dna-based-fish-species-identification-protocol

DNA-based Fish Species Identification Protocol

We have developed a fast, simple, and accurate DNA-based screening method to identify the fish species present in fresh and processed seafood samples. ...

Agilent Technologies

(&#x54ED;) &#x6676;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x6240;&#x4F5C;&#x7684;&#x82CF;&#x4E91;&#x91D1;&#x82BD;&#x5B62;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x662F;&#x6210;&#x5B54;&#x5177;&#x4F53;&#x76EE;&#x6807;&#x6606;&#x866B;&#x548C;&#x7EBF;&#x866B;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E8E;&#x4E16;&#x754C;&#x5404;&#x5730;&#x6740;&#x6B7B;&#x5BB3;&#x866B;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x4E0E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E3B;&#x673A;&#x4EA4;&#x4E92;&#x6210;&#x5B54;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7B5B;&#x67E5;&#x62B5;&#x5236;&#x54ED;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x7684;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x7A81;&#x53D8;&#x83CC;&#x682A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x54ED;&#x6BD2;&#x7D20;&#x62B5;&#x6297;&#x6D89;&#x53CA;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7CD6;&#x82F7;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;bre 2 &#x548C; bre-4 &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CD6;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x80A0;&#x4EE5;&#x6388;&#x4E88;&#x5BF9;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x90FD;&#x9700;&#x8981;&#x4E0E;&#x80A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x53D7;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#xFF0C;bre 3 &#x8010;&#x836F;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E5F;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x4E0E;&#x80A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x7D20;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x3002;Bre-3 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x662F;&#x7EBF;&#x866B;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x4E66;&#x5446;&#x5B50; (&#x6B27;&#x6D32;&#x52A0;&#x6C99;&#x533B;&#x9662;) &#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x65E2;&#x7136;&#x4EE5;&#x524D;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684; bre 5 &#x5177;&#x6709;&#x540C;&#x6E90;&#x5230;&#x679C;&#x8747;&#x5965;&#x65AF;&#x5361; (brn) &#x548C;&#x6B27;&#x6D32;&#x52A0;&#x6C99;&#x533B;&#x9662; brn &#x53EF;&#x80FD;&#x51FD;&#x6570;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7CD6;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD9;&#x4E00;&#x9274;&#x5B9A;&#x7ED3;&#x679C;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x9707;&#x60CA;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x50CF;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x3001; &#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x4E00;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684; bre 3 &#x548C; bre-5 &#x884C;&#x4E3A;&#x3002;bre 2 &#x548C; bre 4 &#x4E5F;&#x662F;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5EF6;&#x957F;&#x5B83;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x5176;&#x540C;&#x6E90;&#x5230; brn&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; C.&#x7EBF;&#x866B; bre 5 &#x8425;&#x6551;&#x679C;&#x8747; brn &#x7A81;&#x53D8;&#x548C;&#x8BE5; BRE 5 &#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#xFF0C;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684; UDP-&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x7684; GlcNAc:Man &#x5E38;&#x6CF0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x54ED;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6297;&#x6027;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E86;&#x56DB;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x7EBF;&#x866B;&#x548C;&#x6606;&#x866B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6297;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

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Crystal (Cry) proteins made by the bacterium Bacillus thuringiensis are pore-forming toxins that specifically target insects and nematodes and are used around the world to kill insect pests. To better understand how pore-forming toxins interact with their host, we have screened for Caenorhabditis elegans mutants that resist Cry protein intoxication. We find that Cry toxin resistance involves the loss of two glycosyltransferase genes, bre-2 and bre-4. These glycosyltransferases function in the intestine to confer susceptibility to toxin. Furthermore, they are required for the interaction of active toxin with intestinal cells, suggesting they make an oligosaccharide receptor for toxin. Similarly, the bre-3 resistance gene is also required for toxin interaction with intestinal cells. Cloning of the bre-3 gene indicates it is the C. elegans homologue of the Drosophila egghead (egh) gene. This identification is striking given that the previously identified bre-5 has homology to Drosophila brainiac (brn) and that egh-brn likely function as consecutive glycosyltransferases in Drosophila epithelial cells. We find that, like in Drosophila, bre-3 and bre-5 act in a single pathway in C. elegans. bre-2 and bre-4 are also part of this pathway, thereby extending it. Consistent with its homology to brn, we demonstrate that C. elegans bre-5 rescues the Drosophila brn mutant and that BRE-5 encodes the dominant UDP-GlcNAc:Man GlcNAc transferase activity in C. elegans. Resistance to Cry toxins has uncovered a four component glycosylation pathway that is functionally conserved between nematodes and insects and that provides the basis of the dominant mechanism of resistance in C. elegans.

Resistance to a bacterial toxin is mediated by removal of a conserved glycosylation pathway required for toxin-host interactions.

Prot&eacute;ines cristallines (cri) de la bact&eacute;rie Bacillus thuringiensis sont formatrices de pores toxines sp&eacute;cifiquement les insectes cibl&eacute;s et de n&eacute;matodes et sont utilis&eacute;s dans le monde entier pour tuer les insectes nuisibles. Pour mieux comprendre comment les toxines formant des pores interagissent avec leurs h&ocirc;tes, nous avons projet&eacute; des mutants d&#39;elegans de Caenorhabditis intoxication prot&eacute;ines Cry de r&eacute;sister &agrave;. Nous trouvons que la r&eacute;sistance &agrave; la toxine Cry implique la perte de deux g&egrave;nes de glycosyltransferase, bre-2 et bre-4. Ces glycosyltransf&eacute;rases fonctionnent dans l&#39;intestin pour conf&eacute;rer une sensibilit&eacute; &agrave; la toxine. En outre, ils sont requis pour l&#39;interaction de la toxine active avec des cellules intestinales, ce qui sugg&egrave;re qu&#39;ils font un r&eacute;cepteur oligosaccharide de toxine. De m&ecirc;me, le g&egrave;ne de r&eacute;sistance de bre-3 est &eacute;galement requis pour l&#39;interaction de toxine par les cellules intestinales. Clonage du g&egrave;ne bre-3 indique c&#39;est l&#39;homologue de c. elegans du g&egrave;ne de la drosophile egghead (EGM). Cette identification est remarquable &eacute;tant donn&eacute; que le bre-5 pr&eacute;c&eacute;demment identifi&eacute;s a homologie de Drosophila brainiac (brn) et cette fonction probable EGM-brn comme glycosyltransf&eacute;rases cons&eacute;cutives dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales de la drosophile. Nous constatons que, comme chez la drosophile, bre-3 et bre-5 Loi dans une seule voie chez c. elegans. bre-2 et bre-4 font &eacute;galement partie de cette voie, &eacute;tendant ainsi. Conform&eacute;ment &agrave; son homologie &agrave; brn, nous d&eacute;montrons que c. elegans bre-5 sauve le mutant brn de Drosophila et que BRE-5 encode la dominante UDP-GlcNAc GlcNAc:Man activit&eacute; chez c. elegans. R&eacute;sistance aux toxines cri a mis au jour une voie de glycosylation en quatre volets qui est fonctionnellement conserv&eacute;es entre les insectes et les n&eacute;matodes et constituant la base du m&eacute;canisme dominant de la r&eacute;sistance chez c. elegans.

R&eacute;sistance &agrave; une toxine bact&eacute;rienne est m&eacute;di&eacute;e par l&#39;enl&egrave;vement d&#39;une voie de glycosylation conserv&eacute;es requise pour l&#39;interaction h&ocirc;te-toxine.

Der Widerstand gegen ein bakterielles Toxin wird durch Entfernen eines konservierten Glycosylierungswegs f&#xFC;r Toxin-Wirt-Wechselwirkungen vermittelt erforderlich.

Crystal (Cry) proteine fatte dal batterio Bacillus thuringiensis sono poro-formando le tossine che specificamente gli insetti bersaglio e nematodi e sono utilizzati nel mondo per uccidere i parassiti di insetto. Per capire meglio come le tossine che formano dei pori interagiscono con il loro ospite, noi abbiamo proiettato per Caenorhabditis elegans mutanti che resistono alla intossicazione proteina Cry. Troviamo che la resistenza di tossina Cry comporta la perdita di due geni glycosyltransferase, bre-2 e bre-4. Questi glycosyltransferases funzione nell&#39;intestino a conferire suscettibilit&agrave; alla tossina. Inoltre, essi sono necessari per l&#39;interazione della tossina attiva con cellule intestinali, suggerendo che fanno un recettore oligosaccaride per tossina. Analogamente, il gene di resistenza bre-3 &egrave; anche necessario per l&#39;interazione della tossina con cellule intestinali. Clonazione del gene bre-3 indica che esso &egrave; l&#39;omologo di c. elegans il gene di Drosophila egghead (egh). Questa identificazione &egrave; sorprendente dato che il bre-5 precedentemente identificati ha omologia di drosofila brainiac (brn) e quello egh-brn probabile funzione come glycosyltransferases consecutivi nelle cellule epiteliali della drosofila. Troviamo che, come in drosofila, bre-3 e bre-5 atto in un unico percorso in c. elegans. bre-2 e bre-4 sono anche parte di questo percorso, quindi che si estende. Coerente con la sua omologia a brn, ci dimostrano che c. elegans bre-5 salv&ograve; il mutante brn drosofila e che BRE-5 codifica il dominante UDP-GlcNAc GlcNAc:Man attivit&agrave; trasferasi in c. elegans. Resistenza alle tossine Cry ha scoperto un percorso di glicosilazione di quattro componenti che funzionalmente &egrave; conservata tra nematodi e insetti e che costituisce la base del meccanismo dominante della resistenza in c. elegans.

