Die Bedeutung unseres Protokolls besteht darin, dass die Elektrokardiogrammmessung mit großer Empfindlichkeit in einer kleinen Maus durchgeführt werden kann, die genetisch oder pharmakologisch manipuliert wurde. Das Protokoll ist insofern vorteilhaft, als es einfach, schnell, kostengünstig und empfindlich ist. Darüber hinaus kann es an kleinen Mäusen durchgeführt werden, sogar an Neonaten.
Wir glauben, dass diese Methode zum Verständnis unerforschter Regionen von Arrhythmie im Kardiovaskulärbereich beitragen würde. Demonstrieren datieren das Verfahren wird Tae Woong Ha aus meinem Labor sein. Beginnen Sie mit dem Öffnen der Analysesoftware und deren Einrichtung für die EKG-Datenerfassung.
Wechseln Sie zu Setup- und Kanaleinstellungen, und legen Sie die SampleRate auf 2.000 Samples pro Sekunde fest. Stellen Sie den Bereich auf 20 Millivolt und den Eingangsverstärker auf 200 Hertz Tiefpass ein. Gehen Sie dann zu EKG-Analyse- und EKG-Einstellungen, und wählen Sie dann die Maus in der Voreinstellung der Erkennungs- und Analyseeinstellungen aus.
Wählen Sie im Mittelungsfenster die Verkettung und aufeinander folgenden Herzzyklen zu einem einzelnen durchschnittlichen Signal oder einer Mittelungsansicht und einer Tabellenansicht aus. Wählen Sie im QTc-Bedienfeld die Bazett-Methode aus, die als Herzfrequenz-korrigierter Wert des QT-Intervalls definiert ist. Platzieren Sie die Maus auf der Präzisionsskala und zeichnen Sie ihr Gewicht auf.
Nachdem sichergestellt wurde, dass die Maus richtig beästhetisiert ist, setzen Elektroden mit Akupunkturnadeln in die rechte und linke Vorderbeine und das linke Hinterglied ein. Stellen Sie sicher, dass Die Elektrodentiefe und -position während der Experimente konsistent sind. Schließen Sie die anderen Enden der Elektroden an, indem Sie sie in die drei Schnappverbinder am anderen Ende der Bleidrähte des drei führenden Bioverstärkerkabels klicken und Medikamente etwa drei Minuten nach dem Anästhetikum injizieren.
10 Minuten nach der Verabreichung von Anästhetika beginnen Sie mit der Aufzeichnung des EKG. Sobald die Aufzeichnung abgeschlossen ist, verwenden Sie die EKG-Daten von 12 bis 17 Minuten nach Injektion von Anästhetika für die Analyse. Wenn Sie fertig sind, entfernen Sie vorsichtig die Elektroden.
Um festzustellen, ob diese nichtinvasive EKG-Messung den Einfluss der autonomen Modulation auf das Herzleitsystem widerspiegelt, wurden normale BALB/c-Mäuse mit Agonisten und Antagonisten des autonomen Nervensystems herausgefordert. Im Vergleich zur Fahrzeugkontrolle stieg die Herzfrequenz bei Atropin und Isoprenalin behandelten Mäusen signifikant an und fiel mit Carbachol. Darüber hinaus stieg das QTc-Intervall bei Atropin und Isoprenalin behandelten Mäusen und verringerte sich bei Carbachol behandelten Mäusen.
Repräsentative Diagrammansichten und Mittelungsansichten der EKG-Signale in Atropin, Carbachol und fahrzeugbehandelten Mäusen werden hier gezeigt. Beim Versuch dieses Protokolls ist es am wichtigsten, sicherzustellen, dass die EKG-Elektroden während des gesamten Experiments sicher eingesetzt werden. Führen Sie mehrere Vorversuche durch, bis die EKG-Signale stabil und konsistent sind.
Unsere früheren Veröffentlichungen mit Mäusen bestätigten EKG-Variationen, die in humangenetischen Studien berichtet worden waren, was den Nutzen dieser Methode in kardiovaskulären Forschungsbereichen wie Arrhythmie unterstützt.
