Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

The Scripps Research Institute 

Sistemi a due fasi acquosi forniscono un metodo rapido e facilmente scalabile per la separazione di proteine solubili da materiali insolubili e altre proteine indesiderate. Il metodo pu&ograve; essere utilizzato in modalit&agrave; continua. &Egrave; particolarmente utile per le proteine di origine animale, come supera la difficolt&agrave; di altri metodi di rimozione di materiale insolubile alla rinfusa, mentre allo stesso tempo fornire purificazione rispetto al totale della proteina solubile. In questo articolo viene descritto lo sviluppo di metodi per l&#39;estrazione a due fasi acquose e purificazione delle proteine animali, presso il laboratorio sia su scala pilota. Vengono discussi i punti di forza, debolezze e possibili prospettive future per il metodo.

Estrazione a due fasi acquose e purificazione delle proteine animali.

Syst&egrave;mes &agrave; deux phases aqueuses fournissent une m&eacute;thode rapide, facilement extensible pour la s&eacute;paration des prot&eacute;ines solubles de mati&egrave;res insolubles et autres prot&eacute;ines ind&eacute;sirables. La m&eacute;thode peut fonctionner en mode continu. Il est particuli&egrave;rement utile pour les prot&eacute;ines animales, car il surmonte les difficult&eacute;s des autres m&eacute;thodes d&#39;enl&egrave;vement de mati&egrave;re insoluble en vrac, tout en fournissant la purification en ce qui concerne les prot&eacute;ines solubles totales. Cet article d&eacute;crit le d&eacute;veloppement de m&eacute;thodes d&#39;extraction en deux phases aqueuse et purification de prot&eacute;ines animales, au laboratoire et pilote. Les auteurs discutent les forces, les faiblesses et les perspectives d&#39;avenir possibles pour la m&eacute;thode.

Extraction en deux phases aqueuse et purification de prot&eacute;ines animales.

W&auml;&szlig;rige zweiphasige Systeme bieten eine schnelle, leicht skalierbare Methode zur Trennung von l&ouml;slichen Proteinen unl&ouml;sliche Materialien und andere unerw&uuml;nschte Proteine. Die Methode kann im kontinuierlichen Modus betrieben werden. Eignet sich besonders f&uuml;r tierische Proteine, wie es Schwierigkeiten anderer Methoden &uuml;berwindet bei der Beseitigung von unl&ouml;slichen Sch&uuml;ttgut, w&auml;hrend gleichzeitig die Reinigung in Bezug auf insgesamt l&ouml;sliches Protein. Dieser Artikel beschreibt die Entwicklung von Methoden f&uuml;r w&auml;ssrige Zweiphasen-Extraktion und Reinigung von tierischen Proteinen, sowohl im Labor als auch im pilot Ma&szlig;stab. Die st&auml;rken, Schw&auml;chen und m&ouml;gliche Zukunftsperspektiven f&uuml;r die Methode werden diskutiert.

W&auml;&szlig;rige zweiphasige Extraktion und Reinigung von tierischen Proteinen.

&#x6C34;&#x76F8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x6613;&#x4E8E;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7528;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x79BB;&#x4E0D;&#x6EB6;&#x6027;&#x6750;&#x6599;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x8FDE;&#x7EED;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E0B;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x7279;&#x522B;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x514B;&#x670D;&#x4E86;&#x5176;&#x4ED6;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E2D;&#x5220;&#x9664;&#x6279;&#x91CF;&#x4E0D;&#x6EB6;&#x6027;&#x7684;&#x6750;&#x6599;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5173;&#x4E8E;&#x603B;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x56F0;&#x96BE;&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x6C34;&#x4E24;&#x76F8;&#x63D0;&#x53D6;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5728;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x548C;&#x4E2D;&#x8BD5;&#x7EAF;&#x5316;&#x3002;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x5F3A;&#x9879;&#x3001; &#x5F31;&#x70B9;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x672A;&#x6765;&#x524D;&#x666F;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x6C34;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x8403;&#x53D6;&#x53CA;&#x7EAF;&#x5316;&#x52A8;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

Aqueous two-phase systems provide a rapid, easily scalable method for separation of soluble proteins from insoluble materials and other undesired proteins. The method can be operated in continuous mode. It is particularly useful for animal proteins, as it overcomes difficulties of other methods in removing bulk insoluble material, while at the same time providing purification with respect to total soluble protein. This article describes the development of methods for aqueous two-phase extraction and purification of animal proteins, at both laboratory and pilot scale. The strengths, weaknesses, and possible future prospects for the method are discussed.

Aqueous two-phase extraction and purification of animal proteins.

&#x6C34;&#x6027;&#x4E8C;&#x76F8;&#x7CFB;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x4E0D;&#x6EB6;&#x6027;&#x7269;&#x8CEA;&#x3084;&#x4ED6;&#x306E;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x304F;&#x306A;&#x3044;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x8FC5;&#x901F;&#x3001;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x62E1;&#x5F35;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x9023;&#x7D9A;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3067;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x5168;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x4E00;&#x62EC;&#x4E0D;&#x6EB6;&#x6027;&#x6750;&#x6599;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x4ED6;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x96E3;&#x3057;&#x3055;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x52D5;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x4FBF;&#x5229;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6C34;&#x6027;&#x4E8C;&#x76F8;&#x62BD;&#x51FA;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3001;&#x30D1;&#x30A4;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F37;&#x307F;&#x3001;&#x5F31;&#x70B9;&#x3068;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x5C55;&#x671B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC218;&#xC131; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBD88;&#xC6A9; &#xC131; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; &#xC6D0;&#xCE58; &#xC54A;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C;, &#xC27D;&#xAC8C; &#xD655;&#xC7A5; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC5F0;&#xC18D; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC791;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCD1D; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC815;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB300;&#xB7C9; &#xBD88;&#xC6A9; &#xC131; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6C0; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD55C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC774; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC720;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC218;&#xC131; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBC29;&#xBC95; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xBC0F; &#xD30C;&#xC77C;&#xB7FF; &#xADDC;&#xBAA8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC815;&#xD654;. &#xAC15;&#xC810;, &#xC57D;&#xC810;, &#xBC0F; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBBF8;&#xB798; &#xC804;&#xB9DD; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC218;&#xC131; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC815;&#xD654;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Sistemas de dos fases acuosos proporcionan un m&eacute;todo r&aacute;pido, f&aacute;cilmente escalable para la separaci&oacute;n de prote&iacute;nas solubles de materiales insolubles y otras prote&iacute;nas no deseadas. El m&eacute;todo puede utilizarse en modo continuo. Es particularmente &uacute;til para prote&iacute;nas animales, como supera las dificultades de otros m&eacute;todos en la eliminaci&oacute;n de material insoluble a granel, mientras que al mismo tiempo proporcionando purificaci&oacute;n con respecto a la prote&iacute;na soluble total. Este art&iacute;culo describe el desarrollo de m&eacute;todos para la extracci&oacute;n de dos fases acuosa y purificaci&oacute;n de prote&iacute;nas animales, tanto en laboratorio como en escala piloto. Se discuten las fortalezas, debilidades y perspectivas de futuro posibles para el m&eacute;todo.

Extracci&oacute;n de 2 fases acuosa y purificaci&oacute;n de prote&iacute;nas animales.

&#x4E8C;&#x5341;&#x4E5D;&#x4E2A;&#x5E7C;&#x4ED4;&#x725B;&#x7684;&#x6CFD;&#x897F;&#x5C9B;&#x548C; Friesian &#x54C1;&#x79CD;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709; kappa &#x916A;&#x86CB;&#x767D; AB &#x578B;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x88AB;&#x4E00;&#x8D77;&#x653E;&#x7267;&#x548C;&#x7BA1;&#x7406;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x3002;10 D &#xFF08;&#x65E9;&#x671F;&#x54FA;&#x4E73;) &#x6625;&#x5B63;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x4E09;&#x6B21;&#xFF0C;&#x725B;&#x5976;&#x662F;&#x4ECE;&#x7B2C;&#x56DB;&#x4E2A;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7684;&#x4E73;&#x54C1;&#x4F01;&#x4E1A;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x725B;&#x53EA;&#x6536;&#x96C6;&#x5E76;&#x6839;&#x636E;&#x54C1;&#x79CD;&#x5360;&#x4E86;&#x5F88;&#x6BD4;&#x91CD;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x573A;&#x5408;&#xFF0C;&#x725B;&#x5976;&#x4E5F;&#x4ECE;&#x6837;&#x672C;&#x5728;&#x8FDE;&#x7EED;&#x4E0A;&#x5348;&#x53CA;&#x4E0B;&#x5348;&#x7684;&#x4E73;&#x54C1;&#x4F01;&#x4E1A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65E5;&#x5E38;&#x6837;&#x672C;&#x6BCF;&#x725B;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x725B;&#x3002;&#x81A8;&#x5316;&#x7684;&#x725B;&#x5976; (&#x6BCF;&#x4E2A;&#x54C1;&#x79CD;&#x6BCF;&#x6B21; 800-1000 l) &#x88AB;&#x6807;&#x51C6;&#x5316; 0.80&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF1A; &#x8102;&#x80AA; (P:F) &#x6BD4;&#x7387;&#x548C;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x54C1;&#x79CD;&#x4ECE; 350 l &#x88AB;&#x5236;&#x6210;&#x829D;&#x58EB;&#x3002;&#x5176;&#x4F59; Friesian &#x4E73;&#x56FA;&#x4F53;&#x542B;&#x91CF;&#x7136;&#x540E;&#x589E;&#x52A0;&#x8D85;&#x6EE4;&#x5BF9;&#x56FA;&#x4F53;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7B49;&#x4E8E;&#x6CFD;&#x897F;&#x725B;&#x5976;&#x4E86;&#x3002;&#x8FD9;&#x56FA;&#x4F53;&#x6807;&#x51C6;&#x5316; Friesian &#x725B;&#x5976;&#x548C; P:F &#x590D;&#x5236;&#x6279;&#x5904;&#x7406;&#x6807;&#x51C6;&#x5316;&#x7684;&#x6CFD;&#x897F;&#x725B;&#x5976;&#x88AB;&#x5236;&#x6210;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x6279; 350-l &#x80F8;&#x8154;&#x955C;&#x5207;&#x8FBE;&#x5E72;&#x916A;&#x3002;&#x4E0E; Friesian &#x725B;&#x5976;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x6CFD;&#x897F;&#x725B;&#x5976;&#x4E86;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x725B;&#x5976;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x916A;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x7684;&#x542B;&#x91CF;&#x8F83;&#x9AD8;&#x3002;&#x6709;&#x5C11;&#x5DEE;&#x5728;&#x4E73;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC4;&#x5206;&#x4E4B;&#x95F4;&#x54C1;&#x79CD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x8102;&#x80AA;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;Friesian &#x725B;&#x5976;&#x8102;&#x80AA;&#x591A;&#x4E86;&#x6CFD;&#x897F;&#x725B;&#x5976;&#x8102;&#x80AA;&#x6BD4;&#x5171;&#x8F6D;&#x4E9A;&#x6CB9;&#x9178; (CLA)&#x3002;&#x6CFD;&#x897F;&#x725B;&#x5976;&#x51DD;&#x7ED3;&#x901F;&#x5EA6;&#x66F4;&#x5FEB;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5F62;&#x6210;&#x66F4;&#x575A;&#x5B9E;&#x8C46;&#x8150;&#x6BD4; Friesian &#x725B;&#x5976;&#x3002;&#x725B;&#x5976;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x76F8;&#x5173;&#x4E0E;&#x51DD;&#x8840;&#x6307;&#x6807;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5173;&#x7CFB;&#x4E0D;&#x5141;&#x8BB8;&#x5976;&#x916A;&#x9884;&#x6D4B;&#x6F5C;&#x5728;&#x3002;&#x6CFD;&#x897F;&#x725B;&#x5976;&#x4EA7;&#x751F; 10%&#x66F4;&#x591A;&#x5976;&#x916A;&#x6BCF;&#x516C;&#x65A4;&#x6BD4;&#x4F7F;&#x7528; P:F Friesian &#x725B;&#x5976;&#x6807;&#x51C6;&#x5316;&#x7684;&#x725B;&#x5976;&#xFF0C;&#x4F46;&#x725B;&#x5976;&#x5177;&#x6709;&#x540C;&#x6837;&#x7684;&#x56FA;&#x4F53;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E3A;&#x5976;&#x916A;&#x4EA7;&#x91CF;&#x6CA1;&#x6709;&#x5DEE;&#x522B;&#x3002;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5728;&#x5976;&#x916A;&#x7EC4;&#x6210;&#x54C1;&#x79CD;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x3002;&#x4ECE;&#x7403;&#x8863;&#x548C; Friesians &#x7684;&#x725B;&#x5976;&#x7684;&#x5976;&#x916A;&#x6027;&#x80FD;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5B8C;&#x5168;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x539F;&#x5976;&#x4E2D;&#x7684;&#x56FA;&#x4F53;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;

&#x7EC4;&#x6210;&#x3001; &#x51DD;&#x8840;&#x7279;&#x6027;&#x548C;&#x5976;&#x916A;&#x7684;&#x4ECE; Friesian &#x548C;&#x6CFD;&#x897F;&#x5C9B;&#x7684;&#x5976;&#x725B;&#x4EA7;&#x5976;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;

Twenty-nine multiparous cows of each of the Jersey and Friesian breeds, all kappa-casein AB phenotype, were grazed together and managed identically. On three occasions during 10 d in spring (early lactation), milk was collected from all cows at four consecutive milkings and bulked according to breed. On a separate occasion, milk samples were also collected from each cow at consecutive a.m. and p.m. milkings to form one daily sample per cow. The bulked milks (800-1000 l per breed on each occasion) were standardized to a protein:fat (P:F) ratio of 0.80, and 350 l from each breed was made into Cheddar cheese. The solids content of the remaining Friesian milk was then increased by ultrafiltration to a solids concentration equal to that of the Jersey milk. This solids-standardized Friesian milk and a replicate batch of P:F standardized Jersey milk were made into two further batches of Cheddar cheese in 350-l vats. Compared with Friesian milk, Jersey milk had higher concentrations of most milk components measured, including protein, casein and fat. There were few difference in milk protein composition between breeds, but there were differences in fat composition. Friesian milk fat had more conjugated linoleic acid (CLA) than Jersey milk fat. Jersey milk coagulated faster and formed firmer curd than Friesian milk. Concentrations of some milk components were correlated with coagulation parameters, but relationships did not allow prediction of cheesemaking potential. Jersey milk yielded 10% more cheese per kg than Friesian milk using P:F standardized milk, but for milks with the same solids concentration there were no differences in cheese yield. No differences in cheese composition between breeds were detected. Differences in cheesemaking properties of milk from Jerseys and Friesians were entirely related to the concentrations of solids in the original milk.

A comparison of the composition, coagulation characteristics and cheesemaking capacity of milk from Friesian and Jersey dairy cows.