Resistenza ad una tossina batterica &egrave; mediata dalla rimozione di un percorso di glicosilazione conservata necessario per le interazioni ospite-tossina.

&#x30D0;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B9; &#x30FB; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B2;&#x30B9;&#x83CC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x7D50;&#x6676; &#xFF08;&#x30AF;&#x30E9;&#x30A4;&#xFF09; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6A19;&#x7684;&#x6606;&#x866B;&#x3084;&#x7DDA;&#x866B;&#x3068;&#x306F;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x4E16;&#x754C;&#x4E2D;&#x306E;&#x5BB3;&#x866B;&#x3092;&#x6BBA;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; Cry &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x7DDA;&#x866B;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x4E0A;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6CE3;&#x304F;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8010;&#x6027;&#x306B;&#x306F; bre 2 &#x3068; bre 4 &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7CD6;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BD2;&#x7D20;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x6388;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x8178;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7CD6;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x7CD6;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3092;&#x4F5C;&#x308B;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x8178;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;bre 3 &#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x8178;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Bre 3 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8; &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30EA; (egh &#x578B;) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7DDA;&#x866B;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3067;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8; brainiac (brn) &#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3068;&#x305D;&#x306E; egh &#x578B; brn &#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9023;&#x7D9A;&#x7CD6;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F; bre-5 &#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x304C;&#x5370;&#x8C61;&#x7684;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x3067;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x7DDA;&#x866B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5358;&#x4E00;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067; bre 3 &#x3068; bre 5 &#x884C;&#x70BA;&#x3002;bre 2 &#x3068; bre 4 &#x3082;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x76F8;&#x540C; brn &#x306B;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x7DDA;&#x866B; bre-5 &#x6551;&#x52A9;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8; brn &#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x305D;&#x306E; BRE 5 &#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A; UDP &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x793A;&#x3059;-GlcNAc:Man GlcNAc &#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x7DDA;&#x866B;&#x306B;&#x3002;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x6BD2;&#x7D20; Cry &#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x7DDA;&#x866B;&#x3068;&#x6606;&#x866B;&#x306E;&#x9593;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306E;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x57FA;&#x76E4;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B; 4 &#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7CD6;&#x9396;&#x4FEE;&#x98FE;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x62B5;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x83CC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x9664;&#x53BB;&#x6BD2;&#x7D20;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x4FDD;&#x5B58;&#x7CD6;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; (&#xC678;&#xCE68;) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C8; &#xADE0;&#xC758; thuringiensis &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131;&#xC740; &#xADF8; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xC0C1; &#xACE4;&#xCDA9; &#xBC0F; nematodes&#xC640;&#xB294; &#xC804;&#xC138;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD574;&#xCDA9; &#xC8FD; &#xC77C; &#xB3C5; &#xC18C;. &#xB354; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xB3C5; &#xC18C; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC678;&#xCE68; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xB3C5; &#xC800;&#xD56D; Caenorhabditis elegans &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xC601; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC6B8; &#xB3C5; &#xC800;&#xD56D; bre-2&#xC640; bre-4 &#xB450; glycosyltransferase &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300; &#xC7A5; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC5D0; &#xBD80;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; glycosyltransferases &#xD568;&#xC218;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC774; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2F9; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC778; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;, bre-3 &#xC800;&#xD56D; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB3C5; &#xC18C; &#xCC3D; &#xC790; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xC774;&#xAE30;&#xB3C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bre-3 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD074;&#xB85C;&#xB2DD; Drosophila &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC778; (egh) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; C. elegans homologue &#xC784;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; id&#xB294; &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; bre 5 Drosophila &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xC18D; &#xB41C; glycosyltransferases&#xB85C; Drosophila &#xCC9C;&#xC7AC; &#xC57C; (brn)&#xC5D0; &#xC0C1; &#xB3D9;&#xC640; egh brn &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xD0C0;&#xACA9; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;, &#xCC98;&#xB7FC;, &#xADF8;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC744; C. elegans&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; bre-3&#xC640; bre-5 &#xBC95;. bre-2&#xACFC; bre-4&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBBC0;&#xB85C;&#xC774; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;. Brn&#xC740; &#xC0C1; &#xB3D9; &#xC77C;&#xCE58;, C. elegans bre-5 &#xAD6C;&#xCD9C; Drosophila brn &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; BRE-5 &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; UDP &#xC2DC;&#xC5F0;-C. elegans&#xC5D0;&#xC11C; GlcNAc:Man Glcnac&#xACFC; &#xD65C;&#xB3D9;. &#xC6B8; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE4;&#xCDA9; &#xBC0F; nematodes &#xC0AC;&#xC774; &#xBCF4;&#xC874;&#xC740; C. elegans&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; glycosylation &#xD1B5;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xADE0; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D; &#xB3C5; &#xC18C;-&#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; glycosylation &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cristal (Cry) las prote&iacute;nas de la bacteria Bacillus thuringiensis son formadoras de poros toxinas que espec&iacute;ficamente insectos objetivo y nematodos y se utilizan en el mundo para matar las plagas de insectos. Para comprender mejor c&oacute;mo las toxinas formadoras de poros interact&uacute;an con su anfitri&oacute;n, nos hemos defendido para Caenorhabditis elegans mutantes resistentes a la intoxicaci&oacute;n de prote&iacute;nas Cry. Encontramos que la resistencia de la toxina Cry implica la p&eacute;rdida de dos genes glicosiltransferasa, bre-2 y bre-4. Estos funcionan de glicosiltransferasas en el intestino para conferir susceptibilidad a la toxina. Adem&aacute;s, son necesarios para la interacci&oacute;n de la toxina activa con las c&eacute;lulas intestinales, sugiriendo hacen un receptor del oligosac&aacute;rido de toxina. Del mismo modo, el gen de resistencia bre-3 tambi&eacute;n se requiere para la interacci&oacute;n de la toxina con las c&eacute;lulas intestinales. Clonaci&oacute;n del gen bre-3 indica es el hom&oacute;logo de C. elegans del gene del Cerebrito (egh) de Drosophila. Esta identificaci&oacute;n es sorprendente dado que el previamente identificadas bre-5 tiene homolog&iacute;a a Drosophila brainiac (brn) y esa funci&oacute;n probable egh-brn como glicosiltransferasas consecutivos en las c&eacute;lulas epiteliales de la Drosophila. Nos encontramos con que, como en Drosophila, acto bre-3 y bre-5 en una sola v&iacute;a en C. elegans. bre-2 y bre-4 tambi&eacute;n forman parte de esta v&iacute;a, de tal modo que se extienda. Consistente con su homolog&iacute;a a brn, demostramos que C. elegans bre-5 rescata el mutante de brn Drosophila y eso BRE-5 codifica la UDP dominante-GlcNAc GlcNAc:Man la actividad transferasa en C. elegans. Resistencia a las toxinas Cry ha descubierto un camino de glicosilaci&oacute;n de cuatro componentes que funcionalmente se conserva entre insectos y nematodos y que constituye la base del mecanismo dominante de resistencia en C. elegans.

Resistencia a una toxina bacteriana est&aacute; mediada por el retiro de un camino de glicosilaci&oacute;n conservado para toxina-host interactions.

&#x4E0E;&#x76EE;&#x6807;&#x4E3B;&#x673A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7531;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x4E3B;&#x673A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x6216;&#x8005;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4E3B;&#x673A;&#x6216;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x571F;&#x58E4;&#x7EBF;&#x866B;&#x662F;&#x6709;&#x597D;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x83CC;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#xFF0C;&#x50CF;&#x7B80;&#x8981;&#x56DE;&#x987E;&#x4E86;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x3002;&#x82CF;&#x4E91;&#x91D1;&#x82BD;&#x5B62;&#x6746;&#x83CC; (Bt) &#x662F;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x7EBF;&#x866B;&#x662F;&#x53EF;&#x80FD;&#x9047;&#x5230;&#x81EA;&#x7136;&#x571F;&#x58E4;&#x4E2D;&#x3002;&#x6240;&#x4F5C;&#x7684; Bt &#x7684;&#x5B54;&#x9699;&#x5F62;&#x6210;&#x6676;&#x4F53; (&#x54ED;) &#x6BD2;&#x7D20;&#x88AB;&#x786E;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x6B64;&#x4E3B;&#x673A;--&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;C.&#x7EBF;&#x866B;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x83CC;&#x682A;&#x8010;&#x54ED;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF0C;Cry5B&#xFF0C;&#x8F6C;&#x53D1;&#x9057;&#x4F20;&#x5C4F;&#x5E55;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3B;&#x673A;&#x78B3;&#x6C34;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7ED3;&#x6784;&#x5F88;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x5728;&#x4E3B;&#x673A;&#x80A0;&#x5185;&#x8868;&#x793A; Cry5B &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x662F;&#x6839;&#x636E;&#x5176;&#x4ED6;&#x78B3;&#x6C34;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x53D7;&#x4F53;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E86;&#x3002;&#x8C03;&#x67E5;&#x5728;&#x5168;&#x7403;&#x4E00;&#x7EA7;&#x4E3B;&#x673A;&#x6BD2;&#x7D20;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x6210;&#x5B54;&#x7684; Cry5B C.&#x7EBF;&#x866B;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E5F;&#x6B63;&#x5728;&#x8C03;&#x67E5;&#x5206;&#x6790; (&#x82AF;&#x7247;) &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x4E5F;&#x5F00;&#x59CB;&#x63ED;&#x793A;&#x63A5;&#x89E6;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x89D2;&#x5EA6;&#x6765;&#x770B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E3B;&#x673A;&#x54CD;&#x5E94;&#x5176;&#x4ED6;&#x5B54;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3002;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E0E; Cry5B &#x8C03;&#x67E5;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x5E2E;&#x52A9;&#x9610;&#x660E;&#x4E3B;&#x673A;&#x6BD2;&#x7D20;&#x548C;&#x5BC4;&#x4E3B;--&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5145;&#x6EE1;&#x5E0C;&#x671B;&#x7684;&#x5F00;&#x59CB;&#x3002;

