Recoger muestras de pelo para cabello análisis de Cortisol en americanos africanos

Resumen

Análisis de concentración de cortisol de cabello proporciona una alternativa a las medidas tradicionales de cortisol; sin embargo, para recoger muestras del pelo de los americanos africanos, los científicos necesitan ser culturalmente informada y competente. El propósito de este protocolo es demostrar una técnica culturalmente informada para recoger muestras de pelo para el análisis de cortisol de afroamericanos.

Resumen

Por lo general se evalúa la hormona cortisol en saliva, suero o muestras de orina. Más recientemente, el cortisol ha sido extraído con éxito de pelo, incluyendo a los seres humanos. La ventaja de la concentración de cortisol de pelo es que refleja una representación retrospectiva de la función del eje hipotalámico-pituitario-suprarrenal (HPA) con el tiempo, como hemoglobina A1C representa el control de la glucemia. Sin embargo, obtener muestras de pelo puede ser difícil, debido a las creencias culturales y las prácticas de atención de pelo de los participantes de la minoría. Por ejemplo, los americanos africanos pueden ser reacios a proporcionar muestras. Además, algunos investigadores están capacitados para recoger muestras de pelo de los americanos africanos. El objetivo de este trabajo es presentar un protocolo cultural informado para ayudar a los investigadores a obtener muestras de pelo de los americanos africanos. Para ilustrar los resultados representativos de esta implementación del Protocolo, se proporcionan datos desidentificados de afroamericanos que participaron en un estudio comunitario sobre el estrés crónico. Preferencias de práctica de cabello son evaluados. Los participantes se hacen cómodos mostrando imágenes de muestras de pelo antes de cortar el pelo. El solo esfuerzo de torsión y suavemente tire método se utiliza para recoger aproximadamente 30-50 hebras de cabello de la región de vértice posterior del cuero cabelludo. Este protocolo mejorará significativamente la recolección de muestras de pelo de los americanos africanos.

Introducción

Recoger muestras de saliva, sangre u orina para análisis de cortisol tiene desafíos procesales y carga mayor de participantes, el procedimiento requiere múltiples muestras de saliva, muestras de punción venosa o colección de orina de 24 horas. Obtención de cortisol de muestras del pelo es una alternativa simple y aceptable al uso de^1,de muestras de saliva, suero u orina². Cortisol de cabello proporciona una representación retrospectiva de la función del eje hipotalámico-pituitario-suprarrenal (HPA) con el tiempo. Aproximadamente 3 cm de pelo recogido del cuero cabelludo es igual al promedio de liberación de cortisol durante los últimos 3 meses¹. Sin embargo, los investigadores encuentran retos al tratar de recoger las muestras de cabello a través de diversas poblaciones. Tales desafíos incluyen creencias religiosas o espirituales incluyendo exponiendo el pelo (por ejemplo, las mujeres musulmanas), sagrado (grupos de indios americanos), o normas culturales que conectan el pelo a los estándares de belleza y autoestima.

En la cultura afroamericana, particularmente entre las mujeres, el pelo del cuero cabelludo es un aspecto muy personal e importante de su imagen corporal^3,4. Experiencias más, históricas (por ejemplo, los experimentos de Tuskegee) continúan fomentar desconfianza en el proceso de investigación⁵. Algunos afroamericano folklore y creencias culturales también sugieren que la muestra de pelo podría ser utilizada en rituales que podrían causar daño^6,7. Los investigadores deben ser conscientes de los desafíos posibles que pueden encontrar en estudios al participantes afroamericanos se solicita a las muestras de pelo.