Vingt-neuf vaches multipares de chacune des races Jersey et frisonne, tous ph&eacute;notype AB kappa-cas&eacute;ine, ont &eacute;t&eacute; brout&eacute;es ensemble et g&eacute;r&eacute;s de fa&ccedil;on identique. &Agrave; trois reprises au cours des 10 jours au printemps (d&eacute;but de la lactation), lait ont &eacute;t&eacute; recueillie aupr&egrave;s de toutes les vaches &agrave; quatre traites cons&eacute;cutives et en vrac selon la race. &Agrave; une autre occasion, des &eacute;chantillons de lait ont &eacute;t&eacute; pr&eacute;lev&eacute;s de chaque vache &agrave; des traites et heures cons&eacute;cutives pour former un &eacute;chantillon quotidien par vache. Les laits en vrac (800-1000 l / race &agrave; chaque occasion) ont &eacute;t&eacute; normalis&eacute;s &agrave; un rapport prot&eacute;ines : mati&egrave;res grasses (p:) 0,80, et 350 l de chaque race a &eacute;t&eacute; transform&eacute; en fromage Cheddar. La teneur en solides du lait restant Friesian augmenta ensuite par ultrafiltration &agrave; une concentration de solides &eacute;gale &agrave; celle du lait de Jersey. Ce lait de frison comparatifs solides et un lot r&eacute;p&eacute;t&eacute; de p: normalis&eacute; Jersey lait ont &eacute;t&eacute; faites en deux lots suppl&eacute;mentaires de fromage Cheddar en cuve 350 l. Par rapport au frison lait, lait de Jersey avait des concentrations plus &eacute;lev&eacute;es de la plupart des composants lait mesur&eacute;s, y compris des prot&eacute;ines, de cas&eacute;ine et de graisses. Il y avait peu de diff&eacute;rence dans la composition de prot&eacute;ines du lait entre les races, mais il y avait des diff&eacute;rences dans la composition des mati&egrave;res grasse. Mati&egrave;re grasse du lait frison avait plus conjugu&eacute; d&#39;acide linol&eacute;ique (CLA) que la graisse de lait de Jersey. Lait de Jersey coagul&eacute; plus vite et forme le caill&eacute; plus ferme que le lait de la Frise. Les concentrations de certains composants du lait sont en corr&eacute;lation avec les param&egrave;tres de la coagulation, mais relations n&#39;ont pas permis la pr&eacute;diction de la fabrication du fromage potentiels. Lait de Jersey ont donn&eacute; plus de 10 % de fromage / kg que le lait de frison &agrave; l&#39;aide de p: normalis&eacute; de lait, mais pour laits avec la m&ecirc;me concentration de solides il y avait pas de diff&eacute;rence avec un rendement de fromage. Aucune diff&eacute;rence dans la composition des fromages entre races ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s. Diff&eacute;rences dans les propri&eacute;t&eacute;s de la fabrication du fromage de lait de maillots et Frisons &eacute;taient enti&egrave;rement li&eacute;s aux concentrations de mati&egrave;res solides dans le lait d&#39;origine.

Une comparaison de la composition, les caract&eacute;ristiques de la coagulation et les capacit&eacute; de fabrication du fromage de lait de vaches laiti&egrave;res frisonne et Jersey.

Neunundzwanzig multiparous K&uuml;he jedes Trikot und ostfriesischen Rassen, alle Kappa-Kasein AB Ph&auml;notyp, waren streifte zusammen und konnten identisch. Bei drei Gelegenheiten w&auml;hrend 10D im Fr&uuml;hjahr (fr&uuml;hen Laktation) Milch war alle K&uuml;he an vier aufeinander folgenden Melkungen entnommen und gew&ouml;lbten nach Rasse. Bei einem separaten Gelegenheit wurden Milchproben auch von jeder Kuh an aufeinanderfolgenden a.m. und p.m. Melkungen bilden eine t&auml;gliche Auswahl pro Kuh gesammelt. Die Einf&uuml;llg&uuml;ter Milcharten (800-1000 l pro Rasse jedesmal) wurden zu einem Protein: Fett (P:F)-Verh&auml;ltnis von 0,80, standardisiert und 350 l aus jeder Rasse in Cheddar-K&auml;se gemacht wurde. Der Feststoffgehalt der verbleibenden friesischen Milch wurde dann durch Ultrafiltration zu einer festen K&ouml;rper-Konzentration gleich dem der Jersey-Milch erh&ouml;ht. Diese Feststoffe-standardisierte Friesenpferde-Milch und einen replizieren Stapel von P:F standardisiert Jersey Milch wurden in zwei weiteren Batches Cheddar-K&auml;se in 350-l-F&auml;sser. Im Vergleich mit friesischen Milch, hatte Jersey-Milch h&ouml;here Konzentrationen der meisten Milchbestandteile gemessen, einschlie&szlig;lich Protein, Kasein und Fett. Gab es wenig Unterschied in der Milch-Protein-Komposition zwischen Rassen, aber es gab Unterschiede in der Fettzusammensetzung. Friesische Milchfett hatte mehr Linols&auml;ure (CLA) als Jersey Milchfett konjugiert. Jersey-Milch koaguliert schneller und fester Quark als friesische Milch gebildet. Konzentrationen von einigen Milchbestandteile wurden mit Koagulation Parametern korreliert, aber Beziehungen erlaubte nicht Vorhersage der K&auml;sefabrikation potenzielle. Jersey-Milch ergab 10 % mehr K&auml;se pro kg als friesische Milch mit P:F standardisierte Milch, aber f&uuml;r die Milch mit der gleichen Feststoffkonzentration es wurden keine Unterschiede in der K&auml;se-Ausbeute. Keine Unterschiede in der Zusammensetzung der K&auml;se zwischen Rassen wurden entdeckt. Unterschiede in der K&auml;seherstellung Eigenschaften der Milch von Trikots und Friesen bezogen sich ausschlie&szlig;lich auf die Konzentrationen von Feststoffen in der urspr&uuml;nglichen Milch.

Ein Vergleich der Zusammensetzung, Gerinnung Merkmale und K&auml;seherstellung Kapazit&auml;t von Milch von Friesen und Jersey Milchk&uuml;he.

Ventinove multipare mucche di ognuna delle razze Frisona e Jersey, fenotipo tutti AB kappa-caseina, erano pascolavano insieme e gestite in modo identico. In tre occasioni durante 10 d in primavera (inizio lattazione), il latte &egrave; stato raccolto da tutte le mucche a quattro mungiture consecutive e raggruppate secondo la razza. In un&#39;occasione separata, campioni di latte sono stati anche raccolti da ogni mucca a consecutivi mungiture a.m. e p.m. per formare un campione ogni giorno per vacca. I latti sfusi (800-1000 l per ogni singola razza in ogni occasione) sono stati standardizzati in rapporto proteine: grasso (p) di 0,80, e 350 l da ogni razza &egrave; stato trasformato in formaggio Cheddar. Il contenuto di solidi del latte di razza Frisona restante allora &egrave; stato aumentato da ultrafiltrazione a una concentrazione di solidi uguale a quello del latte Jersey. Questo latte di razza Frisona standardizzato per solidi e un batch di replica di p standardizzato Jersey latte sono state fatte in due ulteriori lotti di formaggio Cheddar in tini di 350-l. Rispetto al latte di razza Frisona, latte Jersey aveva concentrazioni pi&ugrave; elevate della maggior parte dei componenti di latte misurato, tra cui la proteina, caseina e grasso. C&#39;erano qualche differenza nella composizione di proteine del latte tra razze, ma non c&#39;erano differenze nella composizione grassa. Grasso del latte di razza Frisona aveva pi&ugrave; coniugata con acido linoleico (CLA) di grasso di latte di Jersey. Jersey latte coagulato pi&ugrave; velocemente e formata la cagliata pi&ugrave; solida rispetto al latte di razza frisona. Concentrazioni di alcuni componenti del latte sono stati correlati con i parametri della coagulazione, ma relazioni non permetteva previsione di caseificazione potenziali. Latte Jersey ceduto il 10% in pi&ugrave; di formaggio per kg di latte di razza Frisona utilizzando p standardizzato di latte, ma per latti con la stessa concentrazione di solidi non c&#39;era differenze di resa in formaggio. Sono state rilevate differenze nella composizione del formaggio tra razze. Le differenze nelle propriet&agrave; di caseificazione del latte da maglie e Frisoni erano interamente correlate ad una concentrazione di solidi nel latte originale.

Un confronto tra la composizione, le caratteristiche di coagulazione e la capacit&agrave; di caseificazione del latte da vacche di razza frisona e Jersey.

&#x4E8C;&#x5341;&#x4E5D;&#x7D4C;&#x7523;&#x725B;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; &kappa;-&#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; AB &#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3001;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30B8;&#x30FC;&#x3068;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A2;&#x30F3;&#x54C1;&#x7A2E;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x653E;&#x7267;&#x3057;&#x3001;&#x307E;&#x3063;&#x305F;&#x304F;&#x540C;&#x3058;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7BA1;&#x7406;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;3 &#x3064;&#x306E;&#x5834;&#x9762; 10 d &#x6625; (&#x6CCC;&#x4E73;&#x521D;&#x671F;) &#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x3067; 4 &#x3064;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x3057;&#x305F;&#x643E;&#x4E73;&#x725B;&#x304B;&#x3089;&#x53CE;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3068;&#x7E41;&#x6B96;&#x7B4B;&#x8089;&#x9686;&#x3005;&#x3002;&#x5225;&#x306E;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x3082;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x725B; 1 &#x982D; 1 &#x3064;&#x6BCE;&#x65E5;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x9023;&#x7D9A;&#x3057;&#x305F;&#x5348;&#x524D;&#x3068;&#x5348;&#x5F8C;&#x306E;&#x643E;&#x4E73;&#x725B;&#x304B;&#x3089;&#x63A1;&#x53D6;&#x3057;&#x305F;.&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3072;&#x308B; &#xFF08;&#x90FD;&#x5EA6;&#x54C1;&#x7A2E;&#x3042;&#x305F;&#x308A; 800 1000 l&#xFF09; 0.80&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF1A; &#x8102;&#x80AA; (P:F) &#x6BD4;&#x306B;&#x6A19;&#x6E96;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5404;&#x54C1;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089; 350 l &#x30C1;&#x30A7;&#x30C0;&#x30FC; &#x30C1;&#x30FC;&#x30BA;&#x306B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6B8B;&#x308A;&#x306E;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A2;&#x30F3;&#x725B;&#x4E73;&#x306E;&#x56FA;&#x5F62;&#x5206;&#x542B;&#x6709;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30B8;&#x30FC;&#x725B;&#x4E73;&#x306B;&#x76F8;&#x5F53;&#x3059;&#x308B;&#x56FA;&#x5F62;&#x7269;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x9650;&#x5916;&#x308D;&#x904E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x56FA;&#x4F53;&#x6A19;&#x6E96;&#x5316;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A2;&#x30F3; &#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x3068; P:F &#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x30D0;&#x30C3;&#x30C1; &#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30B8;&#x30FC;&#x725B;&#x4E73; 350 l vats &#x306B;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C0;&#x30FC; &#x30C1;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30D0;&#x30C3;&#x30C1;&#x306B;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6A19;&#x6E96;&#x5316;&#x3002;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A2;&#x30F3; &#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30B8;&#x30FC;&#x725B;&#x4E73;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x8102;&#x80AA;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x4E73;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x725B;&#x4E73;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7D44;&#x6210;&#x306E;&#x54C1;&#x7A2E;&#x9593;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x8102;&#x80AA;&#x306E;&#x7D44;&#x6210;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x304C; &#x3002;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A2;&#x30F3;&#x725B;&#x4E73;&#x8102;&#x80AA;&#x3088;&#x308A;&#x30EA;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178; (CLA) &#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30B8;&#x30FC;&#x725B;&#x4E73;&#x8102;&#x80AA;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5171;&#x5F79;&#x7CFB;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30B8;&#x30FC;&#x725B;&#x4E73;&#x306F;&#x901F;&#x304F;&#x51DD;&#x56FA;&#x3001;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A2;&#x30F3;&#x725B;&#x4E73;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3057;&#x305F;&#x8C46;&#x8150;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x725B;&#x4E73;&#x306E;&#x6210;&#x5206;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x51DD;&#x56FA;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x306E; cheesemaking &#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x304C;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;10 &#xFF05; &#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30C1;&#x30FC;&#x30BA;/kg P:F &#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A2;&#x30F3;&#x725B;&#x4E73;&#x3088;&#x308A;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30B8;&#x30FC;&#x725B;&#x4E73;&#x725B;&#x4E73;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x5316;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x56FA;&#x4F53;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x304C;&#x305D;&#x3053;&#x306E;&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x306E;&#x30C1;&#x30FC;&#x30BA;&#x53CE;&#x7387;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30C1;&#x30FC;&#x30BA;&#x7D44;&#x6210;&#x306E;&#x54C1;&#x7A2E;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x9055;&#x70B9;&#x306F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068; Friesians &#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x306E; cheesemaking &#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x725B;&#x4E73;&#x306E;&#x56FA;&#x5F62;&#x7269;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;

&#x7D44;&#x6210;, &#x51DD;&#x56FA;&#x7279;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A2;&#x30F3;&#x3068;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30B8;&#x30FC;&#x4E73;&#x725B;&#x304B;&#x3089;&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x306E; cheesemaking &#x5BB9;&#x91CF;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3002;