&#x5B54;&#x8815;&#x866B;&#xFF1A; &#x4F7F;&#x7528;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x7814;&#x7A76;&#x5982;&#x4F55;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E0E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x76EE;&#x6807;&#x4E3B;&#x673A;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

The interaction of pathogenic bacteria with a target host is regulated both by bacterial virulence factors and by host components that either protect the host or that promote pathogenesis. The soil nematode Caenorhabditis elegans is a host for a number of bacterial pathogens, as briefly reviewed here. Bacillus thuringiensis (Bt) is a pathogenic bacteria that C. elegans is likely to encounter naturally in the soil. The pore-forming Crystal (Cry) toxins made by Bt are recognized as the dominant virulence factor in this host-pathogen interaction. Forward genetic screens for C. elegans mutants resistant to the Cry toxin, Cry5B, have identified a host carbohydrate structure that promotes pathogenesis. Data suggest this structure is likely to be a Cry5B receptor expressed in the host intestine. This finding is discussed in light of other carbohydrate receptors for bacterial toxins. To investigate host-toxin interactions on a global level, the response of C. elegans to the pore-forming Cry5B is also being investigated by gene transcription profiling (microarrays). These data are beginning to reveal a diverse intracellular response to toxin exposure. To put these investigations in perspective, host responses to other pore-forming toxins are discussed. Investigations with Cry5B in C. elegans show a promising beginning in helping to elucidate host-toxin and host-pathogen interactions.

Pore worms: using Caenorhabditis elegans to study how bacterial toxins interact with their target host.

L&#39;interaction des bact&eacute;ries pathog&egrave;nes avec un h&ocirc;te cible est r&eacute;gul&eacute;e par des facteurs de virulence bact&eacute;riens et composants h&ocirc;te que soit prot&eacute;ger l&#39;h&ocirc;te ou qui promouvoir la pathogen&egrave;se. Le sol n&eacute;matode Caenorhabditis elegans est un h&ocirc;te pour un certain nombre de bact&eacute;ries pathog&egrave;nes, comme passe bri&egrave;vement en revue ici. Bacillus thuringiensis (Bt) est un pathog&egrave;ne bact&eacute;ries que c. elegans est susceptible de rencontrer naturellement dans le sol. Toxines formant des pores Crystal (CRI) de Bt sont reconnus comme &eacute;tant le facteur de virulence dominante dans cette interaction h&ocirc;te-pathog&egrave;ne. Avancer les &eacute;crans g&eacute;n&eacute;tiques pour le c. elegans mutants r&eacute;sistants &agrave; la toxine Cry, Cry5B, ont identifi&eacute; une structure de glucides h&ocirc;te qui favorise la pathogen&egrave;se. Les donn&eacute;es sugg&egrave;rent que cette structure est susceptible d&#39;&ecirc;tre un r&eacute;cepteur Cry5B exprim&eacute; dans l&#39;intestin de l&#39;h&ocirc;te. Cette constatation est examin&eacute;e &agrave; la lumi&egrave;re d&#39;autres r&eacute;cepteurs de glucides pour les toxines bact&eacute;riennes. Afin d&#39;&eacute;tudier les interactions h&ocirc;te-toxine au niveau mondial, la r&eacute;ponse de c. elegans &agrave; la Cry5B formant des pores est &eacute;galement examin&eacute;e par la transcription du g&egrave;ne de profilage (puces). Ces donn&eacute;es ont commenc&eacute; &agrave; r&eacute;v&eacute;ler une r&eacute;ponse diversifi&eacute;e intracellulaire &agrave; l&#39;exposition de la toxine. Pour mettre ces enqu&ecirc;tes en perspective, h6te d&#39;autres toxines formant des pores est discut&eacute;s. Enqu&ecirc;tes avec Cry5B chez c. elegans montrent un d&eacute;but prometteur pour aider &agrave; &eacute;lucider les interactions h&ocirc;te-toxine et h&ocirc;te-pathog&egrave;ne.

Vers des pores: &agrave; l&#39;aide de Caenorhabditis elegans pour &eacute;tudier les toxines bact&eacute;riennes comment interagir avec leur h&ocirc;te cible.

Pore &#x200B;&#x200B;W&#xFC;rmer: mit Caenorhabditis elegans zu untersuchen, wie bakterielle Toxine mit ihren Ziel-Host interagieren.

L&#39;interazione dei batteri patogeni con un host di destinazione &egrave; regolata sia da fattori di virulenza batterica e da componenti di host che sia proteggere l&#39;host o che promuovere la patogenesi. Il suolo nematode Caenorhabditis elegans &egrave; un host per un certo numero di agenti patogeni batterici, come brevemente recensito qui. Bacillus thuringiensis (Bt) &egrave; un patogeno batteri che c. elegans &egrave; probabile incontrare naturalmente nel terreno. Le tossine di cristallo (Cry) formando dei pori da Bt sono riconosciute come il fattore di virulenza dominante in questa interazione ospite-patogeno. Avanti schermi genetici per c. elegans mutanti resistenti alla tossina Cry, Cry5B, hanno identificato una struttura ospitante carboidrati che promuove la patogenesi. I dati suggeriscono che questa struttura &egrave; probabile che sia un recettore Cry5B espresso nell&#39;intestino dell&#39;ospite. Questa constatazione &egrave; discusso alla luce altri recettori di carboidrati per le tossine batteriche. Per indagare sulle interazioni ospite-tossina a livello globale, si &egrave; indagata la risposta di c. elegans per la Cry5B formando dei pori di trascrizione del gene profiling (microarray). Questi dati stanno iniziando a rivelare una risposta intracellulare diversa esposizione tossina. Per mettere queste indagini in prospettiva, risposte ospite di altre tossine che formano dei pori sono discussi. Indagini con Cry5B in c. elegans mostrano un inizio promettente nel contribuire a delucidare le interazioni ospite-tossina e ospite-patogeno.

Poro vermi: utilizzando Caenorhabditis elegans per studiare le tossine batteriche come interagire con loro host di destinazione.

&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x4E21;&#x65B9;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3067;&#x7D30;&#x83CC;&#x75C5;&#x539F;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x767A;&#x75C7;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x571F;&#x58CC;&#x7DDA;&#x866B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x306F;&#x3053;&#x3053;&#x3092;&#x898B;&#x76F4;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x6570;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B9; &#x30FB; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B2;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B9; &#xFF08;Bt&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;&#x306F;&#x81EA;&#x7136;&#x571F;&#x58CC;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3002;Bt &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x7D50;&#x6676; &#xFF08;&#x30AF;&#x30E9;&#x30A4;&#xFF09; &#x6BD2;&#x7D20;&#x306F;&#x5BBF;&#x4E3B;-&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x8981;&#x56E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x524D;&#x65B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x753B;&#x9762;&#x7DDA;&#x866B;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3001;&#x6CE3;&#x304F;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3001;Cry5B&#x3001;&#x8010;&#x75C5;&#x56E0;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x70AD;&#x6C34;&#x5316;&#x7269;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x8178;&#x5185;&#x3092;&#x767A;&#x73FE; Cry5B &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x70AD;&#x6C34;&#x5316;&#x7269;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D30;&#x83CC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3092;&#x7167;&#x3089;&#x3057;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210; Cry5B &#x3078;&#x306E; c. &#x306E; elegans &#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; (&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x307E;&#x305F;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x6BD2;&#x7D20;&#x66B4;&#x9732;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x59CB;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x8996;&#x70B9;&#x3067;&#x914D;&#x7F6E;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DDA;&#x866B;&#x3067;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB; Cry5B &#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3068;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3046;&#x3048;&#x3067;&#x6709;&#x671B;&#x306E;&#x59CB;&#x307E;&#x308A;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EF;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x9593;&#x9699;: &#x7DDA;&#x866B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB300;&#xC0C1; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; &#xBAA8;&#xB450; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB610;&#xB294; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xADE0; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC778; &#xC5EC; pathogenesis &#xD64D;&#xBCF4;. &#xD1A0;&#xC591; &#xC120; &#xCDA9; &#xB958; Caenorhabditis elegans&#xB294; &#xC9E7;&#xAC8C; &#xC5EC;&#xAE30; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0; &#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xC0C8; &#xADE0;&#xC758; thuringiensis (Bt)&#xC740; &#xD55C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xB294; C. elegans &#xD1A0;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xC5F0;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB192;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bt&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; (&#xC678;&#xCE68;) &#xB3C5;&#xC774; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xC2DD; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. C. elegans &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC6B8; &#xB3C5; &#xC18C;, Cry5B, &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC55E;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD654;&#xBA74; pathogenesis &#xCD09;&#xC9C4; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD0C4;&#xC218;&#xD654;&#xBB3C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xAC83;&#xC774; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; Cry5B &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xCC3D;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB420; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC740; &#xC138;&#xADE0; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD0C4;&#xC218;&#xD654;&#xBB3C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xCD94;&#xC5B4; &#xB17C;&#xC758; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;-&#xB3C5; &#xC18C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; C. elegans&#xC758; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; Cry5B &#xC751;&#xB2F5;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; (microarrays)&#xB97C; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xB3C5; &#xC18C; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD00;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xB123;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74;, &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. C. elegans&#xC5D0; cry5b&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC870;&#xC0AC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB3C5;&#xACFC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC791;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE30; &#xACF5; &#xBC8C;&#xB808;: Caenorhabditis&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; elegans &#xACF5;&#xBD80; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC138;&#xADE0; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La interacci&oacute;n de las bacterias pat&oacute;genas con un host de destino est&aacute; reglamentada por factores de virulencia bacteriana y por componentes de host que ya sea proteger el host o que promueven la patogenesia. El suelo nematodo Caenorhabditis elegans es un anfitri&oacute;n para un n&uacute;mero de bacterias pat&oacute;genas, como brevemente rese&ntilde;adas aqu&iacute;. Bacillus thuringiensis (Bt) es un pat&oacute;geno bacterias eso C. elegans es probable encontrar naturalmente en el suelo. Las toxinas formadoras de poros de cristal (Cry) de Bt son reconocidas como el factor de virulencia dominante en esta interacci&oacute;n hospedante-pat&oacute;geno. Avance gen&eacute;ticos pantallas para C. elegans mutantes resistentes a la toxina Cry, Cry5B, han identificado una estructura de carbohidratos de acogida que promueve la patogenesia. Los datos sugieren que esta estructura es probable que sea un receptor Cry5B expresado en el intestino del hu&eacute;sped. Este hallazgo se discute a la luz de otros receptores de hidratos de carbono para las toxinas bacterianas. Para investigar las interacciones host-toxina a nivel mundial, la respuesta de C. elegans a la formaci&oacute;n de poros Cry5B tambi&eacute;n est&aacute; siendo investigada por la transcripci&oacute;n del gen perfilado (microarrays). Estos datos est&aacute;n empezando a revelar una respuesta intracelular diversa a la exposici&oacute;n de la toxina. Para poner estas investigaciones en perspectiva, se discuten las respuestas del host a otras toxinas formadoras de poros. Las investigaciones con Cry5B en C. elegans demuestran un comienzo prometedor para ayudar a aclarar las interacciones host-toxina y hospedante-pat&oacute;geno.