Además de las cuestiones que rodean la imagen del cuerpo, las técnicas específicas para la recogida y manipulación de muestras de pelo de los americanos africanos pueden diferir de los americanos europeos^6,7. Por ejemplo, afroamericanos pueden tener recto, fino, rizado, rizado, grueso, o una combinación de estos tipos de cabellos, cada uno que requieren diferentes técnicas para recoger y cabello adecuado de muestras para su procesamiento. Estudios recientes en muestras de adolescentes afroamericanos⁸, así como muestras multiétnica⁹, demostraron que colección de pelo para medición del nivel de cortisol es aceptable entre los participantes afroamericanos. En la actualidad, no hay ningún procedimiento de entrenamiento visual diseñado para proporcionar a los investigadores con la habilidad y conocimiento cultural para recolectar muestras de pelo en americanos africanos. El objetivo de este trabajo es presentar un protocolo cultural informado para ayudar a los investigadores a obtener muestras de pelo adecuado de participantes afroamericanos. Este método fue desarrollado con una cuidadosa consideración de las características físicas, psicosociales y culturales relevantes para colección de muestras de pelo de los adultos afroamericanos. Hasta la fecha, no existen métodos visuales de la recogida de estas muestras, y el presente Protocolo será la primera guía recolección de muestras de cabello adecuada información de los adultos afroamericanos. Para ilustrar los resultados representativos de la implementación del Protocolo, se presentan datos desidentificados de afroamericanos que participaron en un estudio comunitario sobre el estrés crónico que fueron de 65 años o mayores. Dos asistentes de investigación masculinos y femeninos de diferentes orígenes raciales en contacto con posibles participantes en una lista clínica generada y volantes. El investigador principal, que es una mujer afroamericana, habló en centros comunitarios y altos apartamentos de vivienda subsidiados a los afroamericanos adultos mayores sobre el estudio, incluyendo una descripción de los métodos de recogida de pelo.

Protocolo

El estudio es aprobado por la Universidad de hospitales Cleveland centro institucional revisar junta médica y el protocolo sigue las directrices de seguridad de datos y protección de participantes según lo indicado por el Comité de revisión.

1. prepare el participante de la muestra de pelo y cabello muestra colección preguntas

1. Explique a los participantes que la muestra de pelo recogida es menos pelo que se pierde normalmente en cepillado cada día desde la parte posterior de la cabeza (vértex posterior). Dígale a los participantes que el sitio de la muestra de pelo ocultos rodeando el pelo y, por lo tanto, no es visible después de la recolección. Informar a los participantes que la muestra se utilizará para medir una hormona llamada cortisol presente en el pelo^10,11.
2. Sacar la foto de la muestra y mostrar al participante la cantidad de cabello que será recogidos (filamentos de 30-50).
   Nota: Vea la figura 1 para la foto de una muestra de cabello.
3. Pregunte al participante el pelo cuidado práctica¹² preguntas enumeradas en la tabla 1.