&#xAC01; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xCE74;&#xD30C; &#xCE74; &#xC138; &#xC778; AB &#xD615; &#xC800;&#xC9C0;&#xC640; &#xD640;&#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778; &#xD488;&#xC885;&#xC758; 24 &#xAC1C; multiparous &#xC18C; &#xD568;&#xAED8; &#xC2A4;&#xCCD0; &#xC788;&#xC5C8;&#xACE0; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB9AC;. &#xBD04; (&#xCD08; &#xC720;) 10d&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138; &#xCC28;&#xB840;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC6B0;&#xC720; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC5F0;&#xC18D; &#xB41C; milkings&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC554;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xD488;&#xC885;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xBCC4;&#xB3C4; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xC720; &#xC0D8;&#xD50C; &#xB610;&#xD55C; &#xAC01; &#xC554;&#xC18C; &#xC554;&#xC18C; &#xB2F9; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC77C;&#xC77C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC591;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xC18D; &#xC624;&#xC804; &#xBC0F; &#xC624;&#xD6C4; milkings&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 0.80, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;: &#xC9C0;&#xBC29; &#xC9C8; (P:F) &#xBE44;&#xC728; bulked &#xBC00;&#xD06C; (&#xAC01; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xD488;&#xC885; &#xB2F9; 800-1000 l) &#xD45C;&#xC900;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4; &#xAC01; &#xD488;&#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; 350 l &#xCCB4; &#xB2E4; &#xCE58;&#xC988;&#xC5D0; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xB098;&#xBA38;&#xC9C0; Friesian &#xC6B0;&#xC720; &#xACE0;&#xCCB4; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xB2E4;&#xC74C; &#xD55C; &#xC800;&#xC9C0; &#xC6B0;&#xC720;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xACE0;&#xCCB4; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC194;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xD45C;&#xC900;&#xD654; Friesian &#xC6B0;&#xC720;&#xC640; p:f&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC77C;&#xAD04; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD45C;&#xC900;&#xD654; &#xC800;&#xC9C0; &#xC6B0;&#xC720; 350 l vats&#xC5D0; &#xCCB4; &#xB2E4; &#xCE58;&#xC988;&#xC758; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xBC30;&#xCE58;&#xB85C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD640;&#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778;&#xC758; &#xC6B0;&#xC720;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;, &#xC800;&#xC9C0; &#xC6B0;&#xC720; &#xC6B0;&#xC720; &#xAD6C;&#xC131; &#xCE21;&#xC815;&#xAC00; &#xB450; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xC9C0;&#xBC29;, &#xCE74; &#xC138; &#xC778; &#xB4F1;&#xC758; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC9D1;&#xC911; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xC720; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC131;&#xBD84; &#xD488;&#xC885; &#xC0AC;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC788;&#xC5C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC9C0;&#xBC29; &#xC131;&#xBD84;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD640;&#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778; &#xC9C0;&#xBC29; &#xB354; &#xC800;&#xC9C0; &#xC6B0;&#xC720; &#xC9C0;&#xBC29; &#xBCF4;&#xB2E4; linoleic &#xC0B0; (CLA)&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC800;&#xC9C0; &#xC6B0;&#xC720; &#xBE68;&#xB9AC; coagulated&#xC640; &#xD640;&#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778; &#xC6B0;&#xC720; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD655;&#xACE0; &#xD55C; &#xB450; &#xBD80;&#xB97C; &#xD615;&#xC131;. &#xC77C;&#xBD80; &#xC6B0;&#xC720; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC751;&#xACE0; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xAD00;&#xACC4; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; cheesemaking&#xC758; &#xC608;&#xCE21; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;. Friesian &#xC6B0;&#xC720; p:f&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xB2E4; kg &#xB2F9; 10% &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xCE58;&#xC988; &#xB098;&#xC654;&#xACE0; &#xC800;&#xC9C0; &#xC6B0;&#xC720; &#xC6B0;&#xC720;, &#xD45C;&#xC900;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC70;&#xAE30; &#xAC19;&#xC740; &#xACE0;&#xCCB4; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC640; &#xBC00;&#xD0A4; &#xCE58;&#xC988; &#xC218;&#xC728;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD488;&#xC885; &#xAC04;&#xC758; &#xCE58;&#xC988; &#xC131;&#xBD84;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xB2C8;&#xD3FC; &#xBC0F; Friesians &#xC6B0;&#xC720;&#xC758; cheesemaking &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC6D0;&#xB798; &#xC6B0;&#xC720;&#xC5D0; &#xACE0;&#xCCB4;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xC870;&#xC131;&#xACFC; &#xC751;&#xACE0; &#xD2B9;&#xC131;, &#xD640;&#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778;&#xACFC; &#xC800;&#xC9C0; &#xC816;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xC720;&#xC758; &#xC6A9;&#xB7C9; cheesemaking&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;.

Veinte y nueve vacas mult&iacute;paras de cada una de las razas Jersey y frisona, todos fenotipo AB de kappa case&iacute;na, fueron pastoreadas juntos y consigui&oacute; id&eacute;nticamente. En tres ocasiones durante 10 d&iacute;as en la primavera (primera parte de lactancia), la leche se recolect&oacute; de todas las vacas en cuatro orde&ntilde;os consecutivos y abultado seg&uacute;n raza. En otra ocasi&oacute;n, tambi&eacute;n se recogieron muestras de leche de cada vaca en orde&ntilde;os consecutivos de a.m. y p.m. para formar una muestra diaria por vaca. Las leches abultadas (800-1000 l por raza en cada ocasi&oacute;n) fueron estandarizadas a una proporci&oacute;n de prote&iacute;na: grasa (P:F) de 0,80 y 350 l de cada raza fue hecha en el queso Cheddar. El contenido de s&oacute;lidos de la leche frisona restante aument&oacute; luego de ultrafiltraci&oacute;n a una concentraci&oacute;n de s&oacute;lidos igual a la de la leche de Jersey. Esta leche frisona estandarizadas por s&oacute;lidos y un lote de replicaci&oacute;n de P:F estandardizan Jersey leche fueron hechas en dos lotes m&aacute;s de queso Cheddar en dep&oacute;sitos de 350-l. En comparaci&oacute;n con leche Friesian, Jersey leche ten&iacute;a concentraciones m&aacute;s altas de componentes de leche m&aacute;s medidos, incluyendo prote&iacute;nas, case&iacute;na y grasa. Hubo algunas diferencias en la composici&oacute;n de la prote&iacute;na de leche entre razas, pero hubo diferencias en la composici&oacute;n de grasas. Grasa de leche frisona m&aacute;s hab&iacute;a conjugado &aacute;cido linoleico (CLA) que la grasa de leche de Jersey. Jersey leche hab&iacute;a coagulada m&aacute;s r&aacute;pido y hab&iacute;a formado cuajada m&aacute;s firme que la leche frisona. Las concentraciones de algunos componentes de la leche se correlacionaron con los par&aacute;metros de la coagulaci&oacute;n, pero las relaciones no permiti&oacute; predicci&oacute;n del quesero potenciales. Leche de Jersey rindi&oacute; 10% m&aacute;s de queso por kg de leche frisona usando P:F estandarizado de leche, pero para leches con la misma concentraci&oacute;n de s&oacute;lidos que hubo diferencias en la producci&oacute;n de queso. Se detectaron diferencias en la composici&oacute;n del queso entre razas. Diferencias en propiedades quesero de la leche de los Jerseys y los frisones fueron totalmente relacionado con las concentraciones de s&oacute;lidos en la leche original.

Una comparaci&oacute;n de la composici&oacute;n, caracter&iacute;sticas de coagulaci&oacute;n y capacidad quesero de la leche de vacas frisonas y Jersey.

&#x7ED3;&#x6784;&#x548C; &beta;-&#x4E73;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; (&beta;-LG) &#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5904;&#x7406;&#x548C;&#x725B;&#x5976;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5728;&#x6A21;&#x578B;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7248; LG &#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6709;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x6FC0;&#x70C8; &beta;-LG &#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x662F;&#x4E00;&#x8D77;&#x4E3E;&#x529E;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x975E;&#x5171;&#x4EF7;&#x534F;&#x4F1A;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x548C;&#x70ED;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x975E;&#x6BCD;&#x8BED;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E00;&#x4E9B;&#x975E;&#x6BCD;&#x8BED;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x521D;&#x59CB;&#x7684; inter-&#x548C;&#x52A0;&#x70ED;&#x5C31;&#x4F1A;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x503A;&#x5238;&#x91CD;&#x6392;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x68C0;&#x67E5;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x70ED;&#x5904;&#x7406;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x65B0;&#x578B;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x52A0;&#x70ED;&#x7684; &beta;-LG &#x96C6;&#x6599;&#x4E2D;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x63A2;&#x8BA8;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4EA4;&#x6362;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x672C;&#x673A;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x70ED;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x805A;&#x5408;&#x4E86;&#x6C34;&#x89E3;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;&#x548C;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x80BD;&#x3001; &#x4E4B;&#x524D;&#x548C;&#x4E4B;&#x540E;&#x4E0E;&#x9187;&#x5904;&#x7406;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x5206;&#x9694;&#x7684;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x4E0E;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x786E;&#x8BA4;&#x5176;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x80BD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8868;&#x660E; Cys160 &#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x6FC0;&#x70C8;&#x7684; beta &#x7248; LG &#x96C6;&#x6599;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A; Cys160 Cys66 &#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x6253;&#x7834;&#x5728;&#x52A0;&#x70ED;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x7A97;&#x4F53;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x53D1;&#x73B0;&#x8868;&#x660E; &beta;-LG &#x975E;&#x672C;&#x673A;&#x5355;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6216;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x503A;&#x5238;&#x4EA4;&#x6362;&#x53CD;&#x5E94;&#x4F1A;&#x53D1;&#x751F;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x901A;&#x8FC7; Cys160&#x3002;

&#x70ED;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x518D;&#x5206;&#x914D;&#x4E2D;&#x725B;&#x5976;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x3002;1.&#x725B; &beta;-&#x4E73;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

Changes in the structure and chemistry of beta-lactoglobulin (beta-LG) play an important role in the processing and functionality of milk products. In model beta-LG systems, there is evidence that the aggregates of heated beta-LG are held together by a mixture of intermolecular non-covalent association and heat-induced non-native disulfide bonds. Although a number of non-native disulfide bonds have been identified, little is known about the initial inter- and intramolecular disulfide bond rearrangements that occur as a result of heating. These interchange reactions were explored by examining the products of heat treatment to determine the novel disulfide bonds that form in the heated beta-LG aggregates. The native protein and heat-induced aggregates were hydrolyzed by trypsin, and the resulting peptides, before and after reduction with dithiothreitol, were separated by high-performance liquid chromatography and their identities confirmed by electrospray ionization mass spectrometry. Comparisons of these peptide patterns showed that some of the Cys160 was in the reduced form in heated beta-LG aggregates, indicating that the Cys160-Cys66 disulfide bond had been broken during heating. This finding suggests that disulfide bond interchange reactions between beta-LG non-native monomers, or polymers, and other proteins could occur largely via Cys160.

Heat-induced redistribution of disulfide bonds in milk proteins. 1. Bovine beta-lactoglobulin.

Changements dans la structure et la composition chimique de la b&ecirc;ta-lactoglobuline (b&ecirc;ta-LG) jouent un r&ocirc;le important dans le traitement et la fonctionnalit&eacute; des produits laitiers. Dans les syst&egrave;mes de b&ecirc;ta-LG mod&egrave;le, il y a des preuves que les agr&eacute;gats de b&ecirc;ta-LG chauff&eacute;e sont tenus ensemble par un m&eacute;lange d&#39;association non covalente intermol&eacute;culaire et heat-induced allochtones disulfures. Bien qu&#39;un certain nombre de ponts disulfures non indig&egrave;nes ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;, on conna&icirc;t mal la premi&egrave;re inter- et des r&eacute;arrangements de liaison disulfure intramol&eacute;culaire qui surviennent &agrave; la suite de chauffage. Ces r&eacute;actions d&#39;&eacute;change ont &eacute;t&eacute; explor&eacute;es en examinant les produits de traitement thermique pour d&eacute;terminer les nouveaux ponts disulfures qui se forment dans les agr&eacute;gats chauff&eacute;e b&ecirc;ta-LG. La prot&eacute;ine native et agr&eacute;gats induite par la chaleur sont hydrolys&eacute;s par la trypsine, et les peptides qui en r&eacute;sulte, avant et apr&egrave;s r&eacute;duction avec le dithiothr&eacute;itol, ont &eacute;t&eacute; s&eacute;par&eacute;s par chromatographie liquide &agrave; haute performance et leur identit&eacute; confirm&eacute;e par electrospray ionization mass spectrometry. Comparaisons des profils de ces peptides ont montr&eacute; que certains de la Cys160 &eacute;tait dans la forme r&eacute;duite en granulats chauff&eacute;e b&ecirc;ta-LG, indiquant que la liaison disulfure de Cys160-Cys66 avait &eacute;t&eacute; bris&eacute;e pendant le chauffage. Cette constatation donne &agrave; penser que les r&eacute;actions d&#39;&eacute;change liaisons disulfure entre les monom&egrave;res de b&ecirc;ta-LG non indig&egrave;nes, ou polym&egrave;res et d&#39;autres prot&eacute;ines pourraient avoir lieu en grande partie par l&#39;interm&eacute;diaire de Cys160.

Heat-induced redistribution des liaisons disulfide dans les prot&eacute;ines de lait. 1. Les bovin b&ecirc;ta-lactoglobuline.

Ver&auml;nderungen in der Struktur und der Chemie des Beta-Lactoglobulin (Beta-LG) spielen eine wichtige Rolle in der Verarbeitung und die Funktionen von Molkereierzeugnissen. In Beta-LG Modellsysteme gibt es Hinweise darauf, dass die Aggregate des beheizten Beta-LG gehalten zusammen, durch eine Mischung der intermolekularen nicht-kovalente Association und induziert durch Hitze nicht heimischer Disulfidbr&uuml;cken. Obwohl eine Reihe von nicht-Native Disulfidbr&uuml;cken identifiziert wurden, ist wenig bekannt &uuml;ber die erste Inter- und intramolekulare Disulfid-Bond-Umlagerungen, die infolge Heizung auftreten. Diese Anschlussstelle Reaktionen wurden erforscht, untersucht die Produkte der W&auml;rmebehandlung den neuartige Disulfidbr&uuml;cken dieser Form in den beheizten Beta-LG-Aggregaten bestimmen. Die native Protein und induziert durch Hitze Aggregate wurden durch Trypsin hydrolysiert, und die resultierenden Peptiden, vor und nach der Reduktion mit Dithiothreitol, unterschieden durch Hochleistungs-Fl&uuml;ssigkeitschromatographie und ihre Identit&auml;ten von Elektrospray-Ionisation-Massenspektrometrie best&auml;tigt. Vergleiche diese Peptid-Muster zeigte, dass einige der Cys160 in die reduzierte Form in beheizten Beta-LG-Aggregate, die darauf hinweist, dass die Cys160-Cys66-Disulfidbindung w&auml;hrend Heizung defekt gewesen. Dieser Befund legt nahe, dass Disulfid Bond Anschlussstelle Reaktionen zwischen Beta-LG Drittprogrammen Monomere, Polymere oder andere Proteine &uuml;berwiegend &uuml;ber Cys160 auftreten k&ouml;nnten.

Hitze-induzierte Umverteilung von Disulfidbr&uuml;cken in Milchproteine. 1. Rinder Beta-Lactoglobulin.

Cambiamenti nella struttura e nella chimica dei beta-lactoglobulin (beta-LG) giocano un ruolo importante nella trasformazione e funzionalit&agrave; dei prodotti lattiero-caseari. In sistemi modello beta-LG, ci sono prove che gli aggregati di beta-LG riscaldata sono tenute insieme da una miscela di associazione intermolecolari non covalenti e indotta dal calore non nativo disolfuro. Sebbene un certo numero di ponti disolfuro non-native &egrave; stato identificato, poco si sa circa l&#39;iniziale inter- e riarrangiamenti di legame disolfuro intramolecolari che si verificano a seguito di riscaldamento. Queste reazioni di interscambio sono state esplorate esaminando i prodotti di trattamento termico per determinare i nuovi ponti disolfuro che si formano in aggregati riscaldata beta-LG. La proteina nativa e aggregati indotta dal calore erano idrolizzati dalla tripsina, e i risultanti peptidi, prima e dopo la riduzione con ditiotreitolo, erano separati da loro identit&agrave; confermata dalla ionizzazione electrospray e cromatografia liquida ad alte prestazioni. Confronti di questi modelli del peptide ha mostrato che alcuni il Cys160 era in forma ridotta in aggregati riscaldata beta-LG, che indica che il legame disolfuro Cys66-Cys160 era stato rotto durante il riscaldamento. Questa scoperta suggerisce che le reazioni di interscambio legame disolfuro tra altre proteine o polimeri e monomeri non-native beta-LG, potrebbero verificarsi in gran parte via Cys160.

Redistribuzione indotta dal calore dei ponti disolfuro nelle proteine del latte. 1. Bovine beta-lactoglobulin.

&Beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#xFF08;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;-LG&#xFF09; &#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x69CB;&#x9020;&#x5909;&#x5316;&#x51E6;&#x7406;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E73;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; lg &#x96FB;&#x5B50;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6E29;&#x6C34;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; LG &#x306E;&#x96C6;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x975E;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x5354;&#x4F1A;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;&#x71B1;&#x8A98;&#x8D77;&#x306E;&#x975E;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x975E;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x7269;&#x7D50;&#x675F;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5C11;&#x3057;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;- &#x3068;&#x6696;&#x623F;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C1;&#x30A7;&#x30F3;&#x30B8;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x71B1;&#x51E6;&#x7406;&#x65B0;&#x898F;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x6E29;&#x6C34;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; LG &#x96C6;&#x8A08;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x9AA8;&#x6750;&#x306E;&#x71B1;&#x8A98;&#x8D77;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x3068;&#x30B8;&#x30C1;&#x30AA;&#x30C8;&#x30EC;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x9084;&#x5143;&#x5F8C;&#x306E;&#x9AD8;&#x901F;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3068;&#x8EAB;&#x5143;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3001;Cys160 &#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6E1B;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F62;&#x614B;&#x3067;&#x6E29;&#x6C34;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; LG &#x96C6;&#x8A08;&#x3001;&#x52A0;&#x71B1;&#x6642;&#x306B; Cys160 Cys66 &#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x304C;&#x9AA8;&#x6298;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;.&#x3053;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; LG &#x975E;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x3084;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9593;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C1;&#x30A7;&#x30F3;&#x30B8;&#x53CD;&#x5FDC; Cys160 &#x7D4C;&#x7531;&#x3067;&#x4E3B;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;.

&#x4E73;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x306E;&#x71B1;&#x8A98;&#x8D77;&#x518D;&#x914D;&#x5E03;&#x3002;1. &#x30A6;&#x30B7; &beta; &#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3002;

&#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xBCA0;&#xD0C0;-lactoglobulin (&#xBCA0;&#xD0C0;-LG)&#xC758; &#xD654;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654; &#xCC98;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xC6B0;&#xC720; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB378; &#xBCA0;&#xD0C0;-LG &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC628;&#xC218; &#xBCA0;&#xD0C0;-LG&#xC758; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB294; intermolecular &#xBE44; &#xACF5;&#xC720; &#xD611;&#xD68C;&#xC758; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD568;&#xAED8; &#xAC1C;&#xCD5C; &#xD558; &#xACE0; &#xC5F4;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC774; &#xC544;&#xB2CC; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xCC44;&#xAD8C; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xC774;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBCF8;&#xC774; &#xC544;&#xB2CC; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xC218; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC9C0;&#xB9CC;, &#xC791;&#xC740; &#xCD08;&#xAE30; &#xC778;&#xD14C;&#xB974;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;-&#xBC0F; &#xB09C;&#xBC29; &#xC2DC;&#xC124; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; intramolecular &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xACB0;&#xD569; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD50;&#xD658; &#xBC18;&#xC751; &#xACB0;&#xC815; &#xC18C;&#xC124; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xC628;&#xC218; &#xBCA0;&#xD0C0;-LG &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xB2F9; &#xC591;&#xC2DD;&#xC744; &#xC5F4; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC81C;&#xD488;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xD0D0;&#xD5D8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCC9C;&#xC5F0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xC5F4; &#xC720;&#xB3C4; &#xC9D1;&#xACC4;, &#xD2B8;&#xB9BD; &#xC2E0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; &#xACB0;&#xACFC; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; dithiothreitol, &#xAC10;&#xC18C; &#xC804;&#xD6C4; &#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC640; &#xBD84;&#xBB34; &#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; id&#xB85C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xC77C;&#xBD80;&#xB294; Cys160 Cys160 Cys66 &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xBCF8;&#xB4DC; &#xB09C;&#xBC29; &#xC2DC;&#xC124; &#xC911; &#xAE68;&#xC9C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD588;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC628;&#xC218; &#xBCA0;&#xD0C0;-LG &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0; &#xCD95;&#xC18C; &#xB41C; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xB294; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCC3E;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0;-lg &#xC804;&#xC790;-&#xBE44;&#xC6D0;&#xC2DC; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4; &#xB610;&#xB294; &#xC911;&#xD569;&#xCCB4;, &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xCC44;&#xAD8C; &#xAD50;&#xD658; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC8FC;&#xB85C; cys160&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5F4; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xC6B0;&#xC720; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC7AC;&#xBC30;&#xD3EC;. 1. &#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0;-lactoglobulin&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cambios en la estructura y qu&iacute;mica de beta-lactoglobulina (beta-LG) juegan un papel importante en la transformaci&oacute;n y la funcionalidad de los productos l&aacute;cteos. En sistemas de beta-LG modelo, hay pruebas de que los agregados de beta-LG climatizada son disulfuro no-nativas celebrado juntos por una mezcla de asociaci&oacute;n no-covalente intermolecular y provocado por el calor. Aunque se han identificado un n&uacute;mero de enlaces disulfuro no nativos, poco se sabe sobre el inter inicial- y los cambios de enlace de disulfuro intramolecular que ocurren como resultado de la calefacci&oacute;n. Estas reacciones de intercambio fueron exploradas mediante el examen de los productos de tratamiento t&eacute;rmico para determinar la novela disulfuro que se forman en los agregados de beta-LG climatizada. La prote&iacute;na nativa y provocado por el calor agregados fueron hidrolizados por tripsina, y los p&eacute;ptidos resultantes, antes y despu&eacute;s de la reducci&oacute;n con Ditiotreitol, fueron separados por cromatograf&iacute;a l&iacute;quida de alto rendimiento y sus identidades confirmadas por espectrometr&iacute;a de masas de ionizaci&oacute;n por electrospray. Las comparaciones de estos patrones de p&eacute;ptido demostraron que algunos de los Cys160 era en la forma reducida en agregados climatizada beta-LG, indicando que el enlace de disulfuro de Cys160-Cys66 se ha roto durante el calentamiento. Este hallazgo sugiere que las reacciones de intercambio de Enlace disulfuro entre mon&oacute;meros de beta-LG no nativos, o pol&iacute;meros y otras prote&iacute;nas podr&iacute;an ocurrir en gran parte mediante Cys160.

Redistribuci&oacute;n inducida por calor de disulfuro en las prote&iacute;nas de la leche. 1. Bovina beta-lactoglobulina.

W&auml;rmebehandlung von Milch bewirkt, dass die Hitze-denaturable Molkenproteine auf Aggregat mit Kappa-Kasein (Kappa-CN) &uuml;ber Thiol-Disulfid Bond Anschlussstelle Reaktionen. Die besondere Disulfidbr&uuml;cken, die wichtige in der Aggregate sind sind ungewiss, obwohl Cys(121) von Beta-Lactoglobulin (Beta-LG) hat verwickelt war. Die Reaktion bei 60 Grad C zwischen Beta-LG A und eine aktivierte Kappa-CN bildeten kleine Disulfid-verbundene Aggregate. Die tryptic Peptide aus diesem Modellsystem enthalten ein Peptid mit eine Disulfidbindung zwischen Cys R&uuml;ckst&auml;nde in der Dreifach-Cys-Peptid [beta-LG(102-124)] und Kappa-CN Cys(88) u. a. zwischen Kappa-CN Cys(88) oder Kappa-CN Cys(11) und Beta-LG Cys(160). Nur die letzteren zwei neuartige Disulfid, die Anleihen in identifiziert wurden erhitzt (90 Grad C/20 min) Milch. Anwendung der computational Suche tools, insbesondere MS2Assign und SearchXLinks, die Massenspektrometrie (MS) und die Kollision-induzierte Dissoziation (CID)-MS-Daten war sehr wertvoll f&uuml;r die Identifizierung m&ouml;glich Disulfid-gebundenen Peptide. In beiden F&auml;llen Peptide mit gemessenen Massen von 4275.07 und 2312.07 wurden versuchsweise zugewiesen beta-LG(102-135):kappa-CN(11-13) und Beta-LG A(61-69):kappa-CN(87-97), beziehungsweise. Jedoch zeigte die Sequenzierung mittels der CID-MS Daten, dass sie, in der Tat, beta-LG(1-40) und beta-LG(41-60), bzw.. Diese Studie unterst&uuml;tzt das Konzept, dass reversible intramolekulare Disulfidbindung Anschlussstelle die intermolekularen Austausch Reaktionen vorausgeht.

Hitze-induzierte Umverteilung von Disulfidbr&uuml;cken in Milchproteine. 2. Disulfide Verklebung Muster zwischen Rindern Beta-Lactoglobulin und Kappa-Kasein.

&#x70ED;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x725B;&#x5976;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x70ED; denaturable &#x4E73;&#x6E05;&#x86CB;&#x767D; (kappa CN) kappa-&#x916A;&#x86CB;&#x767D;&#x901A;&#x8FC7;&#x5DEF;&#x57FA;&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x503A;&#x5238;&#x4EA4;&#x6362;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E0E;&#x805A;&#x5408;&#x3002;&#x5728;&#x805A;&#x5408;&#x4E2D;&#x5F88;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x662F;&#x4E0D;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x867D;&#x7136;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684; &beta;-&#x4E73;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; (&beta;-LG) Cys(121)&#x3002;&#x5728; 60 &#x5EA6; C &beta;-LG A &#x548C;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; kappa-CN &#x4E4B;&#x95F4;&#x53CD;&#x5E94;&#x5F62;&#x6210;&#x5C0F;&#x7684;&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x7C98;&#x7ED3;&#x805A;&#x5408;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x80F0;&#x9176;&#x80BD;&#x5305;&#x62EC;&#x80BD;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4E09;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x80BD; [beta-LG(102-124)] &#x548C; kappa-CN Cys(88) kappa-CN Cys(88) &#x6216; kappa-CN Cys(11) &#x4E0E; &beta;-LG Cys(160) Cys &#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x3002;&#x4EC5;&#x540E;&#x8005;&#x4E24;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x503A;&#x5238;&#x4E2D;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x52A0;&#x70ED;&#x725B;&#x5976; (90 &#x5EA6; C/20 &#x5206;&#x949F;)&#x3002;&#x8BA1;&#x7B97;&#x641C;&#x7D22;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F; MS2Assign &#x548C; SearchXLinks&#xFF0C;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5; (MS) &#x548C;&#x78B0;&#x649E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x89E3;&#x79BB; (CID)-MS &#x6570;&#x636E;&#x662F;&#x7528;&#x4E8E;&#x6807;&#x8BC6;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x7C98;&#x7ED3;&#x80BD;&#x975E;&#x5E38;&#x5B9D;&#x8D35;&#x3002;&#x5728;&#x4E24;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;4275.07 &#x548C; 2312.07 &#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7FA4;&#x4F17;&#x591A;&#x80BD;&#x88AB;&#x6682;&#x65F6;&#x5206;&#x914D;&#x5230; beta-LG(102-135):kappa-CN(11-13) &#x548C; &beta;-LG A(61-69):kappa-CN(87-97)&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x6392;&#x5E8F;&#x4F7F;&#x7528; CID-&#x8D28;&#x8C31;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;beta-LG(1-40) &#x548C; beta-LG(41-60)&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x652F;&#x6301;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x4EA4;&#x6362;&#x4E4B;&#x524D;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x4EA4;&#x6362;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6982;&#x5FF5;&#x3002;

&#x70ED;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x518D;&#x5206;&#x914D;&#x4E2D;&#x725B;&#x5976;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x3002;2.&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x7C98;&#x63A5;&#x725B; &beta;-&#x4E73;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E; kappa &#x916A;&#x86CB;&#x767D;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;

Heat treatment of milk causes the heat-denaturable whey proteins to aggregate with kappa-casein (kappa-CN) via thiol-disulfide bond interchange reactions. The particular disulfide bonds that are important in the aggregates are uncertain, although Cys(121) of beta-lactoglobulin (beta-LG) has been implicated. The reaction at 60 degrees C between beta-LG A and an activated kappa-CN formed small disulfide-bonded aggregates. The tryptic peptides from this model system included a peptide with a disulfide bond between a Cys residue in the triple-Cys peptide [beta-LG(102-124)] and kappa-CN Cys(88) and others between kappa-CN Cys(88) or kappa-CN Cys(11) and beta-LG Cys(160). Only the latter two novel disulfide bonds were identified in heated (90 degrees C/20 min) milk. Application of computational search tools, notably MS2Assign and SearchXLinks, to the mass spectrometry (MS) and collision-induced dissociation (CID)-MS data was very valuable for identifying possible disulfide-bonded peptides. In two instances, peptides with measured masses of 4275.07 and 2312.07 were tentatively assigned to beta-LG(102-135):kappa-CN(11-13) and beta-LG A(61-69):kappa-CN(87-97), respectively. However, sequencing using the CID-MS data demonstrated that they were, in fact, beta-LG(1-40) and beta-LG(41-60), respectively. This study supports the notion that reversible intramolecular disulfide-bond interchange precedes the intermolecular interchange reactions.

Heat-induced redistribution of disulfide bonds in milk proteins. 2. Disulfide bonding patterns between bovine beta-lactoglobulin and kappa-casein.

Traitement thermique du lait provoque de la chaleur-denaturable de prot&eacute;ines de lactos&eacute;rum &agrave; agr&eacute;ger avec kappa-cas&eacute;ine (kappa-CN), via les r&eacute;actions d&#39;&eacute;change thiol-disulfure liaisons. Les ponts disulfures particuli&egrave;res qui sont importantes dans les agr&eacute;gats sont incertaines, mais Cys(121) de b&ecirc;ta-lactoglobuline (b&ecirc;ta-LG) a &eacute;t&eacute; mis en cause. La r&eacute;action &agrave; 60 degr&eacute;s Celsius, entre b&ecirc;ta-LG A et un kappa-CN activ&eacute; form&eacute; de petits agr&eacute;gats de liaison disulfure. Les peptides tryptiques de ce syst&egrave;me de mod&egrave;le inclus un peptide avec un pont disulfure entre un r&eacute;sidu Cys dans le peptide triple-Cys [beta-LG(102-124)] et kappa-CN Cys(88) et d&#39;autres entre kappa-CN Cys(88) ou kappa-CN Cys(11) et b&ecirc;ta-LG Cys(160). Seulement le dernier deux nouveaux disulfure obligations ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;es dans chauff&eacute; le lait (90 degr&eacute;s C/20 min). Application de recherche computationnelle des outils, notamment MS2Assign et SearchXLinks, &agrave; la spectrom&eacute;trie de masse (MS) et la dissociation induite par collision (DIC)-donn&eacute;es de MS a &eacute;t&eacute; tr&egrave;s pr&eacute;cieuses pour l&#39;identification des peptides de liaison disulfure possibles. Dans les deux cas, peptides avec des masses mesur&eacute;es de 4275.07 et 2312.07 ont &eacute;t&eacute; attribu&eacute;s &agrave; beta-LG(102-135):kappa-CN(11-13) et b&ecirc;ta-LG A(61-69):kappa-CN(87-97), respectivement. Cependant, s&eacute;quen&ccedil;age utilisant la CID-MS donn&eacute;es ont d&eacute;montr&eacute; qu&#39;ils &eacute;taient, en fait, beta-LG(1-40) et beta-LG(41-60), respectivement. Cette &eacute;tude appuie l&#39;id&eacute;e que l&#39;&eacute;change de liaisons disulfure intramol&eacute;culaire r&eacute;versible pr&eacute;c&egrave;de les r&eacute;actions d&#39;&eacute;change intermol&eacute;culaire.