Poro gusanos: usando Caenorhabditis elegans para estudiar las toxinas bacterianas c&oacute;mo interactuar con su host de destino.

&#x6EB6;&#x6210;&#x5B54;&#x6BD2;&#x7D20;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x5F88;&#x591A;&#x81F4;&#x75C5;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3002;&#x5982;&#x4F55;&#x9776;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5B50;&#x54CD;&#x5E94;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88C5;&#x8F7D;&#x9632;&#x5FA1;&#x5374;&#x4E0D;&#x751A;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x7EBF;&#x866B;&#x575A;&#x51B3;&#x54CD;&#x5E94; Cry5B&#xFF0C;&#x6240;&#x4F5C;&#x7684;&#x82CF;&#x4E91;&#x91D1;&#x82BD;&#x5B62;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x5B54;&#x9699;&#x5F62;&#x6210;&#x6676;&#x4F53;&#x6BD2;&#x7D20;&#x5927;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;&#x6B64;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x54CD;&#x5E94;&#x662F;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x770B;&#x5230;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5E94;&#x6FC0;&#x6E90;&#xFF0C;&#x91CD;&#x91D1;&#x5C5E;&#x9549;&#x3002;P38 &#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; (MAPK) &#x6FC0;&#x9176;&#x548C; c &#x541B; N-&#x7EC8;&#x7AEF;&#x6837;&#x6FC0;&#x9176;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x4E0A;&#x8C03;&#x7684; Cry5B &#x90FD;&#x662F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A; MAPK &#x901A;&#x8DEF;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8981;&#x4E48;&#x6D88;&#x9664;&#x5BFC;&#x81F4;&#x662F; (i) &#x8FC7;&#x654F;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF0C;&#x6162;&#x6027;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x548C; (ii) &#x8FC7;&#x654F;&#x6BD2;&#x7D20;&#x9AD8;&#x3001; &#x7B80;&#x77ED;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6837;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x5728;&#x91CE;&#x5916;&#x81EA;&#x7136;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x9047;&#x5230;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6291;&#x5236; p38 &#x7684;&#x5E7C;&#x4ED3;&#x9F20;&#x80BE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x654F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6C14;&#xFF0C;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x5B54;&#x9699;&#x5F62;&#x6210;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x51FA;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0B;&#x6E38;&#x8F6C;&#x5F55;&#x76EE;&#x6807;&#x7684; ttm-1&#x3001; p38 mapk &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x3001; ttm-2&#xFF0C;&#x6240;&#x9700;&#x7684; Cry5B &#x7684;&#x9632;&#x5FA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x62B5;&#x5FA1;&#x5B54;&#x9699;&#x5F62;&#x6210;&#x6BD2;&#x7D20;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B88;&#x6052; MAPK &#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

&#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#x62B5;&#x5FA1;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x5B54;&#x9699;&#x5F62;&#x6210;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3002;

Cytolytic pore-forming toxins are important for the virulence of many disease-causing bacteria. How target cells molecularly respond to these toxins and whether or not they can mount a defense are poorly understood. By using microarrays, we demonstrate that the nematode Caenorhabditis elegans responds robustly to Cry5B, a member of the pore-forming Crystal toxin family made by Bacillus thuringiensis. This genomic response is distinct from that seen with a different stressor, the heavy metal cadmium. A p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) kinase and a c-Jun N-terminal-like MAPK are both transcriptionally up-regulated by Cry5B. Moreover, both MAPK pathways are functionally important because elimination of either leads to animals that are (i) hypersensitive to a low, chronic dose of toxin and (ii) hypersensitive to a high, brief dose of toxin such that the animal might naturally encounter in the wild. These results extend to mammalian cells because inhibition of p38 results in the hypersensitivity of baby hamster kidney cells to aerolysin, a pore-forming toxin that targets humans. Furthermore, we identify two downstream transcriptional targets of the p38 MAPK pathway, ttm-1 and ttm-2, that are required for defense against Cry5B. Our data demonstrate that cells defend against pore-forming toxins by means of conserved MAPK pathways.

Mitogen-activated protein kinase pathways defend against bacterial pore-forming toxins.

Cytolytiques toxines formant des pores sont importants pour la virulence de nombreuses bact&eacute;ries pathog&egrave;nes. Comment les cellules cibles mol&eacute;culaires r&eacute;pondent &agrave; ces toxines et s&#39;ils peuvent monter une d&eacute;fense sont mal compris. &Agrave; l&#39;aide de puces &agrave; ADN, nous d&eacute;montrons que le n&eacute;matode Caenorhabditis elegans r&eacute;agit vigoureusement &agrave; Cry5B, un membre de la famille de toxine cristaux formant des pores de Bacillus thuringiensis. Cette r&eacute;ponse g&eacute;nomique est distincte de celle observ&eacute;e avec un facteur de stress diff&eacute;rente, le cadmium m&eacute;tal lourd. Une p38 mitogen-activated protein kinases (MAPK) kinase et l&#39;une MAPK c-Jun N-terminal-like sont &agrave; la fois transcriptionally r&eacute;gul&eacute;e par Cry5B. En outre, les deux voies MAPK sont fonctionnellement importants parce que l&#39;&eacute;limination soit conduit aux animaux qui sont (i) une hypersensibilit&eacute; &agrave; une dose faible, chronique de la toxine et (ii) une hypersensibilit&eacute; &agrave; une dose &eacute;lev&eacute;e, bref des toxines telles que l&#39;animal pourrait rencontrer naturellement &agrave; l&#39;&eacute;tat sauvage. Ces r&eacute;sultats s&#39;&eacute;tendent &agrave; des cellules de mammif&egrave;res, parce que l&#39;inhibition de p38 entra&icirc;ne l&#39;hypersensibilit&eacute; des cellules de reins de jeunes hamsters d&#39;a&eacute;rolysine, une toxine formatrice de pore qui cible les humains. En outre, nous identifions deux cibles transcriptionnelles en aval de la voie de la MAPK p38, ttm-1 et ttm-2, qui sont n&eacute;cessaires &agrave; la d&eacute;fense contre les Cry5B. Nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent que les cellules se d&eacute;fendent contre formant des pores toxines au moyen de voies MAPK conserv&eacute;es.

Voies de mitogen-activated protein kinase se d&eacute;fendent contre les toxines bact&eacute;riennes formant des pores.

Mitogen-aktivierten Protein-Kinase-Signalwege gegen bakterielle porenbildende Toxine zu verteidigen.

Citolitica tossine formando dei pori sono importanti per la virulenza di molti batteri patogeni. Come bersaglio le cellule molecolarmente rispondano a queste tossine e se non si pu&ograve; montare una difesa sono capiti male. Usando i microarrays, dimostriamo che il nematode Caenorhabditis elegans robustamente risponde a Cry5B, un membro della famiglia tossina Crystal formando dei pori di Bacillus thuringiensis. Questa risposta genomica &egrave; distinta da quello visto con un fattore di stress differenti, il cadmio di metallo pesante. Una chinasi della chinasi (MAPK) della proteina mitogene-attivata p38 e un c-Jun N-terminal-come MAPK sono entrambi transcriptionally up-regolata da Cry5B. Inoltre, entrambe vie MAPK sono funzionalmente importante perch&eacute; eliminazione o conduce agli animali che sono ipersensibili (i) ad una dose bassa, cronica di tossina e (ii) ipersensibili a una breve, alta dose di tossina tale che l&#39;animale naturalmente riscontrabili in natura. Questi risultati si estendono in cellule di mammiferi perch&eacute; l&#39;inibizione della p38 risultati l&#39;ipersensibilit&agrave; delle cellule renali di criceto baby a Aerolisina, una tossina che formano dei pori che gli obiettivi di esseri umani. Inoltre, ci identifichiamo due a valle transcriptional obiettivi del p38 MAPK pathway, ttm-1 e ttm-2, che sono necessari per la difesa contro Cry5B. I nostri dati dimostrano che le cellule difendere contro poro-formando le tossine tramite vie MAPK conservate.