2. Recoja la muestra de cabello

1. Dígale a los participantes que la muestra se recoge en un área privada detrás de una partición del portátil, cortina o puerta cerrada. Asegurar a los participantes que, si usan una peluca o un postizo, su pelo no se corta en un área donde otros puedan ver. Medir la longitud del pelo del cuero cabelludo para acabar tirando el pelo suavemente y tenso.
2. Si el pelo es corto (menos de 3 cm), seguir el protocolo de pelo corto en el paso 3 (aunque si el cabello es menos de 1 cm de largo, la muestra puede ser recogida y, idealmente, el pelo debe ser al menos de 3 cm de largo). Para el pelo más largo de 6 cm, seguir el protocolo de cabello largo en el paso 4. De lo contrario, continúe con el paso siguiente.
3. Asegurar que los materiales están listos colocando los suministros de corte de pelo (una hoja de papel de aluminio, sobres de negocios, tijeras del salón grado, partida peine de dientes grandes y pequeños, alcohol preps, cinta de pintor, marcador permanente, guantes no-latex [opcionales] y pelo clips)¹⁰ en superficie junto a la participante. Limpiar las tijeras y peine la preparación con almohadilla con alcohol antes de tomar la muestra. Corte una hoja de 8 x 10" de papel de aluminio para la muestra.
4. Póngase guantes de látex no. Toma el peine y parte el pelo horizontalmente a lo largo del vértice posterior del cuero cabelludo entre las puntas de las orejas.
5. Tome un clip y mover el pelo de la parte superior de la parte, luego coloque otro clip en la parte inferior para exponer un rectángulo de 5 x 10 cm entre los dos clips de cabello suelto (aproximadamente del tamaño de una baraja de cartas).
6. Pregunta al participante si prefieren usar un diente ancho o peine de dientes estrechos por el rectángulo de 2-3" de pelo. Pedir al participante él o ella como para el resto del cabello en el peine descartarlo. Dar al pelo en el peine al participante, o, si (y sólo si) el participante declara que está bien eliminar el pelo suelto, deseche el resto del cabello del panal en un bote de basura.
7. Tome aproximadamente un 30-50 hebras de cabello a la derecha del rectángulo 2-3" y tire y gire el pelo del cuero cabelludo en un movimiento de balanceo entre los dedos.
8. Asegúrese de que la muestra se recoge lo más cerca del cuero cabelludo como sea posible, pero no corte el cuero cabelludo. Utilizar tijeras de salón-grado y hacer un corte limpio recto.
9. Tome la muestra de cabello y asegúrese de que el extremo de la raíz esté alineado cuidadosamente a lo largo del corte.
10. Fije el pelo a la hoja de papel de aluminio encintado con cinta de pintor. No cubra el extremo del cuero cabelludo y no utilice cinta de pintor en el pelo que es igual o inferior a 3 cm. lugar suelto corta el pelo en el centro de la hoja y dobla en una plaza, asegurándose que el cabello no se caiga fuera de la hoja.
11. Tomar el marcador y marca el final del cuero cabelludo en el papel de aluminio. Usar etiquetas de código de barras predefinidas para adjuntar a la hoja y sobre.
12. Doblar el papel aluminio sin doblar el pelo en el extremo del cuero cabelludo para evitar que la cabeza de la cama (arrugado y doblado pelo), colocar en el sobre de tamaño comercial y sello.
13. El exterior de la envolvente de la etiqueta con número de identificación único de estudio del participante, fecha y el nombre del investigador principal, o utilice una etiqueta de código de barras si está disponible.
14. Almacenar la muestra en un lugar seco a temperatura ambiente.

3. obtención de pelo corto (1-3 cm)

1. Siga los pasos 2.3 y 2.4.
2. Después de la despedida, pedir al participante a mantener el parted pelo cerca del cuero cabelludo. Cortar el pelo a lo largo de la parte, mientras sostiene el pelo firmemente con el dedo índice y pulgar¹⁰.
3. Colocar pelos sueltos en la hoja y doblar con seguridad. No la cinta del pelo a la lámina.
4. Siga los pasos 2.11 a 2.14.

4. obtención de pelo largo (más de 6 cm)

1. Parte el cabello de izquierda a derecha en el vértice posterior.
2. Utilice los ganchos de pelo para sostener detrás el pelo extra.
3. Crear un toque de pelo y sostener firmemente con el dedo índice y el pulgar para que no se deje caer la muestra¹⁰.
4. Hacer un corte limpio recto como cerca del cuero cabelludo como sea posible. Recoger 30-50 hebras de cabello.
5. Si el participante tiene cabello fino, cortar 2-3 áreas pequeñas (1 cm de separación) en el vértice posterior para ocultar el sitio del corte.
6. Siga los pasos de 2.10 a 2.14.

5. procesamiento de la muestra

1. Guarde los paquetes de papel de aluminio que contiene la muestra de pelo a temperatura ambiente indefinidamente hasta su análisis.
   Nota: Pelo cortisol es muy estable en el cabello y puede ser almacenado durante años. De hecho, el cortisol se ha medido en muestras de pelo de restos momificados¹¹.
2. Analizar cortisol pelo previamente publicados¹². Las muestras pueden ser enviadas una noche a temperatura ambiente.