Heat-induced redistribution des liaisons disulfide dans les prot&eacute;ines de lait. 2. Disulfure entre b&ecirc;ta-lactoglobuline bovine et kappa-cas&eacute;ine de liaison.

Trattamento termico del latte provoca le proteine del siero di latte caldo-denaturable da aggregare con kappa-caseina (kappa-CN) attraverso reazioni di interscambio bond tiolo-disolfuro. I legami bisolfurico particolari che sono importanti per gli aggregati sono incerti, anche se Cys(121) di beta-lactoglobulin (beta-LG) &egrave; stato implicato. La reazione a 60 gradi C tra A beta-LG e un kappa-CN attivato forma piccoli aggregati disolfuro-legato. I peptidi triptico da questo sistema modello includevano un peptide con un ponte disolfuro tra un residuo di Cys Cys-triple peptide [beta-LG(102-124)] e kappa-CN Cys(88) fra kappa-CN Cys(88) o kappa-CN Cys(11) e beta-LG Cys(160). Solo il quest&#39;ultimo due romanzo disolfuro le obbligazioni sono state identificate in riscaldato latte (90 gradi C/20 min). Applicazione di ricerca computazionale strumenti, in particolare MS2Assign e SearchXLinks, la spettrometria di massa (MS) e dissociazione indotta da collisione (CID)-dati MS &egrave; stato molto preziosi per identificare possibili peptidi disolfuro-legato. In due casi, peptidi con misurate masse di 4275.07 e 2312.07 sono stati provvisoriamente assegnate a beta-LG(102-135):kappa-CN(11-13) e beta-LG A(61-69):kappa-CN(87-97), rispettivamente. Tuttavia, sequenziamento usando il CID-MS dati dimostrava che erano, in realt&agrave;, beta-LG(1-40) e beta-LG(41-60), rispettivamente. Questo studio supporta la nozione che l&#39;interscambio reversibile disolfuro intramolecolari precede le reazioni intermolecolari interscambio.

Redistribuzione indotta dal calore dei ponti disolfuro nelle proteine del latte. 2. Disulfide bonding modelli tra bovine beta-lactoglobulin e kappa-caseina.

&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x306E;&#x71B1;&#x51E6;&#x7406;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x71B1; denaturable &#x30DB;&#x30A8;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB; &#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C1;&#x30A7;&#x30F3;&#x30B8;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; &#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3; (&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1;-CN) &#x3067;&#x96C6;&#x8A08;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Cys(121) &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#xFF08;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;-LG&#xFF09; &#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x7269;&#x7D50;&#x675F;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; LG A &#x3068;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; CN &#x9593; 60 &#x2103; &#x3067;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7CFB;&#x7531;&#x6765;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EB; Cys &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; [beta-LG(102-124)] &#x3068;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; CN Cys(88) Cys &#x6B8B;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; CN Cys(88) &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; CN Cys(11) &#x3068;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; LG Cys(160) &#x9593;&#x306E;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x50B5;&#x5238;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3060;&#x3051;&#x3001;&#x5F8C;&#x8005; 2 &#x3064;&#x65B0;&#x898F;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9; &#xFF08;90 &#x2103;/20 &#x5206;&#xFF09; &#x725B;&#x4E73;&#x3092;&#x52A0;&#x71B1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x691C;&#x7D22;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x7279;&#x306B; MS2Assign &#x3068; SearchXLinks&#x3001;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5; (MS) &#x3068;&#x885D;&#x7A81;&#x8A98;&#x8D77;&#x89E3;&#x96E2; (CID) &#x3092;-MS &#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x53EF;&#x80FD;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E; 4275.07 &#x3068; 2312.07 &#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x8CEA;&#x91CF;&#x306F;&#x4E00;&#x5FDC; beta-LG(102-135):kappa-CN(11-13) &#x306B;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; LG A(61-69):kappa-CN(87-97)&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;CID MS &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x51E6;&#x7406;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;beta-LG(1-40) &#x3068; beta-LG(41-60)&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x5B9F;&#x8A3C;.&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C1;&#x30A7;&#x30F3;&#x30B8;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C1;&#x30A7;&#x30F3;&#x30B8;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x53CD;&#x5FDC;&#x524D;&#x306E;&#x6982;&#x5FF5;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E73;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x306E;&#x71B1;&#x8A98;&#x8D77;&#x518D;&#x914D;&#x5E03;&#x3002;2. &#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3; &#x30A6;&#x30B7; &beta; &#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068; &kappa;-&#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x63A5;&#x7740;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC6B0;&#xC720;&#xC758; &#xC5F4; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD558;&#xBA74; &#xC5F4; denaturable &#xC720; &#xC7A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCE74;&#xD30C;-thiol &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xCC44;&#xAD8C; &#xAD50;&#xD658; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; (&#xCE74;&#xD30C;-CN)&#xB97C; &#xCE74; &#xC138;&#xC640; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB97C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCA0;&#xD0C0;-lactoglobulin (&#xBCA0;&#xD0C0;-LG)&#xC758; Cys(121) &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xD655;&#xC2E4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCA0;&#xD0C0;-LG A&#xC640; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xCE74;&#xD30C;-CN 60&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC18;&#xC751; &#xD615;&#xC131; &#xC791;&#xC740; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xACB0;&#xD569; &#xC9D1;&#xACC4;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; tryptic &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xCE74;&#xD30C; CN Cys(88) &#xB610;&#xB294; &#xCE74;&#xD30C; CN Cys(11) &#xBCA0;&#xD0C0;-lg &#xC804;&#xC790; Cys(160) &#xC0AC;&#xC774; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; Cys &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; [beta-LG(102-124)]&#xC640; &#xCE74;&#xD30C; CN cys(88)&#xC5D0; Cys &#xC794;&#xC5EC;&#xBB3C; &#xAC04;&#xC758; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CC; &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xB450; &#xC18C;&#xC124; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; (90&#xB3C4; C/20 &#xBD84;) &#xC6B0;&#xC720;&#xAC00; &#xC5F4;. &#xC751;&#xC6A9; &#xC804;&#xC0B0; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC758; &#xB3C4;&#xAD6C;, &#xD2B9;&#xD788; ms2assign&#xC640; SearchXLinks, &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; (MS)&#xC640; &#xCDA9;&#xB3CC;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xBD84;&#xB9AC; (CID)-MS &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xACB0;&#xD569; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;, &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; 4275.07&#xC640; 2312.07&#xC758; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; &#xB300; &#xC911;&#xC73C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xC815; Beta-lg(102-135):kappa-cn(11-13)&#xC5D0; &#xD560;&#xB2F9; &#xB41C; &#xBC0F; &#xBCA0;&#xD0C0;-lg &#xC804;&#xC790; A(61-69):kappa-CN(87-97), &#xAC01;&#xAC01;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC774;, &#xC0AC;&#xC2E4;, beta-LG(1-40) &#xBC0F; beta-LG(41-60), &#xAC01;&#xAC01; &#xC2DC;&#xC5F0; CID MS&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAC00;&#xC5ED; intramolecular &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xCC44;&#xAD8C; &#xAD50;&#xD658; &#xC55E; intermolecular &#xAD50;&#xD658; &#xBC18;&#xC751; &#xAC1C;&#xB150;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5F4; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xC6B0;&#xC720; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC7AC;&#xBC30;&#xD3EC;. 2. &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xACB0;&#xD569; &#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0;-lactoglobulin&#xC640; &#xCE74;&#xD30C; &#xCE74; &#xC138; &#xC778; &#xD328;&#xD134;.

Tratamiento t&eacute;rmico de la leche hace que las prote&iacute;nas de suero de calor-denaturable a agregado con case&iacute;na kappa (kappa-CN) mediante reacciones de intercambio de bonos de tiol-disulfuro. El disulfuro particulares que son importante en los agregados es incierto, aunque se ha implicado Cys(121) de beta-lactoglobulina (beta-LG). La reacci&oacute;n a 60 grados C entre beta-LG y un kappa-CN activado formaron peque&ntilde;os agregados de disulfuro-consolidado. Los p&eacute;ptidos tr&iacute;pticos desde este modelo incluyen un p&eacute;ptido con un enlace disulfuro entre un residuo Cys en el p&eacute;ptido de la triple-Cys [beta-LG(102-124)] y kappa-CN Cys(88) y otros entre kappa-CN Cys(88) o kappa-CN Cys(11) y beta-LG Cys(160). S&oacute;lo el &uacute;ltimo dos novela disulfuro bonos fueron identificados en calienta leche (90 grados C/20 min). Aplicaci&oacute;n de b&uacute;squeda computacional herramientas, en particular, MS2Assign y SearchXLinks, a la espectrometr&iacute;a de masas (MS) y la disociaci&oacute;n inducida por colisi&oacute;n (CID)-MS datos fue muy valiosas para identificar posibles p&eacute;ptidos disulfuro-consolidado. En dos instancias, p&eacute;ptidos con masas medidas de 4275.07 y 2312.07 fueron asignados tentativamente a beta-LG(102-135):kappa-CN(11-13) y beta-LG A(61-69):kappa-CN(87-97), respectivamente. Sin embargo, la secuencia utilizando el CID-MS datos demostraron que eran, de hecho, beta-LG(1-40) y beta-LG(41-60), respectivamente. Este estudio apoya la noci&oacute;n que intercambio reversible disulfuro intramolecular precede a las reacciones de intercambio intermolecular.

Redistribuci&oacute;n inducida por calor de disulfuro en las prote&iacute;nas de la leche. 2. Patrones entre bovino beta-lactoglobulina y case&iacute;na kappa de la vinculaci&oacute;n de disulfuro.

[&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;] &#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x4E73;&#x764C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068; mRNA &#x306E; MCF10&#x3002;

[&#xBAA8;&#xD130; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC640; &#xC720;&#xBC29;&#xC554;&#xC758; MCF10 &#xBAA8;&#xB378; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; mRNA &#xD45C;&#xD604;].

[Metilaci&oacute;n del promotor y la expresi&oacute;n del mRNA de MCF10 modelo de l&iacute;neas celulares de c&aacute;ncer de mama].

[&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; MCF10 &#x6A21;&#x578B;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7CFB;]&#x3002;

[Promoter methylation and mRNA expression of MCF10 model cell lines of breast cancer].

[La m&eacute;thylation du promoteur et expression de l&#39;ARNm de MCF10 mod&egrave;le des lign&eacute;es cellulaires de cancer du sein].

[Promotor-Methylierung und mRNA-Expression von MCF10 Modell Zelllinien von Brustkrebs].

[Metilazione del promotore ed espressione del mRNA di MCF10 modello linee di cellule di cancro al seno].

Pour &eacute;tudier l&#39;expression promoteur m&eacute;thylation statut et de l&#39;ARNm du g&egrave;ne APC MCF10 mod&egrave;le de progression du cancer du sein.

[M&eacute;thylation du promoteur et expression de l&#39;ARNm du g&egrave;ne APC dans mod&egrave;le de cancer du sein MCF10].

Den Projekttr&auml;ger Methylierung Status und mRNA Ausdruck des APC-Gens in MCF10 Modell der Brust Fortschreiten zu untersuchen.

[Promoter-Methylierung und mRNA Ausdruck des APC-Gens in MCF10 Brust-Krebs-Modell].

Per indagare il promotore metilazione status e mRNA espressione del gene APC in MCF10 modello di progressione del cancro al seno.

[Metilazione del promotore ed espressione del mRNA del gene APC nel modello di cancro al seno MCF10].

MCF10 &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x4E73;&#x764C;&#x9032;&#x884C;&#x306E; APC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x72B6;&#x614B;&#x3068; mRNA &#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

[&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068; MCF10 &#x4E73;&#x623F;&#x764C;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; APC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; mRNA &#x767A;&#x73FE;]&#x3002;

&#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC9C4;&#xD589;&#xC758; MCF10 &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; APC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xBC0F; mRNA &#xC2DD; &#xC870;&#xC0AC;.

[&#xBAA8;&#xD130; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC640; MCF10 &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; APC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; mRNA &#xD45C;&#xD604;].

Investigar la expresi&oacute;n promotor metilaci&oacute;n estado y mRNA del gen APC en el modelo MCF10 de la progresi&oacute;n del c&aacute;ncer de mama.

Metilaci&oacute;n del promotor y la expresi&oacute;n del mRNA del gen APC en MCF10 modelo de c&aacute;ncer de mama.

&#x8C03;&#x67E5; MCF10 &#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x4E73;&#x817A;&#x80BF;&#x7624;&#x4E2D; APC &#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x72B6;&#x6001;&#x548C; mRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

[&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; APC &#x57FA;&#x56E0;&#x7684; MCF10 &#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x6A21;&#x578B;]&#x3002;

To investigate the promoter methylation status and mRNA expression of APC gene in MCF10 model of breast cancer progression.

[Promoter methylation and mRNA expression of APC gene in MCF10 breast cancer model].

&#x82E5;&#x8981;&#x901A;&#x8FC7; WT1 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x80BF;&#x7624;&#x7684; MCF10 &#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x72B6;&#x6001;&#x548C; mRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8C03;&#x67E5; WT1 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

[&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE; WT1 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728; MCF10 &#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;]&#x3002;

To investigate the role of WT1 gene in breast carcinogenesis by analyses of the promoter methylation status and mRNA expression of WT1 gene in MCF10 model system of breast cancer progression.

[Promoter methylation and mRNA expression of WT1 gene in MCF10 breast cancer model].

D&#39;enqu&ecirc;ter sur le r&ocirc;le du g&egrave;ne WT1 dans la carcinogen&egrave;se mammaire par l&#39;analyse de l&#39;expression promoteur m&eacute;thylation statut et de l&#39;ARNm du g&egrave;ne WT1 dans MCF10 syst&egrave;me de mod&egrave;le de progression du cancer du sein.

[M&eacute;thylation du promoteur et expression de l&#39;ARNm du g&egrave;ne WT1 dans mod&egrave;le de cancer du sein MCF10].

Die Rolle der WT1-gen in Brust Karzinogenese durch Analysen der Projekttr&auml;ger Methylierung Status und mRNA Ausdruck der WT1-gen in MCF10 Modellsystem der Brust Fortschreiten zu untersuchen.

[Promoter-Methylierung und mRNA Ausdruck WT1-gen in MCF10 Brust-Krebs-Modell].

Per indagare il ruolo del gene WT1 nella carcinogenesi del seno mediante analisi del promotore metilazione status e mRNA espressione del gene WT1 nel sistema modello MCF10 di progressione del cancro al seno.

[Metilazione del promotore ed espressione del mRNA del gene WT1 nel modello di cancro al seno MCF10].

&#x4E73;&#x764C;&#x9032;&#x884C;&#x306E; MCF10 &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; WT1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x72B6;&#x614B;&#x3068; mRNA &#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E73;&#x817A;&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; WT1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

[&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068; MCF10 &#x4E73;&#x623F;&#x764C;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; WT1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; mRNA &#x767A;&#x73FE;]&#x3002;

&#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC9C4;&#xD589;&#xC758; MCF10 &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; WT1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xBC0F; mRNA &#xC2DD;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720; &#xBC29; &#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; WT1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC;.

[&#xBAA8;&#xD130; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC640; MCF10 &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; WT1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; mRNA &#xD45C;&#xD604;].

