Organisch-Ischämie-Reperfusionsverletzung durch Simulation hämodynamischer Veränderungen im Lebertransplantationsmodell der Ratte. Ischämie-Reperfusionsverletzungen sind eine häufige Anwendung nach Lebertransplantation. Patienten mit extrahepatischer Organbeteiligung neigen dazu, länger im Krankenhaus zu bleiben, mehr auszugeben und eine schlechtere Prognose zu haben.
Die Entwicklung der Komplikation hängt eng mit der Länge der anhepatischen Phase der Lebertransplantation zusammen. Die Grundlagenforschung zur Ischämie-Reperfusionsverletzung nach lebertransplantation hat jedoch gezeigt, dass die Überlebensrate nach Lebertransplantation umgekehrt mit dem Grad der Verletzung extrahaptischer Organe zusammenhängt. Basierend auf der Definition der anhaptischen Phase simulierten wir die hämodynamische Veränderung der Lebertransplantation, die zu einer Ischämie-Reperfusionsverletzung von extrahaptischen Organen führte.
Dieses Papiers soll eine detaillierte Beschreibung des Aufbaus eines Tiermodells der anhaptischen Phase bei Ratten, Grundlagenforschung zur Ischämie-Reperfusionsverletzung nach Lebertransplantation liefern. Dr.Yuan Yuan ist für alle Videotieroperationen verantwortlich. Zwei ophthalmologische Zangen, gerade und biegt, und interokulare Linse, IOL Zange, ophthalmologische Schere, ein bis zwei Retraktoren, Wattestäbchen, 3-0 chirurgische Nähte, iodoform Gaze, Nahtnadeln, Biosysteme, wenn nötig, und interokulare Linse, IOL Zangen wird verwendet, um Blutgefäße wegen Rundköpfen zu trennen.
Tieranästhesiemaschine, Entwässerungsmaschine, Einbettmaschine, pathologische Schneidemaschine, Tiefkühlmaschine, Tissueschneider, Lufttrockner, neuraloptisches Mikroskop, Scanner, Enfluran zur Vollnarkose, 4%Paraformaldehydlösung, beliebiges Ethanol, Xylol, hocheffizientes Paraffinwachs, Hämatoxylin-Eosin-Farbstofflösung, Salzsäure, Ammoniak, Rutsche, Deckglas, neutrales Gummi und Absterben. Pipetten, Zentrifuge, automatischer biochemischer Analysator, Alanin-Aminotransferase, ALT-Kit, Aspartat, Aminotransferase, AST-Kit, Kreatinin-Kit. Nach dem Wiegen werden die Ratten von einer Tieranästhesiemaschine mit Isofluran bezähngt.
Nach der Abdominaldesinfektion, machen Sie einen medianen Schnitt von drei Zentimetern unter dem xiphoiden Prozess mit Zangen und Schere. Öffnen Sie die Bauchhöhle, setzen Sie die Leber mit einem Retraktor aus und mobilisieren Sie das hepatogastrische Band. Verwenden Sie Wattestäbchen, um den mittleren Lappen der Leber sanft umzudrehen und drehen Sie ihn nach oben, um die Porta habitis freizulegen.
Identifizieren Sie den Gallengang, die Portalvene und die Leberarterie. Schieben Sie den Dünndarm mit Baumwoll-Swaps in Richtung der linken unteren Bauchhöhle und bewegen Sie die unterlegene Venenhöhle in die rechte Nierenvene, isolieren Sie die Portalvene, die Leberarterie und die untere Venenhöhle oberhalb der rechten Nierenvene mit einer Intraokularlinse, IOL, Zangen, die jeweils mit 3-0 Seidenfaden mit einem Schlupfknoten markiert sind. Schneiden Sie die Haut der linken und rechten unteren Extremität auf und belichten Sie die Oberschenkelvene mit ophthalmologischen Zangen.
Injizieren Sie langsam niedermolekulares Heparin 625 I.E./kg durch die Femoralvene, um den ganzen Körper zu heparinisieren. Ligate die Portalvene, Leberarterie, und unterlegene Vena Cava über der rechten Nierenvene mit der Nummer 3-0 Nähte, für 45 Minuten dauern. Ersetzen Sie den Dünndarm in der Bauchhöhle und bedecken Sie ihn mit Gaze.