Resultados

En nuestro estudio, veintiún afroamericanos (edad media = 75; SD = 6,9; 85% de mujeres) dado su consentimiento para participar. Cuatro participantes (19%) se negaron a proporcionar una muestra de pelo y dos (9.5%) no pudieron proporcionar una muestra porque su cabello era muy corto. Un total de 15 muestras de cabello fueron obtenidos y procesados (tabla 2). La longitud de las muestras de pelo que se procesaron osciló entre 1 cm y 4,8 cm. problemas técnicos incluyen las...

Discusión

Pasos esenciales en el protocolo de recogida de pelo incluyen proporcionar un ejemplo de cómo mucho pelo se tomarán, mostrando el sitio de la muestra (vórtice posterior), el uso de la torcedura de la cepa y tire suavemente de método y obtención de la muestra con cinta de pintor de la final del cuero cabelludo. Suavemente girando y tirando de la muestra, el pelo rizado se alarga y se mantiene la alineación final del cuero cabelludo. Esto reduce el tiempo de laboratorio necesario para alinear las puntas de cuero cabe...

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
Salon grade scissors	Cricket	S-3 550	Carded Professional Hair Shear, 5.5 inch
Large tooth comb	Goody	No catalog number__Goody Stylista Rake Comb	Link to Company website  http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_Stylista_Rake_Comb?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780
Small tooth comb	Goody	No catalog number_ Goody Start.Style.Finish. Link to company website http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Combs?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780
Alcohol preps	Kendall Webcol Alcohol Preps	No catalog number. Kendall Webcol Alcohol Preps	https://www.buyemp.com/product/kendall-webcol-alcohol-preps
Painter's tape	3M Scotch	ScotchBlue ORIGINAL Painter’s Tape	https://www.scotchblue.com/3M/en_US/scotchblue/products/painters-tape/
Permanent marker	Sharpie	Black Sharpie Fine Point	http://www.sharpie.com/sharpie/fine/SHFineBlackFine.html
Non-latex gloves	Protégé	93997	Protege®Nitrile Powder-Free Examination Gloves http://aureliagloves.com/product/protege/
Hair clips	Goody	Goody Start.Style.Finish. Curl Clips	http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Curl_Clips
Envelope	Office Depo	330808	Office Depot® Brand Clasp Envelopes, 9" x 12", Brown, Box Of 100
Foil sheets	Choice	1229105	Box of 500 Sheets Food Service Interfolded Pop-up foil sheets
Pre-weighed 2 ml cryovial	Wheaton, Millville, NJ, USA	W985902
100% isopropanol	Spectrum	I1275 | 67-63-0
Liquid nitrogen	Ohio State Unversity Stores	Gas Cylinder Warehouse	http://osustores.osu.edu/prodservices/liquidnitrogen.aspx
Stainless steel ball bearing	McMasterCarr	9291K42	https://www.mcmaster.com/#standard-stainless-steel-balls/=1acqby0
Specially milled aluminum cassettes	FisherScientific	Retsch 20.745.0001
HPLC grade methanol	FisherScientific	A452N1-19	https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-hplc-fisher-chemical-6/p-216129
Microcentrifuge tube	Eppendorf North America	22363352	https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Laboratory-Consumables-44512/Tubes-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html?_ga=2.36544352.1776616592.1511283212-1254533852.1511283212
Cortisol ELISA Kit	Salimetrics LLC, State College, PA, USA	1-3002 (5PK 1-3002-5)	https://www.salimetrics.com/assay-kit/cortisol-salivary-elisa-eia-kit
Centtrifuge for the micorcentrifuge tube	Beckman Coulter	Microfuge 20 series	http://centrifugebybeckman.com/?page_id=727/?pi_ad_id=creative?utm_term=microfuge