Para investigar el papel del gen WT1 en la carcinog&eacute;nesis mamaria por an&aacute;lisis de la expresi&oacute;n promotor metilaci&oacute;n estado y mRNA del gen WT1 en MCF10 sistema de modelo de progresi&oacute;n del c&aacute;ncer de mama.

Metilaci&oacute;n del promotor y la expresi&oacute;n del mRNA del gen WT1 en MCF10 modelo de c&aacute;ncer de mama.

&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7684;&#x80DE;&#x5627;&#x5576;&#x6B8B;&#x7559;&#x5728;&#x4E2D;&#x592E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x653F;&#x5E9C; dinucleotides &#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;/&#x7A33;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5E76;&#x4FDD;&#x6301;&#x5728;&#x4E2D;&#x592E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x653F;&#x5E9C; dinucleotides &#x7531; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; (Dnmt1&#x3001; Dnmt3a &#x548C; Dnmt3b)&#x3002;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x8BB8;&#x591A;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;CpG &#x4E8C;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x662F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x504F;&#x4F4E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x635F;&#x5931;&#x88AB;&#x5047;&#x5B9A;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A;&#x5931;&#x4FEE;&#x6C28;&#x5627;&#x5576;&#x548C;&#x5C3F;&#x5627;&#x5576;&#x548C;&#x80F8;&#x817A;&#x5627;&#x5576;&#xFF0C;5-&#x7532;&#x57FA;&#x80DE;&#x5627;&#x5576;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x76F8;&#x4FE1;&#x4E24;&#x4E2A;&#x80F8;&#x817A;&#x5627;&#x5576; glycosylases &#x51CF;&#x5C11; 5-&#x7532;&#x57FA;&#x80DE;&#x5627;&#x5576;&#x8131;&#x6C28;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;G/T &#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x7279;&#x5B9A;&#x80F8;&#x817A;&#x5627;&#x5576; DNA &#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; (&#x8D27;&#x8FD0;) &#x548C;&#x7532;&#x57FA;&#x5316; CpG &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x86CB;&#x767D; 4 &#x65E2;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6D88;&#x8D39;&#x7A0E;&#x5C3F;&#x5627;&#x5576;&#x6216;&#x80F8;&#x817A;&#x5627;&#x5576;&#x5728; U.G &#x548C; T.G &#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x542F;&#x52A8;&#x57FA;&#x5730;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x590D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; Dnmt3b &#x53CA;&#x8D27;&#x8FD0;&#x548C;&#x7532;&#x57FA;&#x5316; CpG &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x86CB;&#x767D; 4 &#x4E92;&#x52A8;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; (1)&#xFF0C;&#x5219;&#x4F1A;&#x5C06;&#x8D27;&#x8FD0;&#x548C; Dnmt3b colocalized &#x5F02;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x548C; (2) &#x51CF;&#x5C11;&#x540E; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8981;&#x6C42;&#x6B63;&#x786E; T.G &#x9519;&#x914D;&#x4FEE;&#x590D; RNA &#x7EC4;&#x4EF6;&#x635F;&#x5931; T.G &#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x4FEE;&#x590D;&#x6548;&#x7387;&#x3002;

&#x8868;&#x5F81;&#x7684; Dnmt3b:thymine-DNA methyltransferase(s) &#x548C; RNA &#x4FEE;&#x590D; DNA &#x7CD6;&#x82F7;&#x9176;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E;&#x80F8;&#x817A;&#x5627;&#x5576;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;

Methylation of cytosine residues in CpG dinucleotides plays an important role in epigenetic regulation of gene expression and chromatin structure/stability in higher eukaryotes. DNA methylation patterns are established and maintained at CpG dinucleotides by DNA methyltransferases (Dnmt1, Dnmt3a, and Dnmt3b). In mammals and many other eukaryotes, the CpG dinucleotide is underrepresented in the genome. This loss is postulated to be the result of unrepaired deamination of cytosine and 5-methylcytosine to uracil and thymine, respectively. Two thymine glycosylases are believed to reduce the impact of 5-methylcytosine deamination. G/T mismatch-specific thymine-DNA glycosylase (Tdg) and methyl-CpG binding domain protein 4 can both excise uracil or thymine at U.G and T.G mismatches to initiate base excision repair. Here, we report the characterization of interactions between Dnmt3b and both Tdg and methyl-CpG binding domain protein 4. Our results demonstrate (1) that both Tdg and Dnmt3b are colocalized to heterochromatin and (2) reduction of T.G mismatch repair efficiency upon loss of DNA methyltransferase expression, as well as a requirement for an RNA component for correct T.G mismatch repair.

Characterization of Dnmt3b:thymine-DNA glycosylase interaction and stimulation of thymine glycosylase-mediated repair by DNA methyltransferase(s) and RNA.

La m&eacute;thylation des r&eacute;sidus cytosine dans dinucl&eacute;otides joue un r&ocirc;le important dans la r&eacute;gulation &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique de l&#39;expression des g&egrave;nes et la chromatine structure/stabilit&eacute; chez les eucaryotes sup&eacute;rieurs. Profils de m&eacute;thylation de l&#39;ADN sont &eacute;tablis et maintenus aux dinucl&eacute;otides par ADN m&eacute;thyltransf&eacute;rases (Dnmt1, Dnmt3a et Dnmt3b). Chez les mammif&egrave;res et de nombreux autres eucaryotes, le dinucl&eacute;otide CpG est sous-repr&eacute;sent&eacute;e dans le g&eacute;nome. Cette perte est postul&eacute;e pour &ecirc;tre le r&eacute;sultat de d&eacute;samination non r&eacute;par&eacute; de la cytosine et de la 5-m&eacute;thylcytosine uracile et thymine, respectivement. Deux thymine glycosylases sont cens&eacute;s r&eacute;duire l&#39;impact de la 5-m&eacute;thylcytosine d&eacute;samination. G/T incompatibilit&eacute; sp&eacute;cifique thymine-DNA glycosylase (TMD) et m&eacute;thyl-CpG GRB2 domaine 4 peuvent exciser les deux uracile ou thymine &agrave; U.G et Taher incompatibilit&eacute;s d&#39;ouvrir la base excision repair. Nous rapportons ici, la caract&eacute;risation des interactions entre Dnmt3b TMD et m&eacute;thyl-CpG GRB2 domaine 4. Nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent que (1) que les TMD et Dnmt3b sont &eacute;pididymaire h&eacute;t&eacute;rochromatine et (2) r&eacute;duction de l&#39;efficacit&eacute; Taher incompatibilit&eacute; r&eacute;paration apr&egrave;s la perte de l&#39;expression de l&#39;ADN m&eacute;thyltransf&eacute;rase, ainsi une exigence pour un composant de RNA pour correct Taher m&eacute;sappariements.

Caract&eacute;risation des Dnmt3b:thymine-DNA glycosylase interaction et stimulation de la thymine glycosylase m&eacute;di&eacute;e par r&eacute;paration par methyltransferase(s) de l&#39;ADN et l&#39;ARN.

Methylierung von Cytosin R&uuml;ckst&auml;nde in CpG-Dinucleotides spielt eine wichtige Rolle in epigenetische Regulierung der Genexpression und Chromatin Struktur und Stabilit&auml;t in den h&ouml;heren Eukaryotes. DNA-Methylierungsmuster erstellt und fortgeschrieben am CpG Dinucleotides durch DNA-Methyltransferasen (Dnmt1, Dnmt3a und Dnmt3b). In S&auml;ugetieren und vielen anderen Eukaryoten ist die CpG dinucleotid im Genom unterrepr&auml;sentiert. Dieser Verlust wird postuliert, um das Ergebnis des nicht reparierten Deamination Cytosin und Uracil und Thymin, 5-Methylcytosine zu sein, beziehungsweise. Zwei Thymin Glycosylases werden geglaubt, um die Auswirkungen der 5-Methylcytosine Deamination verringern. G/T stimmen nicht &uuml;berein-spezifische Thymin-DNA Glycosylase (Tdg) und methyl--CpG verbindliches Dom&auml;ne Protein 4 k&ouml;nnen beide Uracil oder Thymin bei U.G und TG Missverh&auml;ltnisse base Excision Repair initiieren Verbrauchsteuern. Hier berichten wir &uuml;ber die Charakterisierung der Interaktionen zwischen Dnmt3b, Tdg und methyl--CpG verbindliches Dom&auml;ne Protein 4. Unsere Ergebnisse zeigen (1), dass Tdg und Dnmt3b Heterochromatin und (2) die Reduzierung der TG Fehlanpassung Reparatur Effizienz bei Verlust der DNA Methyltransferase Ausdruck sowie eine Anforderung f&uuml;r eine RNA-Komponente zur richtigen TG Fehlanpassung Reparatur colocalized sind.

Charakterisierung der Dnmt3b:thymine-DNA Glycosylase Interaktion und Stimulation von Thymin Glycosylase-vermittelte zu reparieren, indem Sie Methyltransferase(s) der DNA und RNA.

La metilazione dei residui della citosina in dinucleotidi gioca un ruolo importante nella regolazione epigenetica dell&#39;espressione genica e la struttura della cromatina/stabilit&agrave; negli eucarioti superiori. Pattern di metilazione del DNA sono stabiliti e aggiornati ai dinucleotidi dai methyltransferases del DNA (Dnmt1, Dnmt3a e Dnmt3b). Nei mammiferi e molti altri eucarioti, il dinucleotide CpG &egrave; sottorappresentata nel genoma. Questa perdita &egrave; postulata per essere il risultato di non riparati deaminazione della citosina e la 5-metilcitosina uracile e timina, rispettivamente. Due glycosylases di timina sono creduto per ridurre l&#39;impatto di deaminazione della 5-metilcitosina. G/T specifico del disadattamento timina-DNA glycosylase (Tdg) e metilico-CpG-binding protein dominio 4 pu&ograve; recidere uracile o timina a incongruenze di U.G e T.G per avviare la riparazione di base di escissione. Riportiamo la caratterizzazione delle interazioni tra Dnmt3b e Tdg e metilico-CpG-binding protein dominio 4. I nostri risultati dimostrano (1) che sia Tdg e Dnmt3b sono colocalized in eterocromatina e (2) riduzione di T.G l&#39;efficienza di riparazione del disadattamento su perdita di espressione di DNA metiltransferasi, nonch&eacute; un requisito per un componente di RNA per la riparazione di mancata corrispondenza corretta T.G.

Caratterizzazione di Dnmt3b:thymine-DNA glycosylase interazione e stimolazione della timina glycosylase-mediata di riparazione di methyltransferase(s) di DNA e RNA.

&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316; CpG &#x306E;&#x30B8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30C1;&#x30C8;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x6B8B;&#x4F59;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;/&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x30FB; CpG &#x306E;&#x30B8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306F; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; (Dnmt1&#x3001;Dnmt3a, &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#xFF09; &#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CpG &#x88DC;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x904E;&#x5C0F;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x672A;&#x4FEE;&#x7406;&#x8131;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x5316;&#x30B7;&#x30C8;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x30A6;&#x30E9;&#x30B7;&#x30EB;&#x3001;&#x30C1;&#x30DF;&#x30F3;&#x3001;5 &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B7;&#x30C8;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x30C1;&#x30DF;&#x30F3; glycosylases 5-&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B7;&#x30C8;&#x30B7;&#x30F3;&#x8131;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x5316;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;G/T &#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x306E;&#x30C1;&#x30DF;&#x30F3; DNA &#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (Tdg) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB; CpG &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D; 4 &#x4E21;&#x65B9;&#x30A6;&#x30E9;&#x30B7;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C1;&#x30DF;&#x30F3;&#x5869;&#x57FA;&#x9664;&#x53BB;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x306F;&#x3001;U.G &#x3068; T.G &#x306E;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x3067;&#x5207;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3068; Tdg &#x3068;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB; CpG &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D; 4 &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Tdg &#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x306F;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068; T.G &#x30DF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x52B9;&#x7387; DNA &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x5F0F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6B63;&#x3057;&#x3044; T.G &#x30DF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B; RNA &#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x6642;&#x306E;&#x9084;&#x5143; (2) &#x7D50;&#x679C; (1) &#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Dnmt3b:thymine &#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x8A55;&#x4FA1;-DNA &#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3068;&#x30C1;&#x30DF;&#x30F3; &#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x5A92;&#x4ECB;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x3092;&#x4FEE;&#x5FA9; methyltransferase(s) DNA &#x304A;&#x3088;&#x3073; RNA &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3002;

&#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; CpG &#xADF8;&#xC5D0; &#xC2DC; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; chromatin &#xAD6C;&#xC870;/&#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xB192;&#xC740; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; epigenetic &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xD328;&#xD134; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0;, DNA methyltransferases (Dnmt1, Dnmt3a &#xBC0F; Dnmt3b)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; CpG &#xADF8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC9C0;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; CpG &#xB514;&#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xC9C0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC190;&#xC2E4;&#xC740; unrepaired &#xD0C8; &#xC2DC; uracil &#xBC0F; thymine, 5-methylcytosine&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC01;&#xAC01; &#xC218; postulated&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; thymine glycosylases 5 methylcytosine &#xD0C8;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC904;&#xC77C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD94;&#xC815; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xBE44; G/T &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58; &#xAD00;&#xB828; thymine DNA glycosylase (Tdg)&#xC640; &#xBA54; &#xD2F8;-CpG &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 4 &#xC218; &#xBAA8;&#xB450; &#xC138; uracil &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC808;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; U.G &#xBC0F; T.G &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58;&#xC5D0; thymine. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; Dnmt3b Tdg&#xC640; &#xBA54; &#xD2F8;-CpG &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 4 &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; Tdg &#xBC0F; Dnmt3b &#xC12C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC0F; &#xC190;&#xC2E4; DNA methyltransferase &#xC2DD;&#xC758; &#xC62C;&#xBC14;&#xB978; T.G &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; RNA &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; T.G &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; (2) colocalized (1)&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Dnmt3b:thymine&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;-DNA glycosylase &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; thymine glycosylase &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xC790;&#xADF9; methyltransferase(s) DNA&#xC640; RNA&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218;&#xB9AC;.

Metilaci&oacute;n de residuos de citosina en dinucle&oacute;tidos CpG juega un papel importante en la regulaci&oacute;n epigen&eacute;tica de la expresi&oacute;n g&eacute;nica y estructura de la cromatina/estabilidad en eucariotas superiores. Patrones de metilaci&oacute;n de ADN son elaborados y mantenidos en dinucle&oacute;tidos CpG por DNA metiltransferasas (Dnmt1, Dnmt3a y Dnmt3b). En mam&iacute;feros y muchos otros eucariotas, el dinucle&oacute;tido CpG est&aacute; sub-representado en el genoma. Esta p&eacute;rdida se postula para ser el resultado de rupturas desaminaci&oacute;n de citosina y 5-METILCITOSINA uracilo y timina, respectivamente. Dos glicosilasas de timina se creen para reducir el impacto de la 5-METILCITOSINA desaminaci&oacute;n. G/T desajuste espec&iacute;ficos timina ADN glicosilasa (Tdg) y prote&iacute;na de dominio de uni&oacute;n a metil-CpG 4 pueden tanto suprimir uracilo o timina en desajustes U.G y T.G para iniciar la reparaci&oacute;n de la supresi&oacute;n de base. Aqu&iacute;, divulgamos la caracterizaci&oacute;n de las interacciones entre Dnmt3b, Tdg y prote&iacute;na de dominio de uni&oacute;n a metil-CpG 4. Nuestros resultados demuestran que (1) que tanto Tdg y Dnmt3b son colocalized heterocromatina y (2) reducci&oacute;n de la eficiencia de reparaci&oacute;n T.G desajuste sobre p&eacute;rdida de expresi&oacute;n de metiltransferasa de ADN, as&iacute; como un requisito para un componente de RNA para la correcta reparaci&oacute;n de desajuste T.G.