Percorsi della chinasi di proteina mitogene-attivata difendono contro tossine batteriche che formano dei pori.

&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5206;&#x5B50;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3084;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x9632;&#x885B;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x7406;&#x89E3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x7DDA;&#x866B;&#x304C;&#x9811;&#x5065; Cry5B&#x3001;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4E00;&#x54E1;&#x30D0;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B9; &#x30FB; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B2;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x7D50;&#x6676;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x91CD;&#x91D1;&#x5C5E;&#x30AB;&#x30C9;&#x30DF;&#x30A6;&#x30E0;&#x3092;&#x898B;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;P38 &#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;MAPK&#xFF09; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068; c Jun N &#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x69D8; MAPK &#x4E21;&#x65B9; Cry5B &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x767A;&#x73FE;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x304C;&#x8ABF;&#x6574;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x9664;&#x53BB;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x304C;&#x81EA;&#x7136;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x306A;&#x3069;&#x306B;&#x306F;&#x3001;(i) &#x904E;&#x654F;&#x75C7;&#x3001;&#x6162;&#x6027;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3068; (ii) &#x904E;&#x654F;&#x75C7;&#x306E;&#x77ED;&#x3044;&#x3001;&#x9AD8;&#x7DDA;&#x91CF;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x4E21;&#x65B9; MAPK &#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;P38 &#x963B;&#x5BB3;&#x8D64;&#x3093;&#x574A;&#x306E;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x814E;&#x81D3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904E;&#x654F;&#x75C7;&#x306E;&#x7D50;&#x679C; aerolysin&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Cry5B &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9632;&#x5FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A; 2 &#x3064;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; ttm 2&#x3001;ttm 1&#x3001;p38 MAPK &#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x9699;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x5B88;&#x308B;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F; MAPK &#x7D4C;&#x8DEF;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x7D30;&#x83CC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x5B88;&#x308B;&#x3002;

Cytolytic &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; &#xB3C5; &#xC18C;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC0C1; &#xC140;&#xC774; &#xB3C5;&#xC774; &#xC18C; &#xBC0F; &#xD0D1;&#xC7AC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC5EC;&#xBD80; &#xBD84;&#xC790;&#xB85C; &#xB300;&#xC751; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xBC29;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC11C; &#xD22C;&#xB974; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574;. Microarrays &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC120; &#xCDA9; &#xB958; Caenorhabditis elegans &#xC751;&#xB2F5; &#xACAC;&#xACE0; Cry5B, &#xC0C8; &#xADE0;&#xC758; thuringiensis&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xB3C5; &#xC18C; &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC8C;&#xB188; &#xC751;&#xB2F5;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;, &#xC911; &#xAE08;&#xC18D; &#xCE74;&#xB4DC;&#xBBB4; &#xBCFC; &#xAD6C;&#xBD84; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. P38 &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (MAPK) &#xD0A4;&#xC640; c 6 &#xC6D4; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xAC19;&#xC740; MAPK transcriptionally &#xCD5C;&#xB300; cry5b&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB458; &#xB2E4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB450; MAPK &#xACBD;&#xB85C; &#xC911;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xB294; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC57C;&#xC0DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xC5F0;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; (i) &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;, &#xB9CC;&#xC131; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xACFC;&#xBBFC; &#xD558; &#xACE0; (ii) &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xB192;&#xC740;, &#xAC04;&#xB7B5; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xACFC;&#xBBFC;&#xC740; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xB9AC;&#xB4DC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; p38 &#xC800;&#xD574; &#xC544;&#xAE30; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xACFC;&#xBBFC;&#xC131; aerolysin, &#xC778;&#xAC04;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; &#xB3C5; &#xC18C;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD655;&#xC7A5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; transcriptional &#xB300;&#xC0C1; p38 MAPK &#xACBD;&#xB85C;, ttm 1 ttm 2&#xC758; cry5b&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC140;&#xC758; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; &#xBC29;&#xC5B4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; MAPK &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB3C5; &#xC18C;.

&#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xACBD;&#xB85C; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; &#xC138;&#xADE0; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xC5B4;.

Citol&iacute;ticas toxinas formadoras de poros son importantes para la virulencia de las bacterias que causan enfermedades. C&oacute;mo las c&eacute;lulas diana molecularmente responden a estas toxinas y si puede montar una defensa son poco conocidos. Mediante el uso de microarrays, demostramos que el nematodo Caenorhabditis elegans robusta responde a Cry5B, un miembro de la familia de toxina de cristal formadoras de poros de Bacillus thuringiensis. Esta respuesta gen&oacute;mica es distinta del visto con un estresor diferente, el cadmio de metales pesados. Una p38-PROTEINA QUINASA mit&oacute;geno activada quinasa (MAPK) y un c-Jun N-terminal-como MAPK son transcripcionalmente regulada por Cry5B para arriba. Por otra parte, ambas v&iacute;as MAPK son funcionalmente importantes porque la eliminaci&oacute;n de cualquiera de ellos conduce a animales (i) hipersensible a una dosis baja, cr&oacute;nica de la toxina y (ii) hipersensible a una alta dosis de toxina breve tal que el animal puede encontrar naturalmente en la naturaleza. Estos resultados se extienden a las c&eacute;lulas mam&iacute;feras debido a inhibici&oacute;n de p38 en la hipersensibilidad de c&eacute;lulas de ri&ntilde;&oacute;n de h&aacute;mster beb&eacute; a aerolysin, una toxina formadoras de poros que se dirige a los seres humanos. Adem&aacute;s, identificamos dos objetivos transcripcionales aguas abajo de la v&iacute;a de p38 MAPK, ttm-1 y ttm-2, que se requieren para la defensa contra Cry5B. Nuestros datos demuestran que las c&eacute;lulas defienden poro-formando toxinas mediante v&iacute;as MAPK conservadas.

V&iacute;as de quinasa activada por mit&oacute;geno prote&iacute;na defienden contra toxinas bacterianas de la formaci&oacute;n de poros.

&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#xFF0C;&#x5F88;&#x9002;&#x5408;&#x6BD2;&#x7406;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001; &#x77ED;&#x751F;&#x6210;&#x65F6;&#x95F4;&#x3001; &#x80B2;&#x96CF;&#x4F53;&#x79EF;&#x8F83;&#x5927;&#x548C;&#x80FD;&#x5426;&#x5BB9;&#x6613;&#x5F97;&#x5206;&#x7684;&#x751F;&#x547D;&#x7279;&#x8D28;&#x3002;C.&#x7EBF;&#x866B;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x53C2;&#x6570;&#x5305;&#x62EC;&#x589E;&#x957F;&#x3001; &#x5927;&#x5C0F;&#x3001; &#x540E;&#x4EE3;&#x751F;&#x4EA7;&#x3001; &#x884C;&#x4E3A;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x53EF;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x5B9A;&#x6027;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x5916;&#x89C2;&#x6216;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x672C;&#x7AE0;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x56DB;&#x4E2A;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5DF2;&#x7528;&#x4E8E;&#x5206;&#x6790;&#x82CF;&#x4E91;&#x91D1;&#x82BD;&#x5B62;&#x6746;&#x83CC;&#x6676;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x7EBF;&#x866B;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x5B9A;&#x91CF;&#x589E;&#x957F;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3001; &#x80B2;&#x96CF;&#x5927;&#x5C0F;&#x6D4B;&#x91CF;&#x548C;&#x81F4;&#x6B7B;&#x6D53;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8815;&#x866B;&#x5916;&#x89C2;&#x8D28;&#x91CF;&#x5065;&#x5EB7;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x9A8C;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x6676;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x529E;&#x6CD5;&#x88AB;&#x9002;&#x5408;&#x5176;&#x4ED6;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E0E;&#x7EBF;&#x866B;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x6BD2;&#x6027;&#x7814;&#x7A76;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E0E; Bt &#x6676;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x4E2D;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Caenorhabditis elegans is well suited for toxicological studies owing to its established biology, short generation time, large brood size, and readily scorable life traits. Quantitative parameters of C. elegans that can be assayed include growth, size, progeny production, behavior, and mortality. Qualitative parameters of toxicity, such as changes in appearance or movement, can also be determined. This chapter describes four assays we have used for analyzing the toxic effects of Bacillus thuringiensis crystal proteins toward C. elegans. The assays are quantitative growth measurement, brood size measurement, and determination of lethal concentration, as well as a qualitative health assay based on worm appearance. Although these assays are described for crystal proteins, the approaches are suited for the studies of other toxins with C. elegans.

Assays for toxicity studies in C. elegans with Bt crystal proteins.

Caenorhabditis elegans est bien adapt&eacute; pour des &eacute;tudes toxicologiques en raison de sa biologie &eacute;tablie, temps de g&eacute;n&eacute;ration court, grande taille des couv&eacute;es et traits de vie facilement mesurables. Les param&egrave;tres quantitatifs de c. elegans qui peuvent &ecirc;tre dos&eacute;s incluent la croissance, taille, production de descendants, le comportement et la mortalit&eacute;. Les param&egrave;tres qualitatifs de toxicit&eacute;, tels que les changements dans l&#39;apparence ou le mouvement, peuvent aussi &ecirc;tre d&eacute;termin&eacute;s. Ce chapitre d&eacute;crit les quatre essais, que nous avons utilis&eacute; pour analyser les effets toxiques des prot&eacute;ines cristallines Bacillus thuringiensis vers c. elegans. Les dosages sont la mesure de la croissance quantitative, la mesure de la taille des couv&eacute;es et d&eacute;termination de la concentration l&eacute;tale, mais aussi un dosage de sant&eacute; qualitative bas&eacute;e sur l&#39;apparence ver. Bien que ces essais sont d&eacute;crits pour des prot&eacute;ines cristallines, les approches sont adapt&eacute;s pour l&#39;&eacute;tude des autres toxines avec c. elegans.

