtastfrequenz von 1000 Hertz. Arterielle Druckwellen werden angezeigt. Lassen Sie die gesamte Einrichtung für mindestens drei bis fünf Minuten stabilisieren, überprüfen Sie die Cannulationsstelle regelmäßig, um zu bestätigen, dass keine Blutungen auftreten.
Um ein Oberflächenelektrokardiogramm durchzuführen, überprüfen Sie zunächst die drei Leitungen des bipolaren EKG, um sicherzustellen, dass die positiven, negativen und Referenzplatinelektroden intakt sind, und legen Sie die Leitungen subkutan am linken Vorderbein, rechten Vorderbein und rechten Hinterbein ein. Befestigen Sie dann die Elektrodennaben an einem kundenspezifischen EKG-Verstärker mit einer Abtastfrequenz von 1000 Hertz und einer Filterfrequenz von drei bis 500 Hertz. Gleichzeitige Blutdruck- und EKG-Aufnahmen bei sechs 47 Wochen alten normotensiven und hypertensiven Ratten zeigten einen signifikant höheren systolischen und mittleren Blutdruck bei spontan hypertensiven Tieren im Vergleich zu normalen Ratten.
P-Wellen-, PR-Intervalle, QRS-Breite und QT-Intervallparameter, die aus den EKG-Aufnahmen gemessen wurden, zeigten keine Unterschiede zwischen den beiden Gruppen. Sie können die Drucksystemkalibrierung durchführen und den Druckaufnehmer und das Datenerfassungssystem vor der Beästhesigung der Tiere einrichten. Die erworbenen rohen arteriellen Druckwellenform- und Elektrokardiogrammdaten können auf der Software analysiert werden.
Radiotelemetrie gilt als Goldstandard-Technik zur Überwachung von BP und Herzfrequenz, aber die Technik ist teuer. Eine intraarterielle Konservenamitation bei gleichzeitigem EKG ist eine wirtschaftliche Alternative. Anästhesie durch Isofluran-Inhalation ist einfach durchzuführen, kann aber gefährlich sein, wenn ein erhebliches Leck auftritt.
Überprüfen Sie daher immer die Ausrüstung und schläuche vor dem Gebrauch.