Inhalationsanästhesie wird während dieser Perioden reduziert. Nach 45 Minuten, lassen Sie die Portalvene, leberarteriende arterien, und die unterlegene Vena cava über der rechten Nierenvene. Muskel und Haut Schicht für Schicht befolgen und die inhalative Anästhesie beenden.
Geben Sie postoperative Analgesie mit subkutanem Morphin von 5 mg/kg alle vier Stunden Beobachten Sie die Ratte bis zum Erwachen und halten Sie unter einer Temperatur von 25 plus oder minus zwei Grad Celsius und Feuchtigkeit von 50 plus oder minus 10% Tier HeizungLampen erforderlich. In diesem Tiermodell wurden die Ratten nach dem Zufallsprinzip 15 Minuten lang nach Ischämie, i 15 Gruppen, 30 Minuten, I 30 Gruppe, 45 Minuten, I 45 Gruppe, 60 Minuten, I 60 und eine Scheingruppe mit 10 Ratten in jeder Gruppe nach dem Zufallsprinzip eingeteilt. Ihre Überlebensrate jeder Gruppe wurde 14 Tage nach der Operation beobachtet.
Alle Ratten überlebten in den Gruppen I 15, I 30 und Schein. Acht überlebten 14 Tage in der I 45 Gruppe und nur zwei in der I 60 Gruppe. Die Ergebnisse legten nahe, dass die Ratten die anhepatische Phase höchstens 45 Minuten tolerieren könnten.
Während des Experiments wurde Biosystems verwendet, um die Veränderungen der Herzfrequenz und des Blutdrucks, die richtige interne Karotisarterienintubation vor und nach der anhepatischen Phase aufzuzeichnen. Wir fanden heraus, dass sich die Herzfrequenz und der mittlere arterielle Druck, MAP von Ratten, nach der Gefäßligation dramatisch veränderten. Nach Ligation, Leberischämie, Stau, und Ödeme im Darm, Magenvarizen und Splenomegalie waren offensichtlich.
80 Ratten wurden nach dem Zufallsprinzip in acht Gruppen eingeteilt, darunter Ischämie für 45 Minuten, T0, Reperfusion für sechs Stunden, T6, 12 Stunden, T12, 24 Stunden, T24, 48 Stunden, T48, 72 Stunden, T72, sieben Tage, T7, in 14 Tagen, T14, bzw. T14. Die Niere, Bauchspeicheldrüse, Dünndarm, Herz- und Lungengewebe wurden eingenommen und mit HE gefärbt, nachdem Ratten geopfert wurden. Mit Ausnahme des Herzens wurden pathologische Noten nach Referenzen bzw. angegeben.
Die Ergebnisse zeigten, dass die Zeit der maximalen Verletzung der extrahepatischen Organe variierte. Es dauerte sechs bis 24 Stunden nach der Operation für die Bauchspeicheldrüse und 24 bis 48 Stunden für die Lunge. Der Darmtrakt und die Niere wurden nach 45 Minuten Ischämie am schwersten verletzt.
Es gab keine offensichtliche Anomalie der Darmschleimhaut 24 Stunden nach der Operation und die Nieren erholten sich nach 48 Stunden. Was das Herz betrifft, so wurden im Laufe der Zeit nach der Reperfusion lokale Myokardzellnarkose, Zellfragmentierung und -auflösung, entzündliche Zellinfiltration sowie lokale Vasodilatation und Verstopfung im Gewebe 24 bis 48 Stunden nach der Operation gefunden. Serum wurde gesammelt und die Konzentrationen von ALT, AST, Kreatinin und Amylase wurden von einem automatischen biochemischen Analysator nachgewiesen.
Alle Indikatoren erreichten einen Höchststand von 24 bis 48 Stunden, im Gegensatz zu den pathologischen Veränderungen. Obwohl die Pegel 48 Stunden nach der Operation im Grunde normal waren, dauerten die pathologischen Schäden noch an. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass das Modell bei Ratten einfach und einfacher ohne Mikrochirurgie zu verwenden ist und der Grundlagenforschung der Ischämie-Reperfusionsverletzung von extrahepatischen Organen nach Leberischämie grundlagesbilden.