Dosages pour les &eacute;tudes de toxicit&eacute; chez c. elegans avec prot&eacute;ines cristallines Bt.

Caenorhabditis Elegans eignet sich gut f&uuml;r toxikologische Untersuchungen aufgrund seiner etablierten Biologie, kurze Generationszeit, Brut gro&szlig; und leicht bewertbare Leben Z&uuml;ge. Quantitative Parametern von C. Elegans, die gepr&uuml;ft werden k&ouml;nnen geh&ouml;ren Wachstum, Gr&ouml;&szlig;e, Nachkommen Produktion, Verhalten und Sterblichkeit. Qualit&auml;tsparameter der Toxizit&auml;t, wie etwa &Auml;nderungen in der Darstellung oder Bewegung k&ouml;nnen auch bestimmt werden. Dieses Kapitel beschreibt vier Proben, die wir verwendet haben, f&uuml;r die Analyse der toxischen Wirkung von Bacillus Thuringiensis Kristall Proteine in Richtung C. Elegans. Die Assays sind quantitatives Wachstum Messung, Brut Gr&ouml;&szlig;enmessung und Bestimmung der letale Konzentration sowie eine qualitative Gesundheit-Assay basiert auf Wurm aussehen. Obwohl diese Proben f&uuml;r Kristall Proteine beschrieben sind, eignen sich die Ans&auml;tze f&uuml;r die Studien von anderen Toxinen mit C. Elegans.

Assays f&uuml;r Toxizit&auml;tsstudien in C. Elegans mit Bt-Kristall-Proteine.

Caenorhabditis elegans &egrave; adatto per studi tossicologici a causa della sua biologia stabilito, tempo di generazione breve, grandi dimensioni covata e tratti di vita prontamente con punteggio assegnabile. Parametri quantitativi di c. elegans che possono essere analizzati comprendono crescita, dimensione, produzione di progenie, comportamento e mortalit&agrave;. Parametri qualitativi di tossicit&agrave;, quali i cambiamenti nell&#39;aspetto o movimento, inoltre possono essere determinati. Questo capitolo descrive quattro saggi che abbiamo usato per analizzare gli effetti tossici delle proteine crystal Bacillus thuringiensis verso c. elegans. I dosaggi sono misura di crescita quantitativa, covata dimensione misura e determinazione della concentrazione letale, come pure un dosaggio qualitativo salute basata sull&#39;aspetto verme. Sebbene questi dosaggi sono descritti per le proteine di cristallo, gli approcci sono adatti per gli studi di altre tossine con c. elegans.

Saggi per studi di tossicit&agrave; in c. elegans con proteine crystal Bt.

&#x7DDA;&#x866B;&#x306F;&#x6BD2;&#x6027;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x305D;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001;&#x77ED;&#x3044;&#x4E16;&#x4EE3;&#x6642;&#x9593;&#x3001;&#x304F;&#x3088;&#x304F;&#x3088;&#x5927;&#x578B;&#x3068;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x63A1;&#x70B9;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x751F;&#x547D;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A66;&#x91D1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; c. &#x306E; elegans &#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3001;&#x5F8C;&#x4EE3;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x6319;&#x52D5;&#x3001;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5916;&#x89B3;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x306A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3082;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B9; &#x30FB; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B2;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D50;&#x6676;&#x86CB;&#x767D;&#x7DDA;&#x866B;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x306E;&#x6709;&#x6BD2;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 4 &#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x91CF;&#x7684;&#x6210;&#x9577;&#x3001;&#x4E00;&#x8179;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3001;&#x81F4;&#x6B7B;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30EF;&#x30FC;&#x30E0;&#x5916;&#x89B3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x8CEA;&#x7684;&#x5065;&#x5EB7;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8A66;&#x7D50;&#x6676;&#x86CB;&#x767D;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3068;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x304C;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Bt &#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EB;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3002;

Caenorhabditis elegans&#xB294; &#xC124;&#xB9BD;&#xB41C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;, &#xC9E7;&#xC740; &#xC0DD;&#xC131; &#xC2DC;&#xAC04;, &#xD070; &#xBE0C;&#xB8E8; &#xB4DC; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xC27D;&#xAC8C; &#xB4DD;&#xC810; &#xC0DD;&#xD65C; &#xD2B9;&#xC131; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD558;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC11D; &#xC218; C. elegans&#xC758; &#xC591;&#xC801; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB294; &#xC131;&#xC7A5; &#xD06C;&#xAE30;, &#xC790;&#xC190; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD589;&#xB3D9;&#xACFC; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; &#xD3EC;&#xD568;. &#xB3C5;&#xC131;, &#xC6B4;&#xB3D9;, &#xB610;&#xB294; &#xC678;&#xAD00;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654; &#xB4F1;&#xC758; &#xC9C8;&#xC801; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xB610;&#xD55C; &#xD655;&#xC778;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; C. elegans &#xD5A5;&#xD574; &#xC0C8; &#xADE0;&#xC758; thuringiensis &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC591;&#xC801; &#xC131;&#xC7A5; &#xCE21;&#xC815;, &#xBE0C;&#xB8E8; &#xB4DC; &#xD06C;&#xAE30; &#xCE21;&#xC815; &#xBC0F; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC9C8;&#xC801; &#xAC74;&#xAC15; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC8C;&#xB808; &#xBAA8;&#xC591;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xBA85;, C. elegans&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC811;&#xADFC; &#xC801;&#xD569;.

C. elegans Bt &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;.

Caenorhabditis elegans es ideal para estudios toxicol&oacute;gicos debido a su biolog&iacute;a establecido, tiempo de generaci&oacute;n corto, cr&iacute;a de gran tama&ntilde;o y rasgos de vida f&aacute;cilmente puntuables. Par&aacute;metros cuantitativos de C. elegans que pueden ensayarse incluyen crecimiento, tama&ntilde;o, producci&oacute;n de progenie, comportamiento y mortalidad. Par&aacute;metros cualitativos de toxicidad, como cambios en el aspecto o movimiento, tambi&eacute;n pueden ser determinados. Este cap&iacute;tulo describe cuatro ensayos que hemos utilizado para analizar los efectos t&oacute;xicos de prote&iacute;nas de Bacillus thuringiensis cristal hacia C. elegans. Los ensayos son crecimiento cuantitativo medici&oacute;n, medici&oacute;n de tama&ntilde;o de cr&iacute;a y determinaci&oacute;n de la concentraci&oacute;n letal, as&iacute; como un an&aacute;lisis cualitativo de la salud basados en el aspecto de gusano. Aunque estos ensayos se describen para las prote&iacute;nas del cristalino, los enfoques son adecuados para los estudios de otras toxinas con C. elegans.

Ensayos para estudios de toxicidad en C. elegans con prote&iacute;nas de cristal de Bt.

&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x5BF9;&#x6210;&#x5B54;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5168;&#x7403;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x6BD2;&#x7D20; (PFTs)&#x3002;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7EC4;&#x6210;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x4E00;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6B63;&#x5728;&#x5BF9;&#x5176;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9633;&#x6027;&#x548C;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9634;&#x6027;&#x83CC;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6A21;&#x5F0F;&#x662F;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x770B;&#x4F3C;&#x7B80;&#x5355;&#xFF0C;&#x63ED;&#x77ED;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x7684;&#x5851;&#x6599;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5206;&#x6563;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4E00;&#x5C0F;&#x64AE;&#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9632;&#x5FA1;&#xFF0C;&#x5230;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x3002;&#x591A;&#x5C11;&#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9632;&#x5FA1;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x548C;&#x5982;&#x4F55;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9632;&#x5FA1;&#x662F;&#x534F;&#x8C03;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; RNA &#x5E72;&#x6270; (RNAi) &#x5C4F;&#x5E55;&#x4E3A;&#x6267;&#x884C;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x3001; &#x65F6;&#x649E;&#x5012;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8FC7;&#x654F;&#x7684;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x3002;&#x6B64;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x4ECE;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x653B;&#x51FB;&#x7684;&#x4E03;&#x4E2A;&#x529F;&#x80FD;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x6807;&#x8BC6; 106 &#x57FA;&#x56E0; (&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684; &sim;0.5%)&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; 106 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684; Interactome &#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4EE5;&#x524D;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; (MAPK) &#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x4E4B;&#x4E00; (p38) &#x7814;&#x7A76;&#x5728;&#x7EC6;&#x8282;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6; &#xFF08;JNK&#xFF09; &#x4E0D;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6838;&#x5FC3;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x9632;&#x5FA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;&#x9644;&#x52A0;&#x82AF;&#x7247;&#x3001; &#x5B9E;&#x65F6;&#x8367;&#x5149;&#x5B9A;&#x91CF; PCR &#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#x63ED;&#x793A; JNK MAPK &#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; p38 mapk &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x662F;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4E2D;&#x592E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EBF;&#x866B;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D; 1 (AP 1 &#xFF1B; c fos c &#x94A7;) &#x662F;&#x4E0B;&#x6E38; JNK &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x4FDD;&#x62A4;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x62A4; C.&#x7EBF;&#x866B;&#x5BF9;&#x5C0F;&#x5B54;&#x548C;&#x5927;&#x5B54;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6CB9;&#x7BB1;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x5927;&#x5B54;&#x5851;&#x6599;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x3002;&#x5851;&#x6599;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x54CD;&#x5E94;&#x6B64;&#x4F53;&#x5185; RNAi &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7814;&#x7A76;&#x8BC1;&#x660E;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x9632;&#x5FA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x627F;&#x8BFA;&#x662F;&#x5DE8;&#x5927;&#x7684;&#x3001; &#x8868;&#x660E; JNK mapk &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x9632;&#x5FA1;&#x63AA;&#x65BD;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x548C;&#x6807;&#x8BC6; AP 1 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8702;&#x7A9D;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x91CD;&#x8981;&#x9632;&#x5FA1;&#x9488;&#x5BF9;&#x5927;&#x578B;&#x548C;&#x5C0F;&#x578B;-&#x5B54;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6CB9;&#x7BB1;&#x3002;