Caracterizaci&oacute;n de Dnmt3b:thymine-reparaci&oacute;n de ADN glicosilasa interacci&oacute;n y estimulaci&oacute;n del thymine glicosilasa-mediada por methyltransferase(s) de ADN y ARN.

Exp&#xE9;riences historiques r&#xE9;centes ont montr&#xE9; que la surexpression transitoire d&#x26;#39;un petit nombre de facteurs de transcription peut reprogrammer des cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es en cellules souches pluripotentes induites (iPS) qui ressemblent &#xE0; des cellules souches embryonnaires (ES) des cellules. Ces cellules iPS sont tr&#xE8;s prometteuses pour la m&#xE9;decine parce qu&#x26;#39;ils ont le potentiel pour g&#xE9;n&#xE9;rer des types cellulaires sp&#xE9;cifiques au patient pour la th&#xE9;rapie de remplacement cellulaire et de produire des mod&#xE8;les in vitro de la maladie, sans n&#xE9;cessiter de tissus embryonnaires ou des ovocytes. Bien que les lignes actuelles iPS cellules ressemblent &#xE0; des cellules ES, ils n&#x26;#39;ont pas pass&#xE9; le test le plus rigoureux de la pluripotence en g&#xE9;n&#xE9;rant des souris &#xE0; terme ou d&#x26;#39;un adulte dans des essais de compl&#xE9;mentation t&#xE9;traplo&#xEF;des, ce qui soul&#xE8;ve des questions quant &#xE0; savoir si elles sont suffisamment puissants pour g&#xE9;n&#xE9;rer tous les types de cellules dans un organisme. Que cette diff&#xE9;rence entre les iPS et les cellules ES refl&#xE8;te les limites intrins&#xE8;ques de reprogrammation directe n&#x26;#39;est pas connue. Nous rapportons ici les souris adultes fertiles provenant enti&#xE8;rement de cellules iPS que nous g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s par reprogrammation g&#xE9;n&#xE9;tique inductible de fibroblastes embryonnaires de souris. Produire des souris adultes issues enti&#xE8;rement &#xE0; partir d&#x26;#39;un fibroblaste reprogramm&#xE9; montre que toutes les caract&#xE9;ristiques d&#x26;#39;une cellule diff&#xE9;renci&#xE9;e peut &#xEA;tre restaur&#xE9;e &#xE0; un niveau embryonnaire de la pluripotence, sans exposition &#xE0; des facteurs inconnus ovoplasmique. En comparant ces lignes totalement pluripotentes iPS cellules &#xE0; des lignes de d&#xE9;veloppement moindre puissants peuvent r&#xE9;v&#xE9;ler des marqueurs mol&#xE9;culaires des Etats pluripotentes diff&#xE9;rents. En outre, les souris issues enti&#xE8;rement &#xE0; partir de cellules iPS fournira une nouvelle ressource pour &#xE9;valuer la stabilit&#xE9; fonctionnelle et g&#xE9;nomique des cellules et des tissus obtenus &#xE0; partir de cellules iPS, ce qui est important de valider leur utilit&#xE9; dans la th&#xE9;rapie de remplacement cellulaire et applications de la recherche.

Souris adultes produites &#xE0; partir de cellules souches pluripotentes induites

&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5730;&#x6807;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x77AC;&#x6001;&#x8FC7;&#x5C11;&#x91CF;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5230;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; (ES) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E72; (iPS) &#x7EC6;&#x80DE;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x524D;&#x666F;&#x5F88;&#x597D;&#x7684;&#x836F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x751F;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66FF;&#x4EE3;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7279;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x548C;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6216;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5F53;&#x524D;&#x7684; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x6CA1;&#x6709;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x6210;&#x8DB3;&#x6216;&#x6210;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x56DB;&#x500D;&#x4F53;&#x4E92;&#x8865;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x5BF9;&#x5B83;&#x4EEC;&#x662F;&#x5426;&#x8DB3;&#x591F;&#x5F3A;&#x5927;&#xFF0C;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x95EE;&#x9898;&#x4E2D;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BC4;&#x9009;&#x6700;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x8003;&#x9A8C;&#x3002;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x662F;&#x5426;&#x8FD9; iPS &#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86;&#x76F4;&#x63A5;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x672C;&#x8EAB;&#x7684;&#x5C40;&#x9650;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x80A5;&#x6C83;&#x7684;&#x6210;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5B8C;&#x5168;&#x6765;&#x81EA;&#x6211;&#x4EEC;&#x7531;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x9057;&#x4F20;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x7684; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x751F;&#x4EA7;&#x5B8C;&#x5168;&#x6765;&#x81EA;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6210;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x529F;&#x80FD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x90FD;&#x6062;&#x590D;&#x5230;&#x6CA1;&#x6709;&#x63A5;&#x89E6;&#x672A;&#x77E5;&#x539F;&#x6838;&#x80DA;&#x4F53;&#x5916;&#x56E0;&#x7D20;&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#x80DA;&#x80CE;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x53D1;&#x80B2;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B8C;&#x5168;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x4E3A;&#x5C0F;&#x4E8E;&#x70C8;&#x6027;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x63ED;&#x793A;&#x5206;&#x5B50;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x4E0D;&#x540C;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7684;&#x56FD;&#x5BB6;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5B8C;&#x5168;&#x6765;&#x81EA; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5C06;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x8D44;&#x6E90;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6765;&#x81EA; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x5176;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66FF;&#x4EE3;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E0E;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

&#x6210;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x3002;

Recent landmark experiments have shown that transient overexpression of a small number of transcription factors can reprogram differentiated cells into induced pluripotent stem (iPS) cells that resemble embryonic stem (ES) cells. These iPS cells hold great promise for medicine because they have the potential to generate patient-specific cell types for cell replacement therapy and produce in vitro models of disease, without requiring embryonic tissues or oocytes. Although current iPS cell lines resemble ES cells, they have not passed the most stringent test of pluripotency by generating full-term or adult mice in tetraploid complementation assays, raising questions as to whether they are sufficiently potent to generate all of the cell types in an organism. Whether this difference between iPS and ES cells reflects intrinsic limitations of direct reprogramming is not known. Here we report fertile adult mice derived entirely from iPS cells that we generated by inducible genetic reprogramming of mouse embryonic fibroblasts. Producing adult mice derived entirely from a reprogrammed fibroblast shows that all features of a differentiated cell can be restored to an embryonic level of pluripotency without exposure to unknown ooplasmic factors. Comparing these fully pluripotent iPS cell lines to less developmentally potent lines may reveal molecular markers of different pluripotent states. Furthermore, mice derived entirely from iPS cells will provide a new resource to assess the functional and genomic stability of cells and tissues derived from iPS cells, which is important to validate their utility in cell replacement therapy and research applications.

Adult mice generated from induced pluripotent stem cells.

Den letzten Wahrzeichen-Experimente haben gezeigt, dass vor&uuml;bergehend eine &Uuml;berexpression von einer kleinen Anzahl von Transkriptionsfaktoren kann differenzierte Zellen umzuprogrammieren, in induzierte pluripotente Stammzellen (iPS) Zellen, die embryonale Stammzellen (ES) &auml;hneln. Diese iPS-Zellen halten viel versprechend f&uuml;r Medizin, weil sie das Potenzial haben, Patienten-spezifischen Zelltypen f&uuml;r Zelle-Ersatz-Therapie zu generieren und in-vitro-Modelle der Krankheit, ohne embryonalen Gewebe oder Eizellen zu produzieren. Obwohl aktuelle iPS-Zelllinien ES Zellen &auml;hneln, haben sie nicht den strengsten Test der Pluripotenz &uuml;bergeben, durch die Generierung von endg&uuml;ltigen oder adulte M&auml;use bei tetraploide Komplementation-Assays, wirft Fragen auf, ob sie ausreichend stark, um all die Zelltypen im Organismus zu generieren sind. Ob dieser Unterschied zwischen iPS und ES Zellen immanente Grenzen der direkte Reprogrammierung widerspiegelt, ist nicht bekannt. Hier berichten wir fruchtbare Erwachsene M&auml;usen abgeleitet iPS-Zellen, die wir durch Induktion erh&auml;ltliche genetische Umprogrammierung der M&auml;useembryonalen generiert. Herstellung von Erwachsene M&auml;usen abgeleitet eine umprogrammiert Fibroblast zeigt, dass alle Funktionen einer differenzierten Zelle zu einem embryonalen Niveau von Pluripotenz ohne Belastung durch unbekannte Ooplasmic Faktoren wiederhergestellt werden k&ouml;nnen. Vergleicht man diese vollst&auml;ndig pluripotente iPS Zelllinien zu weniger entwicklungspolitisch kannst potente Linien molekulare Marker der verschiedenen pluripotenten Staaten aufdecken. Dar&uuml;ber hinaus bieten M&auml;usen abgeleitet iPS-Zellen eine neue Ressource, um die funktionale und genomische Stabilit&auml;t der Zellen und Gewebe abgeleitet von iPS-Zellen, die ihren Nutzen in der Zelle-Ersatz-Therapie und Forschungsanwendungen validieren wichtig ist zu beurteilen.

Erwachsene M&auml;use aus induzierten pluripotenten Stammzellen erzeugt.

Recenti esperimenti di riferimento hanno dimostrato che transitori sovraespressione di un piccolo numero di fattori di trascrizione pu&ograve; riprogrammare le cellule differenziate in cellule staminali (iPS) pluripotenti indotte che ricordano le cellule staminali embrionali (ES). Queste cellule iPS promettono grande per medicina perch&eacute; hanno il potenziale per generare tipi di cellule del paziente-specifici per la terapia di sostituzione cellulare e producono modelli in vitro di malattia, senza la necessit&agrave; di tessuti embrionali o ovociti. Anche se le attuali linee di cellule iPS assomigliano cellule ES, essi non sono passati i pi&ugrave; rigorosi test di pluripotenza tramite la generazione di topi adulti o di pieno-termine in dosaggi di complementazione tetraploidi, alzando i dubbi sul fatto che siano sufficientemente potenti per generare tutti i tipi di cellule in un organismo. Non &egrave; noto se questa differenza tra iPS e cellule ES riflette limitazioni intrinseche della riprogrammazione diretta. Qui riportiamo fertili topi adulti derivati interamente da cellule iPS che abbiamo generato da inducibile genetica riprogrammazione dei fibroblasti embrionali del mouse. Produzione di topi adulti derivati interamente da un rifacimento del fibroblasto dimostra che tutte le caratteristiche di una cellula differenziata possono essere ripristinate ad un livello embrionale di pluripotenza senza esposizione a fattori di ooplasmic sconosciuto. Confrontando questi completamente pluripotenti iPS linee di cellule meno inerente allo sviluppo linee potenti possono rivelare marcatori molecolari di Stati diversi pluripotenti. Inoltre, topi derivati interamente da cellule iPS fornir&agrave; una nuova risorsa per valutare la stabilit&agrave; genomica e funzionale di cellule e tessuti derivati da cellule iPS, che &egrave; importante per convalidare la loro utilit&agrave; nella terapia sostitutiva delle cellule e applicazioni di ricerca.

Topi adulti generati da cellule staminali pluripotenti indotte.

&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x753B;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306B;&#x4F3C;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;iPS&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x88DC;&#x5145;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x80DA;&#x7D44;&#x7E54;&#x3084;&#x5375;&#x5B50;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;in vitro&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x533B;&#x5B66;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x7D04;&#x675F;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x5185;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x5F37;&#x529B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306E;&#x8CEA;&#x554F;&#x3092;&#x4E0A;&#x3052;&#x3001;&#x56DB;&#x500D;&#x4F53;&#x76F8;&#x88DC;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x30D5;&#x30EB;&#x7528;&#x8A9E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x5408;&#x683C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x751F;&#x7269;&#x3002; iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x5DEE;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x5236;&#x9650;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x80A5;&#x6C83;&#x306A;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x66F8;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x5375;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x56E0;&#x5B50;&#x3078;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5FA9;&#x5143;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x200B;&#x200B;&#x3089;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x88DC;&#x5145;&#x7642;&#x6CD5;&#x3084;&#x7814;&#x7A76;&#x7528;&#x9014;&#x3067;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xD68D;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xADF8; &#xACFC;&#xB3C4; overexpression &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC801;&#xC740; &#xC218;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB2EE;&#xC740; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; (iPS) &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC7AC; &#xC124; &#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; iPS &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB300;&#xCCB4; &#xC694;&#xBC95; &#xD658;&#xC790; &#xD2B9;&#xC815; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xBC0F; &#xBC30;&#xC544; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; oocytes&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0;, &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC758;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD070; &#xC57D;&#xC18D;&#xC744; &#xC7A1;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xD604;&#xC7AC; iPS &#xC138;&#xD3EC; &#xC120;&#xC744; &#xB2EE;&#xC740; ES &#xC138;&#xD3EC;, &#xBE44;&#xB85D; tetraploid &#xBCF4;&#xC644;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;, &#xC5EC;&#xBD80; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC744; &#xC81C;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC804;&#xCCB4; &#xC6A9;&#xC5B4;&#xB098; &#xC131;&#xC778; &#xC950;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; pluripotency&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD558;&#xC9C0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740;. Ips&#xC640; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758;&#xC774; &#xCC28;&#xC774;&#xC774; &#xC9C1;&#xC811; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xD55C;&#xACC4;&#xB97C; &#xBC18;&#xC601; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; iPS &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBE44;&#xC625;&#xD55C; &#xC131;&#xC778; &#xC950; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC7AC;&#xC124;&#xC815;&#xB41C; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC131;&#xC778; &#xC0DD;&#xC950; &#xC0DD;&#xC0B0; ooplasmic &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xC5C6;&#xC774; pluripotency&#xC758; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC140;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC644;&#xC804;&#xD788; pluripotent iPS &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC791;&#xAC8C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xBE44;&#xAD50; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB77C;&#xC778; &#xB2E4;&#xB978; pluripotent &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xBC1D;&#xD790; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, iPS &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC950; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC870;&#xC9C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB300;&#xCCB4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC0F; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; iPS &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xAC8C;&#xB188; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0C8; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC131;&#xC778; &#xC0DD;&#xC950; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Recientes experimentos hist&#xF3;ricos han demostrado que la sobreexpresi&#xF3;n transitoria de un peque&#xF1;o n&#xFA;mero de factores de transcripci&#xF3;n pueden reprogramar las c&#xE9;lulas diferenciadas en madre pluripotentes inducidas (iPS) que se asemejan a las c&#xE9;lulas madre embrionarias (ES) las c&#xE9;lulas. Estas c&#xE9;lulas iPS son una gran promesa para la medicina debido a que tienen el potencial de generar en el paciente tipos espec&#xED;ficos de c&#xE9;lulas para la terapia de reemplazo celular y la producci&#xF3;n de los modelos in vitro de la enfermedad, sin necesidad de tejidos de embriones u ovocitos. Aunque las actuales l&#xED;neas de c&#xE9;lulas iPS se parecen a las c&#xE9;lulas madre embrionarias, que no han pasado la prueba m&#xE1;s estricta de pluripotencia por la generaci&#xF3;n de ratones a t&#xE9;rmino o un adulto en ensayos de complementaci&#xF3;n tetraploide, que plantea interrogantes en cuanto a si son lo suficientemente potentes para generar todos los tipos de c&#xE9;lulas en un organismo. Si esta diferencia entre iPS y las c&#xE9;lulas ES refleja las limitaciones intr&#xED;nsecas de reprogramaci&#xF3;n directa no se conoce. Aqu&#xED; mostramos los ratones adultos f&#xE9;rtiles derivados enteramente de c&#xE9;lulas iPS que generaron por la reprogramaci&#xF3;n inducida gen&#xE9;tica de fibroblastos embrionarios de rat&#xF3;n. La producci&#xF3;n de ratones adultos totalmente derivadas de fibroblastos reprogramados una muestra que todas las caracter&#xED;sticas de una c&#xE9;lula diferenciada puede ser restaurado a un nivel embrionario de la pluripotencia sin exposici&#xF3;n a factores desconocidos ooplasmic. Comparando estas l&#xED;neas iPS totalmente de c&#xE9;lulas pluripotentes a las l&#xED;neas de desarrollo menos potentes pueden revelar los marcadores moleculares de los estados pluripotentes diferentes. Adem&#xE1;s, los ratones totalmente derivadas de las c&#xE9;lulas iPS proporcionar&#xE1; un nuevo recurso para evaluar la estabilidad funcional y gen&#xF3;mica de las c&#xE9;lulas y los tejidos derivados de c&#xE9;lulas iPS, lo cual es importante para validar su utilidad en la terapia de reemplazo celular y aplicaciones de investigaci&#xF3;n.