&#x5168;&#x7403;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E94;&#x7B54;&#x53CD;&#x5E94;&#x6210;&#x5B54;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3002;

Here we present the first global functional analysis of cellular responses to pore-forming toxins (PFTs). PFTs are uniquely important bacterial virulence factors, comprising the single largest class of bacterial protein toxins and being important for the pathogenesis in humans of many Gram positive and Gram negative bacteria. Their mode of action is deceptively simple, poking holes in the plasma membrane of cells. The scattered studies to date of PFT-host cell interactions indicate a handful of genes are involved in cellular defenses to PFTs. How many genes are involved in cellular defenses against PFTs and how cellular defenses are coordinated are unknown. To address these questions, we performed the first genome-wide RNA interference (RNAi) screen for genes that, when knocked down, result in hypersensitivity to a PFT. This screen identifies 106 genes (âˆ¼0.5% of genome) in seven functional groups that protect Caenorhabditis elegans from PFT attack. Interactome analyses of these 106 genes suggest that two previously identified mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathways, one (p38) studied in detail and the other (JNK) not, form a core PFT defense network. Additional microarray, real-time PCR, and functional studies reveal that the JNK MAPK pathway, but not the p38 MAPK pathway, is a key central regulator of PFT-induced transcriptional and functional responses. We find C. elegans activator protein 1 (AP-1; c-jun, c-fos) is a downstream target of the JNK-mediated PFT protection pathway, protects C. elegans against both small-pore and large-pore PFTs and protects human cells against a large-pore PFT. This in vivo RNAi genomic study of PFT responses proves that cellular commitment to PFT defenses is enormous, demonstrates the JNK MAPK pathway as a key regulator of transcriptionally-induced PFT defenses, and identifies AP-1 as the first cellular component broadly important for defense against large- and small-pore PFTs.

Global functional analyses of cellular responses to pore-forming toxins.

Nous pr&eacute;sentons la premi&egrave;re analyse fonctionnelle globale des r&eacute;ponses cellulaires &agrave; pore-forming toxines (PFTs). IRP est des facteurs de virulence bact&eacute;rienne unique important, comprenant la seule plus grande classe de toxines bact&eacute;riennes prot&eacute;iques et d&#39;&ecirc;tre important pour la pathog&eacute;nie chez l&#39;homme de nombreux Gram positif et bact&eacute;ries Gram n&eacute;gatif. Leur mode d&#39;action est d&#39;une simplicit&eacute; trompeuse, per&ccedil;ant de petits trous dans la membrane plasmique des cellules. Les &eacute;tudes &eacute;parses &agrave; ce jour des interactions cellulaires PFT-h&ocirc;te indiquent une poign&eacute;e de g&egrave;nes sont impliqu&eacute;s dans les d&eacute;fenses cellulaires de PFTs. Combien de g&egrave;nes est impliqu&eacute;s dans les d&eacute;fenses cellulaires contre PFTs et d&eacute;fenses cellulaires comment sont coordonn&eacute;s sont inconnus. Pour r&eacute;pondre &agrave; ces questions, nous avons effectu&eacute; le premier &eacute;cran de l&#39;interf&eacute;rence (ARNi) RNA de g&eacute;nome des g&egrave;nes qui, lorsque renvers&eacute;, provoquer une hypersensibilit&eacute; &agrave; un PFT. Cet &eacute;cran identifie 106 g&egrave;nes (&sim;0.5 % du g&eacute;nome) dans sept groupes fonctionnels qui prot&egrave;gent le Caenorhabditis elegans d&#39;attaque PFT. Interactome analyses de ces 106 g&egrave;nes sugg&egrave;rent que deux voies pr&eacute;c&eacute;demment identifi&eacute;s prot&eacute;ine mitog&egrave;ne-kinases (MAPK), un (p38) a &eacute;tudi&eacute; en d&eacute;tail et l&#39;autre (JNK) ne pas, forment un r&eacute;seau central de d&eacute;fense PFT. &laquo; Microarray &raquo; suppl&eacute;mentaire, PCR en temps r&eacute;el et &eacute;tudes fonctionnelles r&eacute;v&egrave;lent que la voie de JNK MAPK, mais pas la voie de p38 MAPK, est un important r&eacute;gulateur central du induite par le PFT transcriptional and functional responses. Nous trouvons la prot&eacute;ine activatrice de c. elegans 1 (AP-1, c-jun, c-fos) est une cible en aval de la voie de JNK-mediated PFT protection, prot&egrave;ge le c. elegans contre PFTs de petits pores et &agrave; gros pores et prot&egrave;ge les cellules humaines contre un PFT de grands pores. Cette &eacute;tude de g&eacute;nomique Arni in vivo des r&eacute;ponses PFT prouve que cellulaires envers les d&eacute;fenses de la PFT est &eacute;norme, montre la voie de JNK MAPK comme un r&eacute;gulateur cl&eacute; de d&eacute;fenses PFT induite par la transcription et identifie les AP-1 comme premier &eacute;l&eacute;ment cellulaire largement important pour la d&eacute;fense contre les grandes et petites-pore PFTs.

Des analyses fonctionnelles globales des r&eacute;ponses cellulaires &agrave; pore-forming toxines.

Hier pr&auml;sentieren wir die erste globale Funktionsanalyse von zellul&auml;ren Reaktionen auf die Pore-bildenden Toxine (PFTs). PFTs sind eindeutig wichtiger bakterieller Virulenzfaktoren, bestehend aus die einzelne gr&ouml;&szlig;te Klasse bakterielle Protein Toxine und Bedeutung f&uuml;r die Pathogenese f&uuml;r viele Gram-Positive und Gram-negative Bakterien des Menschen. Ihre Wirkungsweise ist tr&uuml;gerisch einfach, L&ouml;cher in der Plasmamembran von Zellen zu stossen. Die verstreuten Studien bisher PFT-Host Zelle Interaktionen zeigen eine Handvoll Genen zellul&auml;ren Abwehr zu PFTs beteiligt sind. Zellul&auml;ren Abwehrmechanismen gegen PFTs und wie zellul&auml;ren Abwehrmechanismen wie viele Gene beteiligt sind, sind aufeinander abgestimmt, sind unbekannt. Um diese Fragen zu l&ouml;sen, f&uuml;hrten wir den ersten genomweiten RNA-Interferenz (RNAi)-Bildschirm f&uuml;r Gene, die, wenn unten, klopfte &Uuml;berempfindlichkeit gegen eine PFT zur Folge. Dieser Bildschirm identifiziert 106 Gene (&sim;0.5 % des Genoms) in sieben Funktionsgruppen, die Caenorhabditis Elegans von PFT-Angriff zu sch&uuml;tzen. Interaktom Analysen dieser 106 Gene schlagen vor, da&szlig; zwei zuvor identifizierten Mitogen-activated Protein Kinase (MAPK) Wege, eine (p38) studierte im Detail und die anderen (JNK) nicht, ein Kernnetz PFT Verteidigung bilden. Zus&auml;tzliche Microarray, Real-Time PCR und funktionelle Studien zeigen, dass die JNK MAPK-Pathway, aber nicht bei der p38 MAPK Weg, ist ein wichtiger zentralen Regulator der PFT-induzierte transkriptionelle und funktionale Antworten. Finden wir C. Elegans Activator Protein 1 (AP-1, c-jun, c-fos) ist ein nachgeschalteter Ziel des Signalweges Schutz JNK-vermittelte PFT, sch&uuml;tzt gegen klein-Pore und gro&szlig;e Poren PFTs C. Elegans und menschliche Zellen gegen eine gro&szlig;e Pore-PFT sch&uuml;tzt. In-vivo RNAi genomische Studie von PFT Antworten beweist, dass zellul&auml;re Engagement f&uuml;r PFT-Verteidigung enorm ist, die JNK MAPK-Pathway als wichtiger Regulator der transcriptionally induziert PFT Verteidigungsanlagen veranschaulicht und AP-1 als erste zellul&auml;re Komponente weitgehend wichtig f&uuml;r die Verteidigung gegen gro&szlig; - und klein-Pore PFTs identifiziert.

Globale Funktionsanalysen zellul&auml;ren Reaktionen auf die Pore-bildenden Toxine.