Los ratones adultos creadas a partir de c&#xE9;lulas madre pluripotentes inducidas

&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x9B54;&#x9B3C;&#xFF09; &#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5C06;&#x4F1A;&#x51CF;&#x5C11;&#xFF0C;&#x5982;&#x679C;&#x591A;&#x6570;&#x673A;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7EBF;&#x8DEF;&#x6E2F;&#x6E7E;&#x6709;&#x5BB3;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x82AF;&#x7247;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x9B54;&#x9B3C;&#x643A;&#x5E26;&#x76F8;&#x6BD4;&#x90A3;&#x4E9B;&#x6697;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x7C7B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7ED3;&#x6784;&#x53D8;&#x5F02; (SV)&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x53CD;&#x6F14;&#x3001; &#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x91CD;&#x590D;&#x548C;&#x5220;&#x9664;&#x3001; &#x590D;&#x6742;&#x91CD;&#x6392;&#x548C; retroelement &#x9690;&#x73B0;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x7ECF;&#x5E38;&#x51FA;&#x73B0;&#x7531;&#x4E8E;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; DNA &#x62F7;&#x8D1D;&#x6570;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x5347;&#x9AD8;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x91C7;&#x7528;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x914D;&#x5BF9;&#x7ED3;&#x675F; DNA &#x6D4B;&#x5E8F;&#x548C;&#x654F;&#x611F;&#x6620;&#x5C04;&#x7B97;&#x6CD5;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A; SV &#x4E09;&#x5B8C;&#x5168;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x9F20;&#x6807;&#x673A;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x884C;&#x4E2D;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x7C7B;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x548C;&#x51B3;&#x8BAE;&#x7684;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6BCF;&#x884C; &#xFF08;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6216;&#x4E24;&#x4E2A;&#xFF09; &#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x81EA;&#x53D1;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C;&#x65E0;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; retroelement &#x5927;&#x52A8;&#x8109;&#x8F6C;&#x4F4D;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x53EF;&#x4EE5;&#x575A;&#x6301;&#x6574;&#x4E2A;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FA9;&#x79F0;&#x5B83;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x751F;&#x6210;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4F7F;&#x7528;&#x5F53;&#x524D;&#x7F16;&#x7A0B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7834;&#x574F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x9B54;&#x9B3C;&#x3002;

&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86; retroelement &#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x5F88;&#x5C11;&#x7684; DNA &#x91CD;&#x6392;&#x671F;&#x95F4;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x3002;

The biomedical utility of induced pluripotent stem cells (iPSCs) will be diminished if most iPSC lines harbor deleterious genetic mutations. Recent microarray studies have shown that human iPSCs carry elevated levels of DNA copy number variation compared with those in embryonic stem cells, suggesting that these and other classes of genomic structural variation (SV), including inversions, smaller duplications and deletions, complex rearrangements, and retroelement transpositions, may frequently arise as a consequence of reprogramming. Here we employ whole-genome paired-end DNA sequencing and sensitive mapping algorithms to identify all classes of SV in three fully pluripotent mouse iPSC lines. Despite the improved scope and resolution of this study, we find few spontaneous mutations per line (one or two) and no evidence forÂ endogenous retroelement transposition. These results show that genome stability can persist throughout reprogramming, and argue that it is possible to generate iPSCs lacking gene-disrupting mutations using current reprogramming methods.

Genome sequencing of mouse induced pluripotent stem cells reveals retroelement stability and infrequent DNA rearrangement during reprogramming.

L&#39;utilitaire biom&eacute;dicale des cellules souches pluripotentes induites (CISP) sera diminu&eacute; si la plupart des lignes iPSC abritent des mutations g&eacute;n&eacute;tiques d&eacute;l&eacute;t&egrave;res. Microarray des &eacute;tudes r&eacute;centes ont montr&eacute; que CISP humains portent des niveaux &eacute;lev&eacute;s de num&eacute;ro variation par rapport &agrave; celles des cellules souches embryonnaires, ce qui sugg&egrave;re que ces et autres classes de la variation g&eacute;nomique structurale (SV), y compris les inversions, les plus petites duplications et suppressions, r&eacute;arrangements complexes et r&eacute;tro&eacute;l&eacute;ment transpositions, peuvent surviennent fr&eacute;quemment en raison de la reprogrammation de l&#39;ADN copie. Ici, nous utilisons le s&eacute;quen&ccedil;age de g&eacute;nome entier jumel&eacute;-fin et des algorithmes de cartographie sensible pour identifier toutes les classes du SV dans trois compl&egrave;tement pluripotentes iPSC lign&eacute;es de souris. Malgr&eacute; la port&eacute;e am&eacute;lior&eacute;e et la r&eacute;solution de cette &eacute;tude, nous trouvons quelques mutations spontan&eacute;es par ligne (un ou deux) et aucune preuve de transposition r&eacute;tro&eacute;l&eacute;ment endog&egrave;ne. Ces r&eacute;sultats montrent que stabilit&eacute; du g&eacute;nome peut persister tout au long de la reprogrammation et font valoir qu&#39;il est possible de g&eacute;n&eacute;rer le CISP manquant en utilisant les m&eacute;thodes actuelles de reprogrammation des mutations perturbant le g&egrave;ne.

S&eacute;quen&ccedil;age du g&eacute;nome de la souris induite par les cellules souches pluripotentes r&eacute;v&egrave;le r&eacute;tro&eacute;l&eacute;ment stabilit&eacute; et peu fr&eacute;quente r&eacute;arrangement de l&#39;ADN au cours de reprogrammation.

Das biomedizinische Dienstprogramm von induzierten pluripotenten Stammzellen (iPSCs) wird verringert, wenn die meisten iPSC-Linien sch&auml;dliche Genmutationen Hafen. Neuere Microarray Studien zeigten, dass menschliche iPSCs tragen erh&ouml;hten DNA Copy Number variants im Vergleich zu denen in embryonale Stammzellen, die darauf hindeutet, dass diese und andere Klassen von genomischen strukturellen Variationen (SV), einschlie&szlig;lich Inversionen, kleinere Duplikationen und L&ouml;schungen, komplexe Umlagerungen und Retroelement Transpositionen, h&auml;ufig als Folge der Neuprogrammierung entstehen k&ouml;nnen. Hier besch&auml;ftigen wir ganze gepaart-End DNA Genoms und sensible Zuordnung Algorithmen um alle Klassen des SV in drei voll pluripotenten Maus iPSC Zeilen zu identifizieren. Trotz der verbesserten Anwendungsbereich und Aufl&ouml;sung dieser Studie, finden wir einige spontane Mutationen pro Zeile (maximal zwei) und keine Beweise f&uuml;r die endogene Retroelement Umsetzung. Diese Ergebnisse zeigen, dass die Genomstabilit&auml;t kann im gesamten Neuprogrammierung beibehalten und argumentieren, dass iPSCs fehlt Unterbrechung der Gen-Mutationen, die mit aktuelle Neuprogrammierung Methoden generieren kann.

Sequenzierung des Genoms Maus induzierte pluripotente Stammzellen offenbart Retroelement Stabilit&auml;t und selten DNA-Umlagerung w&auml;hrend Neuprogrammierung.

L&#39;utilit&agrave; biomedica di cellule staminali pluripotenti indotte (iPSCs) sar&agrave; diminuito se la maggior parte delle linee di iPSC harbor mutazioni genetiche deleterie. Microarray studi recenti hanno dimostrato che le iPSCs umane trasportare elevati livelli di variazione numero di DNA copia rispetto a quelli in cellule staminali embrionali, suggerendo che queste e altre classi di variazione genomica strutturale (SV), inversioni, piccoli duplicazioni e delezioni, riarrangiamenti complessi e retroelement trasposizioni, frequentemente possono sorgere in conseguenza di riprogrammazione. Qui ci avvaliamo di sequenziamento del DNA di intero genoma fine accoppiato e algoritmi di mappatura sensibile per identificare tutte le classi di SV in tre completamente pluripotenti mouse iPSC linee. Nonostante la portata migliore e la risoluzione di questo studio, troviamo alcune mutazioni spontanee per linea (uno o due) e nessuna prova per la trasposizione di retroelement endogeni. Questi risultati mostrano che la stabilit&agrave; del genoma pu&ograve; persistono nel corso di riprogrammazione e sostengono che &egrave; possibile generare iPSCs privo di mutazioni gene-perturbare utilizzando metodi di riprogrammazione corrente.

Il sequenziamento del genoma di topo indotta da staminali pluripotenti rivela retroelement stabilit&agrave; e infrequente riarrangiamento del DNA durante la riprogrammazione.

&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069; iPSC &#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x5287;&#x7269;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x304B;&#x304F;&#x307E;&#x3046;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;ips &#x7D30;&#x80DE;&#xFF09; &#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8; ips &#x7D30;&#x80DE; DNA &#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x6570;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x9006;&#x8EE2;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x91CD;&#x8907;&#x3068;&#x524A;&#x9664;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x3068; retroelement &#x8EE2;&#x79FB;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x69CB;&#x9020;&#x591A; &#xFF08;SV&#xFF09; &#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3057;&#x76F4;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5168;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; DNA &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068; SV &#x306B; 3 &#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; iPSC &#x884C;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6539;&#x826F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B9;&#x30B3;&#x30FC;&#x30D7;&#x3068;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570; 1 &#x884C; (1 &#x3064;&#x307E;&#x305F;&#x306F; 2 &#x3064;&#xFF09; &#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3068;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; retroelement &#x8EE2;&#x4F4D;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306F;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x5168;&#x4F53;&#x3067;&#x6C38;&#x7D9A;&#x5316;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5206;&#x88C2;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x6B20;&#x3051;&#x3066; ips &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3060;&#x3068;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x6C7A;&#x5B9A; retroelement &#x5B89;&#x5B9A;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x5B9A;&#x671F; DNA &#x8EE2;&#x4F4D;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (iPSCs)&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xBA54;&#xB514;&#xCEEC; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0; iPSC &#xB77C;&#xC778; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xD56D;&#xAD6C;&#xC758; &#xD574;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xC774; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC800;&#xD558; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; microarray &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; iPSCs DNA &#xBCF5;&#xC0AC; &#xBC88;&#xD638; &#xD3B8;&#xCC28;&#xC640; &#xC774;&#xB4E4;&#xACFC; &#xAC8C;&#xB188; &#xAD6C;&#xC870; &#xD3B8;&#xCC28; (SV)&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xB4A4;&#xC9D1;&#xC5B4;, &#xC791;&#xC740; &#xC911;&#xBCF5; &#xBC0F; &#xC0AD;&#xC81C;, &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; retroelement transpositions &#xB4F1; &#xC790;&#xC8FC; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC218;&#xD589; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAC8C;&#xB188; &#xC9DD; &#xC5D4;&#xB4DC; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xBC0F; SV 3 &#xC644;&#xC804; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; iPSC &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xB9E4;&#xD551; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC744; &#xACE0;&#xC6A9;. &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xBC94;&#xC704;&#xC640; &#xBCF8;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; &#xC904; (1 &#xB610;&#xB294; 2) &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD; retroelement &#xC804;&#xC704;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xAC8C;&#xB188; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xC218; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC744;, &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xD604;&#xC7AC; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD80;&#xC871; Ipscs&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC8FC;&#xC7A5; &#xD55C;&#xB2E4;.

Retroelement &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xC2DD;&#xBB3C; DNA &#xC7AC;&#xBC30;&#xCE58;&#xB97C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

La utilidad Biom&eacute;dica de c&eacute;lulas pluripotentes inducidas (iPSCs) disminuir&aacute; si la mayor&iacute;a de las l&iacute;neas de iPSC Puerto delet&eacute;reas mutaciones gen&eacute;ticas. Estudios de microarray recientes han demostrado que iPSCs humanos llevar a niveles elevados de variaci&oacute;n n&uacute;mero de copias de ADN en comparaci&oacute;n con las c&eacute;lulas madre embrionarias, lo que sugiere que estas y otras clases de Gen&oacute;mica estructural variaci&oacute;n (SV), incluyendo inversiones, peque&ntilde;as duplicaciones y deleciones, cambios complejos y transposiciones retroelement, con frecuencia pueden surgir como consecuencia de la reprogramaci&oacute;n. Aqu&iacute; contamos con secuencia de la DNA de todo el genoma emparejado-final y algoritmos de asignaci&oacute;n sensible para identificar todas las clases de SV en tres completamente rat&oacute;n iPSC l&iacute;neas pluripotentes. A pesar del mayor alcance y resoluci&oacute;n de este estudio, encontramos algunas mutaciones espont&aacute;neas por l&iacute;nea (uno o dos) y ninguna evidencia de transposici&oacute;n retroelement end&oacute;geno. Estos resultados demuestran que la estabilidad del genoma puede persisten a lo largo de reprogramaci&oacute;n y sostienen que es posible generar iPSCs falta mutaciones gene-interrumpir mediante los m&eacute;todos actuales de reprogramaci&oacute;n.

Secuenciaci&oacute;n del genoma de c&eacute;lulas madre pluripotentes de rat&oacute;n inducida revela retroelement estabilidad y poco frecuente cambio de ADN durante la reprogramaci&oacute;n.

Michael J. Boland

Dorris Neuroscience Center & Department of Cell Biology

The Scripps Research Institute

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Michael J. Boland

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The Scripps Research Institute

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Dorris Neuroscience Center & Department of Cell Biology