Qui vi presentiamo la prima analisi funzionale globale di cellular responses to formando dei pori tossine (PFT). PFT sono fattori di virulenza batterica importante in modo univoco, comprendente l&#39;unica classe pi&ugrave; grande di tossine batteriche proteiche e di essere importante per la patogenesi negli esseri umani di molti Gram positivi e batteri Gram negativi. Loro modalit&agrave; di azione &egrave; ingannevolmente semplice, frugando buchi nella membrana del plasma delle cellule. Gli studi sparsi per data di interazioni cellula PFT-host indicano una manciata di geni sono coinvolti nelle difese cellulari per PFT. Quanti geni sono coinvolti nelle difese cellulari contro PFT e difese come cellulare sono coordinati sono sconosciuti. Per rispondere a queste domande, abbiamo eseguito la prima schermata di interferenza (RNAi) RNA genome-wide per geni che, quando abbattuto, causare ipersensibilit&agrave; a un PFT. Questa schermata identifica 106 geni (&sim;0.5% del genoma) in sette gruppi funzionali che proteggono Caenorhabditis elegans da attacco PFT. Interactome analisi di questi 106 geni suggeriscono che due percorsi di proteina mitogene-attivato precedentemente identificati chinasi (MAPK), uno (p38) ha studiato nel dettaglio e gli altri (JNK) non formano una rete di difesa principale PFT. Microarray supplementari, PCR in tempo reale e funzionali studi rivelano che il pathway di JNK MAPK, ma non il pathway p38 MAPK, &egrave; un regolatore chiave centrale delle risposte di transcriptional e funzionale PFT-indotta. Troviamo c. elegans proteina attivatore 1 (AP-1; c-jun, c-fos) &egrave; un bersaglio a valle della via JNK-mediata PFT protezione, protegge c. elegans contro grandi poro e poro piccolo PFT e protegge le cellule umane contro un grande poro PFT. Questo studio genomico RNAi in vivo delle risposte PFT dimostra impegno cellulare alle difese PFT &egrave; enorme, dimostra il pathway di JNK MAPK come un regolatore chiave delle difese PFT transcriptionally-indotta che identifica AP-1 come primo componente cellulare largamente importanti per la difesa contro grandi e piccole-poro PFT.

Analisi funzionali globali del cellular responses to formando dei pori delle tossine.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x6BD2;&#x7D20; (&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x30C8;&#x30F3;)&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x30C8;&#x30F3;&#x7D30;&#x83CC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x967D;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E00;&#x610F;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x884C;&#x52D5;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x898B;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x306B;&#x7A74;&#x3092;&#x7A81;&#x304F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6563;&#x5728;&#x306E;&#x7814;&#x7A76; PFT &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x65E5;&#x4ED8;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x63E1;&#x308A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9632;&#x5FA1; pft &#x5206;&#x5E03;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Pft &#x5206;&#x5E03;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9632;&#x5FA1;&#x3068;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9632;&#x5FA1;&#x3067;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3042;&#x308B;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8CEA;&#x554F;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; RNA &#x306E;&#x5E72;&#x6E09; &#xFF08;RNAi&#xFF09; &#x753B;&#x9762;&#x3092;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5B9F;&#x884C;&#x306F;&#x3001;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x3001;pft &#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x904E;&#x654F;&#x75C7;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x753B;&#x9762; 106 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; &#xFF08;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E; &sim;0.5 &#xFF05;&#xFF09; &#x3067;&#x7DDA;&#x866B; PFT &#x653B;&#x6483;&#x304B;&#x3089;&#x5B88;&#x308B; 7 &#x3064;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 106 &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;MAPK&#xFF09; &#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;1 &#x3064; (p38) &#x8A73;&#x7D30;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E; (JNK) &#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x30B3;&#x30A2; PFT &#x306E;&#x9632;&#x885B;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3001;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; PCR &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x7814;&#x7A76; JNK MAPK &#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x3001;p38 MAPK &#x7D4C;&#x8DEF; PFT &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4E2D;&#x592E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DDA;&#x866B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 1 &#xFF08;AP 1; c-jun&#x3001;fos&#xFF09; JNK &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F; PFT &#x4FDD;&#x8B77;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;&#x5C0F;&#x9593;&#x9699;&#x3084;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x30DD;&#x30A2;&#x306E; pft &#x5206;&#x5E03;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x5B54;&#x5F84; PFT &#x4FDD;&#x8B77;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x306E; RNAi &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x7814;&#x7A76; PFT &#x5FDC;&#x7B54;&#x306E; PFT &#x306E;&#x9632;&#x5FA1;&#x3078;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x83AB;&#x5927;&#x3067;&#x3059;&#x3001;JNK MAPK &#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x8A98;&#x8D77; PFT &#x306E;&#x9632;&#x5FA1;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3001;AP 1 &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5E83;&#x304F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x9632;&#x885B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x5927;&#x3068;&#x5C0F;&#x5B54;-&#x5F84; pft &#x5206;&#x5E03;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x7D30;&#x5B54;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3002;

&#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD604;&#xC7AC; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xB3C5; &#xC18C; (PFTs). PFTs &#xC720;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC138;&#xADE0; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;, &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD070; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xAD6C;&#xC131; &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04; &#xB9CE;&#xC740; &#xADF8;&#xB7A8; &#xC591;&#xC131; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB7A8; &#xB124;&#xAC70;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC561;&#xC158;&#xC758; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xB294; &#xD604;&#xD639; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0;, &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xAD6C;&#xBA4D;&#xC744; &#xD30C;&#xACE0;. PFT &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xB0A0;&#xC9DC;&#xC5D0; &#xD769;&#xC5B4;&#xC838;&#xC788;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC18C;&#xC218;&#xC758; PFTs &#xC138;&#xD3EC; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC870;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5BC;&#xB9C8;&#xB098; &#xB9CE;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Pfts&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC29;&#xC5B4; &#xD558; &#xACE0; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xAC8C;&#xB188; &#xC804;&#xCCB4; RNA &#xAC04;&#xC12D; (RNAi) &#xD654;&#xBA74;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xB728; &#xB838; &#xB2E4; &#xB54C;&#xB97C; PFT&#xC5D0; &#xACFC;&#xBBFC; &#xC99D;&#xC758; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC774; &#xD654;&#xBA74;&#xC740; Caenorhabditis elegans PFT &#xACF5;&#xACA9; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558;&#xB294; 7 &#xAC1C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0;&#xC11C; 106 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; (&sim;0.5%)&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; 106&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB450; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (MAPK) &#xACBD;&#xB85C; (p38), &#xC138;&#xBD80; &#xC0AC;&#xD56D; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; (JNK)&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB098; &#xCF54;&#xC5B4; PFT &#xBC29;&#xC5B4; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xC2DC;&#xAE30; &#xBC14;&#xB78D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; microarray, &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACF5;&#xAC1C; JNK MAPK &#xACBD;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; p38 MAPK &#xACBD;&#xB85C; PFT &#xC720;&#xB3C4; transcriptional &#xACE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC911;&#xC559; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; C. elegans &#xD65C;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 (AP 1; c-6 &#xC6D4;, c-fos) JNK &#xC911;&#xC7AC; PFT &#xBCF4;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740; &#xAE30; &#xACF5; &#xBC0F; &#xAE30; &#xACF5; &#xB300;&#xD615; PFTs &#xC0C1;&#xB300;&#xB85C; C. elegans&#xB97C; &#xBCF4;&#xD638;&#xC640; &#xD070; &#xAE30; &#xACF5; PFT&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xD638; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PFT &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; in vivo RNAi &#xAC8C;&#xB188; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xAC00; PFT &#xBC29;&#xC5B4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC9C0; &#xC5C4;&#xCCAD;&#xB09C; PFT &#xBC29;&#xC5B4; transcriptionally &#xC720;&#xBC1C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; JNK MAPK &#xACBD;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; AP-1 &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC29;&#xC5B4; &#xAE30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD070; &#xBC0F; &#xC791;&#xC740;-&#xACF5; PFTs &#xC704;&#xD574; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC99D;&#xBA85; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xAE30; &#xACF5; &#xD615;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC740; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xB3C5; &#xC18C;.

Aqu&iacute; os presentamos el primer an&aacute;lisis funcional global de respuestas celulares a poro-formando toxinas (PFP). PFP es factores de virulencia bacteriana excepcionalmente importante, compuesto por la clase m&aacute;s grande de toxinas de prote&iacute;na bacteriana y ser importante para la patogenesia en seres humanos de muchos Gram positivas y bacterias Gram negativas. Su modo de acci&oacute;n es enga&ntilde;osamente simple, meter los agujeros en la membrana plasm&aacute;tica de las c&eacute;lulas. Los estudios dispersos hasta la fecha de las interacciones de la c&eacute;lula de PFT-host indican un pu&ntilde;ado de genes est&aacute;n involucrados en las defensas celulares contra la PFP. &iquest;Cu&aacute;ntos genes est&aacute;n implicados en las defensas celulares contra la PFP y las defensas celulares c&oacute;mo se coordinan son desconocidos. Para abordar estas cuestiones, se realiz&oacute; la primera pantalla de genoma RNA de interferencia (ARNi) para los genes que, cuando derribado, causar hipersensibilidad a un PFT. Esta pantalla identifica 106 genes (&sim;0.5% del genoma) en siete grupos funcionales que protegen el Caenorhabditis elegans de ataque PFT. Interactoma an&aacute;lisis de estos 106 genes sugieren que dos v&iacute;as de la quinasa (MAPK) previamente identificado prote&iacute;nas activadas por mit&oacute;genos, uno (p38) estudi&oacute; en detalle y los otro (JNK) no, forman una red de defensa central PFT. Microarray adicional, PCR en tiempo real y funcionales estudios revelan que la v&iacute;a JNK MAPK, pero no la v&iacute;a de p38 MAPK, es un regulador central clave de respuestas transcripcionales y funcionales inducidas por PFT. Encontramos la prote&iacute;na activadora de C. elegans 1 (AP-1, c-jun, c-fos) es una Diana de la v&iacute;a de protecci&oacute;n mediada por JNK PFT, protege C. elegans contra la PFP tanto poro peque&ntilde;o y grande del poro y protege las c&eacute;lulas humanas contra un PFT poro grande. Este estudio gen&oacute;mico de RNAi en vivo de las respuestas PFT prueba que compromiso celular defensas PFT es enorme, demuestra la v&iacute;a JNK MAPK como un regulador clave de defensas PFT transcripcionalmente-inducida e identifica AP-1 como el primer componente celular ampliamente importante para la defensa contra grandes y peque&ntilde;as-poro hip.

Danielle Huffman

Agilent Technologies

DNA-based Fish Species Identification Protocol